检索结果-内蒙古大学图书馆

人IFN-β启动子基因报告质粒的构建及SARS-CoV3a和7a蛋白对IFN-β诱生作用的初步研究

中国生物工程杂志 2006年第12期26卷 6-10页

作者：徐春娥付玲侯丽华翁少洁来大志李健民于婷于长明陈薇军事医学科学院微生物流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

3a蛋白和7a蛋白是SARS-CoV的非结构蛋白,分别主要由SARS基因组中ORF3a和ORF7a所编码。在体内和体外感染病毒的细胞中均发现了有3a蛋白的表达。首先将pGL3-Control载体进行了改构,除去了SV40启动子基因,获得了pGL3-Enhancer载体,将获得的... 详细信息

3a蛋白和7a蛋白是SARS-CoV的非结构蛋白,分别主要由SARS基因组中ORF3a和ORF7a所编码。在体内和体外感染病毒的细胞中均发现了有3a蛋白的表达。首先将pGL3-Control载体进行了改构,除去了SV40启动子基因,获得了pGL3-Enhancer载体,将获得的IFN-β启动子基因连入载体中,构建了带有人IFN-β启动子基因的荧光素酶报告质粒IP-21,并且通过实验证明所构建的质粒在干扰素的诱导剂NDV的作用下能够表达荧光素酶活性,照度计检测荧光素酶活性增强,从而验证了所构建的重组质粒的有效性。为了观察SARS-CoV非结构蛋白3a和7a对干扰素诱生途径的影响,将IP-21瞬转入稳定表达有3a和7a蛋白的CHO细胞,通过荧光素酶的信号强弱对3a和7a的作用进行分析,结果表明SARS-CoV的3a和7a蛋白能够刺激荧光素酶的表达,即在体外的细胞实验中,3a和7a能有效地激活IFN-β的启动子部分。此结果对进一步研究3a和7a的功能以及对SARS-CoV的致病机制的进一步研究有一定意义。

关键词： SARS-CoV 3a蛋白7a蛋白 IFN-β启动子荧光素酶报告系统

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感染布氏杆菌后的THP-1细胞的蛋白质组学研究

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微生物学报 2006年第4期46卷 629-634页

作者：高永辉任昶应天翼王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室免疫室北京100071 北京朝阳医院北京100043 军事医学科学院生物工程研究所北京100071

在布氏杆菌(Brucella)的感染免疫过程中,单核巨噬细胞的应答起着非常关键的作用,而毒力不同的布氏杆菌引起的宿主反应截然不同。用双向电泳技术对THP-1单核细胞受毒力不同的布氏杆菌株侵袭后的全细胞蛋白谱进行差异比较和分析,共发现了3... 详细信息

在布氏杆菌(Brucella)的感染免疫过程中,单核巨噬细胞的应答起着非常关键的作用,而毒力不同的布氏杆菌引起的宿主反应截然不同。用双向电泳技术对THP-1单核细胞受毒力不同的布氏杆菌株侵袭后的全细胞蛋白谱进行差异比较和分析,共发现了38个差异表达的蛋白质点。这些点经过胶内酶切后进行MALDI-TOF质谱鉴定,每个蛋白质点的肽质量指纹图谱都在人类的蛋白质组数据库中用Mascot进行检索后,发现这些差异表达的蛋白主要集中在结构蛋白,信号传导途径和物质代谢等领域,还有一些功能未知的蛋白。这一结果为研究布氏杆菌的感染与致病机制提供了方向,对深入探讨病原菌-宿主的相互作用模式具有参考价值。

关键词：布氏杆菌 THP-1细胞比较蛋白质组学双向电泳质谱

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清洁级Wistar大鼠血常规及生化指标正常值观察

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中国消毒学杂志 2006年第2期23卷 119-120,123页

作者：张敏纪晓光王京燕军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

建立清洁级Wistar大鼠的血液常规、生化正常值，为药物毒理学评价提供参考。采用实验室评价方法，对10—12周清洁级Wistar大鼠进行了观测。结果，经对220只大鼠（雌雄各半）检测证明，动物血清生化指标中，除血清总胆固醇之外，其它指... 详细信息

建立清洁级Wistar大鼠的血液常规、生化正常值，为药物毒理学评价提供参考。采用实验室评价方法，对10—12周清洁级Wistar大鼠进行了观测。结果，经对220只大鼠（雌雄各半）检测证明，动物血清生化指标中，除血清总胆固醇之外，其它指标在雌雄动物之间均存在差异。雄性大鼠血液自细胞、血清谷丙转氨酶比雌性大鼠明显偏高（P〈0．01）；雌性大鼠血清肌酐和总蛋白比雄性大鼠明显偏高（P〈0．01）。结论，本研究结果在雌雄大鼠之间血清生化指标多数存在差异，血液学指标受动物性别、年龄及检测方法等因素的影响。

