检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2011年第4期24卷 484-485,490页

作者：孙璐马昱张国强张丽君北京天坛生物制品股份有限公司诊断用品室北京100024

目的制备高效价麻疹抗血清,用于疫苗检定中病毒鉴别、支原体检测、麻腮二联和麻腮风三联疫苗的联合滴定试验。方法将麻疹病毒L4株于Vero细胞中传代培养,获得高滴度病毒原液,制备免疫抗原,分别经腹腔注射法、耳静脉注射法和背部皮下多点... 详细信息

目的制备高效价麻疹抗血清,用于疫苗检定中病毒鉴别、支原体检测、麻腮二联和麻腮风三联疫苗的联合滴定试验。方法将麻疹病毒L4株于Vero细胞中传代培养,获得高滴度病毒原液,制备免疫抗原,分别经腹腔注射法、耳静脉注射法和背部皮下多点注射法免疫家兔,制备抗血清,并按规程要求对抗血清进行检定。结果采用腹腔注射法、耳静脉注射法和背部皮下多点注射法免疫家兔所制备的抗血清的中和效价分别为1∶960、1∶2 560和1∶3 840,经检定,3种方法制备的抗血清均达到疫苗检定的使用要求。结论背部皮下多点注射法制备的麻疹抗血清效价最高,且操作简单,可作为制备高效价麻疹抗血清的最佳方案。

关键词：麻疹病毒中和抗体免疫血清病毒鉴别

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酶联免疫法检测抗狂犬病病毒抗体的研究进展

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中国生物制品学杂志 2010年第6期23卷 669-672页

作者：王伟伟张国强许丽锋北京生物制品研究所北京100024 北京天坛生物制品股份有限公司诊断用品室北京100024

狂犬病的有效预防是避免狂犬病大规模流行的关键措施之一。针对人群免疫接种后抗体水平的监测,酶联免疫法(ELISA)以其特异、快捷的特点具有独特的优势。本文就近年来国内外应用ELISA法检测抗狂犬病病毒抗体的研究进展作一综述。

关键词：狂犬病病毒抗体酶联免疫吸附测定

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WAVE生物反应器在生物制品生产中的应用

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中国生物制品学杂志 2009年第12期22卷 1254-1258,1262页

作者：佟芳王辉北京天坛生物制品股份有限公司疫苗四室北京100024

WAVE生物反应器是一种新型的摇床式生物反应器,是新近发展起来的一种细胞培养的技术平台。其通过摇动板带动细胞袋内的培养基产生波浪,促进营养物质的交换和氧气的传递;细胞袋一次性使用,无需清洗和验证;具有悬浮培养和贴壁培养的功能,... 详细信息

WAVE生物反应器是一种新型的摇床式生物反应器,是新近发展起来的一种细胞培养的技术平台。其通过摇动板带动细胞袋内的培养基产生波浪,促进营养物质的交换和氧气的传递;细胞袋一次性使用,无需清洗和验证;具有悬浮培养和贴壁培养的功能,现已广泛应用于培养HEK293细胞、昆虫细胞、CHO细胞、杂交瘤细胞、NSO细胞、果蝇细胞、BHK细胞、植物细胞、杀伤性T细胞、MDCK细胞、EFL细胞、酵母菌等以及重组蛋白和单克隆抗体的生产。本文就WAVE生物反应器的组成、特点及其在生物制品生产中的应用作一综述。

关键词： WAVE生物反应器细胞培养生物制品

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结晶紫蚀斑法检测重组痘苗病毒艾滋病疫苗病毒滴度方法的建立

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第10期31卷 948-952页

作者：李媛媛凌媛马志新王锡岩徐静北京生物制品研究所第三研究室 100024 北京天坛生物制品股份有限公司

目的建立重组天坛株痘苗病毒（rTV）艾滋病疫苗的结晶紫蚀斑病毒滴度检测方法，为rTV艾滋病疫苗病毒滴度测定提供更稳定的方法。方法通过对Vero细胞浓度、病毒吸附时间及温度、病变判定时间等方面进行优化，建立rTV艾滋病疫苗病毒滴度... 详细信息

