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中国药理学与毒理学杂志 2020年第10期34卷 750-755页

作者：来丽叶智翠娜傅娟玲赵鹏姚碧云北京大学公共卫生学院毒理学系食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室北京100191

目的研究硝酸镧〔La(NO3)3〕在引起人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞毒性中氧化应激和自噬的作用机制。方法 La(NO3)30.125,0.25,0.5,1.0,2.0和4.0 mmol·L^-1处理SK-N-SH细胞24 h,MTT法检测细胞存活率。La(NO3)3 0.5,1.0和2.0 mmol... 详细信息

目的研究硝酸镧〔La(NO3)3〕在引起人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞毒性中氧化应激和自噬的作用机制。方法 La(NO3)30.125,0.25,0.5,1.0,2.0和4.0 mmol·L^-1处理SK-N-SH细胞24 h,MTT法检测细胞存活率。La(NO3)3 0.5,1.0和2.0 mmol·L^-1处理细胞24 h,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)含量和线粒体膜电位,激光共聚焦显微镜检测细胞自噬体数量,Western印迹法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/Ⅰ比值,P62,Parkin和PTEN诱导假定激酶1(PINK1)蛋白表达水平。结果 MTT结果显示,与细胞对照组相比,La(NO3)3≤0.5 mmol·L^-1对细胞存活率无显著影响,La(NO3)31.0,2.0和4.0 mmol·L^-1组细胞存活率均显著降低(P<0.05,P<0.01)。流式细胞术结果显示,与细胞对照组相比,La(NO_3)_30.5 mmol·L^-1组细胞ROS含量无明显差异,La(NO3)31.0和2.0 mmol·L^-1组细胞ROS含量均显著升高(P<0.05,P<0.01),La(NO3)30.5,1.0和2.0 mmol·L^-1组线粒体膜电位均显著降低(P<0.05,P<0.01)。激光共聚焦结果显示,与细胞对照组相比,La(NO3)30.5,1.0和2.0 mmol·L^-1组细胞自噬体数量均显著增加(P<0.05,P<0.01)。Western印迹结果显示,与细胞对照组相比,La(NO3)30.5,1.0和2.0 mmol·L^-1组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、Parkin和PINK1蛋白表达均显著升高(P<0.05),P62蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论La(NO3)3可诱导SK-N-SH细胞发生氧化应激、线粒体功能障碍,同时可诱导SK-N-SH细胞产生细胞自噬和线粒体自噬。

关键词：硝酸镧 SK-N-SH细胞氧化应激线粒体膜电位自噬

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纳米α-HgS对秀丽隐杆线虫不同类型神经元的影响

纳米α-HgS对秀丽隐杆线虫不同类型神经元的影响

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中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：李璐迪李盈姿王旗北京大学公共卫生学院毒理学系国家中医药管理局中药配伍减毒重点研究室食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室

目的朱砂作为代表性的含汞矿物药,应用广泛、历史悠久。其主要成分为红色的α-HgS,含量高达96%以上。现代医学研究表明,朱砂具有安眠、抗焦虑等神经药理活性,长期用药又有一定的神经毒性作用。然而,目前关于朱砂发挥神经作用的分子机制... 详细信息