关键词：大鼠清洁级血液生化血液常规

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大兴安岭林区蜱和鼠中莱姆病螺旋体感染及其基因分型研究

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中华流行病学杂志 2006年第8期27卷 681-684页

作者：褚宸一何静王剑波哈森高娃张泮河吴晓明赵秋敏蒋宝贵高燕曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 内蒙古自治区牙克石林业防疫站

目的了解内蒙古大兴安岭林区蜱和鼠中伯氏疏螺旋体的感染及基因分型情况。方法应用巢式PCR扩增蜱和鼠中伯氏疏螺旋体5S-23S rRNA间隔区片段,对阳性产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析和单链构象多态性(SSCP)分析,RFLP分析显示特殊... 详细信息

目的了解内蒙古大兴安岭林区蜱和鼠中伯氏疏螺旋体的感染及基因分型情况。方法应用巢式PCR扩增蜱和鼠中伯氏疏螺旋体5S-23S rRNA间隔区片段,对阳性产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析和单链构象多态性(SSCP)分析,RFLP分析显示特殊带型的样本测序分析。结果检测全沟硬蜱1336只,293只阳性,阳性率为21．93％;森林革蜱144只,6只阳性,阳性率为4．17％;嗜群血蜱144只,未发现有伯氏疏螺旋体感染。检测鼠9种145只,感染伯氏疏螺旋体的4种5只,感染率为3．45％;其中检测8只棕背鼫(鼠平),2只阳性。RFLP分析及序列分析显示蜱中有***20047亚型、***29亚型、***基因型以及不同基因型或亚型伯氏疏螺旋体的混合感染;鼠感染的伯氏疏螺旋体包括***20047亚型和***29亚型。SSCP分析结果显示带型多于36种。结论大兴安岭林区蜱及鼠中均存在伯氏疏螺旋体的感染,其中全沟硬蜱的感染率较高;***型为主要基因型,且该地区伯氏疏螺旋体存在遗传多态性。单只蜱中存在同时感染不同基因型伯氏疏螺旋体的情况,人和宿主动物是否存在不同基因型伯氏疏螺旋体混合感染尚待进一步研究。全沟硬蜱和棕背(鼠平)分别是该林区伯氏疏螺旋体的主要媒介和主要储存宿主。

关键词：伯氏疏螺旋体基因型蜱鼠

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我国东北林区蜱中伯氏疏螺旋体的分离及分型鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第5期26卷 404-408页

作者：高燕何静王剑波哈森高娃张泮河蒋宝贵吴晓明褚宸一黄海楠詹琳赵秋敏曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 内蒙古自治区牙克石林业防疫站

目的从我国东北地区全沟硬蜱中分离新的伯氏疏螺旋体菌株,了解其基因型及分布。方法应用BSKH培养基从硬蜱中分离菌株,PCR扩增5S^23SrRNA基因间隔区,进行限制性片段长度多态性分析及序列测定。结果新分离出伯氏疏螺旋体25株,其中11株来... 详细信息

目的从我国东北地区全沟硬蜱中分离新的伯氏疏螺旋体菌株,了解其基因型及分布。方法应用BSKH培养基从硬蜱中分离菌株,PCR扩增5S^23SrRNA基因间隔区,进行限制性片段长度多态性分析及序列测定。结果新分离出伯氏疏螺旋体25株,其中11株来自内蒙古自治区,13株来自黑龙江省,1株来自吉林省。RFLP结果显示其中22株属于Borreliagarinii基因型,3株属***基因型,1株产生了新的酶切带型,序列测定表明其属于***。结论东北地区的伯氏疏螺旋体菌株为***和***两种基因型,***为主要基因型。采用5S^23SrRNA间隔区RFLP分型方法对菌株进行分型研究时应结合序列分析方法,以保证分型结果的可靠性。

关键词：伯氏疏螺旋体分离 5S^23S rRNA基因间隔区 RFLP 序列测定

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中国中部农村艾滋病病毒感染状况不一致夫妻的随访研究

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中华流行病学杂志 2006年第3期27卷 192-195页

作者：李敬云李林李宏鲍作义李韩平王哲庄道民刘永健刘思扬军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 河南省疾病预防控制中心

目的在河南省某地农村建立艾滋病病毒(HI V)感染状况不一致(DC)的夫妻队列并进行随访,观察HI V通过异性性传播的频率及其影响因素。方法通过访谈和血清学检测,确定了52对(一方HI V阳性而另一方阴性但无吸毒、性乱、输血等HI V感染危险行... 详细信息

