检索结果-内蒙古大学图书馆

中华皮肤科杂志 2004年第4期37卷 200-202页

作者：韦高冀朝辉李若瑜北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系广西医科大学第一附属医院皮肤性病科南宁530021

目的为设计马尔尼菲青霉种特异性引物 ,探讨马尔尼菲青霉病更加确切的诊断方法。方法实验菌株为北京大学真菌和真菌病研究中心保存的 4 株马尔尼菲青霉 , 来源... 详细信息

目的为设计马尔尼菲青霉种特异性引物 ,探讨马尔尼菲青霉病更加确切的诊断方法。方法实验菌株为北京大学真菌和真菌病研究中心保存的 4 株马尔尼菲青霉 , 来源于国内不同地区。用真菌通用引物 ITS1 和 ITS4 PCR 扩增马尔尼菲青霉 rDNA ITS,扩增产物纯化后直接测序 ,测序结果在基因库核酸序列数据库进行同源序列搜索 ,并依据序列对比、分析。结果 4 株临床分离的马尔尼菲青霉的 rDNA ITS 序列相同。与国外来源于美国、印度尼西亚、法国、澳大利亚的马尔尼菲青霉 rDN A ITS序列基本一致。马尔尼菲青霉与荚膜组织胞浆菌、新生隐球菌、念珠菌的 rDNA ITS 序列差异较大 ,青霉和曲霉属间 rDNA ITS 的序列相似性较低 ,而青霉种间 rD NA ITS 序列的差异不大。结论不同来源的马尔尼菲青霉菌株间乃至不同青霉的种间的 rDN A ITS 序列均具有较高的同源性 , 提示该区可

关键词：马尔尼菲青霉临床分离 rDNA ITS 序列分析真菌

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实时荧光定量PCR在侵袭性曲霉病诊断中的研究进展

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中国真菌学杂志 2012年第1期7卷 59-64页

作者：高露娟余进李若瑜北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心北京100034

实时荧光定量PCR自20世纪90年代初起被用于侵袭性曲霉病的诊断研究,具有较好的灵敏度和特异度,但由于技术操作多种多样,尚未统一,该技术仍未正式列入诊断标准。近年来,随着研究增加,对该技术操作的标准化研究取得了明显的进展。现从技... 详细信息

实时荧光定量PCR自20世纪90年代初起被用于侵袭性曲霉病的诊断研究,具有较好的灵敏度和特异度,但由于技术操作多种多样,尚未统一,该技术仍未正式列入诊断标准。近年来,随着研究增加,对该技术操作的标准化研究取得了明显的进展。现从技术问题,包括标本种类、DNA提取方式、靶序列的选择、国际标准化研究进程以及该技术在侵袭性曲霉病的诊断价值和应用两个层面进行综述。

关键词：侵袭性曲霉病实时荧光定量PCR 标准化应用

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ATB FUNGUS 2法在念珠菌属和新生隐球菌抗真菌药敏试验中应用的评价

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中国真菌学杂志 2008年第6期3卷 333-338,342页

作者：刘伟万喆李若瑜北京大学真菌和真菌病研究中心北京大学第一医院皮肤性病科真菌室北京100034

目的评价ATB FUNGUS 2半固体培养基法在测定念珠菌属和新生隐球菌对4种常用抗真菌药物敏感性中的应用价值。方法利用CLSI M27-A2微量液基稀释法和ATB FUNGUS 2法同时测定131株念珠菌和20株新生隐球菌对两性霉素B(AmB)、氟康唑(FLC)、氟... 详细信息

目的评价ATB FUNGUS 2半固体培养基法在测定念珠菌属和新生隐球菌对4种常用抗真菌药物敏感性中的应用价值。方法利用CLSI M27-A2微量液基稀释法和ATB FUNGUS 2法同时测定131株念珠菌和20株新生隐球菌对两性霉素B(AmB)、氟康唑(FLC)、氟胞嘧啶(5-FC)和伊曲康唑(ITC)的敏感性。结果两种方法对于AmB、5-FC、FLC和ITC的一致性分别为98%、89.4%、78.8%和78.1%。②所有受试菌株中两种方法的一致性为80%;但ATB FUNGUS2法将2/5株M27-A2法检查为FLC耐药的白念珠菌判断为敏感或剂量依赖,将8/10株M27-A2法检查为FLC剂量依赖的白念珠菌判断为敏感或耐药。③ATB FUNGUS 2法中AmB的MIC值判读范围偏高,以致于实际工作中不能读出准确的值。结论ATB FUNGUS 2半固体培养基法在测定念珠菌属和新生隐球菌对4种常用抗真菌药物的敏感性时不失为简单、快速而且重复性好的方法。

