检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2021年第3期37卷 548-553页

作者：陈萱荆红波郑玉玲张力文律清宇姜永强军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京市顺义区疾病预防控制中心北京101300 安徽医科大学合肥230032

副流感病毒(Parainfluenza virus,PIV)是较为常见且广泛的社区性获得性抗原,其感染率仅次于呼吸道合胞病毒。由于PIV感染的临床表现与其他呼吸道病毒感染无特异性差别,所以早期、快速、准确诊断尤为重要。本文建立PIV IgM抗体的AlphaLIS... 详细信息

副流感病毒(Parainfluenza virus,PIV)是较为常见且广泛的社区性获得性抗原,其感染率仅次于呼吸道合胞病毒。由于PIV感染的临床表现与其他呼吸道病毒感染无特异性差别,所以早期、快速、准确诊断尤为重要。本文建立PIV IgM抗体的AlphaLISA快速检测方法,PIV特异性抗原与待测样品中PIV IgM抗体结合使供体微珠和受体微珠相互接近时,激光激发级联反应,从而产生放大的信号。通过对PIV特异性抗原生物素标记量和稀释比例的摸索,确定最佳反应体系。该方法批内和批间变异系数均小于10%,与间接免疫荧光方法比对,总符合率高于95%,且不与其他7种常见呼吸道病原体的IgM抗体发生交叉反应。AlphaLISA方法操作简便,整个反应过程只需要25 min,可快速检测PIV的IgM抗体,为早期确诊PIV感染提供有效办法。

关键词： AlphaLISA 副流感病毒(PIV) IgM抗体

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数字PCR技术的文献计量及可视化分析

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军事医学 2022年第3期46卷 225-230,F0003页

作者：杜奕溥赵勇杨瑞馥宋亚军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北部战区总医院第一派驻门诊部沈阳110000

目的利用文献计量学研究方法,解析数字PCR技术相关文献的分布模式和知识结构。方法应用网络数据库检索2000年1月1日至2019年12月31日已发表的有关数字PCR的学术论文。利用书目条目共现矩阵生成器(BICOMB),对提取的主题词进行定量分析。... 详细信息

目的利用文献计量学研究方法,解析数字PCR技术相关文献的分布模式和知识结构。方法应用网络数据库检索2000年1月1日至2019年12月31日已发表的有关数字PCR的学术论文。利用书目条目共现矩阵生成器(BICOMB),对提取的主题词进行定量分析。根据生成的高频主要主题词/副主题词词篇矩阵,利用gCluto软件进行聚类分析。构建主要主题词/副主题词的共现矩阵,进行战略坐标及社会网络关系分析。结果根据检索策略,共纳入2733篇论文,年度论文发表呈现显著上升趋势。在所提取的主题词中,识别出25个高频主题词/副主题词,并将热点聚类为5类。在战略坐标图中,数字PCR技术在肺癌突变基因快速检测及原癌基因突变检测方法的建立与临床应用方面的研究处于成熟且核心位置,而在妇科肿瘤检测应用、无创产前检查以及液体活检等方面处于相对不成熟阶段,为日后的研究提供了潜在的研究空间。结论通过对近20年的数字PCR技术的文献计量学研究,可以对这一技术的发展趋势和相关应用进行总体把握,为研究人员的项目实现和运行提供借鉴。

关键词：数字PCR 文献计量学共词分析战略坐标社会关系网络分析

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用于转化生长因子β/Smad信号转导通路抑制剂筛选的慢病毒报告载体的构建

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中国药理学与毒理学杂志 2022年第4期36卷 274-281页

作者：杨翠平何园刘慧莹张硌周晨辰米志强查玉华柏长青解放军医学院北京100039 中国人民解放军总医院第五医学中心南院区呼吸与危重症医学科北京100071 中国人民解放军总医院第五医学中心南院区医学工程科北京100071 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的构建由转化生长因子β(TGF-β)诱导的含有Smad响应元件(SmadRE)和红色荧光蛋白mCherry或荧光素酶报告基因序列的慢病毒报告载体,为筛选TGF-β/Smad信号转导通路抑制剂提供有效工具。方法合成UAS-SmadRE-Pmin-Gal4VP64-mCherry和UAS-... 详细信息

