检索结果-内蒙古大学图书馆

北方果树 2019年第5期 20-21,33页

作者：郑书旗张强高木旺周佳魏钦平李民吉北京市林业果树科学研究院农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室北京市落叶果树工程技术研究中心

中国是世界苹果生产大国,栽培面积和总产量占世界的50%以上;苹果产业已成为我国种植区产业结构调整、生态环境建设的主要树种,农民增收致富的主要经济支柱产业之一。但是,我国的苹果生产与世界发达国家相比,存在品种老化单一(‘富士’占... 详细信息

中国是世界苹果生产大国,栽培面积和总产量占世界的50%以上;苹果产业已成为我国种植区产业结构调整、生态环境建设的主要树种,农民增收致富的主要经济支柱产业之一。但是,我国的苹果生产与世界发达国家相比,存在品种老化单一(‘富士’占70%以上)、栽培方式落后(乔砧种植比例占90%左右)、管理技术复杂、费时费工、劳动成本高、产量低、品质差、优质果率低等问题[1~4]。苹果矮砧集约高效栽培已成为世界苹果栽培的主要模式,其具有结果早、产量高、品质优、树体管理方便、便于标准化管理和机械化作业、节省劳动成本、经济利用土地、效益高等优点,已在世界苹果生产先进国家广泛应用(占90%以上)。

关键词：苹果生产矮砧栽培北京地区技术产业结构调整生态环境建设劳动成本树体管理

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北京地区樱桃病毒原检测初报

北京地区樱桃病毒原检测初报

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中国植物病理学会2019年学术年会

作者：陈玲段续伟张晓明闫国华王晶周宇张开春北京市林业果树科学研究院农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室北京市落叶果树工程技术研究中心

樱桃病毒感染在现阶段樱桃生产中普遍存在,其主要通过嫁接相互传播,造成树势衰弱,降低果实产量和品质。明确樱桃病毒原种类,对于建立樱桃病毒检测体系及樱桃植株无病毒化技术,获得具有优良性状的甜樱桃品种和砧木的无病毒原种以及樱桃... 详细信息

樱桃病毒感染在现阶段樱桃生产中普遍存在,其主要通过嫁接相互传播,造成树势衰弱,降低果实产量和品质。明确樱桃病毒原种类,对于建立樱桃病毒检测体系及樱桃植株无病毒化技术,获得具有优良性状的甜樱桃品种和砧木的无病毒原种以及樱桃病毒病的防控具有重要的理论意义和应用价值。为了明确北京地区现有樱桃种质资源中的病毒原种类,从海淀区北京市林业果树科学研究院樱桃资源圃以及通州区樱桃基地共采集100棵砧木盆栽苗、24棵采穗圃砧木、94棵甜樱桃品种的样品,通过RT-PCR和小RNA测序的方法进行樱桃病毒原的检测鉴定。结果在被检测樱桃种质资源中共发现了9种病毒和1种类病毒。包括李矮缩病毒(Prunus dwarf virus,PDV)、李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ring spot virus,PNRSV)、樱桃绿环斑驳病毒(Cherry green ring mottle virus,CGRMV)、樱桃坏死锈斑驳病毒(Cherry necrotic rusty mottle virus,CNRMV)、樱桃病毒A(Cherry virus A,CVA)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、李树皮坏死茎痘伴随病毒(Plum bark necrosis stem pitting-associated virus,PBNSPaV)、樱桃小果病毒-1 (ittle cherry virus-1,LChV-1)以及啤酒花矮化类病毒(Hop stunt viroid,HSVd)。RT-PCR检测以上病毒均获得特异性条带,测序后比对,序列正确。此外,在3棵甜樱桃品种上发现樱桃扭叶伴随病毒(Cherry twisted leaf associated virus,CTLaV),设计特异性鉴定引物(F:5′-TCAGCAAGATTAAGGAGGTTG-3′,R:5′-ATNGGTTGAATTTGGCCAGT-3′)进行RT-PCR检测,检测结果显示特异的CTLaV条带,测序验证无误。CTLaV在国内尚未报道,下一步计划获得其全序列进行进一步分析。

关键词：樱桃病毒原 RT-PCR 小RNA测序检测鉴定

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建立樱桃中快速高效检测樱桃病毒A的重组酶聚合酶扩增技术体系

建立樱桃中快速高效检测樱桃病毒A的重组酶聚合酶扩增技术体系

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中国植物病理学会2019年学术年会

作者：陈玲段续伟张开春张晓明王晶闫国华周宇北京市林业果树科学研究院农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室北京市落叶果树工程技术研究中心

