检索结果-内蒙古大学图书馆

农业生物技术学报 2019年第6期27卷 982-992页

作者：陈昌龙赵雪孙旺旺李晓颖田宇李未然谢华北京农业生物技术研究中心/北京市农林科学院/农业基因资源与生物技术北京市重点实验室

细菌性软腐病对大白菜(Brassica rapa ssp. pekinensis)的危害严重,胡萝卜果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum, Pc)是主要致病菌。本研究基于大白菜软腐病防御反应相关基因,拟开发软腐病抗性基因的分子标记。首先利用生物信息学方法... 详细信息

细菌性软腐病对大白菜(Brassica rapa ssp. pekinensis)的危害严重,胡萝卜果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum, Pc)是主要致病菌。本研究基于大白菜软腐病防御反应相关基因,拟开发软腐病抗性基因的分子标记。首先利用生物信息学方法对具有自主产权的大白菜抗软腐病相关基因的表达序列标签(expressed sequence tags, ESTs)数据进行分析,设计合成56对特异性引物,在大白菜软腐病抗病材料(A19-2)和感病材料(A32-2)亲本间筛选有多态性的EST-PCR和EST-CAPS (cleaved amplified polymorphic sequence)标记。在两亲本F1代自交产生的F2代群体中(142个单株),统计标记位点的基因型,进行标记的分离分析。56对设计合成的特异性引物均能在亲本中扩增出清晰条带,其中具有多态性的标记共鉴定出30个:11个EST-PCR标记,19个EST-CAPS标记(其中有9对引物和限制性内切酶的组合不唯一);14个显性标记,16个共显性标记。将上述30个标记位点在F2代群体142个单株中的基因型进行统计,结果显示符合3∶1或1∶2∶1分离比例的位点共有24个,频率为80%;表现偏分离(不符合孟德尔分离比, P<0.05)的位点有6个,频率为20%。本研究利用大白菜抗软腐病相关的ESTs资源,开发了EST-PCR和EST-CAPS分子标记,对于加速大白菜ESTs资源的开发利用、大白菜抗性基因定位和分子标记辅助育种技术等研究具有一定的意义。

关键词：大白菜细菌性软腐病 EST EST-PCR EST-CAPS

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玉米ZmbHLH161基因的克隆及功能研究

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作物学报 2020年第12期46卷 2008-2016页

作者：杨梦婷张春王作平邹华文吴忠义长江大学农学院湖北荆州434023 北京市农林科学院/北京农业生物技术研究中心/农业基因资源与生物技术北京市重点实验室北京100097

bHLH转录因子是植物第二大转录因子家族,在调节植物生长发育、信号转导和逆境胁迫响应等方面发挥着重要的作用。为了研究玉米bHLH家族基因在逆境胁迫响应中的功能,本研究从玉米根组织中克隆了ZmbHLH161(AC:NC_AQK75074)基因。生物信息... 详细信息

bHLH转录因子是植物第二大转录因子家族,在调节植物生长发育、信号转导和逆境胁迫响应等方面发挥着重要的作用。为了研究玉米bHLH家族基因在逆境胁迫响应中的功能,本研究从玉米根组织中克隆了ZmbHLH161(AC:NC_AQK75074)基因。生物信息学分析表明:该基因包含3个外显子, cDNA全长1460 bp,编码序列全长1059 bp,编码352个氨基酸;在玉米基因组中以单拷贝形式存在,功能未知;ZmbHLH161蛋白分子量为37.1kD,理论等电点为6.10,具有bHLH转录因子家族特有的保守结构域,但不具跨膜结构,无信号肽,为亲水性蛋白,蛋白二级结构无规则卷曲所占比例最大,为42.05%。玉米原生质体瞬时表达试验表明,ZmbHLH161定位在细胞核内。实时荧光定量PCR(qPCR)分析表明,正常生长条件下,ZmbHLH161主要在根系和幼胚中表达;在脱水和干旱处理下,ZmbHLH161在玉米苗期叶片中上调表达。转基因异源表达ZmbHLH161拟南芥株系经不同浓度NaCl处理后,其根长与野生型差异不显著,而不同浓度甘露醇处理后其根长优于野生型。由此推测ZmbHLH161基因可能参与玉米对渗透胁迫应答。