目的构建由转化生长因子β(TGF-β)诱导的含有Smad响应元件(SmadRE)和红色荧光蛋白mCherry或荧光素酶报告基因序列的慢病毒报告载体,为筛选TGF-β/Smad信号转导通路抑制剂提供有效工具。方法合成UAS-SmadRE-Pmin-Gal4VP64-mCherry和UAS-SmadRE-Pmin-Gal4VP64-lucifer⁃ase报告基因序列,分别将其插入经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后的pCDH-GFP-Puro-noCMV慢病毒质粒载体,获得响应TGF-β的含有SmadRE和mCherry或荧光素酶报告基因序列的慢病毒报告载体,分别命名为pCDH-USPG-mCherry和pCDH-USPG-luciferase。利用慢病毒三质粒包装系统在293FT细胞中分别包装出慢病毒并感染A549细胞(分别命名为USPG-mCherryA549和USPG-luciferaseA549细胞),在倒置荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达,鉴定A549细胞是否被感染成功。用TGF-β(10μg·L^(-1))及其受体拮抗剂LY2109761(5μmol·L^(-1))和SB431542(10μmol·L^(-1))分别处理USPG-mCherry A549和USPG-luciferaseA549细胞24 h,倒置荧光显微镜下观察USPG-mCherryA549细胞mCherry的表达,用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测USPG-luciferaseA549细胞荧光素酶的表达,验证所构建慢病毒报告载体用于筛选TGF-β/Smad信号转导通路抑制剂的可行性。用TGF-β及其受体拮抗剂LY2109761和SB431542处理A549细胞24 h,Western印迹法检测A549细胞磷酸化Smad2/3蛋白表达,验证LY2109761和SB431542对TGF-β/Smad信号转导通路的抑制作用。结果经限制性内切酶酶切鉴定及测序分析,成功构建pCDH-USPG-mCherry和pCDH-USPG-luciferase慢病毒重组质粒;分别转染293FT细胞包装出慢病毒并感染A549细胞,倒置荧光显微镜下观察到被感染的A549细胞表达GFP,表明USPGmCherryA549和USPG-luciferaseA549细胞构建成功。加入TGF-β处理24 h后,USPG-mCherryA549细胞表达mCherry,USPG-luciferaseA549细胞表达荧光素酶;而加入LY2109761和SB431542后,USPG-mCherryA549细胞几乎检测不到mCherry的表达,USPG-luciferaseA549细胞检测不到荧光素酶的表达。Western印迹法结果表明,TGF-β刺激后A549细胞中有磷酸化Smad2/3蛋白表达,加入LY2109761和SB431542后未检测到磷酸化Smad2/3蛋白表达。结论成功构建由TGF-β诱导的受Smad调控表达mCherry和荧光素酶的2个慢病毒报告载体,可有效感染目的细胞。该慢病毒报告载体可用于筛选TGF-β/Smad信号转导通路抑制剂。

关键词：转化生长因子β Smad 慢病毒报告基因受体拮抗剂

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鼠疫耶尔森菌基因分型国家参考品研制

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中国医药生物技术 2023年第3期18卷 271-273页

作者：张园园靳娟彭文轩周亚洲赵爱华崔玉军杨瑞馥郭彦魏东中国食品药品检定研究院国家卫生健康委员会生物技术检定方法及其标准化重点实验室北京102629 青海省地方病预防控制所西宁811602 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)(简称鼠疫菌)引起的一种自然疫源性疾病,以发病急、传播快、病死率高为特征,对人类社会影响巨大。鼠疫主要在啮齿类动物中引起原发性感染,病原菌经鼠蚤传播给人,其引起的疾病主要包括腺鼠疫、肺... 详细信息

鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)(简称鼠疫菌)引起的一种自然疫源性疾病,以发病急、传播快、病死率高为特征,对人类社会影响巨大。鼠疫主要在啮齿类动物中引起原发性感染,病原菌经鼠蚤传播给人,其引起的疾病主要包括腺鼠疫、肺鼠疫和败血型鼠疫3种类型。其中肺鼠疫发病迅猛,可通过空气在人间传播,病死率极高[1]。人类历史上曾发生过三次鼠疫大流行,造成上亿人死亡。时至今日,很多地区,如非洲、亚洲、美洲,仍将鼠疫视为可能会死灰复燃的烈性传染性疾病之一[2-4]。

关键词：肺鼠疫腺鼠疫鼠疫菌原发性感染自然疫源性疾病鼠疫耶尔森菌国家参考品性传染性疾病

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病毒现场快速检测研究进展

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军事医学 2022年第2期46卷 150-154,F0003页

作者：唐盈康晓平军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京化工大学生命科学与技术学院北京100029

新发突发性传染病防控中病毒快速检测至关重要。传统的病毒检测方法存在实验操作复杂、实验环境要求高和检测周期长等不足,目前的发展趋势为即时检测,操作简单、检测周期短、无需复杂的仪器设备,有利于基层和偏远、资源匮乏地区开展。... 详细信息

新发突发性传染病防控中病毒快速检测至关重要。传统的病毒检测方法存在实验操作复杂、实验环境要求高和检测周期长等不足,目前的发展趋势为即时检测,操作简单、检测周期短、无需复杂的仪器设备,有利于基层和偏远、资源匮乏地区开展。该文主要综述了病毒现场快速检测技术及其应用研究进展。

