检索结果-内蒙古大学图书馆

毛细管柱固定蛋白质方法的研究进展

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分析化学 2009年第6期37卷 929-934页

作者：陈文静凌笑梅北京大学药学院药物分析教研室

在熔融石英毛细管中,固定化的蛋白质(酶)在手性拆分、蛋白质肽谱、药物筛选、样品预浓缩等方面具有重要应用。本文对用于毛细管中蛋白质固定的溶胶-凝胶法、物理吸附法、离子鳌合吸附法、基于脂质的蛋白固定和共价键合法进行了综述。

关键词：蛋白质固定溶胶-凝胶法物理吸附法离子鳌合吸附法脂质固定蛋白共价键合评述

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中药三七乙酰化前后化学组成的检测和比较研究(英文)

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北京大学学报（医学版） 2004年第6期36卷 630-633页

作者：李静石玉杰徐秉玖北京大学药学院药物分析教研室北京100083

目的：研究二七提取液衍生化(本文采用了乙酰化)和蒸发光散射检测器(evaporative light-scatteringdetector，ELSD)在中药三七组分分析和鉴定中的应用。方法：采用乙腈-水梯度洗脱、紫外检测的方法，比较乙酰化前后的三七样品提取液的... 详细信息

目的：研究二七提取液衍生化(本文采用了乙酰化)和蒸发光散射检测器(evaporative light-scatteringdetector，ELSD)在中药三七组分分析和鉴定中的应用。方法：采用乙腈-水梯度洗脱、紫外检测的方法，比较乙酰化前后的三七样品提取液的高效液相色谱(high pedbrmance liqmd chromatography，HPLC)图谱差异；分别采用乙腈-水(体积比30∶70)和乙腈-水(体积比85∶15)作为流动相，比较用 ELSD 和紫外检测器时三七样品提取液的HPLC 图谱差异。结果：在三七提取液乙酰化后，可以观察到在原样品色谱图中较早洗脱出的组分的变化，其中某些组分衍生物的保留时间大大延长。分别用 ELSD 检测和紫外检测可以得到不同的色谱图，用 ELSD 检测方法可以得到几种不同变化方式的峰群，从而提供了更多的三七提取液化学组成的信息。结论：三七提取液乙酰化后，其中一些亲水组分的极性大大降低，那些在反相色谱中较早流出、较难分离的组分经衍生化后出峰状况得到改善，ELSD 还可以检测到有药理作用但因没有紫外吸收较难检测的糖类。

关键词：三七中药 ELSD 色谱图提取液乙酰化 HPLC图谱组分乙腈化学组成

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毛细管电泳法快速测定大鼠血浆中丙吡胺游离药物和总药物浓度及血浆蛋白结合率

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药物分析杂志 2018年第7期38卷 1174-1182页

作者：胡小波刘燕萌武瑞君胡新鄢尤奇凌笑梅北京大学药学院药物分析教研室北京100191

目的:建立一个全新、简单、快速的高效毛细管电泳方法,不需要对血浆样品进行任何前处理,血浆样品直接进样测定丙吡胺在大鼠血浆中的游离药物浓度和总药物浓度及血浆蛋白结合率。方法:采用40.2 cm未涂层石英毛细管(75μm×375μm,有... 详细信息

目的:建立一个全新、简单、快速的高效毛细管电泳方法,不需要对血浆样品进行任何前处理,血浆样品直接进样测定丙吡胺在大鼠血浆中的游离药物浓度和总药物浓度及血浆蛋白结合率。方法:采用40.2 cm未涂层石英毛细管(75μm×375μm,有效长度30 cm),分别以p H 7.4的20 mmol·L^(-1)磷酸盐缓冲溶液和含有50 mmol·L^(-1)三羟甲基氨基甲烷(Tris)的20 mmol·L^(-1)磷酸盐缓冲溶液作为缓冲体系,测定游离药物浓度和总药物浓度。采用3.447 k Pa压力直接进血浆样品5 s,分离电压15 k V,温度20℃,检测波长190 nm。结果:方法的专属性强,在线测定血浆中总药物浓度时,丙吡胺与蛋白的结合得到充分破坏并与血浆蛋白成分在5 min内达到基线分离,丙吡胺在血浆中总质量浓度分别在1.0~20.0μg·m L^(-1)和20.0~200.0μg·m L^(-1)的低、高浓度区间内呈现良好的线性关系,相关系数分别为0.999 2和0.997 7,回收率为93.8%~110.7%。在体外血浆生物样品中,当预温孵的丙吡胺质量浓度为100、50、25、12.5、10μg·m L^(-1)时,血浆蛋白结合率平均值为86.7%、86.3%、86.4%、78.3%、74.7%。在体内血浆生物样品中,丙吡胺血浆蛋白结合率平均值范围在39.3%~91.5%。测定结果表明丙吡胺与大鼠血浆蛋白的结合具有一强、一弱2个结合位点,结合常数分别为5.3×10~4 mol^(-1)·L和1.2×10~2 mol^(-1)·L。绘制了大鼠在给药后24 h体内丙吡胺游离和总药物浓度的药时曲线。结论:利用所建立的新方法,将含丙吡胺的血浆生物样品直接进样,高效、快速地测定了大鼠体内外血浆生物样品中丙吡胺的游离药物和总药物浓度。新建立的方法灵敏,高效快速,操作简单,耗样量少,价廉,有潜在的广泛的应用价值。

