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中国生物化学与分子生物学报 2021年第10期37卷 1408-1414页

作者：尹燕霞杨冬佟丽李森向本琼骆静北京师范大学生命科学学院生物化学与分子生物学系北京100875

《生物化学与分子生物学综合实验》是由北京师范大学面向生物学专业本科生开设的,集技能训练与创新能力培养于一体的大规模开放的在线课堂。该课程以大肠杆菌碱性磷酸酶贯穿始终,从基因的克隆到蛋白质的表达纯化以及酶学特性的研究,还... 详细信息

《生物化学与分子生物学综合实验》是由北京师范大学面向生物学专业本科生开设的,集技能训练与创新能力培养于一体的大规模开放的在线课堂。该课程以大肠杆菌碱性磷酸酶贯穿始终,从基因的克隆到蛋白质的表达纯化以及酶学特性的研究,还包括碱性磷酸酶抗体的制备和效价测定等,让学生能够完整地、系统地学习和掌握常用的生物化学与分子生物学实验技术。大肠杆菌碱性磷酸酶是一个非常理想的实验研究对象,从基因到蛋白质都有经典的科研文献报道。在教学实践过程中,将这些文献资源作为重要的辅助教学资源,可以帮助教师和学生进行探究式的学习,形成理性批判性的科学态度,同时也为教师和学生提供了更严谨与更个性化的帮助,显著地提升了教学质量和学生的科研素质,在一流课程建设中发挥着重要的作用。

关键词：大规模开放的在线课堂经典文献阅读综合实验分子生物学碱性磷酸酶

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调控细胞外囊泡生成和生物学功能方法的研究进展

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中华实验外科杂志 2023年第4期40卷 789-797页

作者：王泽华毛兴佳郭子瑊冯腾达田最尹志文葛子钢傅攀峰向川山西医科大学第二医院骨科太原030001 浙江大学基础医学院杭州310058 北京大学工学院北京100871 宁波大学生物化学与分子生物学系宁波315211

细胞外囊泡(EVs)是一类由细胞旁分泌产生的亚细胞成分,能够向靶细胞递送蛋白质、核酸、脂质等多种生物活性分子来介导细胞间信号交流,调控靶细胞的生物学行为并使其发生相应的功能和表型改变,在生物医学领域具有巨大的潜在价值。然而非... 详细信息

细胞外囊泡(EVs)是一类由细胞旁分泌产生的亚细胞成分,能够向靶细胞递送蛋白质、核酸、脂质等多种生物活性分子来介导细胞间信号交流,调控靶细胞的生物学行为并使其发生相应的功能和表型改变,在生物医学领域具有巨大的潜在价值。然而非肿瘤细胞的EVs自然分泌量极低,难以达到临床的治疗剂量需求,并且随着供体细胞的衰老,EVs的分泌量急剧下降,其内容物的生物学功能也会发生难以控制的变化。因此,提高EVs分泌量并精确调控其生物学功能对于EVs在临床的应用推广具有重要意义。本文简要概述了细胞外囊泡的结构和形成过程,并对目前影响供体细胞生物学行为,促进EVs生成并强化所需生物学功能的方法及应用进行了详细阐述,望有助于给提高EVs的提取效率及EVs疗法在临床的应用推广提供新思路。

关键词：细胞外囊泡外泌体间充质干细胞治疗

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局部应用辛伐他汀和机械预处理方法预防静脉移植物再狭窄的研究

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中国胸心血管外科临床杂志 2023年第2期30卷 291-298页

作者：赵晨宇潘予韦贾六军张岩段亚冰丁力孙寒松中国医学科学院北京协和医学院阜外医院成人心外科北京100039 中国农业大学生物学院生物化学与分子生物学系北京100094 中国医学科学院北京协和医学院阜外医院动物实验中心北京102300

目的探究局部应用辛伐他汀和机械预处理方法对静脉移植物内膜增生的影响及机制。方法在体实验选用新西兰兔12只,随机分为4组:空白对照组、辛伐他汀局部处理组、机械预处理组、药物机械联合预处理组,每组3只。超声评价移植物管壁改变和... 详细信息

