检索结果-内蒙古大学图书馆

北京大学学报（医学版） 2001年第1期33卷 54-57页

作者：张杰刘军建韩云张宁芮静安金城周柔丽北京大学基础医学院细胞生物学教研室北京100083 邮电总医院肝癌研究所中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室

目的 :寻找肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)相关的新基因 ,并从分子水平进一步探讨HCC发生发展的机制。方法 :对通过荧光差异显示 (fluorescent differentialdisplay ,FluoroDD)技术从人HCC组织、配对非癌肝 ( pairednon can... 详细信息

目的 :寻找肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)相关的新基因 ,并从分子水平进一步探讨HCC发生发展的机制。方法 :对通过荧光差异显示 (fluorescent differentialdisplay ,FluoroDD)技术从人HCC组织、配对非癌肝 ( pairednon cancerousliver,PNL)组织、胎肝 (fetalliver ,FL)组织和正常肝 (normalliver ,NL)组织获得的 110条差异表达cDNA片段 (DD片段 )中的 2 5条进行测序 ,将测序结果在GenBankNR数据库中进行同源性分析 ,并对其中 12条DD片段用RNA狭缝杂交法验证其在HCC、PNL及NL组织中的表达规律。结果 :2 5条DD片段中 18条与已知基因具有高同源性 ( >96 % ) ;5条与已知序列 (基因结构与功能未知 )具有高同源性 ( >85 % ) ;2条与Gen BankNR数据库中的序列无明显同源性。RNA狭缝杂交筛选到 5条在HCC中特异性高或低表达并与已知哺乳类动物基因高度同源 ( 97%～ 99% )的cDNA片段 :在HCC中特异性高表达的 3条片段是LC13(人热休克蛋白 90 β)、LC2 1(智人异源性核内核糖核蛋白C)和LC2 2 (干扰素诱导的智人鸟嘌呤结合蛋白 2 ) ;在HCC中特异性低表达的 2条片段是LC5 (智人甲状腺激素受体相关蛋白 2 40 )和FL2 5 (分化相关基因 1)。结论 :新发现 5条与HCC相关、与已知哺乳动物基因高度同源的cDNA片段。

关键词：肝细胞癌 DNA 癌基因同源盒

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Rasmussen脑炎患者脑组织的转录组学特征分析

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第三军医大学学报 2020年第14期42卷 1407-1413页

作者：罗乔荔王一松关宇光陈思畅范东瀛王培刚栾国明安静首都医科大学基础医学院病原生物学系微生物学教研室北京100069 首都医科大学三博脑科医院功能神经外科北京100093

目的探究Rasmussen脑炎(Rasmussen encephalitis,RE)患者脑组织的转录组学特征。方法采用RNA-seq的方法,对2008年4月至2013年12月首都医科大学附属北京三博脑科医院收治的RE及颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)患者(对照)中各选取4... 详细信息

目的探究Rasmussen脑炎(Rasmussen encephalitis,RE)患者脑组织的转录组学特征。方法采用RNA-seq的方法,对2008年4月至2013年12月首都医科大学附属北京三博脑科医院收治的RE及颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)患者(对照)中各选取4例脑组织的基因表达谱进行检测。结果聚类分析显示RE患者及对照脑组织差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)谱存在明显差异。共筛选出1285个DEGs,其中782个(60.9%)下调,503个(39.1%)上调。上调表达的DEGs主要富集于神经元信号转导相关的通路,可能与RE患者频繁的癫痫发作相关;下调表达的DEGs主要富集于细胞骨架、细胞周期及趋化作用相关的通路,可能与RE患者脑组织中神经元的丢失及再生以及部分病原体感染后的免疫应答相关。上调表达的关键基因为TAS2R40、HTR4、NAP1L2,下调表达的关键基因为CXXC1、SEPTIN8、CCR7。结论RE患者脑组织的转录组学具有明显特征,DEGs主要富集于神经元信号转导、细胞周期以及趋化作用相关的通路中。

关键词： Rasmussen脑炎癫痫 RNA-Seq 转录组学

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中东呼吸综合征冠状病毒N蛋白的原核表达、纯化和鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第10期34卷 764-769页

