检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药房 2009年第25期20卷 1923-1924页

作者：刘玉清李一石中国医学科学院北京协和医学院阜外心血管病医院临床药理中心卫生部心血管药物临床研究重点实验室北京市100037

目的:为药物临床试验机构提高新药Ⅰ～Ⅳ期临床试验的质量,保障受试者权益,增强核心竞争力提供参考。方法:将《药物临床试验质量管理规范》(GCP)的指导原则和《检测和校准实验室能力的通用要求》(ISO/IEC17025)质量管理标准优势互补,贯... 详细信息

目的:为药物临床试验机构提高新药Ⅰ～Ⅳ期临床试验的质量,保障受试者权益,增强核心竞争力提供参考。方法:将《药物临床试验质量管理规范》(GCP)的指导原则和《检测和校准实验室能力的通用要求》(ISO/IEC17025)质量管理标准优势互补,贯穿于药物临床试验质控的全过程。结果与结论:将GCP的原则和ISO/IEC17025质量管理标准结合,建立既符合国际规范,又符合我国国情的质量管理及督察体制,有利于全面提高药物临床试验研究质量,增强我国药物临床试验机构的核心竞争力。

关键词：药物临床试验机构核心竞争力药物临床试验质量管理规范 ISO/IEC17025质量管理标准

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骨髓间充质干细胞经大鼠冠状动脉内移植的可行性

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基础医学与临床 2009年第1期29卷 69-73页

作者：何庚戌要彤张浩张晓玲胡盛寿解放军第251医院胸心血管外科河北北方学院第一附属医院心电图河北张家口075000 中国协和医科大学阜外心血管病医院卫生部再生医学重点实验室北京100037

目的研究骨髓间充质干细胞经冠状动脉内移植的安全性及可行性。方法左侧开胸结扎SD大鼠左冠状动脉,2周后取心脏建立Langerndorff模型。将CM-DiI标记的骨髓间充质干细胞悬液注入主动脉根部,同时收集右心房回流的液体,离心后通过流式细胞... 详细信息

目的研究骨髓间充质干细胞经冠状动脉内移植的安全性及可行性。方法左侧开胸结扎SD大鼠左冠状动脉,2周后取心脏建立Langerndorff模型。将CM-DiI标记的骨髓间充质干细胞悬液注入主动脉根部,同时收集右心房回流的液体,离心后通过流式细胞仪计数细胞数量。观察是否有细胞经冠状静脉回流及数量比例。并在不同时间测LVSP、LVDP、±dp/dt、心率,评价其安全性。在体实验中取心梗后2周的大鼠,经左心室-主动脉途径将细胞悬液注射到临时阻断的主动脉根部,分别在移植后1及24 h和1及4周取材观察细胞在心脏内的位置及细胞的迁移情况。结果离体实验发现经冠状动脉内注射骨髓间充质干细胞90%以上的细胞在心肌组织内存留,移植后LVSP、LVDP、±dp/dt、心率没有明显变化。在体内实验中发现细胞移植后早期大部分细胞分布在心外膜下心肌组织内,在心内膜下组织内较少细胞分布,而且大部分细胞在正常心肌组织内,只有少量在心梗区域。而在细胞移植后1-4周存活的细胞多在心肌梗死及交界区组织内,在正常组织内很少有移植细胞存在。结论经冠状动脉途径进行细胞移植是安全可行的。

关键词：心肌梗死细胞移植骨髓间充质干细胞

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心脏磁共振在体示踪移植细胞的可行性研究

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放射学实践 2009年第9期24卷 1007-1011页

作者：何庚戌要彤张浩胡盛寿张晓玲解放军251医院心胸外科河北075000 北方学院第一附属医院张家口075000 中国协和医科大学阜外心血管病医院卫生部心血管疾病再生医学重点实验室北京100037

目的:寻找一种能够对移植细胞进行在体示踪的标记方法,为移植细胞存留、迁移提供重要观察手段。方法:从中华小型猪髂骨处抽取骨髓,体外培养扩增骨髓间充质干细胞(MSCs)。将SPIO和MSCs共同孵育培养36h。普鲁士蓝染色评价细胞的标记效率;... 详细信息

