检索结果-内蒙古大学图书馆

中国皮肤性病学杂志 2008年第1期22卷 19-22页

作者：乔建军刘伟李若瑜万喆北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心北京100034

目的克隆烟曲霉ERG3B基因,并构建烟曲霉ERG3B基因额外拷贝株,了解该基因对烟曲霉表型的影响。方法通过同源性比对,在烟曲霉基因组找出烟曲霉可能的ERG3基因的开放读码框(ORF),PCR扩增ERG3B基因ORF连同其上下游各约1kb的DNA片段,将该片... 详细信息

目的克隆烟曲霉ERG3B基因,并构建烟曲霉ERG3B基因额外拷贝株,了解该基因对烟曲霉表型的影响。方法通过同源性比对,在烟曲霉基因组找出烟曲霉可能的ERG3基因的开放读码框(ORF),PCR扩增ERG3B基因ORF连同其上下游各约1kb的DNA片段,将该片段重组到穿梭质粒pRG-AMA1-NotI。用重组后的质粒转化嘧啶营养缺陷株烟曲霉AF293.1。观察转化子的生长速度并测定转化子对抗真菌药物敏感性。结果①烟曲霉ERG3基因有3个拷贝(ERG3A,ERG3B,ERG3C)。Erg3Ap和Erg3Bp与其他真菌的Erg3同源性高。②烟曲霉ERG3B基因被重组到了pRG-AMA1-NotI,产生质粒pERG3B。用pERG3B和空载体pRG-AMA1-NotI转化AF293.1后,分别得到转化子AF-pERG3B和AF-empty。AF-pERG3B与AF-empty的生长速度无差异;两者对伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性也无差异。结论额外拷贝的ERG3B基因不影响烟曲霉的生长速度及对伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性。

关键词：烟曲霉 ERG3B基因额外拷贝抗真菌药物敏感性菌丝生长

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阿莫罗芬与特比萘芬和伊曲康唑联合对甲真菌病致病菌的体外药敏试验

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中华皮肤科杂志 2004年第8期37卷 478-480页

作者：董平万喆李若瑜北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心100034 北京铁路总医院皮肤科

目的探讨阿莫罗芬与特比萘芬、伊曲康唑联合对80株甲真菌病病原菌的体外相互作用。方法应用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)的M27-A和M38-P方案,各药单独和联合应用时的MIC值均为与对照孔相比超过80%生长抑制的最低药物浓度;药... 详细信息

目的探讨阿莫罗芬与特比萘芬、伊曲康唑联合对80株甲真菌病病原菌的体外相互作用。方法应用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)的M27-A和M38-P方案,各药单独和联合应用时的MIC值均为与对照孔相比超过80%生长抑制的最低药物浓度;药物间相互作用用分数抑菌浓度(FIC值)表示:FIC<1认为有协同作用,1≤FIC<2认为有相加作用,FIC≥2认为有拮抗作用。结果阿莫罗芬、特比萘芬、伊曲康唑单独应用时对皮肤癣菌抑菌质量浓度的几何均数分别为0.0396、0.012和0.309μg/mL,阿莫罗芬与特比萘芬和阿莫罗芬与伊曲康唑联合应用对所有受试菌协同作用的百分比分别为67.12%和66.67%,两者间差异无显著性(P>0.05)。其中对皮肤癣菌为75%和65%,两者差异无显著性(P>0.05);而对酵母菌和其他霉菌差异有显著性(P<0.05);未发现有拮抗作用。结论阿莫罗芬与特比萘芬、伊曲康唑联合应用对甲真菌病致病菌具有有效的体外协同抑菌作用。

关键词：阿莫罗芬特比萘芬伊曲康唑联合用药甲真菌病致病菌药敏试验

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白细胞介素17A及其受体拮抗剂治疗银屑病的不良反应

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中华皮肤科杂志 2021年第2期54卷 170-173页

作者：王若珺李若瑜北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心皮肤病分子诊断北京市重点实验室100034

白细胞介素17A在银屑病的发生发展中具有关键作用。目前,有多种白细胞介素17A及其受体拮抗剂在多个国家上市并应用于银屑病的治疗,取得了明确疗效。然而,该类生物制剂在临床试验阶段及上市后,仍然有多项不良反应报道,包括上呼吸道感染... 详细信息

