检索结果-内蒙古大学图书馆

南京林业大学学报(自然科学版) 2025年第1期49卷 11-20页

作者：姜波安新民林木遗传育种全国重点实验室林木育种与生态修复国家工程中心林木分子设计育种高精尖创新中心林木花卉遗传育种教育部重点实验室树木花卉育种生物工程国家林业和草原局重点实验室北京林业大学生物科学与技术学院

基因组精准编辑技术正在重新定义对生命奥秘的理解，其核心在于能够在特定的基因组位点精确地插入、删除或替换DNA序列，从而实现对生物体内遗传信息的定向精准编辑。这些技术已经成为现代生物领域研究的基石，从早期的探索到CRISPR系... 详细信息

基因组精准编辑技术正在重新定义对生命奥秘的理解，其核心在于能够在特定的基因组位点精确地插入、删除或替换DNA序列，从而实现对生物体内遗传信息的定向精准编辑。这些技术已经成为现代生物领域研究的基石，从早期的探索到CRISPR系统的开创性应用，每一步都展示了科学探索的深远影响。CRISPR系统的应用带来了基因组编辑的巨大飞跃，它催化了更精准的编辑工具出现，如碱基编辑器和先导编辑器等，它们显著增强了精准编辑基因组的能力。这一历史性转变已经在农业改良、疾病治疗等领域展现出巨大的潜力。基因编辑技术的应用前景广阔，CRISPR/Cas系统能敲除多个基因，具有高靶向效率、易于设计和操作，且成本较低等优点，因此在作物、林木遗传改良中被广泛应用；但它也有不少不足之处，而每一款新编辑工具的出现都使这一技术得以不断完善。随着技术的不断进步，基因编辑技术有望在未来解决更多复杂的生物学问题，为人类健康和农林业发展带来更多的创新和突破力。

关键词： CRISPR Cas9 胞嘧啶碱基编辑器腺嘌呤碱基编辑器糖基化酶碱基编辑器双碱基编辑器先导编辑器

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‘西伯利亚’百合LiHDS基因克隆及表达分析

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植物生理学报 2023年第2期59卷 362-372页

作者：闫文欣张茜刘思佳冷平生胡增辉北京林木分子设计育种高精尖创新中心北京102206 北京农学院园林学院北京102206

4-羟基-3-甲基-2赤藓磷酸合酶(4-hydroxy-3-methyl-2-butenyl diphosphate synthase, HDS)是单萜合成途径中的关键酶。为揭示其在‘西伯利亚’百合(Lilium ‘Siberia’)萜烯合成中的作用,本文克隆了LiHDS基因,进行生物信息学分析、亚细... 详细信息

4-羟基-3-甲基-2赤藓磷酸合酶(4-hydroxy-3-methyl-2-butenyl diphosphate synthase, HDS)是单萜合成途径中的关键酶。为揭示其在‘西伯利亚’百合(Lilium ‘Siberia’)萜烯合成中的作用,本文克隆了LiHDS基因,进行生物信息学分析、亚细胞定位和病毒诱导基因沉默(VIGS)功能验证,并采用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)对该基因进行时空表达分析。结果表明, LiHDS基因开放阅读框为2 223 bp,编码蛋白包括740个氨基酸,理论分子量81 967.95,理论等电点为5.76,与小果野蕉(Musa acuminata)等HDS蛋白相似度较高,LiHDS蛋白主要定位在叶绿体。LiHDS在内花被片与外花被片中表达量最高,在根和叶中表达量最低。花被片中LiHDS基因在盛开期表达量最高,衰败期最低。LiHDS基因被沉默后,罗勒烯和芳樟醇释放量显著降低,分别下降79%和73%,说明LiHDS基因在百合单萜合成中起着重要作用。

关键词： ‘西伯利亚’百合基因克隆基因沉默表达分析

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草莓果实酵母双杂交文库的构建及FvM4K1互作蛋白的筛选