樱桃病毒A (Cherry virus A,CVA)是β线形病毒科(Betaflexiviridae)发型病毒属(Capiovirus)成员,分布较广,在我国已广泛传播。CVA寄主范围广泛,常见于甜樱桃和酸樱桃,前期研究发现CVA通常与侵染樱桃的一至多种病毒存在复合侵染。针对CV... 详细信息

樱桃病毒A (Cherry virus A,CVA)是β线形病毒科(Betaflexiviridae)发型病毒属(Capiovirus)成员,分布较广,在我国已广泛传播。CVA寄主范围广泛,常见于甜樱桃和酸樱桃,前期研究发现CVA通常与侵染樱桃的一至多种病毒存在复合侵染。针对CVA的高发性,本研究从NCBI上收集了位于不同地理位置,不同进化组的24个CVA全序列,根据CVA外壳蛋白保守区域设计特异性引物(F:5’-GATGAAGATATTGTCAATCCTCCAA CTGTG-3′,R:5’-Biotin-CTGTCTCTTGCTTCTG GCATGATACCTTCT-3′)和探针(Probe:5′-FAM-TGGCACTCATTGACGTCAGTGTTGACCAGAG-THF-TTCAGGAAAGGTGGTTTC-PO-3’),建立了在樱桃中检测CVA的等温DNA扩增技术,即重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术。利用TwistAmp nfo试剂盒建立的RPA技术在恒温38℃的条件下反应40min完成,经PCR产物纯化试剂盒回收后电泳,正向和反向引物扩增获得138 bp的扩增子,TA克隆后测序正确,加探针后获得110 bP的扩增子。灵敏性试验表明该RPA技术的灵敏性是PCR技术的10倍,并且与国内侵染樱桃的其他6种病毒原(PNRSV、PDV、CGRMV、CNRMV、PBNSPaV、LChV2)和1种类病毒(HSVd)无交叉反应。此外,获得的具有标记的扩增子可通过侧向流试纸条检测进行直观观察,便于CVA检测的高通量应用。田间样品检测进一步证实了该方法的实用性。以上结果表明本研究开发的CVA RPA检测技术具有简单、快速、灵敏及特异等特点,能用于田间任何生长季的樱桃样品是否被CVA侵染的常规检测。

关键词：樱桃病毒A 重组酶聚合酶扩增樱桃检测

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二倍体森林草莓不定芽再生过程中活力再恢复的分子机制研究

二倍体森林草莓不定芽再生过程中活力再恢复的分子机制研究

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中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会

作者：王华杨媛李茂福刘佳棽金万梅北京市农林科学院北京市林业果树科学研究院农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室北京市落叶果树工程技术研究中心

在二倍体森林草莓(Fragaria vesca)‘Baiguo’不定芽再生过程中,发现有一个活力再恢复的现象,即外植体接种后0～18 d是绿色的,接着逐渐失绿褐化,之后其再生能力在几乎褐色的外植体中恢复,并且在培养30～48 d再生不定芽。这可能是一种选... 详细信息

在二倍体森林草莓(Fragaria vesca)‘Baiguo’不定芽再生过程中,发现有一个活力再恢复的现象,即外植体接种后0～18 d是绿色的,接着逐渐失绿褐化,之后其再生能力在几乎褐色的外植体中恢复,并且在培养30～48 d再生不定芽。这可能是一种选择性过程,低竞争能力的细胞被杀死,而少数细胞分裂并分化成新的不定芽。然而对其活力再恢复的分子机制知之甚少。参与激素控制的基因可能影响不定芽再生期间外植体的活力恢复。二倍体森林草莓材料消毒后接种到含0.2 mg·L-1 BA和0.1 mg·L-1 IBA的MS培养基上,30 d后转接到1/2MS+1/2B5培养基上(含20 g·L-1蔗糖和6.0 g·L-1琼脂),暗培养14 d。每6 d观察统计不定芽再生数和每个外植体芽数;采用荧光定量PCR技术对参与激素控制基因进行表达分析。研究结果显示,叶盘外植体接种后12 d明显膨大,18 d后逐渐失绿褐化,30 d后呈绿褐色,36d后呈黄褐色,48 d后几乎完全褐色;活力恢复的关键时期为30～48 d(36 d不定芽出现,48 d产生大量不定芽)。再生不定芽的高效方法为暗培养14 d,1/2MS+1/2B5培养基添加2.0 mg·L-1TDZ;在培养11周后,不定芽再生频率为96.44%±1.60%,每个外植体再生芽数为23.46±2.14。在此培养条件下研究不定芽活力恢复过程中起关键调控作用的基因。细胞分裂素合成相关基因,ZOG和cisZOG的表达水平在接种后6、30和36d相对较高,此期间叶盘外植体开始膨大或产生芽原基;CKH的表达水平在培养0～24 d显着增加,在此期间形成芽原基,在30～48 d时较高,在此期间再生能力恢复;CKX家族基因(CKX2、CKX3、CKX5、CKX6和CKX7)的表达水平在培养的最初几天(从0～6 d)增加,在此期间外植体膨大,CKX2、CKX3和CKX7的表达水平在30～48 d显着增加,此期间并且产生许多不定芽。生长素合成相关的基因YUC1、YUC2、YUC3、YUC5、YUC7、YUC8、YUC9、YUC10和YUC11的表达水平在培养0～6 d增加,这时外植体膨大,YUC2、YUC5、YUC6、YUC9和YUC10的表达水平在30～48 d显著增加(再生能力活力再恢复并且产生许多不定芽)。赤霉素合成相关基因GA2ox的表达水平在30～48 d时更高,GA20ox的表达水平在培养48 d之前较高,表明其与外植体活力恢复有关。综上所述,在再生能力活力恢复过程中,在30～48 d内检测到激素合成相关基因Ciszog1、CKX2、CKX3、CKX7、YUC2、YUC6、YUC9、YUC10和GA2ox的高表达,表明这些基因可能调节二倍体森林草莓叶盘再生不定芽过程中活力再恢复。

