检索结果-内蒙古大学图书馆

中国消毒学杂志 2005年第2期22卷 156-158页

作者：杜宗敏王效义戴二黑刘海洪韩延平庞昕翟俊辉杨瑞馥吴清发李京湘杨玲汪建军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国医学科学院北京基因组研究所

为研究SARS的传播途径,给医务人员防护提供依据。采用8级安德森空气微生物采样器对SARS病房中空气进行采样、收集空调器冷凝水和空调器滤网尘土标本,应用常规反转录套式PCR检测样本中SARS冠状病毒。结果,共检测40份样,检出阳性标本18份... 详细信息

为研究SARS的传播途径,给医务人员防护提供依据。采用8级安德森空气微生物采样器对SARS病房中空气进行采样、收集空调器冷凝水和空调器滤网尘土标本,应用常规反转录套式PCR检测样本中SARS冠状病毒。结果,共检测40份样,检出阳性标本18份,阳性率为45%;其中空气标本36份,阳性15份,2份空调滤网尘土标本均为阳性,2份空调冷凝水标本检出1份阳性。随机挑选PCR阳性标本2份进行病毒分离试验,2份均为阳性。结果显示,检测SARS病房空气标本以及空调器冷凝水和空调器滤网尘土标本,均获得较高的SARS冠状病毒阳性率并分离到存活病毒。表明环境空气中存在活的SARS冠状病毒,推测SARS确有可能通过空气飞沫传播,本结果可供SARS病房的医护人员采取防护措施参考。

关键词：安德森采样器反转录套式PCR 重症呼吸综合症冠状病毒

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重组蓖麻毒素A链蛋白的可溶性表达、纯化与抗原性分析

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中国生物工程杂志 2005年第4期25卷 47-51页

作者：孙嗣梅王利春康琳王景林中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 内蒙古大学生物工程中心呼和浩特010020

用PCR方法从克隆质粒pUC19-RTA中扩增出蓖麻毒素A(RTA)链基因,序列分析正确后, 亚克隆到原核表达质粒pET-His中,构建重组表达质粒pET-HisRTA,再转化到*** BL21(DE3) plysS中获得表达工程菌株BL21/pET-HisRTA。该工程菌在30℃经0.4mmol／... 详细信息

用PCR方法从克隆质粒pUC19-RTA中扩增出蓖麻毒素A(RTA)链基因,序列分析正确后, 亚克隆到原核表达质粒pET-His中,构建重组表达质粒pET-HisRTA,再转化到*** BL21(DE3) plysS中获得表达工程菌株BL21/pET-HisRTA。该工程菌在30℃经0.4mmol／L IPTG诱导4h后获得可溶性表达的目的蛋白,约占菌体总蛋白的18.45％,SDS-PAGE分析显示表达的蛋白区带与 RTA相对分子量相符,约32kDa左右。表达产物经Ni-NTA亲和层析法一步纯化,蛋白纯度约达 97.53％,并可得到约18mg/L重组RTA蛋白。Western印迹和间接ELISA结果证明,重组RTA蛋白与抗天然蓖麻毒素多抗可发生特异性的抗原抗体反应,具有良好的抗原性,这为制备RT特异性抗体及建立RT的检测方法奠定了基础。

关键词：可溶性表达蓖麻毒素抗原性纯化 Western印迹间接ELISA A链原核表达质粒重组表达质粒 E.coli 抗原抗体反应 PCR方法相对分子量亲和层析法特异性抗体 pET 序列分析工程菌株目的蛋白显示表达 PAGE 表达产物检测方法

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北京市褐家鼠种群遗传多态性及与汉坦病毒分布关系的研究

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中国媒介生物学及控制杂志 2005年第5期16卷 358-363页

作者：江佳富吴晓明左曙青王日明陈立泉王炳才敦哲张泮河郭天宇曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京市东城区疾病预防控制中心北京市海淀区疾病预防控制中心

目的了解北京地区褐家鼠不同地理种群遗传多态性与该地区汉坦病毒(HV)基因变异及其分布可能存在的关联.方法选取北京市不同地区捕获褐家鼠,采用巢式RT-PCR法检测HVM基因片段,获得的阳性标本产物进行直接测序,构建系统发育树.另一方面对... 详细信息

