检索结果-内蒙古大学图书馆

北京大学学报（医学版） 2001年第1期33卷 54-57页

作者：张杰刘军建韩云张宁芮静安金城周柔丽北京大学基础医学院细胞生物学教研室北京100083 邮电总医院肝癌研究所中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室

目的 :寻找肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)相关的新基因 ,并从分子水平进一步探讨HCC发生发展的机制。方法 :对通过荧光差异显示 (fluorescent differentialdisplay ,FluoroDD)技术从人HCC组织、配对非癌肝 ( pairednon can... 详细信息

目的 :寻找肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)相关的新基因 ,并从分子水平进一步探讨HCC发生发展的机制。方法 :对通过荧光差异显示 (fluorescent differentialdisplay ,FluoroDD)技术从人HCC组织、配对非癌肝 ( pairednon cancerousliver,PNL)组织、胎肝 (fetalliver ,FL)组织和正常肝 (normalliver ,NL)组织获得的 110条差异表达cDNA片段 (DD片段 )中的 2 5条进行测序 ,将测序结果在GenBankNR数据库中进行同源性分析 ,并对其中 12条DD片段用RNA狭缝杂交法验证其在HCC、PNL及NL组织中的表达规律。结果 :2 5条DD片段中 18条与已知基因具有高同源性 ( >96 % ) ;5条与已知序列 (基因结构与功能未知 )具有高同源性 ( >85 % ) ;2条与Gen BankNR数据库中的序列无明显同源性。RNA狭缝杂交筛选到 5条在HCC中特异性高或低表达并与已知哺乳类动物基因高度同源 ( 97%～ 99% )的cDNA片段 :在HCC中特异性高表达的 3条片段是LC13(人热休克蛋白 90 β)、LC2 1(智人异源性核内核糖核蛋白C)和LC2 2 (干扰素诱导的智人鸟嘌呤结合蛋白 2 ) ;在HCC中特异性低表达的 2条片段是LC5 (智人甲状腺激素受体相关蛋白 2 40 )和FL2 5 (分化相关基因 1)。结论 :新发现 5条与HCC相关、与已知哺乳动物基因高度同源的cDNA片段。

关键词：肝细胞癌 DNA 癌基因同源盒

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去极化时Ca^(2+) 内流引起蛋白激酶C_α浆膜转位

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中国生物化学与分子生物学报 2001年第3期17卷 293-298页

作者：陆纲陈瑞华宫明邵世滨贾弘禔北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100083 张家口医学院细胞生物学教研室张家口075000 山东临沂医学专科学校山东276003

为观察胞外Ca2 + 内流和肌浆网Ca2 + 释放两种来源的Ca2 + 对cPKCα转位激活的影响 ,揭示PKC在去极化 nAChR转录偶联中的作用 ,构建了pPKCα EGFP N1融合蛋白真核基因表达载体 .转染C2C1 2肌细胞后 ,采用激光共聚焦显微镜记录了KC1或咖... 详细信息

为观察胞外Ca2 + 内流和肌浆网Ca2 + 释放两种来源的Ca2 + 对cPKCα转位激活的影响 ,揭示PKC在去极化 nAChR转录偶联中的作用 ,构建了pPKCα EGFP N1融合蛋白真核基因表达载体 .转染C2C1 2肌细胞后 ,采用激光共聚焦显微镜记录了KC1或咖啡因处理所引起的细胞Ca2 + 波变化及PKCα GFP融合蛋白在细胞内的分布 .结果提示 ,只有用KC1处理引起细胞膜去极化时 ,伴随Ca2 +内流 ,才能观察到PKCα GFP绿色荧光在细胞内发生的细胞浆至细胞膜分布变化 .然而 ,采用肌浆网Ca2 + 通道激动剂咖啡因刺激肌细胞 ,使肌浆网中Ca2 + 释放 ,未见PKCα GFP绿色荧光在浆、膜分布发生任何变化 .结果提示 ,去极化时外Ca2 + 内流可引起PKCα转位激活 ,肌浆网Ca2 + 释放对PKCα的转位激活没有影响 .

