检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学杂志 2013年第6期36卷 1129-1131页

作者：瞧% 毕振伍战军张宏权北京大学医学部基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100191

裸鼠体内成瘤实验是检验肿瘤细胞系成瘤能力的金标准，通过培养肿瘤细胞株建立裸鼠荷瘤模型是研究肿瘤生长、转移生物学特性及其分子调控机制，以及寻找治疗新药、新方法的重要手段。目前用于建立模型的肿瘤细胞株种类较多，如大肠癌、... 详细信息

裸鼠体内成瘤实验是检验肿瘤细胞系成瘤能力的金标准，通过培养肿瘤细胞株建立裸鼠荷瘤模型是研究肿瘤生长、转移生物学特性及其分子调控机制，以及寻找治疗新药、新方法的重要手段。目前用于建立模型的肿瘤细胞株种类较多，如大肠癌、胃癌、宫颈癌、黑色素瘤、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、鼻咽癌，但对不同成瘤模型的建立、成瘤特点、取材、固定及制片应注意的细节等报道较少。

关键词：肿瘤细胞系成瘤能力荷瘤模型制片肿瘤细胞株分子调控机制生物学特性成瘤实验

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肿瘤细胞成瘤模型的建立、取材及制片的工作体会

肿瘤细胞成瘤模型的建立、取材及制片的工作体会

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中国解剖学会第十届组织学与胚胎学教学与科研技术经验交流会

作者：唐岩毕振伍战军王允玲北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京大学医学部心血管所北京100191

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细胞分选蛋白17多克隆抗体的制备和鉴定及在小鼠体内的表达

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解剖学报 2012年第6期43卷 756-761页

作者：程媛牛苗苗马博唐岩李枫战军北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100191

目的制备细胞分选蛋白家族成员细胞分选蛋白17(SNX17)的多克隆抗体,为深入研究SNX17奠定基础。方法 PCR扩增编码人SNX17C端270个氨基酸的cDNA片段,DNA重组入原核表达载体pGEX-4T-1和pMal-C2x,转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,异丙基-β-D-... 详细信息

目的制备细胞分选蛋白家族成员细胞分选蛋白17(SNX17)的多克隆抗体,为深入研究SNX17奠定基础。方法 PCR扩增编码人SNX17C端270个氨基酸的cDNA片段,DNA重组入原核表达载体pGEX-4T-1和pMal-C2x,转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导分别表达GST-SNX17C端和MBP-SNX17C端融合蛋白。采用电泳纯化的GST-SNX17C端融合蛋白于第1天,第28天,第42天3次免疫新西兰白兔。采用亲和层析和分子筛纯化的MBP-SNX17C端融合蛋白,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中多克隆抗体的效价,于第56天取兔全血,析出血清,纯化IgG。免疫印迹法检测SNX17兔多克隆抗体的有效性和特异性,免疫印迹法检测小鼠30种器官中SNX17的表达。结果成功构建了pGEX-4T-1/SNX17C端和pMal-C2x/SNX17C端的表达质粒,成功诱导表达纯化了GST-SNX17C端和MBP-SNX17C端融合蛋白,纯化后的IgG可识别COS-7细胞中外源转入的GFP-SNX17,并与GFP抗体识别的条带在同一位置上,通过SNX17C端多克隆抗体检测了SNX17在小鼠子宫、卵巢和乳腺中表达高而在睾丸、前列腺和输精管中表达低。结论成功制备特异而有效的兔抗人SNX17C端多克隆抗体,此抗体可用于免疫印迹法分析,初步确定了SNX17在小鼠器官中的表达谱。

关键词：细胞分选蛋白17 蛋白纯化多克隆抗体免疫印迹法小鼠新西兰大白兔

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红毛五加多糖对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖和核转录因子p53、c-myc蛋白表达的影响

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解剖学报 2012年第3期43卷 387-392页

作者：程媛战军唐岩李枫唐军民北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100191

目的探讨红毛五加多糖(AGP)对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖以及对细胞核转录因子p53、c-myc表达的影响。方法在DMEM培养基内加入不同浓度AGP(0.15625、0.3125、0.625、1.25、2.5 g/L)体外培养人乳腺癌细胞系MDA-MB-231 1d、3d、5d、7d... 详细信息

