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器官移植 2017年第3期8卷 232-234,237页

作者：孙玉洁马锡慧韩永毕丽丽张文慧肖漓解放军第309医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

预存供体特异性抗体(DSA)阳性是肾移植的禁忌证。预存DSA增加排斥反应发生率,使致敏患者存活率降低,直接影响肾移植结果。本文总结1例预存DSA强阳性患者,在二次肾移植前采用血浆置换、利妥昔单抗输注、持续抗胸腺细胞球蛋白滴注,并大剂... 详细信息

预存供体特异性抗体(DSA)阳性是肾移植的禁忌证。预存DSA增加排斥反应发生率,使致敏患者存活率降低,直接影响肾移植结果。本文总结1例预存DSA强阳性患者,在二次肾移植前采用血浆置换、利妥昔单抗输注、持续抗胸腺细胞球蛋白滴注,并大剂量静脉注射免疫球蛋白等联合用药方案,抗HLAⅡ类抗体滴度显著降低。术后动态监测该受者群体反应性抗体(PRA)和DSA水平,早期发现排斥反应,及时采用地塞米松冲击、抗胸腺细胞球蛋白、大剂量静脉注射免疫球蛋白治疗排斥反应,取得良好效果,患者DSA消失。术后随访5个月,移植肾功能良好。

关键词：肾移植供体特异性抗体(DSA) 群体反应性抗体(PRA) 排斥反应抗体介导的排斥反应(AMR)

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体外光分离置换疗法对皮肤移植小鼠IL-12p70和Th1/Th2类细胞因子产生的影响

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器官移植 2017年第5期8卷 355-359页

作者：魏玉香肖漓蔡明钱叶勇于涛石炳毅解放军第309医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨输注体外光分离置换疗法处理的脾淋巴细胞对皮肤移植小鼠白细胞介素(IL)-12p70和辅助性T细胞(Th)1/Th2类细胞因子产生的影响。方法以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体,建立小鼠皮肤移植模型。分离C57BL/6和BALB/c小鼠脾淋巴... 详细信息

目的探讨输注体外光分离置换疗法处理的脾淋巴细胞对皮肤移植小鼠白细胞介素(IL)-12p70和辅助性T细胞(Th)1/Th2类细胞因子产生的影响。方法以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体,建立小鼠皮肤移植模型。分离C57BL/6和BALB/c小鼠脾淋巴细胞(CSP、BSP),制备经8-甲氧基补骨脂素联合长波紫外线(PUVA)处理的小鼠脾淋巴细胞(PUVA-SP)。根据受体静脉输注的成分将实验动物随机分为5组(每组12只):PUVA-BSP组、PUVA-CSP组、BSP组、CSP组及磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,每组受体分别于术前7 d、手术当日和术后7 d按组别从尾静脉注入PUVA-BSP、PUVA-CSP、BSP、CSP或PBS。观察经PUVA处理脾淋巴细胞凋亡情况,检测受体小鼠外周血中IL-12p70和Th1/Th2类细胞因子产生的情况。结果移植术后,PUVA-BSP组和PUVA-CSP组小鼠外周血的IL-12p70表达水平明显低于BSP组、CSP组和PBS对照组(均为P<0.01);PUVA-BSP组和PUVA-CSP组的Th1类细胞因子IL-2、干扰素(IFN)-γ表达水平均明显低于BSP组、CSP组和PBS对照组(均为P<0.01);PUVA-BSP组和PUVA-CSP组的Th2类细胞因子IL-10表达水平明显高于BSP组、CSP组和PBS对照组(均为P<0.01)。结论输注足够数量的PUVA-SP可诱导受体体内低表达IL-12p70,并且诱导产生Th2免疫偏移。

关键词：体外光分离置换疗法小鼠皮肤移植白细胞介素辅助性T细胞(Th)1/Th2 8-甲氧基补骨脂素凋亡免疫调节排斥反应

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淋巴细胞亚群成员研究进展

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2017年第3期7卷 168-172页

作者：马锡慧肖漓解放军第309医院器官移植研究所移植研究室北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

淋巴细胞是人体重要的免疫细胞,占外周血白细胞总数的20﹪~45﹪,主要分为T细胞、B细胞和NK细胞三大类。根据细胞表面标志及功能特征,将淋巴细胞亚群分为CD3^+CD4^+辅助性T细胞、CD3^+CD8^+的细胞毒性T细胞、CD19^+B细胞、CD16^+CD56^+N... 详细信息

