目的比较不同类型的逆转录荧光实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测急性早幼粒细胞白血病融合基因,观察不同治疗方法达到临床缓解的效果。方法建立荧光染料SYBR Green Ⅰ和Eva Green RQ-PCR技术,同时检测53例PML融合基因PML-RARα的表达水平,...
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目的比较不同类型的逆转录荧光实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测急性早幼粒细胞白血病融合基因,观察不同治疗方法达到临床缓解的效果。方法建立荧光染料SYBR Green Ⅰ和Eva Green RQ-PCR技术,同时检测53例PML融合基因PML-RARα的表达水平,与传统巢式PCR 方法进行敏感度比较。初步选择临床初诊的10例患者随机分为两组,分别给予维甲酸(ATRA)+化疗或ATRA+三氧化二砷治疗。每两至三周抽取骨髓标本,检测融合基因PML-RARα表达的变化情况。结果两种RQ-PCR的灵敏度达50拷贝,低于巢式PCR,但可以准确定量,且没有污染。分别取103拷贝和107拷贝质粒以及一名APL患者CDNA同时作8管平行扩增PML-RARα融合基因,批内变异系数分别为7.31%、8.26%和5.02%(SYBR-Green1),不同批次之间以K562细胞 cDNA作重复性分析,批间变异系数为8.27%(SYBR-Green1)。不同APL患者PML-RARα表达
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