目的探讨红毛五加多糖(AGP)对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖以及对细胞核转录因子p53、c-myc表达的影响。方法在DMEM培养基内加入不同浓度AGP(0.15625、0.3125、0.625、1.25、2.5 g/L)体外培养人乳腺癌细胞系MDA-MB-231 1d、3d、5d、7d后,用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒WST-1测定人乳腺癌细胞的增殖,倒置显微镜观察其形态变化;用免疫荧光法、免疫印迹法检测人乳腺癌细胞凋亡相关蛋白p53、c-myc的表达。结果 WST-1法显示,不同浓度AGP作用3d、5d、7d后对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的增殖具有抑制作用,与阴性对照组相比差异有显著性(P<0.05);抑制率与AGP剂量、作用时间呈依赖性。免疫荧光法及免疫印迹法显示,AGP作用于人乳腺癌细胞系MDA-MB-231后,其细胞的c-myc表达明显减弱,并向细胞质内聚集;而免疫印迹法显示p53表达显著增强。结论 AGP具有抑制人乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖的作用,这可能与AGP下调c-myc表达、上调p53表达有关。

关键词：红毛五加多糖乳腺癌细胞株MDA-MB-231 c—myc p53 WST-1 免疫荧光法免疫印迹法人

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臀大肌肌内神经及肌梭分布

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解剖学报 2012年第5期43卷 654-657页

作者：许家洲薛黔李季蓉金寰杨晓梅遵义医学院解剖学教研室遵义医学院组织学与胚胎学教研室遵义医学院生理学教研室贵州遵义563000 北京大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系北京100191

目的通过对人臀大肌肌内神经分支分布、肌梭密度的研究,提供臀大肌比较详尽的解剖学资料。方法取成人尸体12具,大体解剖后,6具用于改良Sihler肌内神经染色,另6具行HE染色。结果臀大肌受臀下神经支配,有上、中、下3个分支。肌内次级分支... 详细信息

目的通过对人臀大肌肌内神经分支分布、肌梭密度的研究,提供臀大肌比较详尽的解剖学资料。方法取成人尸体12具,大体解剖后,6具用于改良Sihler肌内神经染色,另6具行HE染色。结果臀大肌受臀下神经支配,有上、中、下3个分支。肌内次级分支多达11～14支,沿肌束排列方向走行。臀大肌的肌梭密度平均为(14.91±3.05)个/cm3,肌梭指数为(14.12±4.34)个/g,臀大肌下部肌梭密度最高(25.38±6.25)个/cm3、(24.03±5.92)个/g。结论支配臀大肌的神经肌内次级分支多,沿肌束排列方向走行;人臀大肌下部的肌梭密度明显高于肌上部和肌中部。

关键词：臀大肌肌内神经肌梭臀下神经 Sihler染色人

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脉血康胶囊对经皮冠状动脉介入治疗急性冠脉综合征患者血小板聚集率及其长期预后的影响

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中国中西医结合杂志 2012年第7期32卷 906-909页

作者：葛长江吕树铮柳弘宋现涛陈欣孟康苑飞冯利霞赵聪季凤清霍勇首都医科大学附属北京安贞医院心内科北京100029 首都医科大学基础医学院组织胚胎教研室北京100069 北京大学第一医院心内科北京100034433

目的研究脉血康胶囊对急性冠脉综合征患者行经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)术后二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)介导血小板聚集率水平、高敏C-反应蛋白(highsensitive C-reactive protein,hs-CRP)浓度及长期预后的影响。方法连续入选2008年7月—2010年6月在北京安贞医院住院行PCI手术的急性冠脉综合征患者236例,随机分为常规治疗组(简称RTT组,120例)和脉血康治疗组(简称MKT组,116例),MKT组除常规药物治疗外,每天加用脉血康胶囊12粒,均连续治疗12个月。检测其术前、术后12h及术后30天ADP介导血小板聚集率水平和血清hs-CRP浓度,同时进行12个月临床随访,记录心脑血管事件的发生情况。结果与PCI手术前比较,急性冠脉综合征患者术后12hADP介导血小板聚集率水平和血清hs-CRP浓度明显增高,而经脉血康胶囊治疗30天后其显著降低,与RTT组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。在12个月临床随访中,MKT组心脑血管事件的发生率显著低于RTT组(6.9%vs12.5%,P<0.01)。结论 ADP介导的血小板聚集功能在PCI手术后明显增强,是冠脉不良预后的一个因素。脉血康胶囊可降低PCI术后升高的血小板聚集率及hs-CRP浓度,并改善急性冠脉综合征患者的远期预后。

关键词：急性冠脉综合征血小板抑制剂经皮冠状动脉介入术脉血康胶囊

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阿尔茨海默病大鼠海马胆固醇水平升高对tau蛋白磷酸化程度增加的影响

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中国老年学杂志 2012年第11期32卷 2312-2314页

作者：覃红斌魏蕾张京伟唐军民湖北民族学院医学院湖北恩施445000 武汉大学基础医学院武汉大学中南医院北京大学基础医学院组织学胚胎学教研室

目的观察海马胆固醇含量升高后tau蛋白磷酸化程度的变化,探讨其在阿尔茨海默病(AD)中可能的作用。方法水迷宫训练大鼠7 d筛选合格大鼠后,海马直接注射不同剂量胆固醇,72 h后水迷宫检测行为学变化,并以免疫印迹和免疫组织化学方法检测大... 详细信息