目的:寻找一种能够对移植细胞进行在体示踪的标记方法,为移植细胞存留、迁移提供重要观察手段。方法:从中华小型猪髂骨处抽取骨髓,体外培养扩增骨髓间充质干细胞(MSCs)。将SPIO和MSCs共同孵育培养36h。普鲁士蓝染色评价细胞的标记效率;通过MTT比色实验评价SPIO对细胞生长能力的影响;台盼蓝染色检验标记后细胞的活性;使用Costar Transwell方法评价铁离子对细胞迁移能力的影响;用细胞分化诱导液培养标记后的细胞评价其向成脂肪细胞和成骨细胞的分化能力。在体内实验中将SPIO标记或未标记的自体MSCs注射到心肌内,通过心脏磁共振检查对移植细胞进行在体示踪观察,取材动物心脏行病理检查观察移植细胞的存活、存留。结果:MSCs经铁离子标记后普鲁士蓝染色阳性率在98%以上,可见蓝色颗粒位于细胞浆内,标记细胞电镜切片可见高密度铁颗粒位于细胞浆内。随着培养液中SPIO浓度的增加细胞增殖能力没有明显改变;标记后98%的细胞保持活性;SPIO标记后的细胞保持原有的形态,可继续培养、传代;SDF-1和VEGF诱导的迁移实验发现标记细胞迁移能力没有降低;铁离子标记后细胞仍可向成脂肪细胞和成骨细胞分化。注射到心肌内的SPIO标记的MSCs可通过心脏磁共振检查进行在体示踪,动态观察显示SPIO标记细胞在磁共振图像上表现为低信号,并且在移植后4周仍可成像。病理学检查可以看到移植细胞呈普鲁士蓝染色阳性,并和影像学有很好的一致性。结论:临床使用的SPIO磁共振对比剂可以安全、有效地标记MSCs,心脏磁共振检查可以实现SPIO标记的移植细胞的在体示踪。

关键词：细胞移植干细胞对比剂磁共振成像心肌梗死

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洛伐他汀抑制大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的实验研究

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中华老年多器官疾病杂志 2009年第3期8卷 259-264,268页

作者：徐瑞霞陈曦陈静海朱伟铨韩瑜邓琳子丛祥凤中国医学科学院阜外心血管病医院中心实验室北京市100037 卫生部心血管疾病再生医学重点实验室

目的体外以缺氧无血清条件模拟心肌梗死后的心脏缺血微环境,研究洛伐他汀是否能够抑制缺氧无血清引起的骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡。方法以Hoechst33342染色法及Annexin V/PI流式细胞术检测洛伐他汀的抗凋亡作用,检测线粒体膜电位变化... 详细信息

目的体外以缺氧无血清条件模拟心肌梗死后的心脏缺血微环境,研究洛伐他汀是否能够抑制缺氧无血清引起的骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡。方法以Hoechst33342染色法及Annexin V/PI流式细胞术检测洛伐他汀的抗凋亡作用,检测线粒体膜电位变化,进一步采用Western blot方法检测洛伐他汀对细胞色素C释放及caspase-3活化的影响。结果洛伐他汀0.01～1μmol/L能够有效地抑制缺氧无血清引起的MSCs凋亡。洛伐他汀抑制线粒体凋亡途径,增强线粒体膜电位水平、抑制细胞色素C释放,降低caspase-3活化水平。结论洛伐他汀能够抑制线粒体途径介导的凋亡,阻止caspase-3的活化,发挥抗缺氧无血清引起的MSCs凋亡,为提高移植干细胞的存活率提供了一种可能有效的干预措施。

关键词：洛伐他汀间充质干细胞细胞凋亡,存活率

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低强度激光照射对大鼠骨髓间充质干细胞生物学性状影响的实验研究

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中国激光医学杂志 2009年第4期18卷 205-208,269页

作者：侯剑峰张浩袁昕符韶鹏魏英杰胡盛寿中国医学科学院阜外心血管病医院心外科北京协和医学院心血管病研究所卫生部心血管病再生医学重点实验室北京市100037

目的探讨低强度635nm激光照射对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BM-SCs)增殖及分泌功能的影响。方法体外培养的第2代SD大鼠BMSCs以InGaAsP半导体激光(635nm,60mW)不同能量密度(0,0.5,1.0,2.0和5.0J/cm2)照射,24h后酶联免疫吸附法(ELISA)测定上清液中血管内皮生长因子(VEGF)及神经生长因子(NGF)含量;BrdU法绘制BMSCs增殖曲线。结果低强度635nm半导体激光照射能够促进体外培养的大鼠BMSCs的增殖,最佳能量密度为0.5J/cm2;大鼠BMSCs能够在体外培养条件下分泌VEGF、NGF;5.0J/cm2低强度半导体激光照射能够显著促进BMSCs分泌VEGF、NGF。结论635nm波长低强度半导体激光照射能够显著促进体外培养的大鼠BMSCs增殖及分泌功能,且与照射剂量有关。

关键词：骨髓间充质干细胞激光血管内皮生长因子神经生长因子

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左心室肥厚的影响因素及机制的研究进展

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中国分子心脏病学杂志 2009年第1期9卷 56-59页