关键词：去极化 Ca^2+内流 PKC 转位

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动物细胞系的染色体组型与遗传变异率分析

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Acta Genetica Sinica 2001年第4期28卷 327-344,T001,T002页

作者：张德礼李六金夏耕田何旭玉高步先白晓鸿黄高升刘尚高阎隆飞方福德胡春雷王黎军姜焕宏冯阿曼张广民安社刚任远强郭建民胡淑贤樊军喜牛永利宋占军李迎樊胜军北京大学医学部免疫学系北京100083 北京军区联勤部卫生防疫队西安710032 第四军医大学动物保健品研制中心毒理学研究室西安710032 第四军医大学基础部病理学教研室西京医院病理科中国癌症研究基金会肿瘤研究所北京100094 中国农业大学动物医学院传染病微生物学教研室生物学院生物化学与分子生物学系农业生物技术国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院实验动物研究所

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库，即７种动物肾细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、ＭＤＣＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２、ＭＡ－１０４、ＢＨＫ－２１）的种子库和工作库的基础上，通过细胞染色体组型、Ｇ带核型、染色体数目变异率、... 详细信息

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库，即７种动物肾细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、ＭＤＣＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２、ＭＡ－１０４、ＢＨＫ－２１）的种子库和工作库的基础上，通过细胞染色体组型、Ｇ带核型、染色体数目变异率、结构畸变率分析，了解７种细胞系传代培养不同代次的染色体变异情况。以相应的细胞株皮下接种裸鼠形成肿瘤实验、软琼脂细胞克隆形成率与植物凝集素作用下细胞凝集实验为对照，筛选出无致癌／致瘤性、符合细胞遗传学要求、无传染因子污染的细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２）或极低致癌性的ＭＤＣＫ细胞系用于制苗，发现肿瘤细胞系高变异率株可在裸鼠体内快速选育成功。细胞系染色体遗传特征决定致瘤性质并具有种属特异性，得到一些１００％成瘤和１００％不成瘤的细胞株并探讨了与染色体组型的关系。对于肿瘤的发病机理及实验治疗，都是非常好的模型。一些细胞系不仅成瘤而且还可转移（致恶性横纹肌样瘤的ＢＨＫ－２１和Ｖｅｒｏ细胞株），其他致瘤细胞株只成瘤不转移或不明显转移。

关键词：动物肾细胞系人类子宫颈癌细胞系猪肾原代细胞染色体核型 G带核型遗传变异率数目变异结构畸变

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层粘连蛋白总糖肽的抗癌细胞转移作用及其作用机制

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医学研究通讯 2001年第10期30卷 18-18页

作者：周柔丽张页路艳艳刘艺萍张静蒋新农张莎金月英林明北京大学基础医学院细胞生物学教研室

增殖失控及侵袭与转移是恶性肿瘤细胞的根本特性,也是夺去癌患者生命的根本原因。不单在癌症发展过程中可自发的发生广泛转移,而且在癌症常规诊疗过程中也有可能人为的促进癌细胞的转移(医源性转移),如诊疗操作中的种植及对患者免疫功... 详细信息

增殖失控及侵袭与转移是恶性肿瘤细胞的根本特性,也是夺去癌患者生命的根本原因。不单在癌症发展过程中可自发的发生广泛转移,而且在癌症常规诊疗过程中也有可能人为的促进癌细胞的转移(医源性转移),如诊疗操作中的种植及对患者免疫功能的损伤等。癌细胞转移是一个多步骤的复杂过程。然而。

关键词：层粘连蛋白总糖肽抗癌细胞转移作用机制

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关于SEN病毒(SENV)

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传染病信息 2001年第3期14卷 104-104页

作者：庄辉北京大学基础医学院微生物学教研室北京100083

2000年意大利学者Primi等从1名感染HIV的毒瘾者血清中分离到一株单链DNA病毒,以该病人的姓名第一个字母命名为SEN病毒(SENV)。该病毒有8个成员,分别命名为SENV-A～H。 SENV属于TTV相关病毒的超级家族(superfamily of TTV-related viruse... 详细信息

2000年意大利学者Primi等从1名感染HIV的毒瘾者血清中分离到一株单链DNA病毒,以该病人的姓名第一个字母命名为SEN病毒(SENV)。该病毒有8个成员,分别命名为SENV-A～H。 SENV属于TTV相关病毒的超级家族(superfamily of TTV-related viruses),是小的、很可能是无包膜的单链环状DNA病毒。对8株SENV、6株TTV原型株、7株TTV变异株(SANBAN、TUSO1、

关键词：艾滋病 SEN病毒 SENV TTV病毒 DNA病毒

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层粘连蛋白总糖肽抗癌细胞转移机制的研究

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北京医科大学学报 2000年第3期32卷 258-261页