目的朱砂作为代表性的含汞矿物药,应用广泛、历史悠久。其主要成分为红色的α-HgS,含量高达96%以上。现代医学研究表明,朱砂具有安眠、抗焦虑等神经药理活性,长期用药又有一定的神经毒性作用。然而,目前关于朱砂发挥神经作用的分子机制尚不清楚。模式生物秀丽隐杆线虫具有遗传背景清楚、生命周期短、与人类同源性高、易于进行基因编辑等诸多优势,已经成为毒理学安全性研究的重要替代模型。本研究采用秀丽隐杆线虫作为研究对象,探究纳米α-HgS对线虫不同神经递质类型神经元的影响,以阐明朱砂发挥神经作用的分子机制。方法实验所用秀丽隐杆线虫株为绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)特异性标记γ-氨基丁酸能、多巴胺能、乙酰胆碱能、5-羟色胺能和谷氨酸能神经元的转基因线虫(EG1285、BZ555、LX929、GR1366和DA1240)。采用固体暴露的方式,将同步化后的L4期转基因线虫分别转移至铺有300μL不同剂量(0、250、500、1000μg/mL)纳米α-HgS的培养皿上暴露72 h。暴露结束后,先用S-basal溶液清洗线虫,然后将线虫转移至滴有0.4 M叠氮钠溶液的琼脂糖垫上。在FITC荧光通道下,用荧光显微镜观察线虫不同类型神经元绿色荧光的表达情况,采用Image J软件对荧光强度进行定量分析。各剂量组随机选取20条线虫进行荧光强度测定,实验独立重复3次。结果与对照组相比,暴露于纳米α-HgS 72 h后,EG1285突变株各剂量组线虫均出现γ-氨基丁酸能神经元胞体缩小、树突断裂和神经元缺失等情况,神经元相对荧光强度显著降低;DA1240突变株250、500μg/mL组线虫头部谷氨酸能神经元的相对荧光强度间未见统计学差异,而1000μg/mL组线虫头部的谷氨酸能神经元明显缺失,相对荧光强度显著降低;BZ555、LX929和GR1366突变株各剂量组线虫的多巴胺能、乙酰胆碱能、5-羟色胺能神经元的相对荧光强度均无明显改变。结论纳米α-HgS暴露72 h主要损伤秀丽隐杆线虫的γ-氨基丁酸能和谷氨酸能神经元,而对多巴胺能、乙酰胆碱能、5-羟色胺能神经元无明显作用。

关键词：纳米α-HgS 秀丽隐杆线虫神经元神经递质

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野马追内酯A和野马追内酯B在人肝微粒体中的羧酸酯酶和细胞色素P450代谢特征研究

野马追内酯A和野马追内酯B在人肝微粒体中的羧酸酯酶和细胞色素P4...

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中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：李盈姿刘晓艳李璐迪王旗北京大学公共卫生学院毒理学系国家中医药管理局中药配伍减毒重点研究室食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室

目的野马追内酯A(eupalinolide A,EA)和野马追内酯B(eupalinolide B,EB)为一对同分异构体,是中药野马追中主要的倍半萜内酯类化合物,具有抗炎和抗肿瘤活性,有望被开发为创新药物,但目前EA和EB的代谢特征尚不明确。本研究拟基于羧酸酯酶... 详细信息

目的野马追内酯A(eupalinolide A,EA)和野马追内酯B(eupalinolide B,EB)为一对同分异构体,是中药野马追中主要的倍半萜内酯类化合物,具有抗炎和抗肿瘤活性,有望被开发为创新药物,但目前EA和EB的代谢特征尚不明确。本研究拟基于羧酸酯酶催化的水解作用和细胞色素P450(cytochromeP450,CYP450)介导的氧化作用,探究EA和EB的代谢稳定性、酶促反应动力学特征,并确定该对同分异构体CYP450的代谢酶表型。方法采用人肝微粒体体外温孵法,分别探究羧酸酯酶和细胞色素P450介导的代谢稳定性和酶促反应动力学特征。先用定量构效关系(quantitative structure-activity relationship,QSAR)模型和分子对接预测其CYP450表型,并通过人源重组CYP酶实验验证,应用归一化法计算五种主要CYP450酶亚型(1A2、2C9、2C19、2D6和3A4)对EA和EB代谢的相对贡献率。结果 EA和EB羧酸酯酶水解作用的t1/2均小于CYP450氧化作用的t1/2(EA:26.70 vs. 111.36 min;EB:42.66 vs. 94.50min),EA水解和氧化作用的CLint分别为65.63和8.90[mL/(min·kg)],EB水解和氧化作用的CLint分别为40.89和18.44[mL/(min·kg)]。此外,EA水解及氧化动力学参数Km和Vmax分别为63.86和41.02μM、7945.00和1497.67μmol/min/mg蛋白质,EB水解及氧化动力学参数Km和Vmax分别为104.86和10.68μM、7567.00和1471.38μmol/min/mg蛋白质。QSAR模型和分子对接结果显示,EA和EB可与多种CYP450亚型结合。经人源重组CYP酶实验验证,五种主要的CYP同工酶均参与EA和EB的代谢,其中,CYP3A4对EA和EB的代谢贡献率最高,分别为66.20%和58.18%。结论 EA和EB的代谢特征具有立体选择性,两者代谢消除速率均较快,其主要代谢途径为羧酸酯酶的水解作用。EA和EB可被多种CYP450酶亚型代谢,其中CYP3A4是主要的代谢酶。