目的观察海马胆固醇含量升高后tau蛋白磷酸化程度的变化,探讨其在阿尔茨海默病(AD)中可能的作用。方法水迷宫训练大鼠7 d筛选合格大鼠后,海马直接注射不同剂量胆固醇,72 h后水迷宫检测行为学变化,并以免疫印迹和免疫组织化学方法检测大鼠海马tau蛋白磷酸化水平。结果注射胆固醇后72 h,中高剂量组大鼠水迷宫潜伏期明显延长(P<0.01),tau蛋白PHF-1位点磷酸化水平明显增高(P<0.01),tau-1明显降低(P<0.01),总tau蛋白(R134d)无明显变化。结论海马胆固醇水平升高可导致tau蛋白磷酸化程度增加,可能参与AD的形成。

关键词： AD 胆固醇水平 tan蛋白磷酸化神经退行性变

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阿托伐他汀和普罗布考联合治疗对冠脉临界病变患者冠脉病变程度的协同作用

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中华急诊医学杂志 2012年第3期21卷 277-281页

作者：葛长江吕树铮柳弘冯利霞宋现涛陈欣孟康苑飞季凤清霍勇首都医科大学附属北京安贞医院心内科北京100029 首都医科大学基础医学院组织胚胎教研室北京大学第一医院心内科

目的研究冠脉临界病变患者血浆胱抑素c水平（plasma cystatin C concentration，PcyC）的变化，探讨阿托伐他汀和普罗布考的联合治疗对其PcyC水平和冠脉病变严重程度的影响。方法连续入选2006年5月至2010年11月在北京安贞医院住院经定... 详细信息

目的研究冠脉临界病变患者血浆胱抑素c水平（plasma cystatin C concentration，PcyC）的变化，探讨阿托伐他汀和普罗布考的联合治疗对其PcyC水平和冠脉病变严重程度的影响。方法连续入选2006年5月至2010年11月在北京安贞医院住院经定量冠脉造影检查确诊冠脉临界病变130例（borderline coronary lesion，BCL），136例无冠脉病变的受试者纳入对照组（controls，CTR）。BCL组患者被随机（随机密封信封法）分为常规治疗组（routine treatment，RTT，n=60）和联合治疗组（combined treatment，CBT，n=70），连续治疗6个月。联合治疗组除常规药物治疗外，每日加用阿托伐他汀20mg和普罗布考1．0g。各组性别、年龄等一般资料间比较差异均无统计学意义，具有可比性。检测其血PcyC和高敏C-反应蛋白（high—sensitive C-reactive protein，hs—CRP）水平，以及总胆固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL—C）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL—C）及甘油三酯（triglycerides，TG）浓度。其中BCL组104例受试者复查冠脉造影。两组间均数比较采用t检验和方差分析，计数资料使用X^2检验，以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果BCL组PcyC水平明显高于CTR组（P〈0．05）。与RTT组相比，CBT组PcyC水平、TC、LDL—C、TG、和hs-CRP明显降低（P〈0．05，P〈0．01）。此外，治疗6个月后RTT组冠脉临界病变的平均狭窄程度（mean percent stenosis，MPS）有所下降（P〉0．05），而CBT组却见明显减低（P〈0．05）。结论PcyC参与冠状动脉疾病的病理过程，且与冠脉病变的严重程度密切相关。阿托伐他汀和普罗布考的联合应用可降低PcyC水平，其可能是冠脉临界病变治疗的选择。

关键词：胱抑素C 冠状动脉疾病冠状动脉临界病变

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ICAM-1基因K469E、K56M多态性对中国裕固族、藏族和汉族人血浆ICAM-1水平的影响

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中国实验血液学杂志 2012年第5期20卷 1205-1211页

作者：王明英白德成朱平傅玉卜定方张英兰州大学基础医学院解剖与组织胚胎学教研室甘肃兰州730000 北京大学第一医院血液研究室北京100034 北京航天总医院血液肿瘤研究所北京100076

本研究检测中国裕固族、藏族和汉族3个民族人群血液中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)基因K469E(A/G,rs5498)和K56M(A/T,rs5491)的基因多态性及血浆中可溶性ICAM-1(sICAM-1)水平,分析其基因型和等位基因频率在不同民族人群中的分布,探讨ICAM-... 详细信息

