检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学教育 2025年第3期27卷 283-286页

作者：杨旭东陈妍珂朱二强刘坤侯妮李冬民西安交通大学医学部人体分子与细胞教研室西安交通大学基础医学院生物化学与分子生物学系西安交通大学基础医学院细胞生物学与遗传学系北京百迈客生物科技有限公司科服事业部艾普拜生物(江苏)科技有限公司技术服务部

为了满足培养具有创新意识的复合型医工交叉人才的需要，西安交通大学人体分子与细胞教研室在人体分子与细胞整合课程的教学过程中先后邀请了北京百迈客生物科技有限公司、艾普拜生物(江苏)科技有限公司以及北京达科为生物技术有限公司... 详细信息

为了满足培养具有创新意识的复合型医工交叉人才的需要，西安交通大学人体分子与细胞教研室在人体分子与细胞整合课程的教学过程中先后邀请了北京百迈客生物科技有限公司、艾普拜生物(江苏)科技有限公司以及北京达科为生物技术有限公司，在核酸测序、PCR技术以及细胞流式技术等领域的工程师开展校企联合双师授课(简称“双师授课”)。文章以核酸测序技术的授课过程为例介绍了双师授课教学的实施过程，希望为医工交叉专业其他课程开展双师授课提供有价值的经验。

关键词：高等教育校企联合双师授课医工交叉专业复合型人才培养理论结合实践

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肝癌中高表达的新基因LAPTM4B对细胞增殖及成瘤性的影响

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北京大学学报（医学版） 2003年第4期35卷 348-352页

作者：何静邵根泽周柔丽北京大学基础医学院细胞生物学与遗传学系北京100083

目的 :研究在肝细胞癌中高表达的新基因LAPTM4B对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响 ,探讨LAPTM4B基因的生物学功能。方法 :构建真核表达质粒 pcDNA3 TM 4B ,利用脂质体稳定转染LAPTM 4BcDNA至NIH3T3细胞中 ,用RT -PCR、Northern和Wester... 详细信息

目的 :研究在肝细胞癌中高表达的新基因LAPTM4B对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响 ,探讨LAPTM4B基因的生物学功能。方法 :构建真核表达质粒 pcDNA3 TM 4B ,利用脂质体稳定转染LAPTM 4BcDNA至NIH3T3细胞中 ,用RT -PCR、Northern和Western杂交法筛选和鉴定转染后LAPTM4B基因高表达的单克隆细胞株 ,研究其与细胞增殖相关的生物学特征的变化。结果 :与转染空载体的对照组相比 ,转染了LAPTM4BcDNA的NIH3T3细胞表面发生明显变化 ,微绒毛的数量和长度增加 ,多分枝且缠绕成团。转染细胞在纤黏连蛋白、人工基膜和层黏连蛋白基质上的黏附 /铺展能力增强。生长曲线显示转染细胞的生长速率增高。流式细胞仪检测显示转染细胞的S期细胞数比未转染细胞显著增多 ,而G0 ～G1期细胞数减少。Western杂交显示CyclinE蛋白在转染细胞中的表达显著增加。转染细胞对血清的依赖性下降并具有成瘤性。结论 :LAPTM 4B基因能影响细胞增殖的调节 ,促进NIH3T3细胞的增殖 ,并使NIH3T3细胞具有成瘤性 ,在肿瘤发生过程中具有重要的作用。

关键词：肝癌表达基因 LAPTM4B 细胞增殖成瘤性

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采用杆状病毒/昆虫表达系统纯化蛋白制备抗hUTP14a多克隆抗体

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中国生物化学与分子生物学报 2019年第3期35卷 341-348页

作者：张春凤刘惠蛟任鹏伟杜晓娟北京大学基础医学院医学遗传学系北京100083 北京大学基础医学院细胞生物学系北京100083

为制备兔抗人hUTP14a多克隆抗体并鉴定其抗体的特异性,本研究通过杆状病毒/昆虫表达系统制备并纯化Flag-hUTP14a-his蛋白,免疫新西兰家兔。ELISA方法检测免疫兔的抗血清滴度达到1∶10~5(体积比)时取血清,并通过Protein A免疫亲和层析柱... 详细信息