关键词：丙吡胺血浆蛋白结合率结合常数游离药物浓度药时曲线总药物浓度药时曲线毛细管区带电泳(CZE)

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采用毛细管电泳方法以凝血酶为靶筛选天然药物提取化合物

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高等学校化学学报 2007年第2期28卷 234-237页

作者：凌笑梅刘一赖先银张媛刘晓明屠鹏飞赵玉英崔景荣北京大学药学院药物分析教研室北京100083 北京大学药学院天然药物化学系北京100083 北京大学医学部天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100083

采用毛细管电泳(CE)法研究了凝血酶和水蛭素及肝素间的相互作用,并测定了凝血酶和水蛭素的结合常数.选择凝血酶为靶点,建立了快速灵敏的从天然植物提取物中筛选出先导化合物的CE方法.在接近生理环境的水溶液条件下,研究了两色金鸡菊、... 详细信息

采用毛细管电泳(CE)法研究了凝血酶和水蛭素及肝素间的相互作用,并测定了凝血酶和水蛭素的结合常数.选择凝血酶为靶点,建立了快速灵敏的从天然植物提取物中筛选出先导化合物的CE方法.在接近生理环境的水溶液条件下,研究了两色金鸡菊、肉苁蓉和黄蜀葵中天然植物提取物与凝血酶之间的相互作用;与阴性对照和阳性对照相比,从11个天然化合物中快速筛选出与凝血酶有相互作用的6个化合物,提高了天然植物提取物药理活性筛选的效率.

关键词：毛细管电泳凝血酶生物分子间相互作用药物筛选

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广西大风子中2个新木脂素的NMR研究(英文)

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波谱学杂志 2007年第1期24卷 77-83页

作者：史海明刘一姜勇孙哲屠鹏飞凌笑梅北京大学药学院天然药物学系北京大学药学院药物分析教研室北京100083

从广西大风子的皮中分离得到两个新木脂素1和2,并通过高分辨质谱和核磁共振确定了其结构.利用多种二维核磁共振技术,包括HSQC, HMBC, DQF-COSY和NOESY谱,对其碳氢信号进行了全归属.毛细管电泳分析显示1和2均为外消旋体.

关键词：核磁共振全归属二维核磁共振新木脂素广西大风子毛细管电泳

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生物样品分析中基质效应和准确度的确定

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中国新药杂志 2012年第14期21卷 1607-1610+1626页

作者：韩南银徐秉玖北京大学药学院药物分析室首都医科大学药学院分析教研室

在生物样品分析中,除了被分析药物本身高活性和高度不稳定性等因素造成的问题之外,生物样品中基质效应的存在也会使生物样品分析的复杂性和难度加大。目前人们通常采用加样回收的方法考察生物样品分析方法的准确度。如果分析方法准确度... 详细信息

在生物样品分析中,除了被分析药物本身高活性和高度不稳定性等因素造成的问题之外,生物样品中基质效应的存在也会使生物样品分析的复杂性和难度加大。目前人们通常采用加样回收的方法考察生物样品分析方法的准确度。如果分析方法准确度不合格,所得到的数据也是无意义的,但一些作者并没有充分认识到准确度的重要性。本文主要通过引用国际权威机构的分析方法验证指南以及国内最新版药物分析教科书中有关内容对准确度进行阐述。值得注意的是,在药代动力学研究中,血清中药物测定数据的准确性以及是否可用取决于回收率结果是否合乎要求,但关于药物在生物体内的分布问题上,即使采用加样回收方法也不一定能保证数据是准确的。

关键词：生物样品分析准确性加样回收药代动力学研究药物体内分布

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研究型大学六年制药学专业药物分析实验教学改革的探讨

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实验技术与管理 2012年第7期29卷 164-166,169页

作者：石玉杰富戈刘萍陈鑫何希辉北京大学药学院药物分析教研室北京100191

文章结合北京大学药学院六年制学—硕连读药学专业学生的特点,因材施教,将科研思维融入药物分析实验课程的教学过程中。通过增加多学科融合的综合设计性实验,以及与学生二级学科培养相结合开展研究型实验,营造多维的学习环境,调动学生... 详细信息

文章结合北京大学药学院六年制学—硕连读药学专业学生的特点,因材施教,将科研思维融入药物分析实验课程的教学过程中。通过增加多学科融合的综合设计性实验,以及与学生二级学科培养相结合开展研究型实验,营造多维的学习环境,调动学生学习的主动性和积极性,既培养了学生的创新意识和创新能力,又提高了学生的综合素质,教学质量得到提高。