目的探究局部应用辛伐他汀和机械预处理方法对静脉移植物内膜增生的影响及机制。方法在体实验选用新西兰兔12只,随机分为4组:空白对照组、辛伐他汀局部处理组、机械预处理组、药物机械联合预处理组,每组3只。超声评价移植物管壁改变和移植物内血流速度,病理切片评价血管内膜增生情况。体外实验培养人脐血管内皮细胞,设辛伐他汀组和溶剂对照组,检测YAP磷酸化、下游靶基因表达量和细胞增殖情况。结果血管超声显示除辛伐他汀局部处理组外,其它3组术后21 d静脉移植物内流速均较术后7 d明显升高(P<0.01)。病理切片显示辛伐他汀局部处理组、机械预处理组、药物机械联合预处理组、空白对照组的新生内膜厚度分别为:(45.56±4.11)μm、(201.28±16.71)μm、(143.57±7.82)μm、(249.45±13.33)μm,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。体外实验结果显示,与溶剂对照组相比,高浓度辛伐他汀(5 mmol/L)组细胞死亡,低浓度辛伐他汀(2.5 mmol/L)组细胞增殖受抑制(P<0.05),辛伐他汀组YAP蛋白表达量不变,磷酸化YAP蛋白表达量明显增加(P<0.05),下游靶基因ccn1表达下调(P<0.001)。结论血管内局部应用辛伐他汀和机械预处理方法单用或联用均能抑制静脉移植物内膜增生;高浓度的辛伐他汀有细胞毒性,低浓度的辛伐他汀有抑制细胞增殖的作用;辛伐他汀通过抑制YAP入核、降低细胞增殖相关靶基因ccn1的转录发挥抑制新生内膜形成的作用。

关键词：局部用药辛伐他汀机械预处理静脉移植物再狭窄冠状动脉旁路移植术

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m^(6)A修饰在乳腺癌侵袭转移和化疗耐药中的研究进展

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中国医药科学 2023年第10期13卷 62-66页

作者：刘思涵余和芬首都医科大学第八临床医学院北京100038 首都医科大学生物化学与分子生物学系北京100069

乳腺癌是严重危害女性生命健康的严重疾病,其侵袭转移和化疗耐药是临床治疗乳腺癌面临的瓶颈。N6-甲基腺苷(m~6 A)是真核生物内最广泛和保守的RNA内部修饰。m^(6)A修饰水平是动态变化的,主要由m^(6)A甲基转移酶催化,m^(6)A去甲基酶清除... 详细信息

乳腺癌是严重危害女性生命健康的严重疾病,其侵袭转移和化疗耐药是临床治疗乳腺癌面临的瓶颈。N6-甲基腺苷(m~6 A)是真核生物内最广泛和保守的RNA内部修饰。m^(6)A修饰水平是动态变化的,主要由m^(6)A甲基转移酶催化,m^(6)A去甲基酶清除,并由m^(6)A结合蛋白识别。m^(6)A的异常表达水平与包括肿瘤在内的多种疾病密切相关。m^(6)A修饰参与乳腺癌的发生发展和化疗耐药等多个方面已成为共识。本文通过综述m^(6)A修饰在乳腺癌侵袭转移和化疗耐药方面的作用及其机制,以期为临床治疗乳腺癌、提高乳腺癌生存率提供新的策略。

关键词： m^(6)A 乳腺癌侵袭转移化疗耐药

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甲胎蛋白对细胞增殖的调节作用

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国外医学肿瘤学分册 2021年第5期27卷 286-288页

作者：李孟森李平风（审校）李刚（审校） 100083，北京，北京医科大学生物化学与分子生物学系 100083，北京，北京医科大学生物化学与分子生物学系 100083，北京，北京医科大学生物化学与分子生物学系

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人类嗜T淋巴细胞病毒1型Tax1蛋白在头颈部腺样囊性癌中的表达与预后分析及机制探索

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2022年第6期29卷 367-372页

作者：杨佳杰封格烜周梦娇马廷耀王雪莲杨国梁陈晓红孔璐首都医科大学生物化学与分子生物学系北京100069 首都医科大学附属北京同仁医院头颈外科北京100730

目的探讨人类嗜T淋巴细胞病毒1型(human T-lymphotropic virus 1,HTLV-1)与头颈部腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)发病及其远处转移的相关性。方法采用免疫组织化学及Western blot分析伴或不伴有远处转移ACC患者样品、ACC低... 详细信息