为制备兔抗人hUTP14a多克隆抗体并鉴定其抗体的特异性,本研究通过杆状病毒/昆虫表达系统制备并纯化Flag-hUTP14a-his蛋白,免疫新西兰家兔。ELISA方法检测免疫兔的抗血清滴度达到1∶10~5(体积比)时取血清,并通过Protein A免疫亲和层析柱纯化抗体。在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)中过表达Flag-hUTP14a,或用小干扰RNA(small interference RNA, siRNA)沉默内源的hUTP14a蛋白表达后,提取细胞总蛋白质。经Western印迹分析制备的多克隆抗体的特异性;通过细胞免疫化学染色、细胞免疫荧光、免疫组织化学染色和免疫沉淀(immunoprecipitation, IP)实验对hUTP14a抗体的特异性进行鉴定。研究证实,制备的抗hUTP14a多克隆抗体能够特异性识别内源及外源表达的hUTP14a蛋白。该抗体可以用于细胞免疫荧光、细胞免疫化学染色、免疫组织化学染色、Western印迹及免疫沉淀等技术,为进一步研究hUTP14a的生物学功能提供了特异性抗体。

关键词： hUTP14a 杆状病毒/昆虫表达系统多克隆抗体

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人肝癌相关新基因编码产物LAPTM4B的鉴定及其生物学特性

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北京大学学报（医学版） 2003年第4期35卷 340-347页

作者：刘歆荣周柔丽张青云张页邵根泽金月英张莎林明芮静安叶大雄北京大学基础医学院细胞生物学与遗传学系北京100083 北京大学临床肿瘤学院北京协和医院

目的 :鉴定由肝细胞癌 (HCC)相关新基因LAPTM 4B编码的蛋白质并研究其生物学特性。方法 :以Westernblot、免疫组化及双向电泳鉴定新基因的表达产物 ;以免疫共沉淀等方法研究分子间的相互作用。结果 :LAPTM4B基因编码相对分子质量分别为 ... 详细信息

目的 :鉴定由肝细胞癌 (HCC)相关新基因LAPTM 4B编码的蛋白质并研究其生物学特性。方法 :以Westernblot、免疫组化及双向电泳鉴定新基因的表达产物 ;以免疫共沉淀等方法研究分子间的相互作用。结果 :LAPTM4B基因编码相对分子质量分别为 35× 10 3 和 2 4× 10 3 、等电点分别为 9.0 7和 4 .6 5的两种异型分子。它们在肝癌组织及肝癌细胞系的表达显著上调 ,而相对分子质量为 35× 10 3 者尤为明显 ,并与细胞分化程度相关。LAPTM4B蛋白可与整合素α 6亚单位及表皮生长因子 (EGF)受体形成信号复合物。结论 :LAPTM4B 35蛋白在人肝癌组织及细胞系过表达 ,并可能通过与细胞表面的整合素受体及EGF受体形成复合物而参与细胞外基质成分所启动的信号转导。

关键词：肝癌基因编码产物 LAPTM4B 鉴定生物学特性信号复合物

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前列腺癌患者外周血中前列腺特异抗原,前列腺特异膜抗原和人腺体激肽释放酶mRNA的表达及临床意义

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北京大学学报（医学版） 2004年第2期36卷 164-168页

作者：徐涛陈希王晓峰侯树坤朱积川张小东黄晓波北京大学人民医院泌尿外科北京100044 北京大学基础医学院细胞生物学与遗传学系

目的 :采用巢式RT -PCR方法 ,检测前列腺癌合并骨转移的患者外周血中前列腺特异抗原 (PSA)、前列腺特异膜抗原 (PSMA)和人腺体激肽释放酶mRNA的表达 ,探讨其临床意义。方法 :应用巢式RT -PCR的方法 ,检测外周血中PSA、PSMA和hK2mRNA表... 详细信息

