检索结果-内蒙古大学图书馆

中华检验医学杂志 2003年第7期26卷 442-443页

作者：曹守春王绿娅蔺洁潘晓冬杜兰平秦彦文刘舒南华大学生化与分子生物学教研室北京市心肺血管疾病研究所-首都医科大学附属安贞医院动脉粥样硬化研究室 100029

家族性高胆固醇血症(Familial hypercholesterolemia, FH)是一种常染色体显性遗传病，是导致动脉粥样硬化(Atherosclerosis, As)和早发冠心病的重要危险因素，其发病机理主要为低密度脂蛋白受体(Low density lipoprotein receptor, LDL... 详细信息

家族性高胆固醇血症(Familial hypercholesterolemia, FH)是一种常染色体显性遗传病，是导致动脉粥样硬化(Atherosclerosis, As)和早发冠心病的重要危险因素，其发病机理主要为低密度脂蛋白受体(Low density lipoprotein receptor, LDL-R)基因突变引起LDL-R功能异常。本研究应用聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）结合银染技术对一例临床诊断为FH的先证者的LDL-R基因进行研究，以探讨其分子病理机制。

关键词：家族性高胆固醇血症动脉粥样硬化冠心病低密度脂蛋白受体基因点突变聚合酶链反应单链构象多态性银染技术

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小颗粒致密低密度脂蛋白氧化特性及对血管内皮细胞脂质过氧化的影响

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中国动脉硬化杂志 2003年第4期11卷 309-313页

作者：王绿娅蔺洁秦彦文杜兰平潘晓冬石凤茹顾云赵庆北京市心肺血管疾病研究所动脉粥样硬化研究室北京市100029 中国医学科学院基础医学研究所中心实验室北京市100005

了解小颗粒致密低密度脂蛋白中抗氧化维生素含量、氧化特性 ,探讨其对血管内皮细胞脂质过氧化的影响。采用二次密度梯度超速离心的方法分离制备小颗粒致密低密度脂蛋白 ,高压液相色谱测定其抗氧化物质维生素A、E和 β 胡萝卜素 ;连续监... 详细信息

了解小颗粒致密低密度脂蛋白中抗氧化维生素含量、氧化特性 ,探讨其对血管内皮细胞脂质过氧化的影响。采用二次密度梯度超速离心的方法分离制备小颗粒致密低密度脂蛋白 ,高压液相色谱测定其抗氧化物质维生素A、E和 β 胡萝卜素 ;连续监测小颗粒致密低密度脂蛋白在 2 34nm的吸光度以测定其氧化敏感曲线 ;在血管内皮培养液中分别加入不同浓度的小颗粒致密低密度脂蛋白 ,培养后测定培养液丙二醛的浓度。实验成功分离小颗粒致密低密度脂蛋白 ,与大而轻低密度脂蛋白相比 ,维生素A、E和 β 胡萝卜素等抗氧化物质及总抗氧化能力明显减少 ,只有大而轻低密度脂蛋白的 6 5 %、39%和 2 4 % ,故小颗粒致密低密度脂蛋白氧化的延迟时间只有大而轻低密度脂蛋白的 37.5 % ,但硫代巴比妥酸反应物质值及氧化速率分别是大而轻低密度脂蛋白的 1 .7倍和 1 .2 8倍 ;培养液中丙二醛含量随加入脂蛋白的浓度和作用时间而增高 ,2 4h时小颗粒致密低密度脂蛋白 5 0mg组、1 0 0mg组、1 5 0mg组与相同剂量大而轻低密度脂蛋白组比较丙二醛显著增高 (P <0 .0 5 )。上述结果提示 :小颗粒致密低密度脂蛋白中抗氧化物质及抗氧化能力下降 ,氧化敏感性增高。

关键词：生物化学低密度脂蛋白对血管内皮细胞脂质过氧化的影响二次超速离心法氧化型低密度脂蛋白内皮细胞维生素丙二醛

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家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因复合纯合突变一例

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中华心血管病杂志 2003年第9期31卷 653-656页

作者：王绿娅曹守春蔺洁吴邦俊刘舒潘晓冬杜兰平秦彦文陈保生北京市心肺血管疾病研究所动脉粥样硬化研究室 100029 南华大学基础医学院生物化学分子生物学教研室中国医学科学院基础医学研究所国家医学分子生物学重点实验室