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园艺学报 2021年第6期48卷 1067-1078页

作者：谷思刘璐李安然张伟伟赵帅琪邢宇北京农学院植物科学技术学院林木分子设计育种高精尖创新中心北京102206

通过构建草莓不同发育时期果实的cDNA文库,筛选与促分裂原活化蛋白激酶FvM4K1互作的蛋白,探究FvM4K1参与调控果实发育的分子机理。以森林草莓(Fragraria vesca‘Hawaii 4’)为材料,提取不同发育时期果实的总RNA,建立cDNA文库,其库容为9.... 详细信息

通过构建草莓不同发育时期果实的cDNA文库,筛选与促分裂原活化蛋白激酶FvM4K1互作的蛋白,探究FvM4K1参与调控果实发育的分子机理。以森林草莓(Fragraria vesca‘Hawaii 4’)为材料,提取不同发育时期果实的总RNA,建立cDNA文库,其库容为9.6×10^(6) CFU,重组率96%,插入片段平均长度大于1000 bp。同时构建诱饵载体pGBKT7-FvM4K1,并检测其在酵母中无自激活活性。利用共转化方法,从文库中筛选到13个与FvM4K1互作的蛋白。通过Gene Ontology(GO)通路注释表明候选互作蛋白主要集中在细胞代谢过程及具有催化活性的分子过程。候选蛋白预测功能主要集中在调控花粉发育和花粉管伸长以及开花时间等。筛选到的13个蛋白编码基因在果实发育过程中表达模式不同,其中4个蛋白预测功能与草莓果实发育密切相关。

关键词：草莓森林草莓 cDNA文库 MAPK

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木聚糖衍生物及膜材料研究进展

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林业工程学报 2021年第1期6卷 1-12页

作者：彭锋饶俊北京林业大学林木分子设计育种高精尖创新中心林木生物质化学北京市重点实验室北京100083

木聚糖作为阔叶木和禾本科植物半纤维素的主要成分,因其来源广、可再生、可降解等特点,近年来成为备受关注的功能天然高分子。木聚糖基膜材料因气体阻隔性能优异、生物相容性好、环境友好等特性,在造纸、食品包装、涂层、生物医药材料... 详细信息

木聚糖作为阔叶木和禾本科植物半纤维素的主要成分,因其来源广、可再生、可降解等特点,近年来成为备受关注的功能天然高分子。木聚糖基膜材料因气体阻隔性能优异、生物相容性好、环境友好等特性,在造纸、食品包装、涂层、生物医药材料领域展现出巨大的应用潜力。但是木聚糖具有水溶性和成膜性较差、膜材料极易吸湿和力学强度低等缺陷,极大地限制了其规模化、商业化应用,因此,如何改善这些缺陷将是木聚糖研究与应用的热点和难点。木聚糖通过化学改性可赋予其刺激响应性、离子性、热塑性等新的特性,增加木聚糖的溶解性、疏水性和改善其可加工性能,是实现木聚糖在功能材料制备与应用的重要途径。笔者总结了近年来木聚糖醚化、酯化、氧化和接枝共聚改性的研究进展,探讨了反应条件对木聚糖衍生物取代度、产率和性能的影响;总结了近年来木聚糖基膜材料的制备策略与应用,如通过内增塑、外增塑、聚合物增强等实现了木聚糖基膜材料的高效制备,并探讨了其在应用过程中的优势及缺陷,为木聚糖今后研究和应用提供新的方法和思路。

关键词：木聚糖化学改性醚化酯化膜材料阻隔性能

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金鱼草AmPIF4基因克隆及调控花香物质合成释放功能分析

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西北植物学报 2021年第12期41卷 1994-2001页