目的探讨人类嗜T淋巴细胞病毒1型(human T-lymphotropic virus 1,HTLV-1)与头颈部腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)发病及其远处转移的相关性。方法采用免疫组织化学及Western blot分析伴或不伴有远处转移ACC患者样品、ACC低侵袭力细胞系(SACC-83)、高侵袭力细胞(SACC-LM)及人单核细胞白血病细胞系(THP-1)中HTLV-1 Tax1蛋白、Myb、Notch同源蛋白1(neurogenic locus notch homolog protein 1,Notch1)和维甲酸信号通路蛋白RARA的表达,Pearson分析Tax1蛋白与肺转移及以上信号分子的相关性。结果11例ACC患者Tax1蛋白细胞核阳性表达,4例患者Myb细胞核阳性表达,6例患者Notch1细胞膜和细胞浆阳性表达,8例患者RARA细胞核阳性表达。选取2例ACC和细胞样本进行Western blot验证,1例与免疫组织化学结果不一致。Pearson分析Tax1与RARA蛋白呈正相关,与远处转移呈相关趋势,但与Myb和Notch1表达无显著相关性。结论HTLV-1感染可能影响体内维生素A代谢通路,与ACC患者发生远处转移相关。

关键词：头颈部肿瘤细胞系,肿瘤预后癌,腺样囊性人类嗜T淋巴细胞病毒1型 Notch同源蛋白1 远处转移

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过表达氯离子通道蛋白3对异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌肥厚的预防作用与机制

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第二军医大学学报 2021年第2期42卷 189-196页

作者：汪帅孙宇陈梦青唐敬卢群李春梅广东药科大学生命科学与生物制药学院生物化学与分子生物学系广州510006 中国科学院深圳先进技术研究院合成生物学研究所深圳440305 北京润美康医药有限公司北京101312

目的探讨氯离子通道蛋白3(ClC-3)基因过表达对异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌肥厚的预防作用及机制。方法运用腺相关病毒9(AAV9)感染方法构建ClC-3过表达小鼠模型和原代心肌细胞模型,采用蛋白质印迹法与qRT-PCR检测小鼠心脏组织和原... 详细信息

目的探讨氯离子通道蛋白3(ClC-3)基因过表达对异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌肥厚的预防作用及机制。方法运用腺相关病毒9(AAV9)感染方法构建ClC-3过表达小鼠模型和原代心肌细胞模型,采用蛋白质印迹法与qRT-PCR检测小鼠心脏组织和原代心肌细胞中ClC-3的表达以确定模型是否建立成功。32只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只。对照组连续7 d腹腔注射生理盐水,ISO组连续7 d腹腔注射ISO 7.5 mg•kg^-1•d^-1,AAV9-bv+ISO组用空白载体AAV9病毒颗粒感染小鼠4周后连续7 d腹腔注射ISO 7.5 mg•kg^-1•d^-1,AAV9-ClC-3+ISO组用携带ClC-3基因的AAV9病毒颗粒感染小鼠4周后连续7 d腹腔注射ISO 7.5 mg•kg^-1•d^-1。采用心脏超声检查小鼠心功能变化,计算心脏体重指数,采用qRT-PCR检测心肌组织中心房钠尿肽(ANP)、脑钠肽(BNP)的mRNA表达水平,H-E染色观察左心室形态学变化,苦味酸-天狼星红(PSR)染色观察心脏组织胶原纤维变化。取乳鼠摘出心脏,体外培养原代心肌细胞并分为4组,对照组未予任何干预,ISO组用0.1μmol/L ISO干预48 h,AAV9-ClC-3组用携带ClC-3基因的AAV9病毒颗粒感染细胞48 h,AAV9-ClC-3+ISO组用携带ClC-3基因的AAV9病毒颗粒和0.1μmol/L ISO共同干预48 h。采用芯片膜片钳技术检测小鼠原代心肌细胞的容积激活性氯电流(ICl,vol)。结果蛋白质印迹法和qRT-PCR检测结果均表明ClC-3过表达小鼠和原代心肌细胞模型成功建立。AAV9介导的ClC-3过表达能缓解ISO诱导的小鼠心脏体重指数、收缩末期室间隔厚度、收缩期左室后壁厚度和舒张期左室后壁厚度的增加,改善心脏组织形态学异常和心脏纤维化,减少心脏组织中ANP、BNP mRNA表达的增加,并能体外抑制ISO导致的心肌细胞ICl,vol降低。结论ClC-3过表达可预防ISO诱导的小鼠心肌肥厚,其机制可能与心肌细胞ICl,vol激活有关。