关键词：野马追内酯A 野马追内酯B 人肝微粒体羧酸酯酶细胞色素P450

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基于分子探针“钩钓”技术的朱砂作用靶蛋白识别研究

基于分子探针“钩钓”技术的朱砂作用靶蛋白识别研究

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中国毒理学会第十一次全国毒理学大会

作者：李璐迪杨咪咪曾克武王旗北京大学公共卫生学院毒理学系北京大学药学院天然药物学系国家中医药管理局中药配伍减毒重点研究室食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室

目的朱砂(cinnabar)是一种含汞矿物药,其主要成分为ɑ-硫化汞(ɑ-HgS,含量>95%),已有2000多年的临床用药史,作为镇静安神用药疗效显著,在中成药中的用药频率相当高(约为10%),含有朱砂的古方名药如安宫牛黄丸、牛黄清心丸等,现仍在临... 详细信息

目的朱砂(cinnabar)是一种含汞矿物药,其主要成分为ɑ-硫化汞(ɑ-HgS,含量>95%),已有2000多年的临床用药史,作为镇静安神用药疗效显著,在中成药中的用药频率相当高(约为10%),含有朱砂的古方名药如安宫牛黄丸、牛黄清心丸等,现仍在临床医学中发挥重要作用。然而,过量或长期使用朱砂导致神经毒性的不良反应时有发生。目前尚未阐明朱砂神经药理/毒性作用的分子机制,本研究旨在发现HgS作用的靶蛋白并研究其神经毒性分子机制,为朱砂合理用药提供新的科学依据。方法设计并合成一种生物素标记的HgS探针(bio-HgS),应用亲和纯化技术捕获和鉴定HgS作用的靶蛋白。然后用竞争性下拉(Pull down)实验、细胞热位移分析(CETSA)和表面等离子体共振(SPR)技术,验证HgS与靶蛋白的结合能力,分别用LC-MS/MS和分子对接技术对HgS和靶蛋白的结合位点和结合方式进行分析。为探索HgS是否通过与靶蛋白的作用产生神经毒性,应用秀丽隐杆线虫(***,简称线虫)模型,分别对野生型和靶蛋白基因敲除线虫,经HgS处理后,比较其在一系列神经行为方面的变化差异。结果 S期激酶相关蛋白1(Skp1)被确定为HgS的作用靶点。此外,发现HgS通过"Cys-HgS-Cys"模式共价结合Skp1,特别是在半胱氨酸位点Cys62和Cys120。暴露于高剂量(1000μg·mL-1)的HgS抑制了野生型线虫的运动、排便、产卵和联想学习行为,但对Skp1同源基因敲除的线虫没有显著影响。结论本研究成功识别、鉴定HgS作用的靶蛋白为Skp1,并发现HgS抑制线虫的神经行为须有Skp1的参与,从靶蛋白角度阐释HgS的神经作用分子机制。

关键词：朱砂硫化汞分子探针靶蛋白神经毒性

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医工融合在预防医学专业营养与食品卫生学教学中的应用

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中华医学教育探索杂志 2022年第10期21卷 1301-1305页

作者：樊蕊朱文丽徐美虹北京大学公共卫生学院营养与食品卫生学系北京100191 食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室北京100191