关键词：长学制药物分析实验教学改革综合设计性实验研究型实验

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合成聚(苯乙烯—二乙烯苯 )包覆填料及基于此填料经磺酰化得到的阳离子交换型固定相的色谱行为考察(英文)

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北京大学学报（医学版） 2003年第6期35卷 618-621页

作者：李菠李永山韩南银徐秉玖北京大学药学院分析教研室北京100083

目的 :研究适用于毛细管电色谱乃至液相色谱的具有可定制选择性的固定相 ,以便利用这些新型的固定相 ,对于难以采用常规的固定相分离的物质实现选择性的分离。方法 :将商品球形硅胶颗粒 (粒径 5 μm)与乙烯基三乙氧基硅烷通过在无水甲... 详细信息

目的 :研究适用于毛细管电色谱乃至液相色谱的具有可定制选择性的固定相 ,以便利用这些新型的固定相 ,对于难以采用常规的固定相分离的物质实现选择性的分离。方法 :将商品球形硅胶颗粒 (粒径 5 μm)与乙烯基三乙氧基硅烷通过在无水甲苯中回流 1 8h ,进行硅烷化修饰。在硅烷化了的硅胶颗粒上 ,通过偶氮异丁腈作为引发剂 ,在正己醇和乙腈 (1∶4 )的混合溶剂中 ,80℃下反应 1 8h ,引发苯乙烯二乙烯基苯的链式聚合反应 ,以及苯乙烯二乙烯基苯共聚物通过硅胶表面上的乙烯基键合到硅胶表面上的键合反应。所得到的包覆了这种高聚物的硅胶颗粒 (PS DES)本身也是一种非传统的毛细管电色谱用的固定相。所产生的PS DES再和氯磺酸发生磺化反应 ,即得到磺酸型的强阳离子交换型固定相。结果 :将所制得的PS DES固定相以及磺化的固定相各自填充到毛细管内 ,考察这些毛细管电色谱柱的色谱性能 ,发现前者表现出反相固定相的性质。由于所包覆高聚物中的苯基基团 ,这种固定相在色谱分离过程中引入了π -π电子相互作用 ,因此对芳香化合物表现出了独特的选择性 ,在其上成功地分析了一些芳香化合物以及极性的和碱性的药物。在磺酸型的固定相上 ,则成功地分离了一些碱性药物 ,得到了较好的对称峰型。

关键词：合成聚包覆填料填料磺酰化阳离子交换型固定相色谱行为考察

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破伤风类毒素聚乳酸微球中蛋白质稳定性的研究

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中国药学杂志 2001年第6期36卷 391-394页

作者：何应柳林魏树礼王东升北京大学药学院药剂教研室北京100083 北京大学医药卫生分析中心药学与化学分析室北京100083 北京大学基础医学院免疫教研室北京100083

目的　研究破伤风类毒素聚乳酸微球中破伤风类毒素在制备过程和体内酸性环境中的稳定性及微球中附加剂的稳定作用。方法　采用分子排阻色谱法 ,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法 ,双向免疫扩散法。结果　在制备过程和体内酸性环境... 详细信息

目的　研究破伤风类毒素聚乳酸微球中破伤风类毒素在制备过程和体内酸性环境中的稳定性及微球中附加剂的稳定作用。方法　采用分子排阻色谱法 ,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法 ,双向免疫扩散法。结果　在制备过程和体内酸性环境中破伤风类毒素活性有轻微下降 ;附加剂增加微球包封率 ,改善药物释放 ,稳定蛋白质活性 ,尤其是具有多羟基结构的附加剂。结论　破伤风类毒素聚乳酸微球中的蛋白质在制备过程和体内酸性环境中基本稳定。

关键词：破伤风类毒素聚乳酸微球蛋白质稳定性附加剂

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毛细管电泳技术在研究生物分子间相互作用和药物筛选中的应用

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药物分析杂志 2006年第9期26卷 1350-1357页

作者：刘一凌笑梅崔景荣北京大学药学院药物分析教研室北京100083 北京大学医学部天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100083

毛细管电泳技术是八十年代初发展起来的一种新型分离分析技术。由于其分析时间短,样品消耗少,分离度高,应用灵活,能够在生理条件或者接近生理条件的缓冲液中运行等优点,广泛应用于研究生物分子间的相互作用。本文就毛细管电泳研究生物... 详细信息

毛细管电泳技术是八十年代初发展起来的一种新型分离分析技术。由于其分析时间短,样品消耗少,分离度高,应用灵活,能够在生理条件或者接近生理条件的缓冲液中运行等优点,广泛应用于研究生物分子间的相互作用。本文就毛细管电泳研究生物分子间相互作用的基本原理,及其在生物分子间相互作用和药物筛选中的应用进行了综述。对不同的分子间相互作用体系,如蛋白质-蛋白质/多肽,蛋白质-DNA/RNA,蛋白质-糖,抗原-抗体,蛋白质-药物,脂质体-蛋白质/药物等进行了论述。同时也探讨了毛细管电泳从组合化学库中筛选先导药物及其在药物筛选中的应用。

关键词：毛细管电泳生物分子相互作用药物筛选

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