淋巴细胞是人体重要的免疫细胞,占外周血白细胞总数的20﹪~45﹪,主要分为T细胞、B细胞和NK细胞三大类。根据细胞表面标志及功能特征,将淋巴细胞亚群分为CD3^+CD4^+辅助性T细胞、CD3^+CD8^+的细胞毒性T细胞、CD19^+B细胞、CD16^+CD56^+NK细胞。随着基础免疫学及免疫学技术的不断发展,临床和科研工作者不断地将淋巴细胞亚群细化并发现一些新的亚群,包括γδT细胞、Th1/Th2细胞、Th17细胞、Th9细胞、Tfh细胞、Treg细胞、Breg细胞、NKT细胞和NKB细胞等,淋巴细胞亚群的内容也随之被赋予了新的定义,现将近年来淋巴细胞亚群的研究进展进行综述。

关键词： T淋巴细胞亚群 B淋巴细胞亚群杀伤细胞,天然淋巴细胞亚群

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红细胞表面分子与T/B淋巴细胞亚群的相关性

红细胞表面分子与T/B淋巴细胞亚群的相关性

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2017年中国器官移植大会暨第四届中国器官移植医师年会

作者：孔祥瑞肖漓高钰石炳毅解放军第309医院全军器官移植研究所移植研究室北京市器官移植与免疫调节重点实验室

目的探讨人红细胞表面分子CD35/CD58/CD59的表达与外周血T/B淋巴细胞亚群水平的相关性。方法采用流式细胞术对100例健康人样本红细胞表面分子CD35/CD58/CD59和T/B淋巴细胞亚群进行检测，用cell quest软件分析其几何平均荧光强度和百... 详细信息

目的探讨人红细胞表面分子CD35/CD58/CD59的表达与外周血T/B淋巴细胞亚群水平的相关性。方法采用流式细胞术对100例健康人样本红细胞表面分子CD35/CD58/CD59和T/B淋巴细胞亚群进行检测，用cell quest软件分析其几何平均荧光强度和百分比，以及细胞的绝对数，采用Pearson相关分析对其进行统计分析。

关键词：红细胞 T细胞 B细胞流式细胞术

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肾移植术后16年未经诱导形成免疫耐受1例

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器官移植 2017年第3期8卷 235-237页

作者：马锡慧肖漓高钰孙玉洁范宇石炳毅解放军第309医院器官移植研究所移植研究室北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091 解放军第309医院移植外科北京100091

肾移植是终末期肾病的有效治疗手段。但术后长期应用免疫抑制剂可能引起严重的不良反应、机会性感染或肿瘤。因此,肾移植术后最理想的状态是形成免疫耐受,以减少甚至停止应用免疫抑制剂。但肾移植术后患者未经诱导而形成免疫耐受的病例... 详细信息

肾移植是终末期肾病的有效治疗手段。但术后长期应用免疫抑制剂可能引起严重的不良反应、机会性感染或肿瘤。因此,肾移植术后最理想的状态是形成免疫耐受,以减少甚至停止应用免疫抑制剂。但肾移植术后患者未经诱导而形成免疫耐受的病例极其少见,现报道1例肾移植术后16年形成免疫耐受患者的资料,供临床参考。患者于1995年7月18日接受同种异体肾移植术。2011年8~9月因输尿管恶性肿瘤分别行左、右肾输尿管全长切除术+部分膀胱切除术。患者于2011年10月自行停用所有免疫抑制剂,随访至投稿日,移植肾功能良好。

关键词：免疫耐受免疫抑制剂淋巴细胞毒性试验群体反应性抗体肾移植终末期肾病淋巴细胞亚群调节性T细胞

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人类白细胞抗原-G1蛋白纯化及其免疫耐受机制初探

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实用器官移植电子杂志 2017年第2期5卷 112-115页

作者：毕丽丽孙玉洁孔祥瑞高钰马锡慧韩永肖漓石炳毅解放军第三0九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的原核体系诱导表达并纯化人类白细胞抗原-G1(human leukocyte antigen-G,HLA-G1)蛋白,研究HLA-G1分子对人B淋巴细胞内白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)表达水平的影响,进而探究HLA-G1在肾移植受者中B细胞介导的免疫耐受机制。方... 详细信息

目的原核体系诱导表达并纯化人类白细胞抗原-G1(human leukocyte antigen-G,HLA-G1)蛋白,研究HLA-G1分子对人B淋巴细胞内白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)表达水平的影响,进而探究HLA-G1在肾移植受者中B细胞介导的免疫耐受机制。方法通过原核表达体系,构建表达并纯化HLA-G1蛋白,经过蛋白免疫印迹试验(Western Blot)鉴定后,与人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)共培养,利用流式细胞仪检测B淋巴细胞内IL-10的表达情况。结果十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)、Western Blot结果表明,纯化后的蛋白分子量大小约为38.2 kDa,符合HLA-G1蛋白的分子量;人PBMC与HLA-G1蛋白共培养后,随着HLA-G1蛋白浓度的升高(浓度梯度:0、50、100和200 ng/ml),B细胞内IL-10的表达水平明显增加,分别为0.1%、0.36%、0.57%、0.73%。结论通过原核表达系统获得HLA-G1蛋白,纯度达95%以上,HLA-G1蛋白与人PBMC共培养后,可诱导B淋巴细胞表达IL-10,并具有浓度依赖性,提示其对肾移植免疫耐受的建立具有重要作用。