目的 :采用巢式RT -PCR方法 ,检测前列腺癌合并骨转移的患者外周血中前列腺特异抗原 (PSA)、前列腺特异膜抗原 (PSMA)和人腺体激肽释放酶mRNA的表达 ,探讨其临床意义。方法 :应用巢式RT -PCR的方法 ,检测外周血中PSA、PSMA和hK2mRNA表达。结果 :巢式PCR能够检测到经淋巴细胞稀释的LNCaP细胞的PSA、PSM和hK2mRNA的灵敏度 ,稀释浓度分别为 1 0 -6、1 0 -6及 1 0 -7。检测初发伴骨转移的前列腺癌患者外周血PSA、PSMA和hK2mRNA的阳性率分别为 5 9.4 5 %、5 1 .35 %、5 9.4 6 % ,其中三种检测同时阳性的为 32 .4 3% ;检测接受内分泌治疗后出现骨转移的前列腺癌患者的阳性率分别为 5 7.1 4 %、85 .71 %、83.33% ,其中三种检测同时阳性的为 5 2 .4 8%。局限性前列腺癌患者、健康男性及健康女性的检测结果均为阴性。以 β actinmRNA做为内参照 ,所有临床标本检测均为阳性。结论 :采用巢式RT PCR检测前列腺癌患者外周血PSMA、hK2和PSAmRNA有助于发现进入循环系统的前列腺癌细胞 ,提示隐匿性转移的存在。PSMA和hK2较适合用于内分泌治疗后患者的检测。

关键词：前列腺癌外周血前列腺特异抗原激肽释放酶临床意义巢式RT-PCR 骨转移癌

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从血液中提取总RNA的一种快速高效方法

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中国生物化学与分子生物学报 2002年第6期18卷 786-787页

作者：林明张页张沙周柔丽北京大学医学部基础医学院细胞生物学与遗传学系北京100083

血液中含有大量的RNA酶 ,可引起RNA的降解 .防止RNA酶的降解 ,是保证所得RNA片段完整的关键 .目前提取RNA的方法较多 ,但有些方法尚不能完全防止RNA降解 .将TRIZOL方法稍加改进 ,将TRIZOL与异硫氰酸胍联用提取血液淋巴细胞总RNA .琼脂... 详细信息

血液中含有大量的RNA酶 ,可引起RNA的降解 .防止RNA酶的降解 ,是保证所得RNA片段完整的关键 .目前提取RNA的方法较多 ,但有些方法尚不能完全防止RNA降解 .将TRIZOL方法稍加改进 ,将TRIZOL与异硫氰酸胍联用提取血液淋巴细胞总RNA .琼脂糖凝胶电泳结果表明 ,其 2 8SRNA与 18SRNA的比值为 2∶1,优于单独使用其中任何一种试剂者 .此方法同样适用于从其它细胞中提取RNA .

关键词：血液提取总RNA 快速高效方法异硫氰酸胍 RNA降解 TRIZOL

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hUTP14a在非小细胞肺癌组织中的表达

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北京大学学报（医学版） 2019年第1期51卷 145-150页

作者：张春凤刘云陆敏杜晓娟北京大学基础医学院医学遗传学系北京100191 北京大学医药卫生分析中心北京100191 北京大学基础医学院病理学系北京100191 北京大学基础医学院细胞生物学系北京100191

目的:hUTP14a通过促进p53和Rb降解以及增强c-Myc致癌活性促进肿瘤的发生,且在人肝癌和结直肠癌组织中表达升高。本研究检测hUTP14a在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达,并分析hUTP14a的表达水平与NSCLC患者... 详细信息