关键词：氯离子通道蛋白3 异丙肾上腺素肥厚型心肌病容积激活性氯电流

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滑膜间充质干细胞修复软骨损伤研究进展

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中华实验外科杂志 2022年第11期39卷 2238-2247页

作者：郭子瑊毛兴佳王泽华冯腾达高英杰尹志文田最刘洋葛子钢傅攀峰向川山西医科大学第二医院骨科太原030001 浙江大学基础医学院杭州310058 重庆市第九人民医院 400799 北京大学工学院 100871 宁波大学生物化学与分子生物学系 315211

软骨损伤是一种最为常见,患病率极高的一种疾患,并很有可能最终发展为骨关节炎,造成人民和社会的经济负担。由于传统软骨损伤的治疗方法多存在价格昂贵,疗效欠佳且难以持久等缺点,基于间充质干细胞(MSCs)的软骨组织再生移植成为目前软... 详细信息

软骨损伤是一种最为常见,患病率极高的一种疾患,并很有可能最终发展为骨关节炎,造成人民和社会的经济负担。由于传统软骨损伤的治疗方法多存在价格昂贵,疗效欠佳且难以持久等缺点,基于间充质干细胞(MSCs)的软骨组织再生移植成为目前软骨损伤治疗方法的研究热点。滑膜是滑膜关节的重要组成部分,具有很高的特异性。以往的研究表明,滑膜是一种有少量细胞层厚的结构,主要由成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)组成,并通过细胞与细胞的接触形成一层覆盖在关节腔上的滑膜和滑液。近年来研究结果显示,滑膜中也存在滑膜间充质干细胞(SMSCs),作为MSCs重要组成部分,因其强大的成软骨分化能力和增殖能力,逐渐成为软骨损伤修复的热点种子细胞。本文就最近SMSCs的来源、分离和鉴定及其在软骨损伤修复中的研究作综述,并对近20年SMSCs修复软骨损伤相关研究进行可视化分析,旨在阐明SMSCs目前研究现状和预测未来研究热点和方向。

关键词：软骨损伤组织再生滑膜间充质干细胞

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Notch3对促进胰腺星形细胞活化的基因表达及信号通路的影响

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中国应用生理学杂志 2021年第4期37卷 349-353页

作者：宋海岩周志新张玉祥新乡医学院基础医学院新乡市分子神经病学重点实验室河南新乡453003 新乡医学院河南新乡453003 首都医科大学生物化学与分子生物学系北京100069

目的:分离培养小鼠胰腺星形细胞(PSCs),检测Notch3对促进PSCs活化的基因表达及信号通路的影响。方法:对小鼠PSCs进行分离培养及传代。采用免疫荧光染色检测活化的小鼠PSCs中α-SMA,fibronectin及collagen I的表达;细胞分组为空白对照组(... 详细信息