作者：辛颖(综述) 宋晓东惠汝太(审校) 中国医学科学院心血管病研究所北京协和医学院阜外心血管病医院卫生部心血管疾病再生医学重点实验室北京市100037

生理和病理条件下,血流动力学超负荷会引起左心室肥厚。目前尚未完全阐明引起心肌肥厚的主要的刺激因素是心脏自身机械拉伸,还是神经体液因子,抑或是两者的共同作用所致。刺激因素进入细胞后,通过引起细胞内生化改变导致第二信使和第三... 详细信息

生理和病理条件下,血流动力学超负荷会引起左心室肥厚。目前尚未完全阐明引起心肌肥厚的主要的刺激因素是心脏自身机械拉伸,还是神经体液因子,抑或是两者的共同作用所致。刺激因素进入细胞后,通过引起细胞内生化改变导致第二信使和第三信使的激活,进一步调节转录,激活多种心肌肥厚相关基因的表达。左心室肥厚时会出现一系列的结构改变,包括心肌细胞肥大、间质结缔组织增生以及冠状循环微血管稀少。本文参考近年来相关文献,总结左心室肥厚的影响因素及机制研究方面的发展动态,旨在为读者阐明左心室肥厚的影响因素及机制的总体情况,提供可参考的研究靶点。

关键词：肥厚左心室心肌细胞心脏

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心脏MRI在体示踪移植细胞的可行性研究

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中国临床医学影像杂志 2009年第6期20卷 418-422页

作者：何庚戌要彤张浩胡盛寿宋鹏张晓玲解放军第251医院胸心血管外科河北张家口075000 河北省北方学院第一附属医院河北张家口075000 中国协和医科大学阜外心血管病医院卫生部心血管疾病再生医学重点实验室北京100037

目的:寻找一种能够对移植细胞进行在体示踪的标记方法,为细胞移植的动物和临床实验中细胞的存留、迁移提供重要手段。方法:从中华小型猪髂骨处抽取骨髓,体外培养扩增MSCs。将SPIO和MSCs共同孵育培养36h。普鲁士蓝染色评价细胞的标记效率... 详细信息

目的:寻找一种能够对移植细胞进行在体示踪的标记方法,为细胞移植的动物和临床实验中细胞的存留、迁移提供重要手段。方法:从中华小型猪髂骨处抽取骨髓,体外培养扩增MSCs。将SPIO和MSCs共同孵育培养36h。普鲁士蓝染色评价细胞的标记效率;通过MTT比色实验评价SPIO对细胞生长能力的影响;台盼蓝染色检验标记后细胞的活性;使用CostarTranswell方法评价铁离子对细胞迁移能力的影响;用细胞分化诱导液培养标记后的细胞评价其向成脂肪细胞和成骨细胞的分化能力。在体内实验中将SPIO标记或未标记的自体MSCs注射到心肌或冠状动脉内,通过心脏磁共振检查对移植细胞进行在体示踪观察。在细胞移植后不同时期取材动物心脏切片进行普鲁士蓝染色观察移植细胞。结果:MSCs经铁离子标记后普鲁士蓝染色阳性率在98%以上,可见蓝染颗粒位于细胞浆内,标记细胞电镜切片观察可见高密度铁颗粒位于细胞浆内。MTT比色实验发现随着培养液中SPIO浓度的增加细胞增殖能力没有明显改变;台盼蓝染色显示标记后98%的细胞保持活性;细胞经SPIO标记后仍可保持原有的细胞形态,可继续培养、传代。细胞迁移试验发现细胞标记后对SDF-1和VEGF诱导的迁移能力没有明显的减低。铁离子标记后细胞仍可向成脂肪细胞和成骨细胞分化。注射到心肌或冠状动脉内的SPIO标记的MSCs可通过心脏磁共振检查进行在体示踪,动态观察显示SPIO标记细胞在磁共振影像上表现为低密度灶影或信号缺失,并且在移植后4周仍可显影。病理学检查可以看到移植细胞呈普鲁士蓝染色阳性,并和影像学有很好的一致性。结论:临床使用的SPIO磁共振对比剂可以安全、有效的标记MSCs。利用心脏磁共振对移植的标记细胞可以实现移植细胞的在体示踪观察。此标记方法结合心脏磁共振技术为移植细胞的在体示踪和细胞存留、迁移的研究提供了良好的手段。

关键词：心脏病磁共振成像

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皮肤桥蛋白研究进展

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医学研究杂志 2009年第11期38卷 23-26页

作者：刘晓艳魏英杰胡盛寿中国医学科学院/北京协和医学院阜外心血管病医院/卫生部心血管疾病再生医学重点实验室 100037

皮肤桥蛋白（dermatopontin，DPT）是1989年Neame等人在提纯牛皮肤的硫酸皮肤素蛋白多糖时和硫酸皮肤素蛋白多糖共同提取出来的，并被称作“22kDa蛋白质”。1993年在猪的皮肤中发现了“22kDa蛋白质”的同族体，因其富含酪氨酸残基故将... 详细信息