目的:hUTP14a通过促进p53和Rb降解以及增强c-Myc致癌活性促进肿瘤的发生,且在人肝癌和结直肠癌组织中表达升高。本研究检测hUTP14a在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达,并分析hUTP14a的表达水平与NSCLC患者临床特征的关系。方法:收集2003年5月至2006年4月在北京大学第三医院接受手术治疗并经过组织病理学确诊的123例NSCLC患者的组织蜡块标本(鳞状细胞癌53例,腺癌70例),采用免疫组织化学染色方法分析癌组织及其邻近癌旁非肿瘤组织中hUTP14a的表达水平,应用SPSS 17. 0软件的χ2检验,以患者的性别、年龄、组织类型、肿瘤大小、分化程度以及临床分期等临床病理特征进行分组,对组间肺癌组织中hUTP14a的表达率进行比较。结果:hUTP14a在肺癌组织中的阳性表达率为37. 4%(46/123),在癌旁组织中的阳性表达率为0(0/123),在肺癌组织中的表达率显著高于癌旁非肿瘤组织(P <0. 001); hUTP14a在肺腺癌中的表达率为48. 6%(34/70),在鳞状细胞癌中的表达率为22. 6%(12/53),均显著高于相应的癌旁组织[0 (0/70),0 (0/53)]; hUTP14a在肺腺癌中的表达率显著高于在鳞状细胞癌中的表达率(48. 6%vs. 22. 6%,χ2=8. 66,P=0. 03)。进一步分析肺鳞状细胞癌、腺癌与各临床病理特征之间的关系发现,hUTP14a在病理分期(p TNM)晚期的肺鳞状细胞癌患者肿瘤组织中的表达率显著高于p TNM早期的鳞状细胞癌患者,而与肺腺癌的p TNM分期没有显著关联性,未见hUTP14a表达与肺癌的其他临床病理特征存在关联。结论:hUTP14a在肺癌组织中特异性表达升高,而且与肺鳞状细胞癌的pTNM分期具有关联性,提示hUTP14a有可能成为早期筛查诊断NSCLC的候选标志物。

关键词： hUTP14a 非小细胞肺癌免疫组织化学鳞状细胞癌腺癌

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RT-PCR检测HUTP14A mRNA时排除假基因HUTP14C干扰的方法

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中国生物化学与分子生物学报 2019年第10期35卷 1155-1165页

作者：许阁阁刘小锋张春凤杜晓娟北京大学基础医学院细胞生物学系北京100083 北京大学肿瘤医院肝胆胰外一科北京100142 北京大学基础医学院医学遗传学系北京100083

人类U3蛋白14C基因(HUTP14C)是人类U3蛋白14A基因(HUTP14A)的假基因。两者转录本序列同源性高达95%。常规RT-qPCR技术在检测HUTP14A mRNA丰度时,HUTP14C的存在会影响检测结果。本研究旨在建立检测HUTP14A mRNA时排除HUTP14C干扰的RT-PC... 详细信息

人类U3蛋白14C基因(HUTP14C)是人类U3蛋白14A基因(HUTP14A)的假基因。两者转录本序列同源性高达95%。常规RT-qPCR技术在检测HUTP14A mRNA丰度时,HUTP14C的存在会影响检测结果。本研究旨在建立检测HUTP14A mRNA时排除HUTP14C干扰的RT-PCR方法。本研究设计出能分别从多种肿瘤细胞DNA和RNA中特异性扩增HUTP14A和HUTP14C的引物,避免假基因HUTP14C对其同源基因HUTP14A检测的干扰。在检测细胞系HUTP14A mRNA时,通过DNaseⅠ消除RNA中污染的HUTP14C DNA,用靶向HUTP14C 3'-UTR的siRNA沉默HUTP14C mRNA后,再用RT-PCR检测HUTP14A mRNA丰度,使结果更加准确。在18对肝癌及癌旁组织中,利用特异性引物进行RT-PCR检测,HUTP14A和HUTP14C mRNA的表达略高于癌旁组织。本研究提示,针对有假基因存在的功能基因,对其mRNA丰度进行检测时,在提取细胞或组织总RNA后,用DNaseⅠ处理,再用RNA直接进行PCR扩增,排除DNA污染后,再进行RT-PCR或RT-qPCR扩增。大多假基因具有较长的3'-UTR区,在该区域设计siRNA特异性沉默假基因的mRNA后,用RT-qPCR检测功能基因的mRNA丰度,可以排除假基因mRNA的影响。在病理组织中检测功能基因的mRNA丰度时,可以根据假基因和其功能基因的序列差异设计出特异扩增功能基因的引物,从假基因的3'-UTR区设计特异扩增假基因的引物,通过RT-qPCR技术分别检测二者的mRNA。