目的建立重组天坛株痘苗病毒（rTV）艾滋病疫苗的结晶紫蚀斑病毒滴度检测方法，为rTV艾滋病疫苗病毒滴度测定提供更稳定的方法。方法通过对Vero细胞浓度、病毒吸附时间及温度、病变判定时间等方面进行优化，建立rTV艾滋病疫苗病毒滴度的结晶紫蚀斑检测方法，并应用BioSpotReader进行蚀斑计数及分析，比对仪器蚀斑计数和人工蚀斑计数的相关性；应用血球吸附法、中性红蚀斑、结晶紫蚀斑3种方法，对多批rTV艾滋病疫苗及天坛株痘病毒滴度进行检定，进行3种方法的相关性分析；采用结晶紫蚀斑法重复测定样品，计算变异系数（CV），对方法的精密性进行验证；采用SPSSl7．0软件对实验数据进行统计分析。结果确定Vero细胞浓度为5．O×10^5～9．O×10^5个／ml时，病毒37℃吸附2h后加入含甲基纤维素的维持液，培养72h，应用BioSpotReader进行蚀斑计数，与人工计数的相关系数r=0．985，能客观反映不同大小的病毒蚀斑，降低了人工计数引起的非客观因素误差；经过3种方法对不同批次的rTV艾滋病疫苗及天坛株痘病毒进行病毒滴度检定，结晶紫蚀斑与血吸附法的相关系数r=0．997，结晶紫蚀斑法与中性红蚀斑法相关系数r=0．980（P〈0．01），具有高度相关性。结论建立了可用于rTV艾滋病疫苗病毒滴度检测的结晶紫蚀斑方法。

关键词：痘苗病毒艾滋病疫苗病毒滴度蚀斑检定

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狂犬病病毒抗原的体外检测方法

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中国生物制品学杂志 2008年第2期21卷 166-168页

作者：张国强王远征北京天坛生物制品股份有限公司诊断室北京100024

目的狂犬病毒抗原含量是狂犬病疫苗的主要质量指标之一,疫苗的研制过程中常需要及时进行抗原的检测。准确、简便的测定方法可以大大提高工作效率,同时也为狂犬病疫苗精制方法和工艺的筛选、确定及优化提供依据。合适的检测方法也可为临... 详细信息

目的狂犬病毒抗原含量是狂犬病疫苗的主要质量指标之一,疫苗的研制过程中常需要及时进行抗原的检测。准确、简便的测定方法可以大大提高工作效率,同时也为狂犬病疫苗精制方法和工艺的筛选、确定及优化提供依据。合适的检测方法也可为临床诊断狂犬病提供方便。本文简要综述几种有关狂犬病毒抗原的检测方法。

关键词：狂犬病毒抗原检测方法单克隆抗体多克隆抗体 NIH法 ELISA

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乙型脑炎病毒抗原定量检测试剂的研制

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中国生物制品学杂志 2006年第5期19卷 511-513页

作者：张国强冯素英沈淑芹王晋施彤张月兰张影北京天坛生物制品股份有限公司诊断室北京100024

目的制备酶联免疫乙型脑炎病毒抗原定量检测试剂,用于乙型脑炎灭活疫苗中抗原定量检测.方法分别用2株杂交瘤细胞分泌的抗乙型脑炎病毒单克隆抗体作为包被和标记物,配以辅助试剂,建立酶联免疫检测系统,用经标化的乙型脑炎疫苗参考品绘... 详细信息

目的制备酶联免疫乙型脑炎病毒抗原定量检测试剂,用于乙型脑炎灭活疫苗中抗原定量检测.方法分别用2株杂交瘤细胞分泌的抗乙型脑炎病毒单克隆抗体作为包被和标记物,配以辅助试剂,建立酶联免疫检测系统,用经标化的乙型脑炎疫苗参考品绘制定量标准曲线,对试剂各项技术指标进行验证.结果试剂对乙型脑炎病毒抗原的最佳定量范围是0.131～0.666 ELISA单位（EU/ml）,标准曲线相关系数r=0.996,平均变异系数CV小于10%.与NIH法测定结果相比较,相关有非常显著意义（P＜0.01）.对2批乙型脑炎疫苗9次测定,变异系数分别为2.7%和4.4%.结论试剂的精密性和准确度高,特异性和稳定性可靠,可用于乙型脑炎疫苗中的抗原定量检测.

关键词： ELISA 乙型脑炎检测试剂

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冻干乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)非动物源性稳定剂的筛选

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中国生物制品学杂志 2009年第11期22卷 1110-1112页

作者：张晋张颖杨阳佟芳董建春白亮郝宇高春龙康岚北京天坛生物制品股份有限公司疫苗四室北京100024

目的筛选冻干乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)非动物源性稳定剂,以替代传统的动物源性稳定剂。方法取同一批乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)原液,分别加入A、B、C、D稳定剂(非动物源性),制备成冻干剂型,分别检测其外观、水分、有效抗原含量和效... 详细信息

目的筛选冻干乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)非动物源性稳定剂,以替代传统的动物源性稳定剂。方法取同一批乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)原液,分别加入A、B、C、D稳定剂(非动物源性),制备成冻干剂型,分别检测其外观、水分、有效抗原含量和效力等,以传统稳定剂作对照,并考察其稳定性。结果冻干前后,疫苗的有效抗原含量及效力与对照无明显差异。加入D稳定剂(不含人血白蛋白和明胶)的冻干乙型脑炎灭活疫苗于37℃放置6个月,效力降低15.1%;于2～8℃放置2年,效力仍高于参考品。其他检测指标均符合要求。结论D稳定剂可替代传统稳定剂,用于制备冻干乙型脑炎灭活疫苗。