关键词：二倍体森林草莓不定芽再生活力恢复基因表达

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MYB类转录因子控制八倍体草莓果实着色

MYB类转录因子控制八倍体草莓果实着色

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中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会

作者：王华杨媛李茂福张运涛刘佳棽董静王桂霞金万梅北京市农林科学院北京市林业果树科学研究院农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室北京市落叶果树工程技术研究中心

决定果色的物质主要是黄酮类化合物。大量研究表明,类黄酮化合物花青素苷、原花青素等代谢途径均受MYB类转录因子调控。草莓基因组有187个MYB类转录因子。最近研究表明,R2R3MYB家族成员FaMYB1、FaMYB9/FaMYB11、FaMYB5和FaMYB10是影响... 详细信息

决定果色的物质主要是黄酮类化合物。大量研究表明,类黄酮化合物花青素苷、原花青素等代谢途径均受MYB类转录因子调控。草莓基因组有187个MYB类转录因子。最近研究表明,R2R3MYB家族成员FaMYB1、FaMYB9/FaMYB11、FaMYB5和FaMYB10是影响八倍体栽培草莓(Fragaria×ananassa Duch.)果实黄酮类化合物合成的关键转录因子。本研究重点在转录水平上与代谢物组分的变化关联,结合前人研究构建八倍体栽培草莓果实颜色的MYB类转录因子调控网络。所用材料为八倍体栽培草莓红色品种‘甜查理’和白色品种‘白雪公主’,叶片和果实样品取自北京市林业果树科学研究院。观察‘甜查理’和‘白雪公主’果实发育以选择合适的取样时期,测定单果质量、可溶性固形物、硬度等生理指标;采用液质联用测定果实花青素、黄酮和原花青素含量和组分的差异;采用转录组测序获得MYB类转录因子及色素合成途径结构基因;采用荧光定量PCR技术验证其表达差异;采用酵母双杂交技术和过表达技术在本氏烟草和草莓白果中验证MYB10功能;采用PCA主成分分析获得MYB类转录因子控制八倍体草莓果实着色的模型。结果显示,草莓白色品种成熟果实中几乎没有花青素,而红色品种成熟果实中花青素含量很高(77.0 mg·kg-1 FW)。进一步研究发现参与花青素生物合成的结构基因和FaMYB类转录因子基因的表达出现差异,其中FaMYB9、FaMYB11、FaMYB5负调控,而FaMYB1和FaMYB10正调控。分析显示FaMYB1序列在红色果实和白色果实中均无差异,而FaMYB10序列差异很大。在DNA水平上,红果中的FaMYB10-1与白果中的FaMYB10-2相比,FaMYB10-2无内含子;在转录水平上发现,红色品种成熟果实cDNA中仅含有FaMYB10-1,白色品种成熟果实cDNA中仅含有FaMYB10-2,FaMYB10-2在编码蛋白质C末端的基因组区域中具有ACTTATAC插入,发生移码突变,氨基酸翻译提前终止,导致八倍体草莓出现白色果实。转基因试验进一步验证FaMYB10决定花青素的生物合成。更为重要的是,在果实发育过程中内源ABA调控FaMYB类转录因子基因,从而调控黄酮类生物合成决定果实的颜色。此外,白色品种等位基因FaMYB10-2无内含子,其在多倍体植物物种进化中的作用值得进一步研究。本研究结果揭示了草莓果实颜色由主效基因和微效多基因组成的调控网络来进行调节。