关键词：肾移植人类白细胞抗原-G1蛋白纯化 B淋巴细胞白细胞介素-10 免疫耐受

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临床异种器官移植所面临的种种挑战

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中华器官移植杂志 2017年第12期38卷 705-707页

作者：石炳毅陈文解放军第三0九医院全军器官移植研究所北京市器官移植和免疫调节重点实验室北京100091

器官移植是治疗各种器官终末期疾病最为有效的手段。近几年，随着器官移植外科技术日臻成熟，新型免疫抑制治疗方法不断开发和应用，显著提高了移植成功率和移植术后受者远期生存质量。然而，供移植器官短缺严重制约着器官移植的进一步... 详细信息

器官移植是治疗各种器官终末期疾病最为有效的手段。近几年，随着器官移植外科技术日臻成熟，新型免疫抑制治疗方法不断开发和应用，显著提高了移植成功率和移植术后受者远期生存质量。然而，供移植器官短缺严重制约着器官移植的进一步发展。异种移植被认为可能是未来解决人类移植器官短缺最为有效的方法之一，基因编辑技术的应用更为异种移植的发展带来了新的机遇。近几年异种细胞（胰岛和肝细胞等）移植取得了很好的临床效果，然而异种器官的移植效果并不理想。目前，异种器官移植至少仍有3个主要问题亟待克服：异种移植排斥反应、分子不相容和潜在病原微生物感染。

关键词：异种器官移植临床效果病原微生物感染远期生存质量移植排斥反应治疗方法器官短缺终末期疾病

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巨细胞病毒感染的肾移植受者中性粒细胞表面黏附分子的表达及意义

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中华医学杂志 2016年第20期96卷 1562-1565页

作者：肖漓白剑何秀云韩永许晓光樊文梅毕丽丽高钰孔祥瑞魏玉香石炳毅解放军第三0九医院全军器官移植研究所移植研究室北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨肾移植术后巨细胞病毒（CMV）感染受者体内中性粒细胞表面黏附分子CD11b、CD15和CD62L的表达及诊断价值。方法收集2009年9月至2015年1月在解放军第三。九医院全军器官移植研究所进行同种异体肾移植手术的142例受者的血液样本，... 详细信息

目的探讨肾移植术后巨细胞病毒（CMV）感染受者体内中性粒细胞表面黏附分子CD11b、CD15和CD62L的表达及诊断价值。方法收集2009年9月至2015年1月在解放军第三。九医院全军器官移植研究所进行同种异体肾移植手术的142例受者的血液样本，其中男95例，女47例；选取2009年9月至2015年1月在解放军第三。九医院体检中心年龄匹配的健康志愿者男22名、女9名作为健康对照组。通过外周血CMV-pp65抗原检测将肾移植受者分为CMV高活动性感染组、CMV活动性感染组和CMV阴性对照组。采用流式细胞术检测各组外周血中性粒细胞表面黏附分子CD11b、CD15和CD62L的平均荧光强度，并进行比较。绘制CD11b、CD15和CD62L在诊断肾移植受者CMV感染的受试者工作特征（ROC）曲线。结果肾移植受者中CMV高活动性感染组（n=17）和CMV活动性感染组（n=65）的中性粒细胞CD15的平均荧光强度分别为776．31±89．53和554．39±67．89，高于CMV阴性对照组（n=60）的334．92±44．69和健康对照组（n=31）的310，56±39．67，差异有统计学意义（均P〈0．05）；CMV高活动性感染组中性粒细胞表达CD11b和CD62L的比例为42．31％±6．11％和40．35％±6．47％，低于CMV活动性感染组（62．45％±5．67％和65．65％±5．33％）、CMV阴性对照组（70．74％±6．55％和70．37％±6．71％）和健康对照组（72．52％±6．48％和72．43％±6．51％），差异有统计学意义（均P〈0．05）。CD11b和CD62L表达率在诊断CMV活动性感染时的最佳临界值分别为56．61％和44．35％，敏感度均为***％，特异度为76．67％和58．06％，ROC曲线下面积为0．851和0．628；CD11b和CD62L表达率在诊断CMV高活动性感染时的最佳临界值分别为66．57％和69．56％，敏感度为81．54％和87．69％，特异度为100．00％和98．33％，ROC曲线下面积为1．000和0．991。CD15荧光强度在诊断CMV高活动性感染和CMV活动性感染时的最佳临界值分别为542．71和408．03，敏感度为100．00％和98．460，特异度均为100．00％，ROC曲线下面积为1．000和0．999。结论肾移植受者CMV感染后中性粒细胞CD15表达上调，CD11b和CD62L表达下调，可以作为辅助诊断CMV活动性感染的实验室依据。