目的　检测家族性高胆固醇血症 (FH)患者低密度脂蛋白受体 (LDL R)基因点突变 ,分析基因型与临床表型间的关系 ,探讨其分子病理机制。方法　以 1例临床诊断为FH纯合子患儿及其父母的基因组DNA为模板 ,用降落PCR方法 ,在同一程序中分别对... 详细信息

目的　检测家族性高胆固醇血症 (FH)患者低密度脂蛋白受体 (LDL R)基因点突变 ,分析基因型与临床表型间的关系 ,探讨其分子病理机制。方法　以 1例临床诊断为FH纯合子患儿及其父母的基因组DNA为模板 ,用降落PCR方法 ,在同一程序中分别对LDL R基因的启动子和全部 18个外显子片段进行扩增 ,琼脂糖凝胶电泳检测 ,扩增产物直接进行核苷酸序列分析 ,并检索FH突变数据库 (www ucl ac uk/fh)。此外采用PCR 限制性内切酶技术 ,检测载脂蛋白 (Apo)B10 0 基因Q35 0 0R突变 ,以排除家族性ApoB10 0 缺陷症。结果　该患儿及其父亲第 4外显子发生Cys12 2 →Tyr(C12 2Y)杂合错义突变 ,同时患儿及其母第 9外显子发生Thr3 83 →Ile(T383I)杂合错义突变 ,因此该患儿LDL R基因第 4、9外显子各存在一个杂合突变 ,上述突变尚未在FH突变数据库见到。未检测出患儿及其父母ApoB10 0 Q35 0 0R突变。结论　此患儿为LDL R基因存在C12 2Y、T383I复合纯合突变并分别来自其父母 ;以上两位点突变可引起FH ;是FH患者LDL R基因的一种新突变类型。

关键词：家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因突变聚合酶链反应临床表型

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降落聚合酶链反应技术在低密度脂蛋白受体基因点突变研究中的应用

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中华检验医学杂志 2003年第7期26卷 403-406页

作者：王绿娅曹守春蔺洁潘晓冬杜兰平刘舒秦彦文陈保生北京市心肺血管疾病研究所首都医科大学附属北京安贞医院动脉粥样硬化研究室 100029 南华大学基础医学院生物化学分子生物学教研室中国医学科学院基础医学研究所国家医学分子生物学重点实验室

目的　建立降落 (TOUCHDOWN)聚合酶链反应 (PCR)方法 ,快速检测家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体 (LDL R)基因点突变。方法　设计LDL R基因 2 1对引物 ,根据TOUCHDOWN原理设计包括启动子和 18个外显子特异性片段在内的PCR程序 ,... 详细信息

目的　建立降落 (TOUCHDOWN)聚合酶链反应 (PCR)方法 ,快速检测家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体 (LDL R)基因点突变。方法　设计LDL R基因 2 1对引物 ,根据TOUCHDOWN原理设计包括启动子和 18个外显子特异性片段在内的PCR程序 ,通过试验选择PCR最佳反应条件 ,在同一程序中分别对 2 1个片段进行扩增 ,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物 ,纯化后DNA产物测序分析该方法的特异性。结果　编设退火温度范围从 6 8℃降至 5 4℃的PCR程序 ,优化PCR扩增条件 ,电泳检测采用同一程序同时分别扩增的LDL R基因 2 1个片段条带清晰 ,测序证实了此组片段的特异性。结论　成功建立降落PCR方法 ,提示此法为LDL R基因突变筛查提供了快速可靠的手段。

关键词：家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因突变聚合酶链反应

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小颗粒低密度脂蛋白的分离、鉴定方法的建立

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中华临床医药杂志（北京） 2002年第1期3卷 4-6页

作者：蔺洁王绿娅等北京市心肺血管疾病研究所动脉粥样硬化研究室100029

目的：建立分离、鉴定小颗粒低密度脂蛋白的方法。方法：常规密度梯度超速率心方法分离低密度脂蛋白，琼脂糖电泳鉴定其纯度；第2次密度梯度超速率心分别采用不同离心时间、不同梯度液分离制备小颗粒低密度脂蛋白；酶法测定脂蛋白的胆... 详细信息