作者：王延群郝春绪邓瑶杨扬赵莉沈晓玲谭文杰中国疾病预防与控制中心病毒病预防控制所北京102206 内蒙古医科大学基础医学院微生物学教研室呼和浩特010110

目的：对中东呼吸综合征冠状病毒（ middle east respiratory syndrome coronavirus， MERS-CoV）的核衣壳蛋白（ nucleocapsid，N）进行原核表达、纯化和鉴定，了解其免疫原性。方法通过人工合成N基因，构建重组质粒pET30a-MERS-CoV-N... 详细信息

目的：对中东呼吸综合征冠状病毒（ middle east respiratory syndrome coronavirus， MERS-CoV）的核衣壳蛋白（ nucleocapsid，N）进行原核表达、纯化和鉴定，了解其免疫原性。方法通过人工合成N基因，构建重组质粒pET30a-MERS-CoV-N，然后转化*** BL21（DE3），利用 IPTG进行诱导表达，并优化确定表达条件；采用镍柱亲和层析纯化，SDS-PAGE和Western blot验证。结果原核表达成功并纯化获得与预期大小（46＆#215;103）一致的高纯度可溶性N蛋白。 Western blot表明重组蛋白可与免疫阳性兔血清及His标签抗体发生特异性反应，但与北京地区2008年收集的30份成人血清无反应。结论 MERS-CoV的N蛋白成功在原核系统中实现表达并纯化、鉴定，为MERS-CoV的免疫学诊断和免疫原性研究奠定了基础。

关键词：中东呼吸综合征冠状病毒核衣壳蛋白原核表达纯化鉴定

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进化树指导的腺病毒六邻体家族蛋白的快速建模

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高等学校化学学报 2011年第8期32卷 1838-1844页

作者：袁晓辉王迎晨曲章义任家毅王靖飞郭莹莹王雅贤华东吴晓敏杨志伟高虹中国医学科学院北京协和医学院病原生物学研究所北京100730 哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生微生物学教研室哈尔滨150081 黑龙江中医药大学基础医学院微生物与免疫学研究室哈尔滨150040 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001 东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室哈尔滨150040

为实现对人腺病毒六邻体家族蛋白进行快速准确的结构建模,发展了一种新的基于进化树的预测蛋白质家族中一系列分子三维空间结构的快速建模方法.首先利用邻接法对7株D亚属人腺病毒的六邻体序列构建了基于距离的进化树,并根据进化树所提... 详细信息

为实现对人腺病毒六邻体家族蛋白进行快速准确的结构建模,发展了一种新的基于进化树的预测蛋白质家族中一系列分子三维空间结构的快速建模方法.首先利用邻接法对7株D亚属人腺病毒的六邻体序列构建了基于距离的进化树,并根据进化树所提供的信息确定最佳六邻体家族蛋白渐进式建模路径,然后利用Modeler与Charmm程序实现六邻体家族蛋白的快速建模.新的建模方法与传统方法相比,需要的计算量大大减少,经过结构评估以及与传统方法建模所得到的结构进行比较,证实基于进化树的快速建模结果是可靠的.人腺病毒六邻体家族蛋白的快速建模对于实现快速高通量的表位预测及开发多价人腺病毒疫苗与腺病毒分型诊断试剂都具有重大的意义.

关键词：同源建模进化树人腺病毒六邻体家庭蛋白

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γδT细胞的生物学意义

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上海免疫学杂志 1997年第1期17卷 1-3页

作者：何维巴德年中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院微生物学及免疫学教研室北京100005

T淋巴细胞表面可分别表达两种与CD3分子相关联的T细胞抗原受体(T cell re-ceptor,TCR):由α链和β链(TCRαβ)或γ链和δ链构成的异质二聚体.人们一直对αβT细胞的结构和功能研究予以很大程度上的关注,而对于γδT细胞研究投入要少些.... 详细信息

T淋巴细胞表面可分别表达两种与CD3分子相关联的T细胞抗原受体(T cell re-ceptor,TCR):由α链和β链(TCRαβ)或γ链和δ链构成的异质二聚体.人们一直对αβT细胞的结构和功能研究予以很大程度上的关注,而对于γδT细胞研究投入要少些.主要原因可能是人们认为TCRγδ细胞是一个外周淋巴细胞库中的数量较小的亚群,不大可能在免疫应答中起主要作用.γδT细胞约占正常人外周血淋巴细胞总数的3%～10%,在其表面表达CD3分子,但绝大多数不表达CD4及CD8分子.

