检索结果-内蒙古大学图书馆

寄生虫与医学昆虫学报 2013年第2期20卷 120-124页

作者：姚李四邵丽筠王刚刘阳刘勇先浦昀燕青丽张晓龙张吉徐宝梁王宝麟赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国检验检疫科学研究院北京100123 吉林出入境检验检疫局长春130062 长白出入境检验检疫局吉林长白134400

用针对汉坦病毒L（大）片段的特异引物对21份大林姬鼠鼠肺样本进行检测，有2份扩增出特异性条带，经序列测定显示是Amur样病毒，两株病毒存在一个碱基的差异。随后对一株样本的M和S片段进行了全长扩增，结果显示其M片段和H5株同源性最高... 详细信息

用针对汉坦病毒L（大）片段的特异引物对21份大林姬鼠鼠肺样本进行检测，有2份扩增出特异性条带，经序列测定显示是Amur样病毒，两株病毒存在一个碱基的差异。随后对一株样本的M和S片段进行了全长扩增，结果显示其M片段和H5株同源性最高。S片段和NA33株的同源性最高。根据M片段编码区序列构建的进化树显示，我国和俄罗斯Amur样病毒可归为同一亚型。

关键词：大林姬鼠 Amur样病毒长白县

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2011年第一届牛津国际噬菌体大会介绍

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生物工程学报 2012年第3期28卷 368-375页

作者：范华昊童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

1会议简介噬菌体是一类以原核生物（包括细菌、真菌、放线菌或螺旋体等）为宿主的病毒,它最早于1915年被发现,之后,d＇Herelle在1917年再次发现了这种能裂解细菌的生物类群,并将其命名为＂bacteriophage＂,简称＂phage＂。近年来随着细... 详细信息

1会议简介噬菌体是一类以原核生物（包括细菌、真菌、放线菌或螺旋体等）为宿主的病毒,它最早于1915年被发现,之后,d＇Herelle在1917年再次发现了这种能裂解细菌的生物类群,并将其命名为＂bacteriophage＂,简称＂phage＂。近年来随着细菌耐药形势的日益严峻,越来越多有远见和责任感的科学家和企业开始把目光投向这种细菌的天然病毒，越来越多的科学家开始对噬菌体产生浓厚的兴趣，更多噬菌体产品开始走向市场。

关键词：噬菌体国际牛津会议简介原核生物生物类群科学家细菌

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多重生物检测技术研究进展

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军事医学 2012年第9期36卷 713-717页

作者：张平平王浩然郭兆彪杨瑞馥周蕾军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

多重生物检测因其快速、耗费少、所需样品量少等优点,被广泛用于细菌、病毒、真菌、寄生虫及自身免疫相关抗体等抗原或抗体的快速筛查诊断。多重核酸检测的新技术包括巢式PCR(nPCR)、多重串联PCR、基于毛细管电泳的GeXP平台和luminex x... 详细信息

多重生物检测因其快速、耗费少、所需样品量少等优点,被广泛用于细菌、病毒、真菌、寄生虫及自身免疫相关抗体等抗原或抗体的快速筛查诊断。多重核酸检测的新技术包括巢式PCR(nPCR)、多重串联PCR、基于毛细管电泳的GeXP平台和luminex xMAP多重分析技术平台,多重免疫检测的新技术包括基于上转换发光、多线点、表面等离子共振技术的多重生物检测及基于蛋白芯片的阵列array-ELISA检测。本文综述了近年来多重生物检测新技术在呼吸道感染、腹泻、自身免疫性缺陷和肿瘤等疾病中的应用进展。

关键词：多重PCR 多重免疫检测病原体

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甲型流感病毒H1N1 HA蛋白在果蝇S2细胞中的表达及免疫原性研究

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中国人兽共患病学报 2012年第9期28卷 875-879页

作者：于虹温晶杨裔俞建萍佟双郭彦赵光宇寇志华周育森军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071