关键词：乙型脑炎灭活疫苗冻干稳定剂

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Vero细胞传代过程中致瘤性的检测

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第5期31卷 456-461页

作者：李爱灵王红燕张月兰赵玉秀马可张颖张晋梁宏阳赵硕王辉北京天坛生物制品股份有限公司疫苗四室 100024 质量保证部

目的为生物制品生产及研究用Vero细胞体系传代过程中的遗传安全性评价提供实验数据。方法对Vero细胞进行传代与冻存，并对不同代次Vero细胞进行体外与体内致瘤性检测，同时对不同代次Ver6细胞的蛋白质表达进行差异性分析。结果Vero细胞... 详细信息

目的为生物制品生产及研究用Vero细胞体系传代过程中的遗传安全性评价提供实验数据。方法对Vero细胞进行传代与冻存，并对不同代次Vero细胞进行体外与体内致瘤性检测，同时对不同代次Ver6细胞的蛋白质表达进行差异性分析。结果Vero细胞传代至270代并建立了14个细胞冻存库；不同代次Vero细胞体外与体内致瘤性检测结果均为阴性；200代以上的Vero细胞蛋白质表达水平有所变化。结论Vero细胞传代过程中虽然体外与体内致瘤性检测结果为阴性，但蛋白质组学分析有差异性蛋白表达，这为Vero细胞传代过程中的遗传安全性评价提供了实验参考。

关键词：疫苗细胞基质 Vero细胞传代安全性致瘤性检测蛋白质组学分析

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篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗

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中国生物制品学杂志 2008年第12期21卷 1085-1086,1093页

作者：张晋张月兰赵玉秀王辉马乐马可牛志彬梁宏阳北京天坛生物制品股份有限公司疫苗四室北京100024

目的建立篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的工艺。方法利用7.5L篮式生物反应器和片状载体培养Vero细胞,接种乙型脑炎病毒P3V2株毒种,根据葡萄糖的消耗量,分析细胞的生长情况及调节病毒培养时的灌流速度,每24h取样,检测病毒... 详细信息

目的建立篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的工艺。方法利用7.5L篮式生物反应器和片状载体培养Vero细胞,接种乙型脑炎病毒P3V2株毒种,根据葡萄糖的消耗量,分析细胞的生长情况及调节病毒培养时的灌流速度,每24h取样,检测病毒滴度。收获的病毒液经纯化后,制备乙脑灭活疫苗,检测各项指标。结果Vero细胞培养至96h,葡萄糖消耗量达高峰,细胞密度达峰值;接种病毒后72h,葡萄糖消耗量达高峰,灌流量为7L/d,连续收获7～9d,共可收获(40±5)L病毒液;96h病毒滴度达高峰,为10.0LgLD50/ml;制备的乙型脑炎灭活疫苗各项指标均达到《中国药典》三部(2005版)要求。结论已建立了篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的工艺。

关键词：篮式生物反应器片状载体 Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗

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Sabin株脊髓灰质炎病毒在Vero细胞上的传代稳定性

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中国生物制品学杂志 2009年第8期22卷 786-788页

作者：李懿宁海京张冲支惠陈明宋冬梅马淑花赵敏王红燕石慧颖沈心亮北京生物制品研究所北京100024 北京天坛生物制品股份有限公司疫苗三室北京100024

目的探讨Sabin株脊髓灰质炎病毒在Vero细胞上的传代稳定性。方法用Sabin株脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型分别以0.01、0.1和1MOI接种Vero细胞,进行传代培养,共传13代。采用微量细胞病变法测定病毒滴度;双抗体夹心法测定D抗原含量;免疫Wiste... 详细信息

目的探讨Sabin株脊髓灰质炎病毒在Vero细胞上的传代稳定性。方法用Sabin株脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型分别以0.01、0.1和1MOI接种Vero细胞,进行传代培养,共传13代。采用微量细胞病变法测定病毒滴度;双抗体夹心法测定D抗原含量;免疫Wister大鼠,采用微量中和试验测定病毒的免疫原性。结果Sabin株脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型在Vero细胞上连续传13代,病毒滴度基本稳定;D抗原含量呈下降趋势;免疫原性下降迅速。结论用Sabin株脊髓灰质炎病毒制备灭活疫苗,在Vero细胞上传代的代次越低越好。

关键词：脊髓灰质炎病毒 Sabin株 Vero细胞传代稳定性

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