关键词：人类U3蛋白14A基因人类U3蛋白14C基因(HUTP14C) 假基因 RT-qPCR 肝癌

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牵引成骨体外模型的建立及成骨细胞骨架的观察

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中华口腔医学杂志 2006年第2期41卷 111-113页

作者：王稚英王兴肖军军董晓敏北京大学口腔医学院.口腔医院口腔颌面外科北京大学细胞生物学与遗传学系

目的建立模拟临床牵引成骨的体外模型,了解不同牵引强度牵引后成骨细胞骨架的改变。方法应用钛合金板材和硅橡胶薄膜研制牵引成骨体外模型,并在激光共聚焦显微镜下观察不同强度牵引成骨细胞24h后,肌动蛋白细胞骨架的原位表达,以及肌动... 详细信息

目的建立模拟临床牵引成骨的体外模型,了解不同牵引强度牵引后成骨细胞骨架的改变。方法应用钛合金板材和硅橡胶薄膜研制牵引成骨体外模型,并在激光共聚焦显微镜下观察不同强度牵引成骨细胞24h后,肌动蛋白细胞骨架的原位表达,以及肌动蛋白和微管蛋白α细胞骨架蛋白蛋白质印迹凝胶电泳表达。结果建立的牵引成骨体外模型与临床应用的牵引成骨模式类似;生理性机械牵引力作用于成骨细胞24h后,肌动蛋白细胞骨架蛋白组装,沿受力方向排列;超生理性机械牵引成骨细胞24h后,肌动蛋白细胞骨架出现解聚和崩解,细胞骨架蛋白水平降低。结论牵引成骨体外模型适宜进行牵引成骨体外研究;生理性机械牵引刺激引起肌动蛋白细胞骨架的组装和重新排列,而超生理性机械牵引刺激导致肌动蛋白细胞骨架的解聚和崩解。

关键词：牵引术细胞,培养的模型

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人胚胎脑室脉络丛上皮细胞表达神经干细胞分子标志

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解剖学报 2011年第2期42卷 201-204页

作者：张小燕刘胜勇何其华陆爱丽王珂张卫光沈丽北京大学医学部基础医学院细胞生物学系北京大学医学部基础医学院解剖学与组织胚胎学系北京100191

目的探讨人12周龄胚胎脑脉络丛上皮细胞是否具有神经干细胞的生物学特性。方法制备室管膜/室管膜下区和纹状体脑切片和脉络丛组织铺片,采用免疫荧光染色,在激光扫描共焦显微镜下观察结果,采集图像数据。结果人12周龄胚胎脑室脉络丛上皮... 详细信息

目的探讨人12周龄胚胎脑脉络丛上皮细胞是否具有神经干细胞的生物学特性。方法制备室管膜/室管膜下区和纹状体脑切片和脉络丛组织铺片,采用免疫荧光染色,在激光扫描共焦显微镜下观察结果,采集图像数据。结果人12周龄胚胎脑室脉络丛上皮细胞表达神经干细胞分子标志CD133、Nestin和Sox2。神经干细胞的分子标志在脉络丛上皮细胞的分布具有一定极性,未见共定位分布。室管膜上皮细胞面向脑室腔面的细胞顶端微绒毛也表达CD133,而室管膜下区和纹状体区可见极少数CD133阳性标记细胞。结论 12周龄脑室脉络丛上皮细胞已定向分化,不仅提供维持神经干细胞的微环境,还具有神经干细胞的生物学特性。

关键词：脉络丛上皮细胞室管膜神经干细胞免疫荧光染色胚胎人

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