关键词：玉米 ZmbHLH161 转录因子原生质体 qPCR 渗透胁迫

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不同番茄品种对番茄黄化曲叶病毒的抗病性分析

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中国农业科学 2016年第14期49卷 2850-2856页

作者：田兆丰刘伟成厚凌宇谢华罗晨柴敏北京市农林科学院植物保护环境保护研究所北京农业生物技术研究中心北京市农林科学院蔬菜研究中心

【目的】番茄黄化曲叶病毒病(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)是一种影响全世界番茄生产的病害,培育抗病品种是最有效、经济和持久的防控手段。目前生产上应用的抗病品种繁多,但存在对TYLVC不同抗性基因的抗性水平研究甚少、了解... 详细信息

【目的】番茄黄化曲叶病毒病(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)是一种影响全世界番茄生产的病害,培育抗病品种是最有效、经济和持久的防控手段。目前生产上应用的抗病品种繁多,但存在对TYLVC不同抗性基因的抗性水平研究甚少、了解不够全面的问题。为了解带有不同抗性基因的番茄品种对番茄黄化曲叶病毒病的抗性,对北京市农林科学院蔬菜中心培育的番茄品种抗病性进行检测,并利用半定量RT-PCR方法分析抗病基因和抗病蛋白的表达水平。【方法】选取携带有Ty3a/Ty3a的番茄材料秋光285(Ty3a纯合)、棚137×246(Ty3a杂合),携带Ty1+Ty3a纯合的秋光120、携带Ty1+Ty3a杂合的秋光81和感病对照M82为试验材料,观察番茄植株自然条件下发病情况。通过调查发病率和病情指数,考查这些番茄品种的抗病性,并利用RT-PCR方法分析抗病基因Ty1和Ty3a以及病程相关蛋白葡聚糖酶和几丁质酶基因的表达水平。【结果】携带抗性基因的杂合体、纯合体抗病性差异不明显,含有两个抗性基因和含有单一抗病基因品种的抗病性稍有差异,但差异不显著。半定量RT-PCR结果显示不同番茄品种在感染TYLCV后,体内抗性基因表达量随着发病时间的增加,Ty-3a和Ty-1的表达量逐渐增强。Ty-3a在4个番茄品种中表达水平由弱到强依次为秋光285(Ty-3a纯合)、棚137×246(Ty-3a杂合)、秋光120(Ty-1+Ty-3a纯合)和秋光81(Ty-1+Ty-3a杂合),Ty-1在秋光81中的表达显著高于在秋光120中的表达。同时,植株体内葡聚糖酶和几丁质酶基因表达量均比对照显著增加,并随着发病时间的增加逐渐增强。在发病20 d和30 d后,携带Ty-1+Ty-3a杂合的秋光81的葡聚糖酶基因表达显著强于其他几个品种。【结论】几个番茄材料对TYLCV的抗性由弱到强依次为秋光285(Ty3a纯合)、棚137×246(Ty3a杂合)、秋光120(Ty1+Ty3a纯合)和秋光81(Ty1+Ty3a杂合)。不同番茄抗病品种感染TYLCV后,体内抗性基因表达量随发病时间增加而增强,葡聚糖酶和几丁质酶基因表达量均比感病对照显著增加,表明番茄抗病品种在感染TYLCV后的抗病性除了与抗性基因的表达有关外,同时也与抗病相关蛋白表达增强有关。

关键词：番茄黄化曲叶病毒抗病基因病程相关蛋白半定量RT-PCR

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京郊快菜细菌性软腐病病原鉴定

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华北农学报 2018年第3期33卷 63-70页

作者：李晓颖田宇赵亮陈昌龙谢华北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心农业基因资源与生物技术北京市重点实验室北京100097

为明确京郊快菜软腐病的病原,对取自北京不同区县的发病快菜植株进行组织病原菌分离、培养和回接试验,在形态学观察的基础上,对病原菌株进行了生理生化测定、分子生物学鉴定和致病力分析。结果表明,在分离纯化得到的29株菌株中,17株被... 详细信息