关键词：草莓八倍体 FaMYB 果实颜色黄酮类化合物花青素

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樱桃小果病毒–1北京分离物全基因组序列分析

樱桃小果病毒–1北京分离物全基因组序列分析

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中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会

作者：陈玲李永强段续伟张晓明王晶闫国华周宇张开春北京市林业果树科学研究院农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室北京市落叶果树工程技术研究中心北京农学院植物科学技术学院

樱桃病毒病在生产中危害严重,其主要以嫁接的方式进行相互传播,导致树势衰弱,果实产量和品质下降。为此,开展病毒原种类监测分析,对于其检测体系及樱桃无毒化技术,获得无病毒原种以及病毒病防控具有重要的理论意义和应用价值。2017年6月... 详细信息

樱桃病毒病在生产中危害严重,其主要以嫁接的方式进行相互传播,导致树势衰弱,果实产量和品质下降。为此,开展病毒原种类监测分析,对于其检测体系及樱桃无毒化技术,获得无病毒原种以及病毒病防控具有重要的理论意义和应用价值。2017年6月5日从北京昌平区表现花叶的甜樱桃植株上采集叶片进行小RNA测序,根据获得的contig序列设计特异性引物,用overlapping RT-PCR和5?-、3?-RACE技术扩增获得樱桃小果病毒–1(Littlecherryvirus-1,LChV-1)北京分离物基因组全序列,命名为LChV-1-BJ。从NCBI上收集另外13个LChV-1基因组全序列,通过软件RDP v.4.95对14个全序列进行重组分析,采用MEGA6对非重组的LChV-1全序列、其基因组编码依赖于RNA的RNA聚合酶(RNA-dependentRNA polymerase,RdRp)、热激蛋白70 h(heat-shock protein,HSP70h)、衣壳蛋白(coat protein,CP)3个顺反子的核苷酸序列进行系统发育分析。测序发现79个contig靶向LChV-1,overlappingRT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)分析结果表明,LChV-1-BJ全长16 928 nt(GenBank accession number MK775591),包含8个可读框(open reading frame,ORF),其中1～75 nt是5?非翻译区、16 723～16 928 nt是3?非翻译区、其余区域编码8个ORF。各ORF与NCBI上收集的13个全序列编码的对应ORF在核苷酸和氨基酸水平的相似性分别为ORF1a,71.19%～98.24%和76.36%～98.47%;ORF1b,74.35%～99.22%和85.44%～99.22%;ORF2,66.67%～95.83%和58.33%～90.32%;ORF3,69.11%～98.85%和74.11%～98.37%;ORF4,72.78%～98.39%和74.08%～97.87%;ORF5,71.07%～98.68%和71.32%～97.87%;ORF6,70.04%～98.64%和68.13%～98.64%;ORF7,62.93%～98.99%和70.13%～99.13%;ORF8,70.28%～98.89%和68.62%～97.91%。在全基因组水平,LChV-1-BJ与G153分离物的相似性最低,为73.25%,与Kyoto-2分离物相似性最高,为98.51%。重组分析表明14个LChV-1分离物中存在2个重组体,对非重组序列的系统发育分析表明LCh V-1聚类在5个不同的组,与寄主和地理位置无关。其中,LChV-1-BJ与近期报道的日本分离物Kyoto-2共同聚类在新报道的第V组,与中国泰安分离物聚类在不同组。综上,LChV-1在基因组水平存在多样性,获得LChV-1的全基因组序列有助于开发针对LChV-1的检测技术,对于无病毒接穗和砧木认证具有重要意义。

关键词：樱桃樱桃小果病毒–1 分离物全基因组序列重组分析,系统发育分析

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中熟新品种‘瑞蟠18号’

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北方果树 2020年第3期 57-57页

作者：赵剑波北京市林业果树科学研究院北京市落叶果树工程技术研究中心农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室北京100093

‘瑞蟠18号’是‘幻想’×‘瑞蟠4号’杂交育成的中熟新品种,2005年通过北京市农作物品种审定委员会审定并命名。1品种特征特性平均单果重155 g,最大196 g,果个均匀;果实扁平形,纵径5.01 cm,横径7.44 cm,侧径7.50 cm,远离缝合线一... 详细信息