关键词：巨细胞病毒感染肾移植抗原 CD11b 抗原 CD15 抗原 CD62L

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神经生长因子增强间充质干细胞诱导CD4＋CD25＋Treg细胞分化和增殖的作用

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中华器官移植杂志 2017年第2期38卷 112-115页

作者：龙旺石炳毅肖漓谢续标彭风华蓝恭斌余少杰王彧代贺龙高陈彭龙开中南大学湘雅二医院泌外器官移植科长沙410000 解放军第三○九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京210009

目的研究神经生长因子（NGF）对间充质干细胞（MSC）诱导CD4＋ CD25＋调节性T淋巴细胞（Treg细胞）分化增殖能力的影响.方法于MSC中加入NGF直接进行刺激,检测白细胞介素10（IL-10）、转化生长因子-β（TGF-β）和HLA-G等含量分析NGF对... 详细信息

目的研究神经生长因子（NGF）对间充质干细胞（MSC）诱导CD4＋ CD25＋调节性T淋巴细胞（Treg细胞）分化增殖能力的影响.方法于MSC中加入NGF直接进行刺激,检测白细胞介素10（IL-10）、转化生长因子-β（TGF-β）和HLA-G等含量分析NGF对MSC的作用;直接共培养后采用流式细胞检测CD4和CD25表达;应用Transwell小室共培养后采用流式细胞检测淋巴细胞CD4、CD25、Foxp3的表达.所有检测以经NGF刺激的hBMSC作为NGF组,以未经NGF处理的hBMSC作为对照组.结果与对照组相比,NGF组hBMSC培养上清液中IL-10和TGF-β表达均显著增加,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.流式细胞检测结果显示,与对照组相比,NGF组hBMSC的HLA-G表达显著增加（P＜0.05）;共培养后,NGF组较对照组CD4＋ CD25＋ Treg细胞的数量显著增多（P＜0.05）.抑制IL-10和TGF-p能够阻断NGF的诱导作用（P＜0.05）.结论 NGF能够增强MSC诱导Treg细胞分化增殖的能力,这种能力与MSC表达IL-10和TGF-p的增多有关.

关键词：神经生长因子间质干细胞调节性T淋巴细胞免疫耐受

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肝癌肝移植术后西罗莫司转换治疗的免疫学效应分析

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解放军医药杂志 2017年第4期29卷 24-28页

作者：周林郑永根杜国盛肖漓潘立超高钰孔祥瑞朱志东宋继勇史海达杨绍瑧索龙龙蒙轩解放军总医院肝胆外科北京100583 解放军309医院全军器官移植研究所肝胆外科北京100091 解放军309医院器官移植与免疫调节北京市重点实验室北京100091

目的探讨以西罗莫司为主的联合免疫治疗方案(SCTR)对肝癌肝移植受者体内调节性T细胞(Treg)和效应性T细胞表达的影响。方法对2010年1月—2015年6月收治的应用SCTR干预的肝癌肝移植28例的临床资料进行回顾性分析,观察术后不同时间点CD3、C... 详细信息

目的探讨以西罗莫司为主的联合免疫治疗方案(SCTR)对肝癌肝移植受者体内调节性T细胞(Treg)和效应性T细胞表达的影响。方法对2010年1月—2015年6月收治的应用SCTR干预的肝癌肝移植28例的临床资料进行回顾性分析,观察术后不同时间点CD3、CD8+的表达,并对其与Treg的表达进行相关性分析。结果 SCTR干预下,肝癌肝移植受者术后12个月内,Fox P3+Treg的比例从术前峰值降低到术后1个月谷值,随后逐渐升高,3个月时在正常值水平(P>0.05),术后12~18个月水平逐步维持在较低水平,与正常水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。术前、术后12和18个月Fox P3+Treg和CD3、CD8+T淋巴细胞的变化呈反向趋势。Fox P3+Treg与CD3和CD8的表达水平呈负相关(r=-6.37、-7.12,P<0.001)。肝癌肝移植术后白介素-10、β型转化生长因子和甲胎蛋白水平均较术前显著降低(P<0.05),且其变化与Treg呈正相关。结论 SCTR可降低肝癌肝移植术后Fox P3+Treg、IL-10、TGF-β的表达,并不增加排斥反应,临床应用安全、有效。

关键词：西罗莫司联合免疫治疗肝肿瘤肝移植

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