关键词：病毒现场快速检测免疫学技术分子诊断技术

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多形核中性粒细胞在铜绿假单胞菌气溶胶肺递送感染小鼠急性肺损伤中的作用研究

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军事医学 2022年第10期46卷 749-757页

作者：肖楠张志鹏李莎邓梦芸王一风宗福良苏铎周冬生杨慧盈北京化工大学生命科学与技术学院北京100020 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探究多形核中性粒细胞(PMN)在铜绿假单胞菌(PA)气溶胶肺递送感染小鼠急性肺损伤(ALI)过程中的作用。方法腹腔注射Gr-1抗体构建PMN耗竭小鼠模型,采用流式细胞术和免疫荧光检测PMN的耗竭效果。感染后观察小鼠存活状况,评价肺病理程... 详细信息

目的探究多形核中性粒细胞(PMN)在铜绿假单胞菌(PA)气溶胶肺递送感染小鼠急性肺损伤(ALI)过程中的作用。方法腹腔注射Gr-1抗体构建PMN耗竭小鼠模型,采用流式细胞术和免疫荧光检测PMN的耗竭效果。感染后观察小鼠存活状况,评价肺病理程度,检测肺细菌载量和肺泡灌洗液中细胞因子浓度变化,探究PMN在ALI过程中的作用。结果流式及免疫荧光结果显示,PMN耗竭小鼠模型构建成功。与对照组小鼠相比,PMN耗竭组小鼠感染后死亡率显著增加,肺部细菌载量增多;肺中仅有少量炎性细胞浸润,肺泡腔中可见大量细菌;肺泡灌洗液中白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β、IL-18、IL-17A、IL-22和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等促炎因子表达上调,单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等趋化因子表达上调,IL-4、IL-10、IL-13等抑炎因子表达上调。结论在感染过程中,PMN的募集有效抑制了细菌繁殖,PMN耗竭后小鼠多种细胞因子代偿性升高,PMN在ALI过程中可能抑制炎症过度发展,是炎症和免疫反应的重要调节剂。

关键词：铜绿假单胞菌多形核中性粒细胞气溶胶肺递送急性肺损伤

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次氯酸钠消毒剂灭活新冠病毒的实验研究

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军事医学 2022年第3期46卷 192-196页

作者：刘永健李天一邓永强李韩平帖金凤王晓林贾磊韩婧婉李林李敬云军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军疾病预防控制中心北京100071

目的评估新冠病毒(SARS-CoV-2)对次氯酸钠消毒剂的敏感性,为新冠病毒疫情防控中合理使用次氯酸钠消毒剂提供依据。方法购买3个品牌84消毒液,用碘量法测定有效氯含量,稀释成不同的浓度,分别取200μl与等量滴度为(5.82±0.14)lgTCID_(... 详细信息

目的评估新冠病毒(SARS-CoV-2)对次氯酸钠消毒剂的敏感性,为新冠病毒疫情防控中合理使用次氯酸钠消毒剂提供依据。方法购买3个品牌84消毒液,用碘量法测定有效氯含量,稀释成不同的浓度,分别取200μl与等量滴度为(5.82±0.14)lgTCID_(50)/ml的新冠病毒(BetaCoV/Beijing/AMMS01/2020株)上清液混匀,作用特定时间后,取样100μl,加900μl中和剂终止消毒剂作用。用Vero细胞滴定病毒,每个稀释度做4复孔,用ReedMuench法计算病毒的感染性滴度(TCID_(50)),重复3次。结果由于中和产物的细胞毒作用,病毒滴度的检测限为2.8 lgTCID_(50)/ml。有效氯浓度为50、100、200 mg/L的消毒剂作用10 min均不能灭活新冠病毒;有效氯浓度为300 mg/L的3种消毒剂作用30 min均可检出感染性病毒;有效氯浓度为400和500 mg/L的3种消毒剂完全灭活病毒的时间有较大差异,最长灭活时间分别为30 min以上和15 min;有效氯浓度为600 mg/L的3种消毒剂作用5 min以上均可完全灭活新冠病毒。结论新冠病毒对次氯酸钠具有一定的抵抗力,为确保消毒效果,有效氯浓度为500 mg/L需作用15 min以上、有效氯浓度为600 mg/L需作用5 min以上。建议按照世界卫生组织的指南,使用有效氯浓度为1000mg/L的次氯酸钠消毒剂。

关键词：新冠病毒次氯酸钠消毒

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极端微生物及其应用研究进展

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中国科学：生命科学 2022年第2期52卷 204-222页