关键词：抗真菌药物敏感性试验 ATB FUNGUS 2 CLSI M27-A2 白念珠菌新生隐球菌

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白念珠菌抗氧化基因体外表达研究

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中国真菌学杂志 2009年第6期4卷 325-329,342页

作者：周汝真李若瑜余进北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心北京100034

目的检测白念珠菌体外抗氧化及调节转录的基因表达情况,进一步了解白念珠菌抗氧化机制在体外生长状态下的作用。方法选取白念珠菌标准株sc5314、3株临床分离保存株及7例临床念珠菌性阴道炎分泌物分离株(白念珠菌),接种培养鉴定为白念珠... 详细信息

目的检测白念珠菌体外抗氧化及调节转录的基因表达情况,进一步了解白念珠菌抗氧化机制在体外生长状态下的作用。方法选取白念珠菌标准株sc5314、3株临床分离保存株及7例临床念珠菌性阴道炎分泌物分离株(白念珠菌),接种培养鉴定为白念珠菌后,分别将体外SDB振荡培养2 h、6 h、24 h、72 h、120 d的菌液(含未培养0h),用Trizol法提取总RNA,反转录为cDNA后进行实时荧光定量PCR,检测体外各时间点抗氧化基因及抗氧化转录因子的基因表达情况,运用Ct值比较法进行表达量的相对定量分析。结果与0 h相比,体外6 hSOD2表达增加7.47倍,经Wilcoxon配对符号秩和检验显示P值小于0.01,差异具有统计学意义。其他各基因2 h及6 h分别与0 h相比P值均>0.01,其表达差异不具有统计学意义。体外培养1 d后各基因表达明显增加,CaHog1、CAP1、CAT及SOD5在第3天达最高,分别为24.23、3.34、33.64及14.72倍;SOD2在第1天达最高为68.95倍;CaSkn7在第5天达最高为7.21倍。经Wilcoxon配对符号秩和检验显示SOD5第1天P值为0.013,其余基因表达P均<0.01,表达差异具有统计学意义。结论当外界营养逐渐耗竭时,白念珠菌会动态加强抗氧化基因的表达,以抵抗机体内、外产生的氧化压力,其中SOD2可能是最早增加表达的抗氧化基因,3条抗氧化感受通路的转录调节基因均有增加表达,提示3条抗氧化感受通路在适应体外营养限制过程中起了重要作用。

关键词：白念珠菌氧化压力反应体外基因表达反转录实时荧光定量PCR

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我国代表地区须癣毛癣菌复合体的分子鉴定与分型研究

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中国真菌学杂志 2011年第2期6卷 70-76页

作者：胡小平万喆王晓红李若瑜北京大学第一医院皮肤性病科真菌室北京大学真菌和真菌病研究中心北京100034

目的对我国代表地区的须癣毛癣菌菌株进行分子再鉴定和分型研究。方法选取我国南北方8个省市地区经表型鉴定的须癣毛癣菌菌株47株,通过再培养形态观察、生理试验;PCR扩增核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区(ITS)和核糖体大亚基(LSU)D1-D2区... 详细信息

目的对我国代表地区的须癣毛癣菌菌株进行分子再鉴定和分型研究。方法选取我国南北方8个省市地区经表型鉴定的须癣毛癣菌菌株47株,通过再培养形态观察、生理试验;PCR扩增核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区(ITS)和核糖体大亚基(LSU)D1-D2区,测序后利用数据库进行序列比对,对须癣毛癣菌复合体进行再鉴定;PCR扩增rDNA非转录间隔区(NTS)的三个串联重复亚单位S0、S1和S2区,进行种内分型,并比较不同部位来源菌株型别的差异性。结果我国南北方8个省市地区47株须癣毛癣菌中3株鉴定为断发毛癣菌,6株鉴定为无性型苯海姆节皮菌,其余均鉴定为万博节皮菌中的亲人型趾间毛癣菌;三对不同引物扩增38株趾间型毛癣菌和2株苯海姆节皮菌NTS区,共产生28种特征性带型。带型和菌株来源及发生部位无相关性。结论我国分离自人类须癣毛癣菌复合体的主要组成菌种为趾间毛癣菌;ITS区结合LSU D1-D2区测序有助于鉴定须癣毛癣菌复合体至种水平;NTS区的三个串联重复亚单位所产生的特征性指纹图提供了一种快速、稳定的分子生物学种内分型方法,可应用于趾间毛癣菌感染的流行病学研究。