本文就医工融合在《营养与食品卫生学》“食品卫生”教学改革中应用的价值与意义进行探讨,同时重点阐述了本校践行医工融合的教育理念。将食品科学融入在“食品卫生”的教学革新的方案中,借助食品科学对于食品卫生乃至整个产业链的理解... 详细信息

本文就医工融合在《营养与食品卫生学》“食品卫生”教学改革中应用的价值与意义进行探讨,同时重点阐述了本校践行医工融合的教育理念。将食品科学融入在“食品卫生”的教学革新的方案中,借助食品科学对于食品卫生乃至整个产业链的理解和运用,取“食品科学”之“长”,补“营养与食品卫生学”之“短”,完善教程体系,优化“双师型”师资配置,改进教学方式。采用传统教育方式与虚拟现实等现代化技术相结合,使之达到理论与应用相呼应、培养具备新时代该领域岗位胜任力的复合型高素质人才的培养目标。

关键词：营养与食品卫生学食品科学医工融合食品卫生食品安全

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不同体育锻炼水平与老年人饮水行为之间的关系研究

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中国食物与营养 2022年第10期28卷 80-84页

作者：张玥张娜张建芬周明珠王行芦俊博马冠生北京大学公共卫生学院营养与食品卫生学系北京100191 食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室北京100191

目的:了解老年人的水及饮料饮用量、饮水次数等饮水行为情况,分析饮水行为与体育锻炼量的关系,为开展老年人饮水健康宣教提供科学依据。方法:于2019年9-11月采用方便抽样的方法,在中国广州、合肥、济南、南昌、太原5个城市招募符合纳排... 详细信息

目的:了解老年人的水及饮料饮用量、饮水次数等饮水行为情况,分析饮水行为与体育锻炼量的关系,为开展老年人饮水健康宣教提供科学依据。方法:于2019年9-11月采用方便抽样的方法,在中国广州、合肥、济南、南昌、太原5个城市招募符合纳排标准的老年人共551名开展调查。采用7 d 24 h饮水记录法,实时记录老年人每次饮水的种类、时间、饮水量;用调查问卷收集老年人体育锻炼情况并计算体育锻炼量,根据体育锻炼量的三分位间距将老年人划分为Q1、Q2、Q3三组;使用卡方检验、Kruskal-Wallis H秩和检验的统计方法进行老年人饮水行为分析。结果:共发出问卷551份,回收551份,回收率为100.0%,其中有效问卷524份,有效率为95.1%。参与调查的老年人每日饮水量中位数为1241 mL,饮水达到推荐量的人占比为26.5%。Q1、Q2、Q3组老年人的每日饮水量中位数分别为1189、1401、1461 mL,白水饮用量中位数为733、935、1021 mL,组间差异均有统计学意义(H=48.840,P<0.001;H=41.367,P<0.001)。饮水达到推荐量的比例Q1组为13.2%、Q2组为37.7%、Q3组为32.5%,差异有统计学意义(χ2=31.942,P<0.001)。老年人每日饮水次数中位数为8.1次,Q1组每日7.6次、Q2组每日8.6次、Q3组每日8.7次,差异有统计学意义(H=23.385,P<0.001)。老年人次均饮水量中位数为184 mL,其中Q1组每次176 mL、Q2组194 mL、Q3组190 mL,差异有统计学意义(H=9.485,P=0.009)。分别对每日饮水量、白水饮用量、饮水次数和次均饮水量与体育锻炼量进行回归分析,均存在显著线性关系,标准化系数分别为0.265、0.249、0.017、0.161(P<0.05)。结论:体育锻炼量较多的老年人每日饮水量与白水饮用量较高,饮水次数较多,次均饮水量较高。老年人存在饮水不足现象,需进行健康宣教,帮助老年人形成健康饮水行为。

关键词：老年人饮水行为饮水量体育锻炼

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营养素养调查现况及评价工具研究进展

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中华预防医学杂志 2020年第10期54卷 1146-1151页

作者：谭雨薇周雅琳许雅君北京大学公共卫生学院营养与食品卫生学系食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室100191