为明确京郊快菜软腐病的病原,对取自北京不同区县的发病快菜植株进行组织病原菌分离、培养和回接试验,在形态学观察的基础上,对病原菌株进行了生理生化测定、分子生物学鉴定和致病力分析。结果表明,在分离纯化得到的29株菌株中,17株被鉴定为胡萝卜软腐果胶杆菌巴西亚种,其余12株被鉴定为胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种;同时也识别到9株非典型Pcc菌株,表现为不能分解柠檬酸盐或不具备在37℃和7%Na Cl条件下生长的能力,可微弱利用D-阿拉伯糖醇、异麦芽酮糖醇和D-麦芽糖。致病力测试结果显示,仅2株Pcb菌株和1株Pcc菌株表现为中等致病力,其余菌株均表现为高等致病力。明确了引发北京地区快菜软腐病致病菌的种类为Pcb和Pcc,且致病力普遍较强,可为其防控提供理论依据。

关键词：快菜细菌性软腐病病原鉴定胡萝卜软腐果胶杆菌

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毛白杨翻译起始因子基因PtoeIF5A2的克隆及其表达特性分析

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林业科学 2014年第2期50卷 63-69页

作者：管阳王宏芝张杰伟陈亚娟朱丹丁莉萍魏建华北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心农业基因资源与生物技术北京市重点实验室北京100097

真核翻译起始因子5A(eIF5A)在植物生长发育和抗逆过程中发挥着重要作用。以2个月的毛白杨‘BJHR01’幼苗总RNA反转录的cDNA为模板,克隆得到PtoeIF5A2(GenBank登录号:HQ529480)基因全长cDNA序列。该基因包含483 bp开放读码框,编码160个... 详细信息

真核翻译起始因子5A(eIF5A)在植物生长发育和抗逆过程中发挥着重要作用。以2个月的毛白杨‘BJHR01’幼苗总RNA反转录的cDNA为模板,克隆得到PtoeIF5A2(GenBank登录号:HQ529480)基因全长cDNA序列。该基因包含483 bp开放读码框,编码160个氨基酸,预测蛋白分子质量为18 kDa,等电点为5.76。Real-Time qRT-PCR分析表明:PtoeIF5A2在6个月毛白杨幼苗叶片中的表达量最高,约为其在幼根中表达量的5倍。PtoeIF5A2响应了干旱、ABA(200μmol·L-1)、低温(4℃),尤其是NaCl(300 mmol·L-1)胁迫。在NaCl胁迫24 h后,PtoeIF5A2的表达量上调25倍,结合其启动子中含有6个病原体与高盐响应(GT-1 box)元件,推测该基因在响应高盐胁迫时起着重要作用。

关键词：真核翻译起始因子5A 毛白杨盐胁迫 PtoeIF5A2

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不同杂种优势类群玉米幼胚愈伤组织的诱导及植株再生特性的研究

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西北植物学报 2004年第1期24卷 50-55页

作者：张红梅刘小红张红伟刘欣洁陈刚谭振波北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心北京100089

以Reid、唐四平头和其它种质等3个杂种优势类群共19份玉米自交系为试验材料,以玉米幼胚作为外植体,研究了基因型、培养基和激素对玉米幼胚愈伤组织的诱导及植株再生的影响,结果表明供试材料均能进行愈伤组织的诱导,但是仅有12个自交系... 详细信息

以Reid、唐四平头和其它种质等3个杂种优势类群共19份玉米自交系为试验材料,以玉米幼胚作为外植体,研究了基因型、培养基和激素对玉米幼胚愈伤组织的诱导及植株再生的影响,结果表明供试材料均能进行愈伤组织的诱导,但是仅有12个自交系能再生植株.N6和改良N6培养基有助于提高愈伤组织的质量及其生长速度,2,4-D在愈伤组织的诱导中起着关键性作用.在诱导培养基中添加0.2mg/L的6-BA或KT会使胚性愈伤组织的诱导频率下降以及降低愈伤组织的质量.在胚状体诱导培养基中添加1mg/L的KT能促进绿苗的分化,但是浓度过高会使丛生苗分化过多.此外,通过对不同杂种优势类群自交系玉米幼胚培养特性的分析,发现在唐四平头类群的4个自交系中,黄早四的绿苗分化率仅为0.5%,其它3个自交系不能再生植株.但是,从Reid和其它种质类群的供试自交系中筛选出了胚性愈伤组织的诱导频率和绿苗分化率均较高的、适合于遗传转化的受体材料,如3189/4380、4380/陕综5、8103、先早17、18-599红、18-599白、501、178和冀53.