目的：建立分离、鉴定小颗粒低密度脂蛋白的方法。方法：常规密度梯度超速率心方法分离低密度脂蛋白，琼脂糖电泳鉴定其纯度；第2次密度梯度超速率心分别采用不同离心时间、不同梯度液分离制备小颗粒低密度脂蛋白；酶法测定脂蛋白的胆固醇浓度；Abbo折光仪测定密度，负染电镜观察颗粒大小。结果：第2次密度梯度超离心时间设定为6小时的分离小颗粒低密度脂蛋白效果好；两种梯度液均适用；分离出小颗粒低密度脂蛋白符合密度范围1．040－1．063g/ml，颗粒直径（25．5nm的标准。结论：本文建立的2步法超速离心分离小颗粒低密度脂蛋白效果好，简化步骤并缩短时间，为大量制备小颗粒密度脂蛋白提供可靠的方法。

关键词：小颗粒低密度脂蛋白分离鉴定动脉粥样硬化发病机理 SLDL

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低能量He-Ne激光治疗仪鼻粘膜照射对血液粘稠度的影响

中华实用医学

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中华实用医学 2002年第5期4卷 23-24页

作者：杜兰平王绿娅潘晓冬崔萍蔺洁顾云张颖北京安贞医院-北京心肺血管疾病研究所动脉粥样硬化研究室

目的:观察一种新型低能量He-Ne激光治疗仪照射鼻腔粘膜对高粘度血症患者血液粘稠度的影响.方法:采用低能量He-Ne激光治疗仪对31例本院门诊血液粘度增高的患者进行鼻粘膜照射治疗,每日一小时共30日.观察治疗前后血液粘稠度的变化和症状改... 详细信息

目的:观察一种新型低能量He-Ne激光治疗仪照射鼻腔粘膜对高粘度血症患者血液粘稠度的影响.方法:采用低能量He-Ne激光治疗仪对31例本院门诊血液粘度增高的患者进行鼻粘膜照射治疗,每日一小时共30日.观察治疗前后血液粘稠度的变化和症状改善.结果:经低能量He-Ne激光治疗仪照射鼻腔内膜后,全血粘度高切(4.80±0.06 vs 4.73±0.05 mPa.s)、低切(15.68±0.78 vs 15.14±0.61 mPa.s)、血浆粘度(1.81±0.07 vs1.73±0.68 mPa.s)、血小板聚集(48.45±10.13%vs42.83±8.74%)均显著下降(p＜0.01).主要症状如疲倦乏力,头晕头痛,胸闷心悸等改善明显,有效率70%.积分统计(p＜0.01).结论:低能量He-Ne激光治疗仪照射鼻内膜对降低血液粘稠度有一定效果.

关键词：低能量氦氖激光高粘血症鼻粘膜

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小颗粒致密低密度脂蛋白氧化特性及对血管内皮细胞脂质过氧化的影响

小颗粒致密低密度脂蛋白氧化特性及对血管内皮细胞脂质过氧化的影...

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中国病理生理学会动脉粥样硬化专业委员会五届一次会议

作者：蔺洁王绿娅秦彦文杜兰平潘晓冬石凤茹顾云陈保生安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室北京市 100029 安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室中国医学科学院基础医学研究所

目的内皮细胞损伤是动脉粥样硬化形成的始动环节,而氧化型低密度脂蛋白是内皮细胞损伤的关键因素之一,在动脉粥样硬化发生发展中起着重要作用。近年来研究发现,LDL具有明显的异质性,小颗粒致密LDL(sLDL)与大颗粒上浮LDL相比具有强烈的... 详细信息

目的内皮细胞损伤是动脉粥样硬化形成的始动环节,而氧化型低密度脂蛋白是内皮细胞损伤的关键因素之一,在动脉粥样硬化发生发展中起着重要作用。近年来研究发现,LDL具有明显的异质性,小颗粒致密LDL(sLDL)与大颗粒上浮LDL相比具有强烈的致动脉粥样硬化作用,且更易遭受氧化或修饰。本研究着重探讨sLDL氧化特性及促进血管内皮细胞脂质过氧化反应,为进一步探讨sLDL致As的可能机制提供实验依据。方法①收集正常人空腹新鲜混合血清。采用二次密度梯度超速离心的方法分离制备sLDL。琼脂糖电泳、油红“O”染色扫描鉴定LDL纯度,折光仪鉴定密度,透射电镜观察并测量脂蛋白直

