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中华高血压杂志 2013年第3期21卷 265-271页

作者：苗艳菊杨敏郑娇王绿娅杜杰首都医科大学附属北京安贞医院心血管生物学研究室北京市心肺血管疾病研究所省部共建心血管重塑相关疾病教育部重点实验室

目的观察Akt1在高血压心肌纤维化中的作用,并探讨其对心脏成纤维细胞转分化的影响。方法 34只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和高血压组,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),于第7天时采用鼠尾套法检... 详细信息

目的观察Akt1在高血压心肌纤维化中的作用,并探讨其对心脏成纤维细胞转分化的影响。方法 34只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和高血压组,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),于第7天时采用鼠尾套法检测小鼠尾动脉血压、超声检测心脏结构及功能;处死并取其心脏进行组织切片,行Masson染色观察胶原沉积;流式细胞学方法检测心脏中巨噬细胞浸润;免疫组织化学染色检测炎症细胞因子[诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]和促纤维化因子[转化生长因子β(TGF-β)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]表达;实时定量PCR检测Akt1及α-SMAmRNA水平;Westernblot检测α-SMA蛋白表达以及Akt1蛋白表达和激活。体外分离原代骨髓巨噬细胞进行Akt1siRNA及ControlsiRNA干扰后与乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)共培养,观察促纤维化因子mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,高血压组在AngⅡ灌注7d时血压升高[(147.1±1.0)比(104.6±2.1)mmHg,P<0.01],射血分数和短轴缩短率均升高(P<0.05);胶原沉积明显增加[(2.06±0.18)%比(0.35±0.04)%,P<0.01];心脏组织中巨噬细胞浸润增加[(1.75±0.15)%比(0.44±0.07)%,P<0.01],促炎因子(iNOS、IL-1β、TNF-α)及促纤维化因子(TGF-β、α-SMA)表达升高(均P<0.01)。高血压组Akt1及α-SMAmRNA表达上调(P<0.01),Akt1磷酸化水平上调(P<0.01),同时α-SMA蛋白表达明显上调(P<0.05)。体外实验,与单独CFs组相比,CFs与转染ControlsiRNA巨噬细胞共培养组促纤维化因子(α-SMA、TGF-β、Ⅰ型胶原)mRNA表达升高(P<0.05或P<0.01),α-SMA蛋白表达明显上调(P<0.01),而CFs与转染Akt1siRNA巨噬细胞共培养组上述促纤维化因子mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01),α-SMA蛋白表达下降(P<0.05)。结论在高血压心脏纤维化疾病早期,心脏组织Akt1活性增加,可能通过促进炎症反应,介导巨噬细胞作用下的成纤维细胞转分化,进而促进高血压导致的心肌纤维化。

关键词：高血压心肌纤维化炎症反应 Akt1 血管紧张素Ⅱ

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7个家族性高胆固醇血症纯合家系致病基因检测及其产前基因诊断

7个家族性高胆固醇血症纯合家系致病基因检测及其产前基因诊断

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脂质组学与脂蛋白的新功能——第十二届全国脂质与脂蛋白学术会议

作者：徐胜媛潘晓冬孙立元江龙关啸杨士伟刘俊涛姚凤霞王绿娅首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室中国协和医科大学北京协和医院妇产科中国医学科学院基础医学研究所/中国协和医科大学基础医学院医学遗传学系

目的:针对有再生育愿望的FH纯合家系明确致病基因突变,进而分别收集再次妊娠母亲胎盘绒毛或羊水脱落细胞提取胎儿DNA,明确胎儿携带该家系内致病突变位点及数目,实现产前基因诊断。方法:1、选取7个有再生育愿望的临床确诊的FH纯合家系;2... 详细信息

目的:针对有再生育愿望的FH纯合家系明确致病基因突变,进而分别收集再次妊娠母亲胎盘绒毛或羊水脱落细胞提取胎儿DNA,明确胎儿携带该家系内致病突变位点及数目,实现产前基因诊断。方法:1、选取7个有再生育愿望的临床确诊的FH纯合家系;2、取先证者及其父母抗凝血提取基因组DNA;3、PCR扩增测序以排除ApoB100及PCSK9基因突变;4、重点对LDLR启动子及全部18个外显子进行扩增测序;5、使用SWISS-MODEL服务器预测新突变LDLR蛋白三级结构变化;6、母亲再次妊娠时于孕13周或18