白细胞介素17A在银屑病的发生发展中具有关键作用。目前,有多种白细胞介素17A及其受体拮抗剂在多个国家上市并应用于银屑病的治疗,取得了明确疗效。然而,该类生物制剂在临床试验阶段及上市后,仍然有多项不良反应报道,包括上呼吸道感染、念珠菌感染、中性粒细胞减少和炎症性肠病等,严重者甚至可危及生命。本文综述3种白细胞介素17A及其受体拮抗剂司库奇尤单抗、ixekizumab和brodalumab的临床安全性。

关键词：银屑病生物制剂白细胞介素17 受体,白细胞介素17 抗体,单克隆,人药物毒性感染白色念珠菌

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少根根霉肿胀孢子诱导小鼠树突状细胞产生Th1及Th17适应性免疫应答

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中华微生物学和免疫学杂志 2017年第1期37卷 14-21页

作者：姚丽敏张淑贞万喆李若瑜余进北京大学第一医院皮肤性病科、北京大学真菌和真菌病研究中心、北京市皮肤病分子诊断重点实验室 100034 河南省人民医院皮肤性病科郑州450003

目的初步探究宿主对少根根霉的免疫识别模式及适应性免疫机制。方法提取野生型及Card9缺陷小鼠骨髓来源细胞（bone marrow-derived cells, BMDCs），将使用和未使用Syk抑制剂的BMDCs与肿胀期及静止期少根根霉孢子孵育，24 h后ELISA法检... 详细信息

目的初步探究宿主对少根根霉的免疫识别模式及适应性免疫机制。方法提取野生型及Card9缺陷小鼠骨髓来源细胞（bone marrow-derived cells, BMDCs），将使用和未使用Syk抑制剂的BMDCs与肿胀期及静止期少根根霉孢子孵育，24 h后ELISA法检测细胞上清液IL-23、IL-1β和IL-12分泌情况。提取并分离小鼠na？ve T细胞，并与已被不同时期孢子刺激的BMDCs共孵育，4 d后ELISA法检测细胞上清液中IL-17A和IFN-γ分泌情况，收集细胞使用流式细胞术检测T细胞分化情况。将静止期与肿胀期孢子进行免疫荧光染色，使用Confocal显微镜观察孢子表面β-葡聚糖暴露情况。将肿胀期孢子与可溶性Dectin-1、Dectin-2、TLR2和MMR共孵育，检测结合情况。结果肿胀期而非静止期少根根霉孢子可以刺激野生型小鼠的BMDCs产生细胞因子IL-23、IL-1β和IL-12，并诱导Th17和Th1细胞分化，肿胀期少根根霉孢子刺激T细胞分泌的IL-17A和IFN-γ明显高于静止期孢子。使用Syk抑制剂抑制后，肿胀期孢子刺激野生型小鼠BMDCs产生细胞因子与T细胞分化的能力明显降低。Card9缺陷小鼠的BMDCs经肿胀期孢子刺激后产生细胞因子和T细胞分化的能力低于野生型小鼠。Confocal显微镜显示，在肿胀期而非静止期少根根霉表面出现了β-葡聚糖的暴露。可溶性蛋白结合实验显示肿胀期孢子表面有可以与Dectin-1和TLR2结合的病原相关分子模式（PAMPs）。结论肿胀期少根根霉孢子可能因为表面暴露了能与Dectin-1结合的β-葡聚糖，从而刺激BMDCs分泌细胞因子IL-23、IL-1β和IL-12，诱发T细胞分化并分泌细胞因子IL-17A和IFN-γ，这一反应是Syk-Card9通路依赖的。

关键词：骨髓来源细胞少根根霉 Syk—Card9

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血清乳胶凝集试验诊断肺隐球菌病的临床对照研究

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中华结核和呼吸杂志 2008年第5期31卷 360-363页

作者：牟向东李若瑜万喆王广发柳平王仁贵何冰北京大学第一医院呼吸内科 100034 北京大学第一医院皮肤性病科、真菌和真菌病研究中心 100034 北京大学第一医院病理科 100034 北京大学第一医院影像科 100034

目的评价乳胶凝集试验检测血清隐球菌荚膜多糖抗原对肺隐球菌病的临床诊断价值。方法选择2000年7月至2007年7月北京大学第一医院收治的、疑诊为肺部隐球菌感染患者27例，均行血清乳胶凝集试验和肺活检组织病理检查。结果经病理证实的肺... 详细信息