皮肤桥蛋白（dermatopontin，DPT）是1989年Neame等人在提纯牛皮肤的硫酸皮肤素蛋白多糖时和硫酸皮肤素蛋白多糖共同提取出来的，并被称作“22kDa蛋白质”。1993年在猪的皮肤中发现了“22kDa蛋白质”的同族体，因其富含酪氨酸残基故将其称为“富含酪氨酸的酸性基质蛋白”。

关键词：硫酸皮肤素蛋白多糖基质蛋白蛋白质酪氨酸

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降低医用牛心包致热原性研究

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生物医学工程与临床 2009年第2期13卷 81-84页

作者：武海波周建业胡盛寿郑可菲汪胜中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院卫生部心血管疾病再生医学重点实验室北京100037

目的比较不同浓度酒精溶液洗脱医用牛心包中残留戊二醛的效果,通过酒精溶液洗脱作用降低其致热反应。方法牛心包经戊二醛固定后,再用酒精溶液处理,未经酒精溶液处理组作为对照组。分别采用50%、60%、70%、80%、90%酒精溶液对医用牛心包... 详细信息

目的比较不同浓度酒精溶液洗脱医用牛心包中残留戊二醛的效果,通过酒精溶液洗脱作用降低其致热反应。方法牛心包经戊二醛固定后,再用酒精溶液处理,未经酒精溶液处理组作为对照组。分别采用50%、60%、70%、80%、90%酒精溶液对医用牛心包进行浸泡洗脱处理,应用气相色谱法测定洗脱液中戊二醛的浓度,比较不同浓度酒精溶液洗脱戊二醛效果;并采用2005年版《中华人民共和国药典》附录热原检查的方法,检测经60%、70%、90%不同浓度酒精溶液洗脱后牛心包致家兔体温升高的差别。结果洗脱实验中,60%和70%酒精溶液对医用牛心包冲洗后,洗脱液中戊二醛含量分别达18.21‰±0.14‰和11.91‰±0.09‰,优于其余浓度组(n=3,P<0.01),60%酒精溶液组优于70%酒精溶液组(n=3,P<0.05);热原实验,60%、70%、90%酒精溶液处理组、戊二醛对照组家兔体温升高值分别为0.5℃、0.6℃、0.9℃、0.8℃,其中以60%的酒精溶液效果最优,与对照组相比差异有统计学意义(n=3,P<0.05),其余两组与对照组比较差异无统计学意义。结论60%酒精溶液处理可以有效洗脱医用牛心包中残留戊二醛,并且可明显降低其致热原性。

关键词：戊二醛牛心包热原实验

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实时定量PCR法检测骨髓间充质干细胞移植到梗死心肌后的存活数量

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温州医学院学报 2009年第4期39卷 358-360页

作者：王业焕张浩袁昕侯剑锋刘学彬叶珏孙成超温州医学院附属第一医院心胸外科浙江温州325000 中国医学科学院阜外心血管病医院卫生部心血管疾病再生医学重点实验室北京100037 中国医学科学院阜外心血管病医院中心实验室北京100037

目的:建立一种干细胞移植到梗死心肌后检测其存活数量的有效方法。方法:选取10只雌性SD大鼠结扎前降支,心肌梗死3周后,随机分成移植组与对照组,同时选取雄性大鼠培养出骨髓间充质干细胞(MSCs),分别将MSCs(3×106个,50μL)及等体积的... 详细信息

目的:建立一种干细胞移植到梗死心肌后检测其存活数量的有效方法。方法:选取10只雌性SD大鼠结扎前降支,心肌梗死3周后,随机分成移植组与对照组,同时选取雄性大鼠培养出骨髓间充质干细胞(MSCs),分别将MSCs(3×106个,50μL)及等体积的PBS液移植到梗死心肌中,24h后通过实时定量PCR(Real-timePCR)检测雄性大鼠Y染色体上特有的基因SRY,从而得知移植MSCs的存活数量。结果:MSCs移植24h后,移植组梗死心肌中检测到SRY基因数占移植总数的14.9%±8.3%,存活细胞的绝对数量为447195±248090,而对照组均未检测到SRY基因的存在。结论:用Real-timePCR的方法能有效地检测到具有SRY基因的干细胞,从而能准确地得知移植干细胞的存活数量,Real-timePCR技术在心梗后干细胞移植的基础研究及临床应用中具有重要的价值。

关键词：实时定量PCR 心肌梗死细胞移植

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