作者：路艳艳周柔丽张莎蒋新农北京大学基础医学院细胞生物学教研室北京100083

从癌细胞增殖、凋亡和基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinases,MMPs)的分泌等方面研究层粘连蛋白总糖肽 (laminin glycopeptides,LN GPs)抗癌细胞转移的机制。方法 :将人肝癌细胞系Bel740 2细胞于层粘连蛋白基质上孵育一定时间后 ,... 详细信息

从癌细胞增殖、凋亡和基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinases,MMPs)的分泌等方面研究层粘连蛋白总糖肽 (laminin glycopeptides,LN GPs)抗癌细胞转移的机制。方法 :将人肝癌细胞系Bel740 2细胞于层粘连蛋白基质上孵育一定时间后 ,噻唑蓝比色法测活细胞群体总数。3H TdR参入法测癌细胞DNA的合成 ;荧光素活化的细胞分拣术 (fluorescentactivatedcellsorting ,FACS)测定细胞周期 ;细胞经吉姆萨染色后计数有丝分裂指数 ;FACS和丫啶橙染色法检测细胞的凋亡。明胶酶谱分析法检测无血清培养上清中癌细胞分泌MMPs的水平。糖肽组加LN GPs (5 0mg·L-1)。结果 :癌细胞孵育后 ,活细胞群体总数增加 ,3H TdR的参入升高 ,G1期细胞减少而S期细胞增加。相反 ,加LN GPs组活细胞群体总数明显降低 ,3H TdR的参入下降 ,G1期细胞增加而S期细胞减少 ,与未包被组结果相近。但两种方法均未检测到明显的癌细胞凋亡。LN GPs组人肝癌细胞系Bel740 2细胞和高转移潜能的人巨细胞肺癌细胞系PG细胞的MMPs分泌和活化明显降低。结论 :LN可促进癌细胞的增殖 ,而LN GPs能抑制这一作用 ,并可明显抑制癌细胞MMPs的分泌 ,这可能是其抑制癌细胞侵袭和转移的重要环节。

关键词：层粘连蛋白糖肽类肿瘤转移药物疗法抗癌药

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LHScDNA的部分克隆及其表达对肝癌细胞行为的影响

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北京医科大学学报 2000年第6期32卷 526-529页

作者：刘军建张杰周柔丽金城北京大学基础医学院细胞生物学教研室北京100083 中国科学院微生物研究所

目的 :克隆在肝癌组织中低表达的差异显示片段L2的基因cDNA序列 ,并初步探讨其在肝癌发生、发展过程中的作用。方法 :将L2在GenBank中拼接后 ,分析其序列结构 ,并构建正义真核表达质粒 ,转染BEL 740 2肝癌细胞后 ,对转染细胞增殖、粘附... 详细信息

目的 :克隆在肝癌组织中低表达的差异显示片段L2的基因cDNA序列 ,并初步探讨其在肝癌发生、发展过程中的作用。方法 :将L2在GenBank中拼接后 ,分析其序列结构 ,并构建正义真核表达质粒 ,转染BEL 740 2肝癌细胞后 ,对转染细胞增殖、粘附、迁移和侵袭等指标进行测定。结果 :克隆得到一条 10 0 5bp的cDNA ,其 5′端 712bp与人Liprinβ1cDNA 5′端调控序列和外显子 1,2 ,3序列同源 (10 0 % ) ,而 3′端 2 93bp与Liprinβ1基因内含子 4同源 (10 0 % )。其间有一个 5 10bp开放阅读框架 ,起始密码位置与Liprinβ1基因相同 ,推断的蛋白产物除C端 13个氨基酸残基外 ,其余均与Liprinβ1同源。此cDNA暂命名为LHS (Liprinβ1 homologoussequence)。LHScDNA正义转染BEL 740 2肝癌细胞系 ,对于细胞的增殖活性和侵袭能力无明显影响 ,但可降低肝癌细胞在层粘连蛋白上的粘附和迁移能力。结论

关键词：肝癌 LHS cDNA 克隆肿瘤转移基因表达

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二巯丙磺钠抗四次甲基二砜四胺致惊作用的机理

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中国药理学会通讯 2000年第2期17卷 56-57页

作者：张春颖朱桐君温州医学院药理学教研室，浙江325027 北京大学基础医学院细胞生物学教研室，北京100083

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用荧光差异显示法分离新的肝细胞癌相关基因

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北京医科大学学报 2000年第5期32卷 411-414页