营养素养是健康素养的重要组成部分,目前我国针对营养素养的评价研究处于起步阶段,针对特定人群如儿童青少年、老年人、孕产妇的营养素养评价工具研究相对较少。本文对营养素养概念、近几年国内外针对一般人群和特殊人群(儿童青少年、... 详细信息

营养素养是健康素养的重要组成部分,目前我国针对营养素养的评价研究处于起步阶段,针对特定人群如儿童青少年、老年人、孕产妇的营养素养评价工具研究相对较少。本文对营养素养概念、近几年国内外针对一般人群和特殊人群(儿童青少年、老人、孕产妇)营养素养相关评价工具及其维度、信效度和应用范围进行综述,结合目前我国所面临的营养问题,为今后针对不同人群营养素养工具的开发提供思路。

关键词：营养评价健康素养研究进展

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模拟一次快速静脉注射和静脉滴注体外染毒模型的构建

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毒理学杂志 2021年第2期35卷 104-109页

作者：付大维闫赖赖陈洁付娟玲姚碧云赵鹏郝卫东北京大学公共卫生学院毒理学系食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室北京100191 北京大学公共卫生学院卫生检验学系北京100191

目的以硝酸镧La(NO_(3))_(3)为受试物,构建模拟一次快速静脉注射和静脉滴注2种体外染毒模型。方法自主设计由储液室、染毒室和废液室组成的染毒装置,由蠕动泵软管连接各室以实现液体单向和定速传输。根据预设的毒代动力学参数,构建模拟... 详细信息

目的以硝酸镧La(NO_(3))_(3)为受试物,构建模拟一次快速静脉注射和静脉滴注2种体外染毒模型。方法自主设计由储液室、染毒室和废液室组成的染毒装置,由蠕动泵软管连接各室以实现液体单向和定速传输。根据预设的毒代动力学参数,构建模拟一次快速静脉注射和静脉滴注的体外染毒模型。以电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定不同时间点染毒室中La(NO_(3))_(3)含量。利用PKsolver和GraphPad Prism 7软件对La(NO_(3))_(3)浓度-时间曲线进行分析,通过比较毒代动力学参数实测值和理论值对2种染毒模型进行评估。结果2种体外染毒模型的消除速率常数、半衰期、清除率和曲线下面积等参数实测值均与理论值接近,拟合系数R^(2)均>0.9900。结论由蠕动泵连接储液室、染毒室和废液室组成的染毒装置可体外模拟一次快速静脉注射和静脉滴注2种染毒模型。本研究为优化体外毒性测试染毒方法提供了初步实验依据,对基于体外毒性测试的化学品风险评估具有一定理论和实际意义。

关键词：体外染毒模型一次快速静脉注射静脉滴注毒代动力学硝酸镧

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海口市妊娠期女性不同时间段饮水行为分析

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中国妇幼健康研究 2023年第9期34卷 75-81页

作者：王行张娜张建芬芦俊博林国天张帆马冠生北京大学公共卫生学院营养与食品卫生学系北京100191 食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室北京100191 海南医学院公共卫生与全健康国际学院海南海口571199

目的分析海口市妊娠期女性不同时间段的饮水行为,为指导妊娠期女性健康饮水、制定适宜饮水计划提供科学依据。方法本研究为前瞻性观察研究设计,于2019年5月至2020年8月期间在海口市妇幼保健院门诊招募妊娠期女性142人。调查对象需分... 详细信息