关键词：玉米幼胚愈伤组织诱导植株再生唐四平头

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大白菜软腐病新病原菌Pectobacterium aroidearum的鉴定及其生物学特性

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植物病理学报 2018年第4期48卷 455-465页

作者：李晓颖田宇张瑾陈昌龙谢华北京市农林科学院农业基因资源与生物技术北京市重点实验室北京农业生物技术研究中心北京100097

细菌性软腐病是大白菜生产上主要发生病害之一,其病原菌通常为胡萝卜软腐果胶杆菌Pectobacterium carotovorum ***(Pcc)。从北京房山区大白菜软腐病样中分离获得一株菌株KC20,其在LB固体培养基上的菌落呈圆形、乳白色、半透明、表面光... 详细信息

细菌性软腐病是大白菜生产上主要发生病害之一,其病原菌通常为胡萝卜软腐果胶杆菌Pectobacterium carotovorum ***(Pcc)。从北京房山区大白菜软腐病样中分离获得一株菌株KC20,其在LB固体培养基上的菌落呈圆形、乳白色、半透明、表面光滑且边缘整齐,在半选择性培养基CVP上产生典型的杯状凹陷。致病性测定结果表明,该菌株侵染引发的大白菜软腐症状与田间大白菜软腐自然发病症状相同。利用果胶杆菌属特异引物Y1/Y2可扩增出预期大小为434 bp的目的片段;ITS-PCR和ITS-PCR-RFLP结果发现,KC20与***菌株带型均不相同。KC20的16S rDNA基因完整序列与已报道的标准菌株*** SCRI 109T(JN600323)的相应序列相似性高达99%以上;该序列系统发育关系分析表明,KC20与已报道的***菌株聚集,并形成了明显的***类群,基于pmrA基因序列和基于果胶杆菌8个看家基因(acnA、icd、gapA、mdh、mtlD、pgi、proA和rpoS)的MLSA-多位点序列分析进一步支持了这一结果。以上结果表明,引发北京地区大白菜软腐病的病原菌株KC20为果胶杆菌***。人工接种条件下,KC20还可侵染马蹄莲、虎眼万年青、马铃薯、鳄梨、西葫芦、胡萝卜、生菜和芹菜等植物;该菌株具备在37℃以及含有7%NaCl培养基中生长的能力,能液化明胶;可利用棉籽糖、纤维素二糖、蜜二糖,不能利用异麦芽酮糖、D-麦芽糖、D-阿拉伯糖、D-山梨醇、菊糖等。大白菜软腐病新病原菌Pectobacterium aroidearum的发现加深了我们对该病害的了解,为该病害的有效防治提供了参考。

关键词：大白菜细菌性软腐病 Pectobacterium aroidearum 病原鉴定生物学特性

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菜保拾零(十) 北京地区番茄黄化曲叶病毒的发现和应对

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中国蔬菜 2017年第10期 93-96页

作者：李明远北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心北京100097

防治番茄黄化曲叶病毒主要有通过防治传毒介体烟粉虱和利用抗（耐）病品种两种方法，防治烟粉虱要选合格的纱网，并覆盖周密、严实；选用抗（耐）TY病毒的品种要符合当地生产需求。1 北京地区番茄黄化曲叶病毒的发现2009年9月14日，北... 详细信息