作者：庄滢潭刘芮存陈雨露杨岑玥余岩王涛王友亮宋亚军滕越军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 山东中医药大学药学院济南250300 山东大学基础医学院济南250100 四川大学生命科学学院成都610064 天津大学生命科学学院天津300110 军事科学院军事医学研究院生物工程研究所北京100071

极端微生物是指在高/低温、高/低p H、高盐、高压等极端环境条件下生存的微生物.特殊的生存条件导致其具有特殊的遗传背景和代谢途径,并可产生功能特殊的酶类和活性物质.随着系统生物学和合成生物学技术的发展,极端微生物作为一类特殊... 详细信息

极端微生物是指在高/低温、高/低p H、高盐、高压等极端环境条件下生存的微生物.特殊的生存条件导致其具有特殊的遗传背景和代谢途径,并可产生功能特殊的酶类和活性物质.随着系统生物学和合成生物学技术的发展,极端微生物作为一类特殊的微生物群体,在生物医疗、生物能源和生物材料等领域具有巨大的应用潜力.极端微生物相关研究也对生命起源与演化、生物工程技术等领域的发展具有重大意义.本文对极端环境及极端微生物的概念和分类进行了回顾,综述了极端微生物在不同环境条件下的适应机制及其酶的应用,并介绍了合成生物学在极端微生物研究中的应用情况.此外,由于极端微生物和极端酶的特殊性和高效性,本文还探讨了极端微生物开发过程中的挑战,以及其在航空航天与国防安全领域的综合应用潜力,并指出了相关研究的必要性.

关键词：极端微生物极端酶极端环境适应机制合成生物学

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抗肉毒毒素纳米抗体的研究进展

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军事医学 2022年第11期46卷 872-876,F0003页

作者：吕若梅王菁辛文文康琳宋玉竹昆明理工大学生命科学与技术学院昆明650500 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

肉毒中毒是由于人体摄入肉毒毒素引起的,发病迅速且死亡率很高。目前肉毒中毒的治疗以马血清抗毒素为主,也有多种新型基因工程抗体药物在研,纳米抗体便是其中之一。纳米抗体是近年来的研究热点,具有相对分子质量小、稳定性好、亲和力高... 详细信息

肉毒中毒是由于人体摄入肉毒毒素引起的,发病迅速且死亡率很高。目前肉毒中毒的治疗以马血清抗毒素为主,也有多种新型基因工程抗体药物在研,纳米抗体便是其中之一。纳米抗体是近年来的研究热点,具有相对分子质量小、稳定性好、亲和力高及易生产改造等特点,多项研究报道抗肉毒毒素纳米抗体具有良好的中和效果。纳米抗体用于临床治疗的主要问题是半衰期太短,目前延长纳米抗体半衰期的方法包括偶联聚乙二醇(PEG)、利用红细胞载体、融合免疫球蛋白G的Fc段及人血清白蛋白(HSA)等。该文对肉毒毒素纳米抗体的筛选、表达及改造方法进行了综述,为后续肉毒毒素纳米抗体的研究提供参考。

关键词：纳米抗体单域抗体肉毒毒素半衰期异二聚体

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创伤弧菌毒力相关因子的全基因组关联分析研究

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微生物学报 2020年第7期60卷 1488-1495页

作者：张嘉鑫武雅蓉杨超康琳王景林崔玉军安徽医科大学安徽合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

【目的】创伤弧菌是致死率最高的弧菌物种,但目前尚无在全基因组层面挖掘毒力相关因子的研究。本研究以创伤弧菌分离来源(临床和环境)作为不同表型,通过与260株基因组序列进行关联分析,挖掘毒力相关因子,从而进一步了解创伤弧菌致病因... 详细信息

【目的】创伤弧菌是致死率最高的弧菌物种,但目前尚无在全基因组层面挖掘毒力相关因子的研究。本研究以创伤弧菌分离来源(临床和环境)作为不同表型,通过与260株基因组序列进行关联分析,挖掘毒力相关因子,从而进一步了解创伤弧菌致病因素。【方法】对139株创伤弧菌分离株进行高通量测序,获取其全基因组序列;与公共数据库已公开发表的121株基因组整合,使用pyseer软件进行全基因组关联分析,对与不同分离来源显著相关的基因进行注释和解读。【结果】共发现11个基因与临床分离株显著相关,其中9个是本研究新发现的创伤弧菌潜在毒力相关因子。【结论】本研究使用群体基因组学和统计遗传学方法,在全基因组范围扫描挖掘了创伤弧菌毒力相关因子,为深入揭示该物种致病机制、设计新的疫苗和治疗靶点提供了重要依据。

关键词：创伤弧菌全基因组测序全基因组关联研究毒力因子

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