目的在果蝇S2细胞表达甲型流感H1N1HA并分析其免疫原性。方法根据GenBank发表的甲型流感病毒(H1N1)HA基因序列,经过密码子优化,全基因合成编码HA的基因,并于其N端引入特定的空间折叠序列,定向连接至表达载体pMT/Bip/V5-His A,构建重组... 详细信息

目的在果蝇S2细胞表达甲型流感H1N1HA并分析其免疫原性。方法根据GenBank发表的甲型流感病毒(H1N1)HA基因序列,经过密码子优化,全基因合成编码HA的基因,并于其N端引入特定的空间折叠序列,定向连接至表达载体pMT/Bip/V5-His A,构建重组表达载体pMT-HA。酶切鉴定正确后,用脂质体转染法与辅助质粒pCoHygro共转染果蝇S2细胞,潮霉素加压筛选稳定细胞系,在无血清培养基中以硫酸铜溶液诱导表达,SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定,经镍柱纯化后免疫小鼠,ELISA检测其诱导的特异性抗体水平。结果获得了稳定表达HA的S2细胞株,目的蛋白以分泌形式表达于上清,并形成三聚体,可以被H1N1HA抗体识别;免疫小鼠后可诱导机体产生抗HA特异性抗体。结论获得了纯化的三聚体形式表达的HA蛋白,并具有较好的免疫原性,具有很好的疫苗应用前景。

关键词：甲型H1N1流感病毒昆虫S2 细胞 HA

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1株保存的马雅罗病毒基因组序列测定及分析

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军事医学 2012年第9期36卷 662-665页

作者：张雨司炳银刘伯华杨银辉祝庆余军事医学科学院微生物与流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京10007

目的对保存的WJBC株马雅罗病毒(MAYV)基因组序列进行测定,阐明其与已报道毒株的关系及追溯其可能来源。方法将MAYV基因组编码区分10段进行RT-PCR扩增,扩增产物直接进行测序,非编码区采用RACE法进行扩增,扩增产物纯化并连接pGEM-T easy... 详细信息

目的对保存的WJBC株马雅罗病毒(MAYV)基因组序列进行测定,阐明其与已报道毒株的关系及追溯其可能来源。方法将MAYV基因组编码区分10段进行RT-PCR扩增,扩增产物直接进行测序,非编码区采用RACE法进行扩增,扩增产物纯化并连接pGEM-T easy载体后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆鉴定后进行测序,用DNAStar软件将测序结果拼接得到基因组序列。下载MAYV核苷酸序列,利用MEGA5.0软件构建系统进化发生树。结果与结论 WJBC株MAYV基因组核苷酸(nt)共11 429 nt,编码3679个氨基酸,其中5'端的2/3基因组编码4种非结构蛋白nsP1,nsP2,nsP3,nsP4;3'端的1/3基因组编码5种结构蛋白C、E3、E2、6K和E1蛋白。结构基因和非结构基因之间有26 nt的连接区为非翻译区。病毒基因组5'端和3'端分别有76、290 nt的非编码区。进化树结果显示,WJBC株马雅罗病毒与TRVL4675株MAYV亲缘性最高。

关键词：马雅罗病毒基因组逆转录聚合酶链反应

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某种正压生物防护服的病毒气溶胶防护性能评价

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中华预防医学杂志 2012年第1期46卷 67-69页

作者：李娜温占波杨文慧王洁李劲松胡凌飞董晓凯刘克洋曹杰军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室国家生物防护装备工程技术研究中心北京100071

目的评价某种正压生物防护服对病毒气溶胶的防护效果。方法制备Phi—X174噬菌体悬液，在气溶胶密闭舱室内发生Phi—X174噬菌体气溶胶，应用空气动力学粒子分析仪检测粒子直径，在高送风档和低送风档条件下，调节气溶胶密闭舱室内的湿度... 详细信息