防治番茄黄化曲叶病毒主要有通过防治传毒介体烟粉虱和利用抗（耐）病品种两种方法，防治烟粉虱要选合格的纱网，并覆盖周密、严实；选用抗（耐）TY病毒的品种要符合当地生产需求。1 北京地区番茄黄化曲叶病毒的发现2009年9月14日，北京发现了番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus，TYLCV，以下简称TY病毒）。实际上这个病毒传入北京的时间还要早，只是在这一天该病得到大家的确认。2009年我在北京市大兴区一个部队的生产基地任技术顾问，6月中旬就发现基地播种的中杂9号番茄长得不好。

关键词：番茄黄化曲叶病毒北京地区中杂9号番茄传毒介体生产需求 leaf curl 生产基地

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菜保拾零(九) 茶黄螨的发生及其防治

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中国蔬菜 2017年第9期 81-83页

作者：李明远北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心北京100097

茶黄螨的为害状与辣椒病毒病的症状相似，但仔细观察这两种症状还是有区别的，另外茶黄螨对不同寄主的危害也是有差异的。及早发现是防治的关键。秋天是茶黄螨发生的季节。我第一次见到茶黄螨是在1976年的秋天，在北京四季青公社（目前... 详细信息

茶黄螨的为害状与辣椒病毒病的症状相似，但仔细观察这两种症状还是有区别的，另外茶黄螨对不同寄主的危害也是有差异的。及早发现是防治的关键。秋天是茶黄螨发生的季节。我第一次见到茶黄螨是在1976年的秋天，在北京四季青公社（目前的四季青乡）巨山大队的茄子上见到的。当时有几株茄子上出现了一种“怪病”，紫茄子的茎和果实应当是发亮的紫色（彩色图版1），却变成了无光泽的灰黄色，表面长了一层木栓化的粗皮（彩色图版2）；病株上结的茄子个头不小，表面长出了一层木栓化的组织，还有些茄子开裂，长成开花馒头状（彩色图版3）。

关键词：茶黄螨防治辣椒病毒病彩色图四季青茄子为害状无光泽

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规模化畜禽养殖场粪便中多重耐药菌分离鉴定及其耐药特征

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农业环境科学学报 2020年第1期39卷 207-216页

作者：唐伟欣孙兴滨高浩泽程首涛仇天雷王旭明东北林业大学林学院哈尔滨150040 北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心北京100097

为了解禽畜粪便中多重耐药菌的污染特征,本研究对鸡粪、牛粪、猪粪和有机肥这4种不同样品中多重耐药菌进行了计数分析,并对不同来源的多重耐药菌株进行了分离和纯化,进一步开展了基于16S rDNA序列比对的分子生物学鉴定以确定其种属地位... 详细信息

为了解禽畜粪便中多重耐药菌的污染特征,本研究对鸡粪、牛粪、猪粪和有机肥这4种不同样品中多重耐药菌进行了计数分析,并对不同来源的多重耐药菌株进行了分离和纯化,进一步开展了基于16S rDNA序列比对的分子生物学鉴定以确定其种属地位,以及基于药敏试验的耐药性特征分析。结果表明:不同养殖动物粪便中四环素、恩诺沙星、磺胺甲恶唑和泰乐菌素4种抗生素多重耐药菌的绝对数量和相对数量排序均为鸡粪>猪粪>牛粪,粪源有机肥中可培养的多重耐药菌的绝对数量和相对数量在堆肥后均有所下降。通过对耐药菌株鉴定和分类学分析,发现禽畜粪便中多耐药菌的菌门集中分布在Proteobacteria、Firmicutes和Actinobacteria,多重耐药菌的优势菌属为Escherichia、Corynebacterium、Kurthia;而有机肥样品中多重耐药菌的优势菌属为Staphylococcus、Glutamicibacter。菌株的药敏试验表明,3类动物粪污中的多重耐药菌都对红霉素、四环素有着较高的耐药率,均高于80%,而对阿米卡星这种抗生素表现出较好的敏感性,其耐药率低于30%。通过对Ⅰ、Ⅱ类整合子基因盒的扩增,发现PCR产物的大小从0.8 kb到1.8 kb不等,基因盒ad A2、dfr A17、dfr A1及sat2在养殖场粪污中检出率均较高。

关键词：禽畜粪便多重耐药菌 16S rDNA 药敏试验整合子

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