目的:分离培养小鼠胰腺星形细胞(PSCs),检测Notch3对促进PSCs活化的基因表达及信号通路的影响。方法:对小鼠PSCs进行分离培养及传代。采用免疫荧光染色检测活化的小鼠PSCs中α-SMA,fibronectin及collagen I的表达;细胞分组为空白对照组(MOCK组),阴性对照组(转染Notch3 siRNA negative control,NC组),Notch3 siRNA组(转染Notch3 siRNA,N3 siRNA组)及Notch3 siRNA-1组(转染Notch3 siRNA-1,N3 siRNA-1组),提取各组总RNA,测定RNA浓度及纯度后,送至安诺优达基因科技(北京)有限公司进行转录组测序。结果:免疫荧光结果显示,在活化的PSCs中α-SMA,fibronectin及collagen I都有明显的表达。测序结果分析表明,与NC组相比较,在N3 siRNA组与N3 siRNA-1组,α-SMA基因,collagen I基因,fibronectin基因及CTGF基因均表达下调,与胶原蛋白代谢过程相关的基因表达上调,正向调节胶原生物合成的基因表达下调,而负向调节胶原生物合成的基因表达上调,PCNA基因表达下调;在N3siRNA组与N3siRNA-1组,调节细胞聚集的基因表达下调;在细胞组分部分,细胞外基质的基因表达下调;抑制PSCs中Notch3的表达可对细胞粘附分子信号通路,MAPK信号通路及TGF-β信号通路的组成成员的基因表达产生影响。结论:抑制Notch3的表达可抑制PSCs的活化,降低细胞增殖能力,降低迁移聚集能力及ECM合成的能力;抑制Notch3的表达可对其他的信号如细胞粘附分子信号通路,MAPK信号通路及TGF-β信号通路产生影响。

关键词：胰腺星形细胞 Notch3 基因表达信号通路

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广东省1990-2019年急性病毒性肝炎疾病负担分析

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中华流行病学杂志 2024年第3期45卷 365-372页

作者：邱嘉敏曾芳芳程琛温卉妍黄诗琪刘丹齐金蕾殷鹏周脉耕徐英刘志平梅青松肖珩向征梁晓峰暨南大学基础医学与公共卫生学院预防医学系/暨南大学疾病预防与控制研究院/暨南大学康泰生物疫苗产业研究院广州510632 暨南大学附属第一医院(广州华侨医院)医务科广州510630 中国疾病预防控制中心慢性非传染性疾病预防控制中心北京100050 广东省深圳市宝安区慢性病防治院深圳518020 暨南大学药学院中药与新药研究药效学成分重点实验室广州511436 暨南大学基础医学与公共卫生学院医学生物化学和分子生物学系广州510632 暨南大学生命科学技术学院/病原微生物研究院广州510632 暨南大学基础医学与公共卫生学院微生物学与免疫学系广州510632

目的了解1990-2019年广东省急性病毒性肝炎的疾病负担情况及变化趋势,为广东省肝炎防治提供参考依据。方法资料来源于2019全球疾病负担研究数据库广东省1990-2019年的相关数据。急性病毒性肝炎包括甲型肝炎(甲肝)、乙型肝炎(乙肝)、丙... 详细信息

目的了解1990-2019年广东省急性病毒性肝炎的疾病负担情况及变化趋势,为广东省肝炎防治提供参考依据。方法资料来源于2019全球疾病负担研究数据库广东省1990-2019年的相关数据。急性病毒性肝炎包括甲型肝炎(甲肝)、乙型肝炎(乙肝)、丙型肝炎(丙肝)和戊型肝炎(戊肝)。对不同时期的分年龄、性别构成的发病、死亡以及伤残调整寿命年(DALY)数据进行描述与分析,以及年估计变化百分比(EAPC),以描述急性病毒性肝炎疾病负担的变化趋势。结果1999-2019年广东省急性病毒性肝炎疾病负担均呈逐年下降趋势,其中死亡率与DALY年龄标化率下降趋势尤为明显。2019年在急性病毒性肝炎患者4365221例中,急性乙肝患者占51.43%(2245087例),而急性乙肝的死亡病例占急性病毒性肝炎死亡病例的77.18%(106/138)。在不同年龄组中,除急性乙肝高发于成年人外,急性甲肝、急性乙肝和急性戊肝等其他肝炎发病率总体随着年龄增长呈下降趋势。除<5岁年龄组的急性病毒性肝炎死亡率稍高外,其他年龄组的急性病毒性肝炎死亡率均随年龄增长呈上升趋势。男性的急性病毒性肝炎总体发病率和死亡率均高于女性。结论1999-2019年广东省急性病毒性肝炎疾病负担总体有所下降,但始终高于全国平均水平,须进一步加强对广东省不同人群尤其是儿童及老年人的肝炎预防与筛查工作。

关键词：急性病毒性肝炎疾病负担趋势分析

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