目的评价某种正压生物防护服对病毒气溶胶的防护效果。方法制备Phi—X174噬菌体悬液，在气溶胶密闭舱室内发生Phi—X174噬菌体气溶胶，应用空气动力学粒子分析仪检测粒子直径，在高送风档和低送风档条件下，调节气溶胶密闭舱室内的湿度，用安德森六级采样器采样，通过计数噬菌体噬斑数评价该正压生物防护服对病毒气溶胶的防护效率。结果Phi-X174噬菌体气溶胶粒子质量中值直径约为0．922仙m，气溶胶粒子本底浓度〉2．0×10^4个／m^3，在不同的测试条件下，该正压生物防护服内病毒气溶胶浓度为0—21PFU／m^3，对Phi—X174噬菌体气溶胶粒子防护效率均〉99．9％，送风量（P=0．84）、环境湿度（P=0．33）以及采样时间（P=0．07）对正压防护服防护效率的影响无统计学意义。结论该正压生物防护服对Phi—X174噬菌体气溶胶的防护效果较好。

关键词：防护服评价研究 Phi—X174噬菌体病毒气溶胶

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流感疫苗研制的新策略

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生物工程学报 2012年第5期28卷 550-556页

作者：刘志辉姜涛秦鄂德冉多良秦成峰新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

流感病毒感染可引起急性呼吸道传染病,严重危害人类的健康与生命。疫苗免疫是防控流感的重要手段。目前广泛应用的传统灭活疫苗和减毒活疫苗,在预防流感中发挥了重要作用,但存在通用性差和免疫效率低等不足。研制更为安全高效特别是能... 详细信息

流感病毒感染可引起急性呼吸道传染病,严重危害人类的健康与生命。疫苗免疫是防控流感的重要手段。目前广泛应用的传统灭活疫苗和减毒活疫苗,在预防流感中发挥了重要作用,但存在通用性差和免疫效率低等不足。研制更为安全高效特别是能针对多种流感亚型的新型广谱疫苗成为当前流感疫苗研究的热点。随着结构生物学和反向遗传生物学等新技术的迅速发展,一些新策略不断应用于新型流感疫苗的研究,显示出良好的应用前景。

关键词：流感病毒疫苗新技术弹性蛋白酶病毒样颗粒

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2型猪链球菌胞壁蛋白MRP的截短表达、纯化及抗原保护性评价

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第2期28卷 117-119页

作者：王萍萍骈亚亚袁媛郑玉玲姜永强熊正英陕西师范大学体育学院陕西西安710026 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:扩增猪链球菌2型(Streptococcus suis 2)05Z33中的mrp基因,并在大肠杆菌BL21中重组表达,以获得高纯度的重组MRP截短蛋白,验证其抗原保护性。方法:以05ZYH33基因组为模板并设计引物扩增目的片段,构建表达质粒,利用亲和层析对目的蛋... 详细信息

目的:扩增猪链球菌2型(Streptococcus suis 2)05Z33中的mrp基因,并在大肠杆菌BL21中重组表达,以获得高纯度的重组MRP截短蛋白,验证其抗原保护性。方法:以05ZYH33基因组为模板并设计引物扩增目的片段,构建表达质粒,利用亲和层析对目的蛋白进行纯化,免疫新西兰大白兔制备抗血清并测其效价。通过抗原保护实验及抗血清调理的全血杀伤实验验证重组MRP蛋白抗原保护性。结果:重组MRP蛋白在大肠杆菌中高浓度表达,纯化获得了高纯度的MRP截短蛋白并制备获得了抗血清。经该蛋白免疫过的CD-1小鼠与阴性对照组相比,存活率显著升高。经抗血清调理后,野生株05ZYH33在全血中的存活率显著降低,突变株ΔMRP无显著变化。结论:MRP蛋白有较高的抗原保护性。

关键词：猪链球菌2型 MRP 抗原保护性

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S/D法对人凝血因子Ⅷ产品中人免疫缺陷病毒灭活效果的研究