关键词：须癣毛癣菌复合体 rDNA内转录间隔区核糖体大亚基D1-D2区 rDNA非转录间隔区

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21例侵袭性肺曲霉病患者Th以及Treg细胞的检测

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中国真菌学杂志 2014年第5期9卷 287-292页

作者：王润超万喆李若瑜北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心北京100034

目的分析侵袭性肺曲霉病患者辅助性T细胞(Th)以及调节性T细胞(Treg)在外周血中单个核细胞中的表达情况及其临床相关性,探讨Th和Treg细胞介导的免疫反应在侵袭性肺曲霉病中的作用。方法分离21例侵袭性肺曲霉病患者及19例健康人外周血的... 详细信息

目的分析侵袭性肺曲霉病患者辅助性T细胞(Th)以及调节性T细胞(Treg)在外周血中单个核细胞中的表达情况及其临床相关性,探讨Th和Treg细胞介导的免疫反应在侵袭性肺曲霉病中的作用。方法分离21例侵袭性肺曲霉病患者及19例健康人外周血的单个核细胞,采用流式细胞术分析Th1、Th2、Th17、Treg细胞群的表达情况,Real-time PCR方法检测相关转录因子T-bet、GATA-3、RORγt以及Foxp3的表达,ELISA法检测血清中相关细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17以及TGF-β的表达。结果与健康人对照组相比,侵袭性肺曲霉病患者Th1细胞以及Treg细胞占CD4+T细胞的比例较之对照组明显降低;Th1、Th17、Treg细胞相关转录因子T-bet、RORγt、Foxp3以及相关细胞因子IFN-γ、IL-17A、TGF-β与对照组相比表达明显降低。结论 IPA患者的Th1、Th17以及Treg细胞所介导的免疫反应受抑制。

关键词：侵袭性肺曲霉病辅助性T细胞白介素-17 干扰素-γ

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应用反向线点杂交技术鉴定临床常见曲霉属和毛霉目真菌

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中国真菌学杂志 2011年第5期6卷 261-266页

作者：赵作涛李丽丽王晓阳万喆陈伟李若瑜北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心北京100034

目的应用反向线点杂交技术(reverse line blot hybridization,RLB)快速鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌。方法收集我院真菌和真菌病研究中心保存的5种曲霉菌(烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、构巢曲霉)和7种毛霉目真菌(冻土毛霉菌、... 详细信息

目的应用反向线点杂交技术(reverse line blot hybridization,RLB)快速鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌。方法收集我院真菌和真菌病研究中心保存的5种曲霉菌(烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、构巢曲霉)和7种毛霉目真菌(冻土毛霉菌、总状毛霉菌、卷枝毛霉菌、少根根霉、小孢根霉、微小根毛霉、伞状犁头霉),共计98株菌株。利用真菌通用引物ITS1和ITS4对菌株进行PCR扩增,用12个真菌种特异性探针与扩增后产物进行反向线点杂交。将RLB结果与真菌传统形态学鉴定结果、ITS区DNA测序结果进行比较。结果 RLB可以正确鉴定98株实验菌株,与形态学方法和ITS区测序方法鉴定结果100%一致,种特异性探针之间未见交叉杂交,显示出该方法的高度敏感性和特异性。8株阴性对照菌株(白念珠菌、茄病镰刀菌、尖端赛多孢、马尔尼菲青霉、疣状瓶霉、棒曲霉、日本曲霉以及雅致小克银汉霉),使用RLB方法无法鉴定。通过烟曲霉基因组DNA浓度10倍倍比稀释法验证RLB的敏感性为1.8×10-3 ng/μL。结论 RLB技术为实验室早期快速诊断、鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌提供参考。

关键词：曲霉毛霉 PCR 反向线点杂交

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卡泊芬净、米卡芬净对8种皮肤癣菌体外抑菌活性的研究

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中国真菌学杂志 2009年第2期4卷 73-77,107页