关键词：产前基因诊断基因突变家族性高胆固醇血症基因检测

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7个家族性高胆固醇血症纯合家系致病基因检测及其产前基因诊断

7个家族性高胆固醇血症纯合家系致病基因检测及其产前基因诊断

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2014年第十二届全国脂质与脂蛋白学术会议

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35岁以上血压控制未达标患者血压特征及与缺血性脑卒中的关系

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中华高血压杂志 2013年第6期21卷 565-568页

作者：左惠娟林运张娟苏江莲首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所人群防治研究室首都医科大学附属北京安贞医院心内科安贞里社区卫生服务站北京100029

目的了解血压控制未达标高血压患者血压类型、脉压、血压分级情况以及与缺血性脑卒中患病情况的关系。方法 2012-03-12在北京安贞医院门诊及所属社区卫生服务中心及社区卫生服务站门诊筛查血压控制未达标的高血压患者3909例,144例患脑... 详细信息

目的了解血压控制未达标高血压患者血压类型、脉压、血压分级情况以及与缺血性脑卒中患病情况的关系。方法 2012-03-12在北京安贞医院门诊及所属社区卫生服务中心及社区卫生服务站门诊筛查血压控制未达标的高血压患者3909例,144例患脑卒中。结果男性占49.4%(1932例),女性占50.6%(1977例)。血压分级为1级者所占比例最大(61.3%)。18.5%为单纯舒张压未达标,33.8%为单纯收缩压未达标,47.7%为收缩压和舒张压均未达标。女性单纯收缩压未达标的比例高于男性(40.2%比27.4%,P<0.05),而单纯舒张压未达标的比例低于男性(13.9%比23.3%,P<0.05)。55岁以前患者单纯收缩压控制未达标的比例均较低(35～<45岁组为6.5%,45～<55岁组为17.9%),而65岁以上患者单纯舒张压控制未达标比例极低(6.7%)。控制可能的混杂因素后,和收缩压及舒张压均未达标的患者相比,单纯舒张压控制未达标脑卒中的患病危险低50%(OR=0.493,95%CI0.256～0.947)。伴有糖尿病者脑卒中的危险升高1.5倍(OR=2.534,95%CI1.726～3.720)。结论血压未达标以单纯收缩压未达标以及收缩压和舒张压均未达标为主,单纯舒张压控制未达标的患者脑卒中患病危险较其他两组低,男性、高龄、糖尿病与缺血性脑卒中的患病有关。

关键词：高血压脉压缺血性脑卒中

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兔外周血与骨髓源性内皮祖细胞培养鉴定及生物学特性的研究

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心肺血管病杂志 2013年第3期32卷 351-356页

作者：周晨阳陈忠辛毅杨燎王盛唐小斌成伟刘丹首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所血管外科北京100029 北京市心肺血管疾病研究所分子生物研究室北京100029

目的:探索并建立兔内皮祖细胞(EPCs)的体外培养、鉴定方法。方法:采用密度梯度分离法分别从兔外周血和骨髓中分离出单个核细胞,接种于预包被明胶的培养瓶,并应用培养基(EBM-2)诱导培养,诱导分化为EPCs;在倒置显微镜下观察两种源性细胞... 详细信息

目的:探索并建立兔内皮祖细胞(EPCs)的体外培养、鉴定方法。方法:采用密度梯度分离法分别从兔外周血和骨髓中分离出单个核细胞,接种于预包被明胶的培养瓶,并应用培养基(EBM-2)诱导培养,诱导分化为EPCs;在倒置显微镜下观察两种源性细胞生长过程;台盼蓝法测定细胞传代成活率;通过绘制生长曲线法、MTT法、DNA周期检测比较两种源性获得的EPCs增殖情况;采用免疫荧光染色观察EPCs相关抗原CD34、CD31、CD133及vWF因子的表达。结果:两种源性EPCs均于培养3～4d完全贴壁,呈克隆样生长,7～9d形成类似成熟血管内皮细胞形态,细胞数量逐渐增多,细胞成活率均为95%。两种源性获得的第2代细胞生长曲线近似"s"形、MTT法显示3～5d细胞增殖较明显,外周血源性EPCs G0-G1期和S+G2+M期所占比例分别为96.48%和3.52%,骨髓源性EPCs G0-G1期和S+G2+M期所占比例分别为97.11%和1.84%。第2代EPCs进行免疫荧光鉴定结果显示:两种源性内皮祖细胞均阳性表达CD34、CD133、vWF因子,CD31弱阳性表达。结论:两种源性的EPCs均可高效获得且在体外稳定培养。与传统的骨髓源性EPCs相比较,从外周血源获得的EPCs是一种可靠、简便的培养方法,为组织工程学提供理想的细胞来源。