目的了解北京地区褐家鼠不同地理种群遗传多态性与该地区汉坦病毒(HV)基因变异及其分布可能存在的关联.方法选取北京市不同地区捕获褐家鼠,采用巢式RT-PCR法检测HVM基因片段,获得的阳性标本产物进行直接测序,构建系统发育树.另一方面对不同HV来源的宿主个体和其对应种群内随机选取的其他个体,以及其他一些地区鼠类作为参照,用随机扩增多态DNA(RAPD)技术获得褐家鼠基因组DNA多态性图谱,利用RAPDDIST和PHYLIP软件分析褐家鼠种群多态性,并与对应的北京地区的HV差异和分布进行比较.结果选用50个随机引物进行扩增,有5个引物获得清晰、多态性高的RAPD谱带.不同区域种群RAPD标记不尽相同,北京市褐家鼠地理种群之间存在一定程度的遗传分化,大部分种群遗传距离较为接近,其中采集于某农产品集散地的XFD种群遗传距离相对较大,有特异性标记条带.11个HV代表序列均为汉城型汉坦病毒,基因差异为0.1%～8.0%,可分为2个主要的支系,多数毒株变异类型在不同地域中交叉分布,但BjFT01株变异较大,成一个独立的支系.通过Bootstrap分析和系统树图比较,种群分化较大的XFD种群与该区获得1株亲缘关系相对较远的HV相对应.结论北京市不同区域HV及其褐家鼠DNA多态性均存在一定差异,不同种群尤其是输入性种群对北京HV流行影响程度不同,初步显示一些特定种群与特定的基因性别有一定的关联.XFD种群外源基因交流渗入的可能性较大,进一步证明北京市HV随着鼠类种群迁移输入的可能性极大,但仍有待于选用一些特异性标记基因多态性进行继续研究.

关键词：褐家鼠遗传多态性随机扩增多态DNA 汉坦病毒地理种群分布关系随机扩增多态DNA(RAPD) 北京市基因组DNA多态性 RAPD标记

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SARS-CoV S蛋白受体结合区的重组表达及免疫原性分析

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中国病毒学 2005年第5期20卷 472-475页

作者：马翠卿周育森王弋嘉郭彦管洁魏林何玉先军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 河北医科大学免疫学教研室河北石家庄050017

为了表达SARS-CoV的S蛋白的受体结合区并对其免疫原性进行分析,用PCR方法扩增S蛋白的受体结合区基因片段,克隆至原核表达质粒pET-32a+并在大肠杆菌中表达,应用Western-blot鉴定表达的目的蛋白,而后以该蛋白作为诊断抗原包被酶联板来检... 详细信息

为了表达SARS-CoV的S蛋白的受体结合区并对其免疫原性进行分析,用PCR方法扩增S蛋白的受体结合区基因片段,克隆至原核表达质粒pET-32a+并在大肠杆菌中表达,应用Western-blot鉴定表达的目的蛋白,而后以该蛋白作为诊断抗原包被酶联板来检测20份SARS病人血清和28份健康人血清,结果原核表达的S蛋白能够和所用的SARS病人血清反应。这提示表达的S重组蛋白具有良好的抗原性。将变性纯化的重组蛋白和复性蛋白分别皮下免疫小鼠,第三次免疫一周后收集抗血清,用ELISA测定抗体和同时测定中和抗体活性。用变性的抗原免疫的小鼠血清均无中和活性;而用复性的蛋白免疫的小鼠产生了中和抗体。实验表明,S蛋白受体结合区无线性中和表位,中和抗体的产生是由构象表位诱导的。提示该蛋白有可能应用于亚单位疫苗的研究。

关键词：严重急性呼吸窘迫综合征病毒(SARS-CoV) 刺突蛋白(S蛋白) 受体结合区

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马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01株中和作用的研究

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微生物学免疫学进展 2005年第4期33卷 1-6页

作者：石辛甫张良艳赵光宇邢丽安玉军刘士山朱和平王希良军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学实验室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

观察马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01毒株的中和作用,为马抗SARS-CoV免疫球蛋白用于SARS的治疗提供科学的依据。采用CPE、MTT测定马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01株的中和作用。结果显示,马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab’)... 详细信息

观察马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01毒株的中和作用,为马抗SARS-CoV免疫球蛋白用于SARS的治疗提供科学的依据。采用CPE、MTT测定马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01株的中和作用。结果显示,马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab’)2治疗性抗体对SARS-CoV GZ-01株具有很好的中和作用,三批马抗SARS-CoV免疫球蛋白的CPE和MTT中和效价分别达到1:6400、1:6400、1:12800,且两种方法测得结果一致。