作者：鲍迎秋万喆李若瑜北京大学第一医院皮肤科北京大学真菌和真菌病研究中心北京100034 卫生部北京医院皮肤科北京100730

目的评价棘白菌素类抗真菌药物卡泊芬净(caspofungin)、米卡芬净(micafungin)针对常见致病性皮肤癣菌的体外抗菌活性。方法参考CLSI制定的M38-A2方案。测定82株常见皮肤癣菌的最低有效浓度(minimal effective concentrations,MECs)。结... 详细信息

目的评价棘白菌素类抗真菌药物卡泊芬净(caspofungin)、米卡芬净(micafungin)针对常见致病性皮肤癣菌的体外抗菌活性。方法参考CLSI制定的M38-A2方案。测定82株常见皮肤癣菌的最低有效浓度(minimal effective concentrations,MECs)。结果按照MEC90浓度从高到低,米卡芬净对紫色毛癣菌和断发毛癣菌的MEC90是0.25μg/mL;对犬小孢子菌、疣状毛癣菌的MEC90为0.06μg/mL;对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、石膏小孢子菌、絮状表皮癣菌的MEC90均在0.03μg/mL。②卡泊芬净对红色毛癣菌、紫色毛癣菌和断发毛癣菌的MEC90为1μg/mL;对须癣毛癣菌、犬小孢子菌、石膏小孢子菌、絮状表皮癣菌和疣状毛癣菌的MEC90为0.5μg/mL。③根据中位数检验,米卡芬净对几种皮肤癣菌的MEC值均低于卡泊芬净的MEC值,统计学比较有显著性差异(P<0.05)。结论米卡芬净和卡泊芬净对皮肤癣菌有较强的抑菌作用,米卡芬净的MEC值低于卡泊芬净。

关键词：皮肤癣菌抗真菌药物敏感性试验,体外卡泊芬净米卡芬净

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抗击COVID-19感染病原性真菌实验室生物安全防护建议(试行)

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中国真菌学杂志 2020年第1期15卷 6-9页

作者：陈伟张晓梅万喆李若瑜余进王爱平刘伟北京大学第一医院皮肤性病科国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心北京大学真菌和真菌病研究中心皮肤病分子诊断北京市重点实验室

随着COVID-19感染疫情的不断蔓延,实验室生物安全防护成为急需重视的重要问题。为响应国家号召,我们参照国家建议和相关文件,提出本建议。从适用范围、安全原则、个人防护、标本采集、转运、处理、检验及检验后、职业暴露等方面,对病原... 详细信息

随着COVID-19感染疫情的不断蔓延,实验室生物安全防护成为急需重视的重要问题。为响应国家号召,我们参照国家建议和相关文件,提出本建议。从适用范围、安全原则、个人防护、标本采集、转运、处理、检验及检验后、职业暴露等方面,对病原真菌临床检查的生物安全防护进行了建议。希望在实际工作中落实并不断完善。

关键词： COVID-19感染病原真菌临床检查临床实验室生物安全

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关于重症新型冠状病毒肺炎继发侵袭性真菌感染实验室诊治建议

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中国真菌学杂志 2020年第1期15卷 1-5页

作者：余进刘伟陈伟张晓梅万喆王爱平李若瑜北京大学第一医院皮肤性病科国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心北京大学真菌和真菌病研究中心皮肤病分子诊断北京市重点实验室

新型冠状病毒肺炎传染性强,发病率高,重症患者病死率高。重症新冠肺炎患者具备侵袭性真菌感染发生的高危因素,且已有重症病例出现继发或合并真菌感染报告。对重症新冠肺炎患者应积极进行侵袭性真菌感染相关的微生物学、血清学及分子生... 详细信息

新型冠状病毒肺炎传染性强,发病率高,重症患者病死率高。重症新冠肺炎患者具备侵袭性真菌感染发生的高危因素,且已有重症病例出现继发或合并真菌感染报告。对重症新冠肺炎患者应积极进行侵袭性真菌感染相关的微生物学、血清学及分子生物学检查,及时发现合并或继发真菌感染,开展针对性抗真菌治疗,降低患者病死率。

关键词：新型冠状病毒肺炎侵袭性真菌感染实验室诊断治疗

来源：评论

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