‘瑞蟠18号’是‘幻想’×‘瑞蟠4号’杂交育成的中熟新品种,2005年通过北京市农作物品种审定委员会审定并命名。1品种特征特性平均单果重155 g,最大196 g,果个均匀;果实扁平形,纵径5.01 cm,横径7.44 cm,侧径7.50 cm,远离缝合线一端果肉较厚,果顶凹,基本不裂顶;缝合线浅,片肉稍不对称;果皮底色黄白,表色浅红,近全面着色;果皮中厚,成熟时果皮不能剥离;果肉硬溶质,汁液多,纤维少,风味甜,有香味,可溶性固形物含量12.4%。树势中庸,以长、中果枝结果为主。徒长性结果枝坐果良好,幼树期可适当利用徒长性结果枝结果。

关键词：平均单果重结果枝幼树期中果枝硬溶质品种特征特性果皮底色横径

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玫瑰香味葡萄新品种——瑞都科美

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中国果业信息 2018年第2期35卷 55-56页

作者：孙磊徐海英北京市林业果树科学研究院北京市落叶果树工程技术研究中心农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室

“瑞都科美”是从“意大利”×“Muscat Louis”后代中选育出的玫瑰香味葡萄新品种。2016年通过北京市林木品种审定委员会审定并命名。

关键词：新品种葡萄香味玫瑰品种审定委员会意大利北京市选育

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施氮深度对‘黄金梨’树氮素吸收、分配及利用效率的影响

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园艺学报 2017年第11期44卷 2171-2178页

作者：武阳孙明德刘军田海青王文娟刘松忠北京市林业果树科学研究院北京市落叶果树工程技术研究中心农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室北京100093

以7年生‘黄金梨’树为试材,采用^(15)N示踪技术研究了3个施氮深度[0(表面施氮)、20和40 cm]处理下不同器官对氮素的吸收、分配及利用效率,并探讨了氮素在土壤中的残留及损失。结果表明,梨果实成熟期,果实的Ndff值最高,其他器官的Ndff... 详细信息

以7年生‘黄金梨’树为试材,采用^(15)N示踪技术研究了3个施氮深度[0(表面施氮)、20和40 cm]处理下不同器官对氮素的吸收、分配及利用效率,并探讨了氮素在土壤中的残留及损失。结果表明,梨果实成熟期,果实的Ndff值最高,其他器官的Ndff值均表现为20 cm施氮深度处理显著高于其他处理。各施氮深度处理,^(15)N的分配率均为贮藏器官最高,生殖器官最低。20 cm施氮深度处理的梨树N利用率最高(26.23%),40 cm施氮深度处理最低(15.65%)。N损失率以表面施氮处理最高(54.21%),20 cm施氮深度最低;0~80 cm土层的N残留率以40 cm施氮深度处理最高(31.73%),表面施氮处理最低。因此,本研究中,20 cm深度施氮处理能提高梨树各器官对N肥的吸收征调能力,氮素损失少。

关键词：梨施氮深度 Ndff 15N分配率 N利用率

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月季bHLH基因的克隆、表达及其与MYB和WD40的互作分析

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园艺学报 2017年第10期44卷 1949-1958页

作者：李茂福杨媛王华刘佳棽金万梅北京市林业果树科学研究院农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室北京100093 北京市落叶果树工程技术研究中心北京100093

以月季‘月月红’(Rosa chinensis‘Slater’s Crimson China’)花瓣为材料,利用同源克隆法鉴定到1个Rcb HLH基因的c DNA全长序列,并研究了其生物信息学特征、组织特异性表达及其与MYB和WD40的互作关系。序列分析表明,Rcb HLH的开放阅... 详细信息

以月季‘月月红’(Rosa chinensis‘Slater’s Crimson China’)花瓣为材料,利用同源克隆法鉴定到1个Rcb HLH基因的c DNA全长序列,并研究了其生物信息学特征、组织特异性表达及其与MYB和WD40的互作关系。序列分析表明,Rcb HLH的开放阅读框长2 112 bp,编码703个氨基酸,基因登录号为KY783912。结构域序列分析显示,Rcb HLH为一个保守的N端含有碱性氨基酸的DNA结合区、C端含有α螺旋–环–α螺旋的b HLH蛋白。对Rcb HLH进行系统进化分析发现,Rcb HLH与草莓及其他蔷薇科植物的b HLH蛋白具有较高的同源性。组织特异性实时定量RT-PCR分析揭示Rcb HLH基因主要在花瓣中表达。酵母双杂交结果显示,Rcb HLH能与Pav MYB和Pav WD40相互作用形成MYB-b HLH-WD40复合物。以上结果为进一步研究Rcb HLH的功能鉴定奠定了基础。

关键词：月季 RcbHLH 基因克隆基因表达酵母双杂交

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