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中国消毒学杂志 2012年第8期29卷 677-678,681页

作者：刘思扬庄道民董如华白丽李韩平鲍作义李林刘永健王晓林李天一李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究S/D法对人凝血因子Ⅷ中污染的人免疫缺陷病毒灭活效果。方法采用细胞培养法,对S/D处理人凝血因子Ⅷ灭活HIV的效果进行了检测。结果在常温(25℃)条件下,在污染有HIV的人凝血因子Ⅷ种混入体积分数9%S/D灭活剂,作用60 min,HIV灭活... 详细信息

目的研究S/D法对人凝血因子Ⅷ中污染的人免疫缺陷病毒灭活效果。方法采用细胞培养法,对S/D处理人凝血因子Ⅷ灭活HIV的效果进行了检测。结果在常温(25℃)条件下,在污染有HIV的人凝血因子Ⅷ种混入体积分数9%S/D灭活剂,作用60 min,HIV灭活对数值为6.83。重复处理3批人凝血因子Ⅷ制品,对HIV均达到完全灭活,经细胞培养盲传三代,均未出现细胞病变。结论 S/D法能够完全灭活人凝血因子Ⅷ产品中污染的人免疫缺陷病毒,灭活效果可靠。

关键词：人凝血因子Ⅷ 人免疫缺陷病毒 S/D处理灭活效果

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云南省2008-2009年HIV-1病毒株亚型分布

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中华流行病学杂志 2012年第8期33卷 836-840页

作者：杨绍敏李惠琴陈立力李林刘永健钟敏李健健杨壁珲高丽樊移山李敬云云南省传染病专科医院艾滋病关爱中心HIV实验室昆明650301 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的了解云南省目前HIV-1流行株的基因型及其地区和人群分布。方法收集2008-2009年云南省15个地市788例HIV感染者／艾滋病患者（HIV／AIDS）的血浆标本和背景信息，采用RT-PCR法分别扩增HIV-1 gag、pol全长基因（1584bp和3147bp）及env... 详细信息

目的了解云南省目前HIV-1流行株的基因型及其地区和人群分布。方法收集2008-2009年云南省15个地市788例HIV感染者／艾滋病患者（HIV／AIDS）的血浆标本和背景信息，采用RT-PCR法分别扩增HIV-1 gag、pol全长基因（1584bp和3147bp）及env基因的C2V3片段（558bp），序列编辑后用Genotyping及Mega5．03软件工具确定病毒基因型，分析HIV-1株的地区和人群分布特征。结果788例标本获得1728条HIV-1基因序列，其中全长gag基因序列599条、全长pof基因序列564条、env基因C2V3区序列525条，确定617例基因亚型，构成比分别为CRF08_BC（50．2％）、CRF01_AE（25．0％）、未知重组（10．2％）、CRF07_BC（9．2％）、C亚型（2．9％）和B（B′）亚型（2．4％）。HIV-1株在云南省具有地域分布特征，可分为以临沧和昆明为代表的CRF08_BC为主的地区，以德宏和西双版纳为代表的CRF08_BC与CRF01_AE构成比相近的地区；未知重组型在云南省少数民族中所占比例（17．0％）显著高于汉族（6．7％）；异性性传播感染者和静脉注射吸毒感染者的CRF08_BC亚型均占总数的50．0％以上，但前者CRF01_AE的构成比占约30．0％，后者未知重组型和CRF07_BC的比例分别达到约15．0％。未知重组病毒株呈现两种重组模式，分别为B（B′）／C重组和以CRF01_AE为母株嵌入B（B′）和／或C片段重组，并以前者为主（74．6％）。结论云南省HIV-1株组成复杂，具有显著的地域、民族和传播途径相关的特征，并出现新型重组病毒株，应密切监测。

关键词：艾滋病毒1型基因型分子流行病学

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