目的评价乳胶凝集试验检测血清隐球菌荚膜多糖抗原对肺隐球菌病的临床诊断价值。方法选择2000年7月至2007年7月北京大学第一医院收治的、疑诊为肺部隐球菌感染患者27例，均行血清乳胶凝集试验和肺活检组织病理检查。结果经病理证实的肺隐球菌病9例，乳胶凝集试验均阳性；非隐球菌感染患者18例，乳胶凝集试验均阴性。乳胶凝集试验的敏感度和特异度均为100％。结论血清乳胶凝集试验对肺隐球菌病具有很高的诊断价值。

关键词：隐球菌病乳胶结合试验隐球菌荚膜抗原

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实时荧光定量PCR诊断侵袭性真菌病方法的建立及应用

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中华医学杂志 2012年第12期92卷 822-826页

作者：鲁巧云余进高露娟郑罡李若瑜北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心 100034 贵阳医学院第一附属医院急诊重症监护病房

目的建立侵袭性真菌病的实时荧光定量PCR诊断方法，初步评价其在侵袭性真菌病诊断中的价值。方法设计真菌通用、曲霉和念珠菌的属特异性引物和TaqMan探针，检测标准菌株和部分临床分离株，探讨这3个检测体系的敏感性和特异性。收集确诊... 详细信息

目的建立侵袭性真菌病的实时荧光定量PCR诊断方法，初步评价其在侵袭性真菌病诊断中的价值。方法设计真菌通用、曲霉和念珠菌的属特异性引物和TaqMan探针，检测标准菌株和部分临床分离株，探讨这3个检测体系的敏感性和特异性。收集确诊或除外侵袭性真菌病的21例患者的血清标本，验证实时荧光定量PCR诊断方法在临床诊断中的准确性。结果3个检测体系实现了在相同PCR条件下的整合。真菌通用检测体系能检测大部分病原真菌，包括烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、白念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌、新生隐球菌、多变根毛霉、少根根霉以及马内菲青霉；曲霉检测体系能检测烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉；念珠菌检测体系能检测白念珠菌、近平滑念珠菌和热带念珠菌。真菌通用检测体系能检测到4pg基因组DNA，曲霉和念珠茵的检测体系均能检测到2个拷贝数。11例侵袭性真菌病患者的11份血清标本经该诊断体系检测，结果与传统方法的诊断结果完全吻合，且3个检测体系之间有很好的一致性，其中2例侵袭性曲霉病和2例侵袭性白念珠菌病均被鉴定至属，其他7例患者亦可通过真菌通用检测体系被诊断为侵袭性真菌病。10例除外侵袭性真菌病患者的10份血清均无扩增。结论建立的真菌通用检测体系能检测临床常见的深部病原真菌，且曲霉和念珠菌检测体系能进一步将临床常见的曲霉和念珠菌鉴定至属的水平。

关键词：真菌病聚合酶链反应诊断

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耐氟康唑的白念珠菌对常见抗真菌药物的敏感性检测

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中国皮肤性病学杂志 2009年第4期23卷 193-195,198页

作者：冯丽娟陈伟万喆王晓红李若瑜刘伟北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌与真菌病研究中心北京100034

目的测定耐氟康唑白念珠菌对常见抗真菌药物的敏感性,并探讨pH值对微量液基稀释法的影响。方法参照美国临床实验室标准研究所(CLSI)颁布的酵母菌抗真菌药物敏感性试验方案M27-A2,测定氟康唑(FLC)、伏立康唑(VOR)、伊曲康唑(ITC)、两性霉... 详细信息

目的测定耐氟康唑白念珠菌对常见抗真菌药物的敏感性,并探讨pH值对微量液基稀释法的影响。方法参照美国临床实验室标准研究所(CLSI)颁布的酵母菌抗真菌药物敏感性试验方案M27-A2,测定氟康唑(FLC)、伏立康唑(VOR)、伊曲康唑(ITC)、两性霉素B(AMB)和米卡芬净(MCFG)的最小抑菌浓度(MIC),并调整RPMI-1640液体培养基的pH值至4.5,测定FLC、VOR和ITC的MIC值。结果FLC的MIC值均>64μg/mL;VOR的MIC值,6株菌>16μg/mL,1株为2μg/mL,3株<1μg/mL;ITC的MIC值,7株≥1μg/mL,3株为0.25～0.5μg/mL;MCFG的MIC值为0.125～0.25μg/mL,AMB的MIC值为1～2μg/mL;使用pH值为4.5的RPMI-1640液体培养基,5种抗真菌药物的MIC值变化不明显。结论10株耐氟康唑的白念珠菌对MCFG均敏感,部分菌株对VOR和(或)ITC交叉耐药;部分耐FLC的白念珠菌对AMB的敏感度有所降低。降低RPMI-1640的pH值,可明显减少拖尾现象,但不影响药敏结果的判定。