本研究检测中国裕固族、藏族和汉族3个民族人群血液中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)基因K469E(A/G,rs5498)和K56M(A/T,rs5491)的基因多态性及血浆中可溶性ICAM-1(sICAM-1)水平,分析其基因型和等位基因频率在不同民族人群中的分布,探讨ICAM-1基因2个多态性位点对血浆中sICAM-1水平的影响。采集327例裕固族、400例藏族及126例汉族人群EDTA抗凝静脉血,采用大量全血基因组DNA提取试剂盒提取DNA,以PCR-RFLP进行DNA多态性分析,琼脂糖凝胶电泳后在凝胶扫描成像系统下判断基因型,DNA测序确定基因序列,比较ICAM-1基因型和等位基因频率在不同群体中的分布,通过Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验群体代表性。采用人ICAM-1 ELISA试剂盒检测各民族人群血浆中sICAM-1水平。结果表明,DNA测序与PCR-RFLP分析结果一致。本研究检测到裕固族、藏族及汉族3个民族ICAM-1基因K469E位点KK、KE、EE 3种基因型,但它们的分布差异没有统计学意义,而K、E等位基因频率分布的差异有统计学意义(P<0.05)。裕固族和藏族分别与汉族群体之间的基因型和等位基因频率分布差异都有统计学意义(P<0.05)。K56M位点在3个民族中只检测出KK、KM 2种基因型,尚未检测到MM基因型;2种基因型和K、M等位基因频率分布在裕固族与汉族群体之间差异有统计学意义(P<0.05)。3个民族人群ICAM-1基因型和等位基因频率无明显性别比例和年龄分布差异,分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P>0.05)。ICAM-1 K469E位点含K等位基因个体的sICAM-1血浆水平〔(253±122),(185±97)μg/L)〕高于不含K等位基因的个体〔(145±110)μg/L,P<0.01〕。ICAM-1 K56M位点含KK基因型的个体的sICAM-1血浆水平〔(253±122)μg/L〕高于KM基因型的个体〔(168±103)μg/L,P<0.01〕。裕固族和藏族群体中sICAM-1血浆水平〔(224±800),(214±111)μg/L〕高于汉族群体〔(175±125)μg/L,P<0.05〕,两两比较显示,裕固族与汉族群体及藏族与汉族群体中sICAM-1血浆水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论:裕固族、藏族和汉族人群的ICAM-1 K469E和K56M 2个氨基酸位点基因型和等位基因频率均以KK/KE型、KK型和K等位基因为主,且裕固族和藏族的高于汉族,性别年龄间无明显差异,本研究对象中的ICAM-1基因型和等位基因频率分布具有群体代表性。ICAM-1基因K469E和K56M多态性影响血液中sICAM-1的血浆水平。K469E基因的K等位基因可能是某些疾病遗传危险因素,而K56M基因的M等位基因可能是其遗传保护因素。

关键词：细胞间黏附分子-1 K469E K56M 基因多态性裕固族藏族汉族

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细胞钙离子转运蛋白兰尼碱受体3与ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块形成的关系

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中国病理生理杂志 2012年第9期28卷 1686-1689页

作者：冯利霞葛长江吕树铮孙海梅季凤清霍勇首都医科大学附属北京安贞医院心内科北京市心肺血管疾病研究所北京100029 首都医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100069 北京大学第一医院心内科北京100034

目的:观察细胞钙离子转运蛋白兰尼碱受体3(ryanodine receptor 3,RYR3)在动脉粥样硬化斑块形成过程中的改变,探讨两者的相关性。方法:选取6周龄雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠及野生型C57BL/6J小鼠,高脂饲喂20、27和33周后,在各个... 详细信息

目的:观察细胞钙离子转运蛋白兰尼碱受体3(ryanodine receptor 3,RYR3)在动脉粥样硬化斑块形成过程中的改变,探讨两者的相关性。方法:选取6周龄雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠及野生型C57BL/6J小鼠,高脂饲喂20、27和33周后,在各个时点处死动物取主动脉根部制作连续切片。(1)HE染色,观察组织形态学的变化,计算机图像分析仪测量斑块面积和血管管腔面积,计算校正斑块面积(斑块面积/血管管腔面积)。(2)免疫组织化学染色,计算机图像分析仪测定不同周龄小鼠细胞钙离子转运蛋白RYR3表达变化。结果:与同周龄对照组小鼠相比,ApoE-/-小鼠体内RYR3表达显著减少(P<0.05),随着ApoE-/-小鼠周龄的增加,RYR3的表达明显减少,且与斑块面积/血管管腔面积呈负相关(r=-0.652,P<0.01)。结论:细胞钙离子转运蛋白RYR3参与动脉粥样硬化的病理过程,且与动脉粥样硬化斑块的形成密切相关。

关键词：兰尼碱受体3 载脂蛋白E 动脉粥样硬化

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