作者：刘军建张杰张宁芮静安金城周柔丽北京大学基础医学院细胞生物学教研室北京100083 邮电总医院肝癌研究所中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室

目的 :寻找新的肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)相关基因。方法 :应用荧光差异显示 (fluorescentdifferentialdisplay)技术分析人HCC、配对非癌肝、胎肝、正常肝等组织之间的基因差异表达 ,差异表达cDNA片段 ,经测序后 ,再用... 详细信息

目的 :寻找新的肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)相关基因。方法 :应用荧光差异显示 (fluorescentdifferentialdisplay)技术分析人HCC、配对非癌肝、胎肝、正常肝等组织之间的基因差异表达 ,差异表达cDNA片段 ,经测序后 ,再用RNA狭缝杂交对部分差异片段在上述 4种组织中的表达进行验证。结果 :共得到差异表达cDNA片段 110条。经狭缝杂交筛选 ,获得了 4条阳性片段 ,未知cDNA片段L2和与人醛缩酶B 99.5 %同源的cDNA片段L7在部分HCC中特异性低表达 ,未知cDNA片段LC2 7和与人Nip3基因 99.4%同源的cDNA片段LC2 0在部分HCC中特异性高表达。结论 :确认了 4条HCC相关基因。其中L2和人醛缩酶B基因可能为阻抑HCC发生、发展的基因 ,而人Nip3基因和LC2 7可能为促进HCC发生、发展的基因。L2和LC2 7为目前未知的新基因。

关键词：肝细胞癌遗传学癌基因荧光差异显示法

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用荧光差异显示法筛选肝细胞癌相关新基因

用荧光差异显示法筛选肝细胞癌相关新基因

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2000全国肿瘤学术大会

作者：张杰刘军建韩云张宁芮静安金城周柔丽北京大学基础医学院细胞生物学教研室北京大学基础医学院细胞生物学教研室北京大学基础医学院细胞生物学教研室邮电总医院肝癌研究所邮电总医院肝癌研究所中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室北京大学基础医学院细胞生物学教研室

应用荧光-差异显示技术（F-DD）分析人肝细胞癌、配对非肝癌、胎肝、正常肝等组织之间的基因差异表达,得到差异表达 cD- NA 片段110条,选73条差异表达 cDNA 片段经测序后,与 GenBank NR 及 ESR 数据库（BLASTN 2．0．10）中的序列进行... 详细信息

应用荧光-差异显示技术（F-DD）分析人肝细胞癌、配对非肝癌、胎肝、正常肝等组织之间的基因差异表达,得到差异表达 cD- NA 片段110条,选73条差异表达 cDNA 片段经测序后,与 GenBank NR 及 ESR 数据库（BLASTN 2．0．10）中的序列进行同源性比较,并选其中23条差异表达的 cDNA 片段为探针,用 RNA 狭缝杂交对其在上述组织中的表达进行验证,获得了9条差异表达片段（与 FDD 的差异符合率为39.13%）。在多数 HCC 中特异性高表达的是:未知 cDNA 片段 LC27;与智人甲状腺受体相关蛋白240基因99%同源的 LC5片段;与人热休克蛋白90β基因99%同源的 LC13片段;与人 Nip3基因 99.4%同源的 LC20片段;与智人异质性核糖核蛋白 C 基因99%同源的 LC21片段;与干扰素诱导的智人鸟嘌呤结合蛋白2基因99%同源的 LC22片段,上述片段可能会促进肝细胞癌的发生、发展。在多数 HCC 中特异性低表达的是:未知 cDNA 片段 L2、与人醛缩酶 B 基因 99.5%同源的 L7片段、与人分化相关基因1具有97%同源的 FL25片段,上述基因可能会阻抑肝细胞癌的发生、发展。本研究发现7个与 HCC 相关的已知基因片段,其中6个在肝脏和肝细胞癌中的功能及与肝细胞癌的关系尚为未知,本文报道属首例。它们在 HCC 发生发展中的作用机制,相互之间的关系以及与其它癌基因抑癌基因之间的作用,都有待于进一步的深入研究。未能找到较高同源性的 L2和 LC27基因的结构和功能的相关工作正在进行之中。

关键词：肝细胞癌差异显示基因表达

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