关键词： SARS SARS-CoV GZ-01株马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab')2 中和抗体活性

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肺炎链球菌性肺炎诊断方法研究进展

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微生物学免疫学进展 2005年第4期33卷 69-71页

作者：何斌朱虹军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

肺炎链球菌是一种常见的细菌性肺炎的病原体,快速、准确的确定病原体是控制疾病的关键。本文就目前诊断肺炎链球菌性肺炎的免疫层析法、酶联免疫吸附法、胶乳颗粒凝集试验等研究进展作以简要综述。

关键词：肺炎链球菌肺炎肺炎链球菌肺炎球菌肺炎肺炎球菌诊断

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新疆出血热病毒的研究进展

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微生物学免疫学进展 2005年第4期33卷 52-55页

作者：朱晓光杨银辉祝庆余军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

克里米亚-刚果出血热是由克里米亚-刚果出血热病毒引起的一种人畜共患病,以发热、出血为典型特征,主要传播媒介为硬蜱,其发病具有明显的季节性与地方性。克里米亚-刚果出血热于20世纪40年代在克里米亚半岛首次爆发,1956年又在刚果流行,... 详细信息

克里米亚-刚果出血热是由克里米亚-刚果出血热病毒引起的一种人畜共患病,以发热、出血为典型特征,主要传播媒介为硬蜱,其发病具有明显的季节性与地方性。克里米亚-刚果出血热于20世纪40年代在克里米亚半岛首次爆发,1956年又在刚果流行,故名克里米亚-刚果出血热,目前该病广泛分布于亚洲、非洲和欧洲地区,致死率约为30%。该病在我国于1965年首次发现于新疆,因此又称为新疆出血热。克里米亚-刚果出血热病毒属于布尼亚病毒科内罗病毒属,为单股负链RNA病毒。本文综述了该病的流行病学、病原学、临床症状、发病机理、检测方法、防治措施等方面的进展。

关键词：新疆出血热克里米亚-刚果出血热蜱传疾病

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痘苗病毒载体在冠状病毒反向遗传学中的应用

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国外医学（病毒学分册） 2005年第4期12卷 121-125页

作者：韩剑峰秦鄂德病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

反向遗传学方法是研究RNA病毒的主要方法,痘苗病毒载体则是感染性克隆技术的主要媒介,目前这一技术已趋向成熟并扩大其应用领域及对象。本文对痘苗病毒载体的构建、在冠状病毒反向遗传学中的应用情况以及目前该领域的进展作一综述。

关键词：痘苗病毒载体冠状病毒反向遗传学感染性克隆技术

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登革2型病毒衣壳蛋白在哺乳动物细胞中的表达与鉴定

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生物技术通讯 2005年第6期16卷 595-597页

作者：秦成峰秦鄂德军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

从构建的重组质粒pLEX-C中高保真PCR获得编码登革2型病毒43株C基因(D2C)的DNA片段,通过基因重组的方法将其克隆入真核表达载体pcDNA6/V5-His获得了重组真核表达载体pc/D2C。经电穿孔的方法转染BHK21细胞后,分别通过RT-PCR、免疫荧光和We... 详细信息

从构建的重组质粒pLEX-C中高保真PCR获得编码登革2型病毒43株C基因(D2C)的DNA片段,通过基因重组的方法将其克隆入真核表达载体pcDNA6/V5-His获得了重组真核表达载体pc/D2C。经电穿孔的方法转染BHK21细胞后,分别通过RT-PCR、免疫荧光和Western印迹鉴定表达的蛋白。结果重组蛋白在BHK21细胞中获得表达,表达的蛋白主要存在于胞浆中,并具有较好的抗原性,能够被抗登革病毒衣壳蛋白单克隆抗体特异识别。此研究为深入了解登革病毒衣壳蛋白在病毒复制及组装过程中的生物学功能奠定了基础。

关键词：登革病毒衣壳蛋白真核表达

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云南虻科四新种(双翅目)

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寄生虫与医学昆虫学报 2005年第3期12卷 171-176页

作者：许荣满郭天宇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室2004DAV00214

本文主要报道采自云南的虻科4新种,分别命名为学忠虻***.,中平虻***.,副异额虻***.和勐定麻虻***.。模式标本保存在军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。

关键词：双翅目虻科麻虻属虻属新种新种虻科云南双翅目 sp. 医学昆虫军事医学标本保存标本馆

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