关键词：白念珠菌抗真菌药物耐药性

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皮肤活检组织中分枝杆菌荧光实时PCR鉴定方法的建立

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中华皮肤科杂志 2024年第11期57卷 1016-1021页

作者：刘晓薛若宁李若瑜宋营改北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心皮肤病分子诊断北京市重点实验室北京100034

目的建立快速鉴定皮肤活检组织中分枝杆菌的荧光实时PCR方法并进行验证。方法自行设计针对分枝杆菌属和14种常见分枝杆菌的引物探针,建立分枝杆菌的荧光实时PCR检测体系和方法。利用12株分枝杆菌标准菌株对该方法进行体外验证,并对2019... 详细信息

目的建立快速鉴定皮肤活检组织中分枝杆菌的荧光实时PCR方法并进行验证。方法自行设计针对分枝杆菌属和14种常见分枝杆菌的引物探针,建立分枝杆菌的荧光实时PCR检测体系和方法。利用12株分枝杆菌标准菌株对该方法进行体外验证,并对2019年至2021年北京大学第一医院皮肤性病科收集的119例临床诊断皮肤分枝杆菌感染患者的组织样本进行检测。结果体外检测显示该方法对12种分枝杆菌标准株均有良好的检测敏感性和特异性。在119例临床诊断分枝杆菌皮肤感染患者活检标本中,培养阳性率仅为21.0%(25/119);荧光实时PCR检测分枝杆菌阳性率为76.5%(91/119),其中,44.5%(53/119)鉴定至菌种水平,以海分枝杆菌为主;31.9%(38/119)仅鉴定至分枝杆菌属水平。结论建立了可在患者皮肤组织样本中高效检测分枝杆菌的荧光实时PCR方法,但仍有漏诊可能,还需结合其他分子诊断方法提高敏感性和特异性。

关键词：分枝杆菌感染皮肤活组织检查荧光实时PCR 分枝杆菌属培养技术

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不同分数抑菌浓度解读标准评估抗真菌药物体外联合效应比较

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中国真菌学杂志 2016年第2期11卷 85-89页

作者：吴伟伟王千龚杰万喆王爱平李若瑜北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心北京100034

目的明确酮康唑联合特比萘芬或萘替芬相互作用模式,评估不同分数抑菌浓度解读标准对判断抗真菌药物体外联合效应的影响。方法参考CLSI微量液基稀释法M27-A3和M38-A2方案,采用棋盘微量稀释法对100株分离自临床真菌病患者的菌株进行酮康... 详细信息

目的明确酮康唑联合特比萘芬或萘替芬相互作用模式,评估不同分数抑菌浓度解读标准对判断抗真菌药物体外联合效应的影响。方法参考CLSI微量液基稀释法M27-A3和M38-A2方案,采用棋盘微量稀释法对100株分离自临床真菌病患者的菌株进行酮康唑与特比萘芬或奈替芬体外联合药敏试验,包括皮肤癣菌,念珠菌和马拉色菌。采用不同分数抑菌浓度解读标准评估酮康唑与特比萘芬或奈替芬体外联合效应,A标准定义为:FICI≤0.5为协同作用,0.54为拮抗作用;B标准:FICI≤0.5为协同作用,0.52为拮抗作用;C标准:FICI<1为协同作用,FICI=1为相加作用,12为拮抗作用。结果A标准与B标准具有较好的一致性,C标准则较为宽松。根据C标准进行解读会明显扩大协同效应范围。结论定义FICI≤0.5为协同作用,0.54为拮抗作用的解读标准,具有简便、一致性好的优点,值得临床采用。

关键词：抗真菌药物联合药敏实验分数抑菌浓度

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5%盐酸阿莫罗芬搽剂在甲真菌病中的应用

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中国真菌学杂志 2015年第5期10卷 317-320页

作者：王爱平李若瑜北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心北京100034

阿莫罗芬属于吗啉类广谱抗真菌药物,该文就有关5%盐酸阿莫罗芬搽剂在甲真菌病中的应用研究做一综述。

关键词：阿莫罗芬甲真菌病疗效

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