目的在河南省某地农村建立艾滋病病毒(HI V)感染状况不一致(DC)的夫妻队列并进行随访,观察HI V通过异性性传播的频率及其影响因素。方法通过访谈和血清学检测,确定了52对(一方HI V阳性而另一方阴性但无吸毒、性乱、输血等HI V感染危险行为)夫妻进入研究队列,在0.5、1和2.5年进行3次随访,每次随访均询问夫妻双方的性生活和安全套使用情况,同时抽取20ml抗凝静脉血检测HI V抗体、CD4+T淋巴细胞计数以及病毒载量。结果(1)0.5、1和2.5年的随访率分别是92.3%、75.0%和28.8%。在随访的过程中,DC夫妻中HI V阴性一方HI V抗体始终保持阴性,未出现HI V抗体阳转及HI V的传播。(2)在队列建立时(0年)以及0.5、1和2.5年随访时,DC夫妻性生活次数每月1次至每周1次的分别占65.4%、72.9%、71.7%和80.0%,有时使用或从来不用安全套的比例分别是76.9%、66.6%、69.1%和60.0%,不同随访时间性生活次数和安全套使用频率的差异无统计学意义。(3)DC夫妻中的HI V阳性一方在0.5、1和2.5年随访时,CD4+T淋巴细胞计数保持稳定或上升的比例分别是85.4%、66.6%和60.0%。15对在2.5年随访到双方的夫妻,HI V阳性一方中病毒载量稳定和下降的占66.7%,绝大部分病毒载量保持稳定或下降者同时CD4+T淋巴细胞计数也保持稳定或上升。结论研究中未观察到HI V在夫妻之间的传播。HI V阳性一方稳定的病毒载量和CD4+T细胞计数可能是HI V未发生传播的原因之一,宿主的遗传免疫学因素以及HI V的生物学特性对传播的影响值得深入研究。

关键词：艾滋病病毒异性性传播艾滋病病毒感染状况不一致夫妻

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新分离呼吸道肠道病毒生物学特性和S4片段的序列测定

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中国病毒学 2006年第4期21卷 324-327页

作者：朱虹苏裕心宋立华何君黄如统貌盼勇端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军第302医院北京100039

新分离呼吸道肠道病毒(简称呼肠病毒)经过空斑分纯后进行生物学和部分基因序列的鉴定。首先通过BYD株(由端青从北京于某患者标本中分离到的第一株呼肠病毒)对4种传代细胞的敏感性试验,选出L929和LLC-MK2敏感细胞,然后用LLC-MK2细胞进行... 详细信息

新分离呼吸道肠道病毒(简称呼肠病毒)经过空斑分纯后进行生物学和部分基因序列的鉴定。首先通过BYD株(由端青从北京于某患者标本中分离到的第一株呼肠病毒)对4种传代细胞的敏感性试验,选出L929和LLC-MK2敏感细胞,然后用LLC-MK2细胞进行理化性质试验,血凝试验和形态学鉴定。结果显示该病毒为耐乙醚、不耐酸、不耐热的RNA病毒;对人O型红细胞能产生凝集,滴度达1:32;电镜下可查见细胞胞浆内有球形、直径为70nm～80nm、双层衣壳的病毒颗粒。提取BYD株RNA并进行S4片段序列分析,结果显示该片段的氨基酸序列与已知呼肠病毒1～3型标准株的同源性分别为95%、90%和95%。以上这些生物学以及S4片断的序列分析结果表明:新分离BYD株病毒符合呼肠病毒科的特性。

关键词：呼吸道肠道病毒细胞敏感性理化性质形态学序列分析

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北京市部分人群和农产品集散地鼠间汉坦病毒感染的研究

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中华流行病学杂志 2006年第2期27卷 145-149页

作者：江佳富吴晓明王日明左曙青徐伟才郭天宇陈立泉曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京市东城区疾病预防控制中心

目的了解北京地区鼠间汉坦病毒(HV)感染的可能来源与线索。方法2004年4-5月选取北京城区某大型火车站和郊区某大型农产品贸易集散地,采用夹夜法捕鼠,应用间接ELISA法检测鼠血清IgG抗体;针对HV M和S基因片段设计汉城型病毒(SEOV)特异引物... 详细信息