作者：李彤邵慧慧韩嘉宁王雪莲胡增辉吴静北京农学院园林学院北京102206 北京林木分子设计育种高精尖创新中心北京102206

为了研究光敏因素互作因子(phytochrome-interacting factors,PIFs)在光诱导花香物质合成释放中的调控作用,该研究从‘马里兰’金鱼草(Antirrhinum majus‘Maryland True Pink’)中克隆PIF4转录因子(AmPIF4)编码区序列,进行生物信息学... 详细信息

为了研究光敏因素互作因子(phytochrome-interacting factors,PIFs)在光诱导花香物质合成释放中的调控作用,该研究从‘马里兰’金鱼草(Antirrhinum majus‘Maryland True Pink’)中克隆PIF4转录因子(AmPIF4)编码区序列,进行生物信息学分析、亚细胞定位和瞬时表达载体转化烟草,研究AmPIF4蛋白在细胞中的分布;并采用qRT-PCR技术检测AmPIF4基因的时空表达,运用病毒诱导的基因沉默(VIGS)验证基因功能,采用ATD-GC/MS技术测定花香成分含量。结果显示:(1)成功克隆到AmPIF4基因开放阅读框全长1497 bp,编码498个氨基酸;理论分子量55.58 kD,理论等电点6.44;同源比对分析显示AmPIF4蛋白与芝麻(Sesamum indicum)序列相似度最高。(2)AmPIF4蛋白主要定位于细胞核。(3)实时定量分析表明,AmPIF4基因在金鱼草各个时期及不同器官、组织中均有表达,而在花盛开期达到最高,其中在盛开期的叶片中表达量最高,但叶片与茎和萼片中的表达差异不显著。(4)基因沉默使金鱼草花瓣中AmPIF4基因的相对表达量较野生型显著下调约65%,且与阴性对照相比AmPIF4表达量也显著降低,同时使金鱼草花瓣中主要花香挥发物成分月桂烯、罗勒烯、苯甲酸甲酯较野生型分别显著增加了22%、24%、12%,花香释放量总体含量上升。研究表明,AmPIF4对花香物质合成释放有负调控作用,可能参与光对花香次生代谢的调控。

关键词：金鱼草光敏色素互作因子基因沉默光花香调控

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百合花香合成相关基因LiMCS的克隆、定位和表达特性研究

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西北农业学报 2022年第8期31卷 981-989页

作者：张茜罗景琳王浩楠李迎迎冷平生胡增辉北京林木分子设计育种高精尖创新中心北京102206 北京农学院园林学院北京102206

百合花香中含有大量的萜类化合物,2-C-甲基-D-赤藻糖醇-2,4-环二磷酸合成酶(MCS)是合成单萜的甲基赤藓糖醇磷酸(MEP)途径中的关键酶之一。为了进一步探究MCS在百合花香合成中的作用,克隆了‘西伯利亚’百合LiMCS基因,进行生物信息学分析... 详细信息

百合花香中含有大量的萜类化合物,2-C-甲基-D-赤藻糖醇-2,4-环二磷酸合成酶(MCS)是合成单萜的甲基赤藓糖醇磷酸(MEP)途径中的关键酶之一。为了进一步探究MCS在百合花香合成中的作用,克隆了‘西伯利亚’百合LiMCS基因,进行生物信息学分析,使用亚细胞定位确定该基因编码蛋白的位置,根据荧光定量PCR确定了该基因的时空表达模式。结果表明,LiMCS基因开放阅读框为669bp,编码222个氨基酸,与盾叶薯蓣的相似度最高。LiMCS蛋白定位于烟草叶表皮细胞的叶绿体中。LiMCS基因在‘西伯利亚’百合花的半开期表达量最高,花蕾期最低;在盛开期,该基因在花瓣中表达量最高,在其他部位表达量较低。结果证明LiMCS可能参与百合花香单萜类物质合成,这为后续利用基因工程手段调控百合花香释放奠定了理论基础。