关键词： γδT细胞 T细胞生物学

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登革病毒和登革热

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首都医科大学学报 2014年第6期35卷 683-688页

作者：崔晓云吴艳花安静首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

登革热(Dengue fever,DF)是由登革病毒(Dengue virus,DV)引起的一种虫媒传染病,主要在热带亚热带地区流行,全世界将近一半的人口有罹患DF的风险。DF在临床上分为DF和重症登革(severe Dengue),后者包括登革出血热(Dengue hemorrhagic fev... 详细信息

登革热(Dengue fever,DF)是由登革病毒(Dengue virus,DV)引起的一种虫媒传染病,主要在热带亚热带地区流行,全世界将近一半的人口有罹患DF的风险。DF在临床上分为DF和重症登革(severe Dengue),后者包括登革出血热(Dengue hemorrhagic fever,DHF)和登革休克综合征(Dengue shock syndrome,DSS)。每年重症登革病例达500 000例,其中大多数患者为儿童。2014年DF在我国的南方地区出现历史上最严重的疫情,对人类健康和社会经济造成了严重损失。为此,本文对DV和DF的概况作一综述,供广大同行参考。

关键词：登革热登革病毒重症登革感染

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人巨细胞病毒通过STAT3上调胶质瘤中endocan表达

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微生物与感染 2016年第6期11卷 347-355页

作者：王士杰范东瀛罗乔荔邢燕王一松安静首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

本研究旨在探讨人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)和内皮细胞特异性分子1(endocan)在胶质瘤发生发展中的作用及机制。利用HCMV感染人脑胶质瘤U87细胞,检测感染后第1、2、4天信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and acti... 详细信息

本研究旨在探讨人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)和内皮细胞特异性分子1(endocan)在胶质瘤发生发展中的作用及机制。利用HCMV感染人脑胶质瘤U87细胞,检测感染后第1、2、4天信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)和endocan的表达变化,并分析HCMV、STAT3和endocan三者之间的可能关联。结果显示,HCMV感染的U87细胞中pSTAT3和endocan表达上调,并随感染时间延长而逐渐升高;用RNAi干扰STAT3基因表达,endocan表达量下降;利用抗病毒药物更昔洛韦抑制HCMV复制后,pSTAT3表达量下降,endocan表达量随之下降。进一步利用免疫组织化学法检测79例脑胶质瘤患者和8例对照者脑组织中pSTAT3表达情况,发现pSTAT3在胶质瘤组织中表达上调;与低级别胶质瘤相比,高级别胶质瘤中pSTAT3染色强度较高。结果提示,HCMV感染可能通过STAT3信号通路上调endocan表达,从而参与胶质瘤的进展。

关键词：胶质瘤人巨细胞病毒内皮细胞特异性分子1 信号转导及转录激活蛋白3

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GM-CSF作为Ⅱ型登革病毒E蛋白免疫佐剂的免疫效果观察

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微生物学免疫学进展 2017年第1期45卷 7-12页

作者：崔晓云房树玉范东瀛吴艳花安静首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)作为II型登革病毒E蛋白免疫佐剂的保护效果,评估GM-CSF作为蛋白疫苗免疫佐剂的可行性。方法提取GM-CSF质粒(pCAG-GM)、将表达II型登革病... 详细信息

目的观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)作为II型登革病毒E蛋白免疫佐剂的保护效果,评估GM-CSF作为蛋白疫苗免疫佐剂的可行性。方法提取GM-CSF质粒(pCAG-GM)、将表达II型登革病毒E蛋白的重组质粒(E/pGEX-6P-1)进行诱导,表达产物用亲和层析纯化。将BALB/c小鼠随机分为E蛋白组、佐剂组(E蛋白+GM-CSF)和对照组进行免疫,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗体终点效价;采用蚀斑减少中和试验(PRNT)检测II型登革病毒中和抗体水平;酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测小鼠免疫后细胞因子的水平;用攻毒试验观察各组小鼠保护率。结果 E蛋白组和佐剂组小鼠血清中抗体终点效价、中和抗体水平均在免疫后有一定的升高,差异无统计学意义(P>0.05);佐剂组细胞因子(IFN-γ和IL-10)水平较E蛋白组均有明显上升,差异具有统计学意义(P<0.05);但攻毒试验显示,佐剂组小鼠全部死亡,生存率为0,而E蛋白组的小鼠保护率为33%。结论 GM-CSF免疫佐剂可抑制II型登革病毒E蛋白的免疫保护作用,其作为蛋白疫苗免疫佐剂仍需慎重。