关键词：脂蛋白低密度内皮,血管氧化剂脂质过氧化

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小颗粒致密低密度脂蛋白对血管内皮细胞粘附分子表达的影响

小颗粒致密低密度脂蛋白对血管内皮细胞粘附分子表达的影响

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中国病理生理学会动脉粥样硬化专业委员会五届一次会议

作者：秦彦文王绿娅蔺洁潘晓冬杜兰平石凤茹郭恒仪安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室安贞医院北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室中国医学科学院基础医学研究所

目的小颗粒致密低密度脂蛋白(small low density lipoprotein,sLDL)具有强烈的致As作用,是冠心病重要的危险因素。由于血管内皮细胞损伤是As发生的始动环节,本研究试图通过sLDL对培养的血管内皮细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及血管内皮... 详细信息

目的小颗粒致密低密度脂蛋白(small low density lipoprotein,sLDL)具有强烈的致As作用,是冠心病重要的危险因素。由于血管内皮细胞损伤是As发生的始动环节,本研究试图通过sLDL对培养的血管内皮细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及血管内皮细胞间粘附分子-1(VCAM-1)的影响,探讨sLDL致动脉粥样硬化的分子机制。方法①分离制备鉴定sLDL:按本室与中国医科院基础医学研究所生化室建立的方法二次超速离心制备血浆sLDL,油红“O”染色、凝胶扫描鉴定LDL纯度,折光仪检测密度,采用负染电镜法透射电镜5×10～4倍观察,分规测量脂蛋白直径。②测定sLDL的氧化性:用改良BCA法测定不同LDL中的蛋白,试剂盒测定丙二醛(MDA),硫代巴比妥酸反应物质值(TBARS)以MDA/蛋白浓度计算。③培养脐静脉内皮细胞:人脐静脉内皮细胞系用含10%小牛血清的1640培养基培养,相差显微镜下观察细胞单层和形态改变。④ELISA法测定内皮细胞表面粘附分子表达:内皮细胞

关键词：脂蛋白,低密度,内皮,血管细胞粘附分子基因表达

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家族性高胆固醇血症患者LDL-R基因研究进展

中华实用医学

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中华实用医学 2002年第9期4卷 53-58页

作者：曹守春王绿娅刘宗汉南华大学基础医学院生化与分子生物学教研室 421001 北京市心肺血管疾病研究所动脉粥样硬化研究室 100029

家族性高胆固醇血症(Familial hypercholes-terolemia,FH)是低密度脂蛋白受体(Low densitylipoprotein receptor,LDL-R)基因突变引起的一种常染色体显性遗传性疾病.其主要临床表现为血浆低密度脂蛋白-胆固醇(Low density lipoprotein Ch...

关键词：

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家族性高胆固醇血症LDL-R基因点突变的初步研究

引用

中华临床医药杂志 2002年第5期3卷 1-4页

作者：曹守春王绿娅何淑雅潘晓冬蔺洁杜兰平秦彦文刘舒南华大学基础医学院生化与分子生物学教研室 421001 北京市心肺血管疾病研究所动脉粥样硬化研究室 100029

目的:建立一种快速、高效地检测LDL-R基因点突变的方法用于对家族性高胆固醇血症患者进行分析.方法:采用同一种程序和反应体系分别扩增家族性高胆固醇血症LDL-R基因包括18外显子和启动子在内的21个片段,琼脂糖电泳检测PCR产物,SSCP分析... 详细信息

目的:建立一种快速、高效地检测LDL-R基因点突变的方法用于对家族性高胆固醇血症患者进行分析.方法:采用同一种程序和反应体系分别扩增家族性高胆固醇血症LDL-R基因包括18外显子和启动子在内的21个片段,琼脂糖电泳检测PCR产物,SSCP分析和PCR产物直接测序检测点突变.结果与结论:本方法可以快速、简便、有效地扩增LDL-R基因包括启动子在内的21个片段,PCR产物直接测序初步发现一家族性高胆固醇血症患者存在点突变.

关键词：家族性高胆固醇血症 LDL-R基因 PCR-SSCP 点突变

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