关键词： ‘西伯利亚’百合 LiMCS 基因克隆表达分析

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金鱼草AmPDS基因克隆及调节类胡萝卜素合成功能分析

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西北植物学报 2020年第2期40卷 193-201页

作者：韩嘉宁邵慧慧胡增辉冷平生北京农学院园林学院北京102206 北京林木分子设计育种高精尖创新中心北京102206

八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)是类胡萝卜素进行生物合成途径中的关键酶。为了深入探究金鱼草PDS基因的功能,该研究以‘马里兰’金鱼草(Antirrhinum majus‘Maryland True Pink’)为材料,对其PDS基因(AmPDS)全长序列及... 详细信息

八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)是类胡萝卜素进行生物合成途径中的关键酶。为了深入探究金鱼草PDS基因的功能,该研究以‘马里兰’金鱼草(Antirrhinum majus‘Maryland True Pink’)为材料,对其PDS基因(AmPDS)全长序列及蛋白结构进行分析,并克隆了AmPDS基因片段;采用qRT-PCR技术检测AmPDS基因在不同时期及部位的相对表达水平,利用VIGS技术验证AmPDS基因功能,用紫外分光法测定叶片中各类色素含量。结果显示:(1)成功克隆AmPDS基因片段(500 bp);AmPDS基因cDNA全长1743 bp,编码580个氨基酸;其蛋白分子量为64.75 kD,理论等电点6.66;同源比对分析显示AmPDS基因与芝麻(Sesamum indicum)的序列相似性最高。(2)qRT-PCR分析表明,AmPDS基因在全株均有表达,且在全盛期花朵的上瓣和叶片中表达量最高。(3)构建pTRV2-AmPDS载体,建立了金鱼草的VIGS沉默体系,AmPDS基因沉默效率约为53%,与阴性对照相比叶片中各类色素含量均显著降低。研究认为,AmPDS基因是金鱼草类胡萝卜素生物合成途径中的关键基因,可作为金鱼草VIGS沉默体系的指示基因,为后续研究金鱼草其他基因功能奠定基础。

关键词：金鱼草八氢番茄红素脱氢酶基因沉默白化现象类胡萝卜素

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金鱼草AmHMGS基因的克隆及表达特征分析

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基因组学与应用生物学 2021年第4期40卷 1778-1785页

作者：邵慧慧王少杰韩嘉宁胡增辉冷平生北京农学院园林学院北京102206 北京林木分子设计育种高精尖创新中心北京102206

植物萜烯类化合物合成主要通过MVA和MEP途径,这些萜烯类化合物在植物生长、发育过程发挥着重要作用,萜烯类化合物在植物花香挥发成分中占有大比率。3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶基因(HMGS)是MVA途径中的关键酶基因,该酶作用主要是催... 详细信息

植物萜烯类化合物合成主要通过MVA和MEP途径,这些萜烯类化合物在植物生长、发育过程发挥着重要作用,萜烯类化合物在植物花香挥发成分中占有大比率。3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶基因(HMGS)是MVA途径中的关键酶基因,该酶作用主要是催化底物乙酰辅酶A和乙酰乙酰辅酶A生成3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A (HMG-CoA),是合成萜烯类化合物的前体限速酶。本研究以‘马里兰’金鱼草(Antirrhinum majus’Maryland’)为材料,克隆AmHMGS,基因全长1 383 bp,编码460个氨基酸,时空和组织特异性RT-qPCR表达分析表明,AmHMGS基因在花中表达量显著高于根茎叶;初开期的表达量最高;在盛花期的不同花器官中,Am HMGS基因在雄蕊和上瓣中表达量最高,与其它花器官中的表达量差异显著。用茉莉酸抑制剂不同浓度的菲尼酮处理盛开期金鱼草花瓣,RT-qPCR分析HMGS基因表达量结果表明,菲尼酮处理后能抑制该基因的表达。本研究的结果为明确AmHMGS基因在金鱼草中的表达模式,为今后研究该基因的功能及其在金鱼草花香释放中的信号作用奠定基础。