关键词：登革病毒 E蛋白粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子佐剂免疫效果

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重组丙型肝炎病毒核心蛋白的原核表达、纯化和抗体制备

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微生物与感染 2010年第3期5卷 140-145页

作者：陈辉高娜范东瀛郑群王娟安静首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

本文旨在获得纯化丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(HCV-C)及抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C与肝细胞相互作用的分子机制奠定基础。首先以HCV1b亚型HC-J4-91全基因组质粒为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增HCV-C基因,构建重组质粒pQE31-HCV-C... 详细信息

本文旨在获得纯化丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(HCV-C)及抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C与肝细胞相互作用的分子机制奠定基础。首先以HCV1b亚型HC-J4-91全基因组质粒为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增HCV-C基因,构建重组质粒pQE31-HCV-C。融合蛋白经原核表达、纯化后,免疫BALB/c小鼠,制备抗HCV-C多克隆抗体。利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价,蛋白免疫印迹(Westernblot)和间接免疫荧光染色鉴定抗体特异性。结果显示,表达HCV-C的原核表达质粒pQE31-HCV-C构建正确,获得相对分子质量约22000的纯化融合蛋白。ELISA检测重组蛋白免疫小鼠的抗血清效价达1:12800。结果显示,自制的抗HCV-C多克隆抗体能特异性识别HCV-C。本研究获得了纯度较好、原核表达的HCV-C,并成功制备了抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C的致病机制提供了有实用价值的研究工具。

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白原核表达抗体制备

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人胃源乳杆菌耐受性及抗幽门螺杆菌活性的鉴定

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中国人兽共患病学报 2013年第6期29卷 556-561页

作者：黄微微郭刚宋阳曾本华张卫军解庆华杨致邦重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 第三军医大学医学检验系临床微生物学及免学疫教研室重庆400038 中国人民解放军总医院微生物科北京100853 第三军医大学基础部实验动物学教研室重庆400038

目的分离自人胃粘膜的乳杆菌抗幽门螺杆菌活性的筛选,为观察乳杆菌与幽门螺杆菌相互作用寻找合适的研究对象。方法从21例胃镜检查者的胃粘膜组织中分离鉴定出6株乳杆菌,检测其在pH 2.5～pH 4.5和含0.05%～0.2%胆盐条件下的耐受性,并结... 详细信息

目的分离自人胃粘膜的乳杆菌抗幽门螺杆菌活性的筛选,为观察乳杆菌与幽门螺杆菌相互作用寻找合适的研究对象。方法从21例胃镜检查者的胃粘膜组织中分离鉴定出6株乳杆菌,检测其在pH 2.5～pH 4.5和含0.05%～0.2%胆盐条件下的耐受性,并结合琼脂扩散牛津杯法检测其抑制幽门螺杆菌生长的能力及通过细胞试验检测其抗幽门螺杆菌粘附人胃上皮细胞的活性。结果 6株乳杆菌分离株中L3产酸量最大,耐酸和高浓度胆盐,其活菌和上清液在血平板中对幽门螺杆菌作用后形成的抑菌环直径均最大,对大肠杆菌的抑菌环大于金黄色葡萄球菌的,处理液相同的两两比较差异有统计学意义(P<0.05),同时能使幽门螺杆菌粘附人胃上皮细胞的粘附率最低。结论人胃粘膜来源的乳杆菌菌株L3具有较好的耐受性和抗幽门螺杆菌活性,研究结果为幽门螺杆菌感染的微生态治疗提供依据。

关键词：幽门螺杆菌乳杆菌胃粘膜耐受性抑制性

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