目的分析海口市妊娠期女性不同时间段的饮水行为,为指导妊娠期女性健康饮水、制定适宜饮水计划提供科学依据。方法本研究为前瞻性观察研究设计,于2019年5月至2020年8月期间在海口市妇幼保健院门诊招募妊娠期女性142人。调查对象需分别在妊娠早、中、晚期产检前7天采用《7天24小时饮水行为调查问卷》及带有刻度值并精确至10mL的量具,详细记录每天八个时间段内每次饮水的类型及饮用量。结果调查对象每日饮水量随妊娠早、中、晚期逐渐升高(1 339mL vs.1 481mL vs.1 585mL,χ^(2)=134.155,P<0.05);上午饮水量(445mL vs.402mL vs.480mL)、下午饮水量(389mL vs.476mL vs.564mL)、晚上饮水量(522mL vs.610mL vs.635mL)、就餐时饮水量(578mL vs.579mL vs.604mL)、非就餐时饮水量(780mL vs.900mL vs.978mL)均在妊娠晚期最高,差异有统计学意义(χ^(2)值介于19.233~139.099之间,P<0.05);白水是妊娠早、中、晚期最主要的饮水类型;妊娠早、中、晚期八个时间段饮水行为中,早餐前饮水量均为最低(χ^(2)值介于370.674~640.912之间,P<0.05);上午及下午饮水量均低于晚上(χ^(2)值介于145.113~204.396之间,P<0.05);就餐时饮水量均低于非就餐时(Z值介于10.074~10.338之间,P<0.05)。结论本研究中,妊娠期女性饮水量在妊娠早期最低,妊娠晚期最高,且未能做到主动规律饮水。应结合妊娠期女性身体需要特点,制定适宜饮水策略,促进健康饮水。

关键词：妊娠期孕妇饮水量饮水行为时间段

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大气污染物PM2.5缺失数据插值方法的比较研究:基于北京市数据

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环境与职业医学 2020年第4期37卷 299-305页

作者：曹凯鑫汤猛猛葛建鸿李泽康王晓芸李国星魏雪涛北京大学公共卫生学院北京100191 北京大学食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室北京100191

[背景]地面监测站点大气污染物数据越来越多地被应用到环境流行病学个体暴露评估中。鉴于大气监测等实时数据缺失信息无法弥补,利用历史数据进行相关研究时,不同填补方法引起的预测误差将影响研究者对结果的判断。[目的]综合比较6种插... 详细信息

[背景]地面监测站点大气污染物数据越来越多地被应用到环境流行病学个体暴露评估中。鉴于大气监测等实时数据缺失信息无法弥补,利用历史数据进行相关研究时,不同填补方法引起的预测误差将影响研究者对结果的判断。[目的]综合比较6种插值方法在大气污染物PM2.5数据中的填补效果,评估每种插值方法平均预测误差大小,为暴露评估中测量误差大小提供线索。[方法]基于2016年北京市35个监测站点PM2.5数据,选取3个有代表性的评价站点(东四、密云和房山),基于4个统计量(中位绝对误差、中位相对误差、均方误差和均方根误差)进行6种插值方法(日均值、最近监测站点、多重线性回归、多重插补、反距离权重和克里金插值法)插值效果的比较研究。[结果]6种插值方法中,在"东四"站点,多重线性回归插值法效果最优,其次为反距离权重插值法,日均值插值法最差;均方根误差分别为6.67、8.19和52.19;日均值插值法中位绝对误差为19.00,其余各方法中位绝对误差均在4以内。"密云"站点多重插补法插值效果最优,其次为克里金插值法,日均值插值法最差;均方根误差分别为8.34、11.76和42.53;日均值插值法中位绝对误差为16.00,其余各方法中位绝对误差均在5以内。"房山"站点克里金插值法效果最优,其次为多重插补法,日均值插值法最差;均方根误差分别为18.74、22.73和50.93;日均值插值法中位绝对误差为27.50,其余各方法中位绝对误差均在10以内。3个站点综合分析,克里金插值法最优,其次为多重插补法,日均值插值法最差;均方根误差分别为13.65、14.77和48.74;日均值插值法中位绝对误差为19.00,其余各方法中位绝对误差均在5以内。[结论]6种插值方法中,克里金插值法和多重插补法插值效果较优,日均值插值法效果最差;克里金插值法稳定性高于反距离权重插值法。除日均值插值法外,各方法平均预测误差在5以内。监测点密度、地形等相关因素对插值效果有很大影响。

关键词：缺失值填补插值方法交叉验证大气污染物克里金插值法多重插补法

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