关键词： ‘马里兰’金鱼草基因克隆 AmHMGS 表达分析

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‘西伯利亚’百合LiJAR1基因的克隆及表达分析

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基因组学与应用生物学 2021年第11期40卷 3610-3619页

作者：王浩楠付宇辰马波张茜胡增辉冷平生北京农学院园林学院北京102206 北京林木分子设计育种高精尖创新中心北京102206

茉莉酸类物质(Jasmonates,JAs)是一类在植物体内广泛存在的激素,在植物次生代谢产物合成中起着重要的调控作用。花香作为植物重要的挥发性次生代谢产物,受到JAs信号的影响。为探究LiJAR1在百合单萜类挥发物合成中的作用,本研究以东方百... 详细信息

茉莉酸类物质(Jasmonates,JAs)是一类在植物体内广泛存在的激素,在植物次生代谢产物合成中起着重要的调控作用。花香作为植物重要的挥发性次生代谢产物,受到JAs信号的影响。为探究LiJAR1在百合单萜类挥发物合成中的作用,本研究以东方百合‘西伯利亚’(Lilium‘Siberia’)为试验材料,克隆LiJAR1基因,对其序列进行生物信息学分析,并通过荧光定量(RT-qPCR)技术进行时空表达分析。结果表明,LiJAR1基因全长1743 bp,编码580个氨基酸,具有典型的GH3特征结构域。LiJAR1相对表达量随着花朵的逐渐开放至盛开期而逐渐升高,转入衰败期开始降低。LiJAR1基因在内花被片中表达量最高,其次是叶和根,该基因在花柱、花丝、子房、花药中的相对表达量较低。本研究分析了LiJAR1基因的蛋白质结构功能,明确了该基因的表达模式,为后续研究其在百合单萜类挥发物释放中的信号作用奠定了基础。

关键词： ‘西伯利亚’百合 LiJAR1 茉莉酸类物质表达分析基因克隆

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水淹胁迫对4年生华北紫丁香生理指标的影响

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西部林业科学 2021年第4期50卷 101-106页

作者：白果冷平生胡增辉北京农学院林木分子设计育种高精尖创新中心/园林学院北京102206

为探索提高华北紫丁香耐涝性的途径和方法,筛选和培育耐涝性强的品系,以4 a生华北紫丁香成苗为材料,采用盆栽模拟水淹环境,经水淹0、1、4、7、10、16 d后,测定叶片含水量、相对电导率、丙二醛含量、可溶性糖含量、脯氨酸含量,以及过氧... 详细信息

为探索提高华北紫丁香耐涝性的途径和方法,筛选和培育耐涝性强的品系,以4 a生华北紫丁香成苗为材料,采用盆栽模拟水淹环境,经水淹0、1、4、7、10、16 d后,测定叶片含水量、相对电导率、丙二醛含量、可溶性糖含量、脯氨酸含量,以及过氧化物酶、过氧化氢酶活性和叶绿素荧光等指标,分析其对水淹胁迫的生理响应。结果显示,华北紫丁香叶片相对含水量随水淹胁迫时间延长逐渐降低,在7 d时出现较明显下降,而相对电导率和丙二醛含量则逐渐升高,表明伤害程度越来越重;F_(o)和F_(m)呈现先升高后降低的趋势,而F_(v)/F_(m)和Yield则逐渐下降;可溶性糖含量、过氧化物酶和过氧化氢酶活性呈现出先升高后降低的趋势,在7 d时达到最高;脯氨酸含量则持续升高。总体来看,华北紫丁香在胁迫10 d时,伤害指标变化的加剧和抗性指标的明显降低说明已产生不可逆损伤。由此可见,4 a生丁香成苗表现出一定的耐涝性,可耐受近7 d的水淹胁迫。

关键词：华北紫丁香水淹胁迫耐涝性生理指标

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