目的了解北京地区鼠间汉坦病毒(HV)感染的可能来源与线索。方法2004年4-5月选取北京城区某大型火车站和郊区某大型农产品贸易集散地,采用夹夜法捕鼠,应用间接ELISA法检测鼠血清IgG抗体;针对HV M和S基因片段设计汉城型病毒(SEOV)特异引物,应用逆转录-聚合酶链反应检测鼠肺中HV,阳性标本直接测序,与GenBank已知序列进行两两比较,对获得序列进行多重比较分析并构建系统发育树。结果共捕获鼠类24只,平均密度3.49%(24/690),火车站和农产品集散地平均鼠密度分别为1.25%(3/240)和4.67%(21/450),血清抗体阳性率分别为0.0%和9.5%。优势种分别为小家鼠和褐家鼠,带病毒率分别为14.28%(1/7)和5.89%(1/17)。序列比较结果显示:2份扩增阳性标本M片段核苷酸差异为7.6%,来自火车站的dc501与山东省SD227、河北省Hebei4株亲缘关系较近。来自集贸市场的BjFT01株与GenBank中已注册的其他北京市SEOV株比较,存在一些独特的基因差异,并与海南省HN71株、浙江省K24-E7株多个位点变异类型一致,同源性较高,构成一个支系。而其S片段与韩国80-39株同源性最高(96.4%),与浙江K24-E7同源性为95.5%。结论北京市人群及农产品集散地鼠类HV感染对肾综合征出血热流行的潜在危险较大,家栖鼠携带并传播的SEOV由上述类似地区从外埠输入到北京的可能性较大,但有待进一步研究。

关键词：汉坦病毒啮齿动物

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人类致病病毒属水平基因筛查芯片的制备及其在黄病毒属检测中的初步应用

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军事医学科学院院刊 2006年第5期30卷 401-405页

作者：杨银辉韩伟国胡玉洋康晓平曾海攀陈晨刘洪朱晓光刘国振祝庆余军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京华大基因研究中心北京101300

目的：制备人类致病病毒属水平高通量筛查用基因芯片，并通过检测黄病毒属病毒初步验证其筛查效果。方法：利用Clustal W和BLAST软件设计针对人类致病病毒的属特异性寡核苷酸探针，对探针浓度、杂交温度、杂交时间、不同杂交液及杂交后... 详细信息

目的：制备人类致病病毒属水平高通量筛查用基因芯片，并通过检测黄病毒属病毒初步验证其筛查效果。方法：利用Clustal W和BLAST软件设计针对人类致病病毒的属特异性寡核苷酸探针，对探针浓度、杂交温度、杂交时间、不同杂交液及杂交后芯片的洗涤方法进行优化。分别用特异或随机PCR方法从病毒感染的细胞培养上清中扩增病毒核酸，在扩增过程中掺入aa-dUTP并进一步偶联cy5或cy3荧光素进行标记，随后与基因芯片进行杂交，并通过荧光扫描仪对杂交结果进行分析，然后分析检测的特异性和敏感性验证基因芯片的筛查效果。结果：共设计了针对人类医学病毒的1090条寡核苷酸探针及其他阳性、阴性对照探针，其中黄病毒属共46条探针，Tm值为77，67～83．53℃，通过随机或特异PCR扩增8株黄病毒属病毒核酸，在42℃、过夜杂交的条件下，通过基因芯片方法均获得了黄病毒属特异性杂交信号，与其他属病毒之间没有非特异性交叉反应。结论：所制备的基因芯片可用于黄病毒属病毒的快速筛查，本研究为进一步建立大规模病毒性病原体的高通量筛查与鉴定技术平台提供了实验依据。

关键词：基因芯片黄病毒寡核苷酸探针筛查鉴定

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复方二氯异氰尿酸钠消毒粉的毒性研究

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中国消毒学杂志 2006年第3期23卷 229-231页

作者：纪晓光张敏赵京花王京燕军事医学科学院微生物流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为了解复方二氯异氰尿酸钠消毒粉的安全性,在实验室对其进行了毒理学评价.结果,复方二氯异氰尿酸钠消毒粉对小鼠急性经口毒性试验LD50大于5000 mg/kg·bw（95%可信限为4811～7328）,属实际无毒;亚急性毒性试验动物血液常规、生化指... 详细信息

为了解复方二氯异氰尿酸钠消毒粉的安全性,在实验室对其进行了毒理学评价.结果,复方二氯异氰尿酸钠消毒粉对小鼠急性经口毒性试验LD50大于5000 mg/kg·bw（95%可信限为4811～7328）,属实际无毒;亚急性毒性试验动物血液常规、生化指标及各脏器均未发现异常.皮肤刺激指数＜0.5,刺激强度属无刺激性;对小鼠骨髓嗜多染红细胞无致微核作用;对小鼠精子无致畸作用.结论,在本实验条件下,复方二氯异氰尿酸钠为实际无毒类物质,对家兔皮肤无刺激性,无致微核和致突变作用.

关键词：二氯异氰尿酸钠有效氯毒性

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