关键词：内皮祖细胞外周血骨髓体外培养细胞鉴定兔

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脂蛋白亚组分型技术进展及其在脂代谢异常检测中的应用

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心肺血管病杂志 2013年第5期32卷 652-654页

作者：张凌燕王绿娅蔺洁首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所妇产科北京100029 北京市心肺血管疾病研究所心血管生物研究室北京100029 北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室北京100029

血浆脂蛋白包括LDL、HDL、乳糜微粒（chylomicrons,CM）及VLDL-C。近年来对LDL亚组分与冠心病的关系,进行了深入的研究[1-2],认为小而密LDL比大而轻LDL在动脉粥样硬化（As）的发生中起着更为重要的作用,是冠心病的危险因子[1]。

关键词：脂蛋白亚组快速分析系统低密度脂蛋白低密度脂蛋白亚组分冠心病危险因素

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线粒体融合蛋白2在原发性高血压患者血管组织和平滑肌细胞中表达的研究

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中国医药 2013年第6期8卷 772-774页

作者：刘雅赵莉敏刘洁琳文杰王佐广刘亚萍温绍君王世奇首都医科大附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所高血压研究室 100029 .浙江省宁波市第一医院心内科

目的观察线粒体融合蛋白2（Mfn2）在人血管组织和平滑肌细胞（VSMCs）中的表达情况。方法选取2006年10月至2007年10月在北京安贞医院行冠状动脉旁路移植术的患者60例，分为高血压组和正常血压组各30例，收集术中剩余桥血管（乳内动脉）... 详细信息

目的观察线粒体融合蛋白2（Mfn2）在人血管组织和平滑肌细胞（VSMCs）中的表达情况。方法选取2006年10月至2007年10月在北京安贞医院行冠状动脉旁路移植术的患者60例，分为高血压组和正常血压组各30例，收集术中剩余桥血管（乳内动脉）。取1例正常产妇产新生婴儿脐带，进行人乳内动脉和VSMCs培养。提取乳内动脉组织和VSMCs总RNA，RNA的反转录-cDNA的聚合酶链式扩增（RT—PCR），观察2组患者Mfn2的表达情况。用不同浓度血小板源性生长因子（PDGF—BB）诱导VSMCs增殖并检测Mfn2表达情况。结果2组患者血压水平、体质指数差异有统计学意义（P〈0．05）。人乳内动脉血管组织和VSMCs均有Mfn2表达，高血压组Mfn2表达水平均低于正常血压组（人乳内动脉血管组织：0．42±0．10比0．49±0．12，P=0．014；VSMCs：0．29±0．07比0．334-0．08，P=0．041）。高血压组原代VSMCs细胞计数高于正常血压组（0．48±0．15比0．38±0．11，P=0．005）。与对照组相比，随PDGF—BB浓度增加VSMCs计数增加（对照组：0．36±0．09，10μg/L组：0．53±0．13，100μg/L组：0．54±0．12），VSMCs的Mfn2表达减少（对照组：0．31±0．08，10μg/L组：0．22±0．06，100μg/L组：0．21±0．05，P〈0．05）；100μg/L组与10μg/L组相比，VSMCs细胞计数和VSMCs的Mfn2表达差异无统计学意义（P值分别为0．862和0．755）。结论在人血管组织和培养的VSMCs中验证了高血压和正常血压人选者存在Mfn2的表达差别。

关键词：原发性高血压线粒体融合蛋白乳内动脉平滑肌细胞

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间充质干细胞治疗心肌缺血性疾病的临床研究进展

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心肺血管病杂志 2013年第3期32卷 377-379页

作者：李娜孔晴宇辛毅黄益民张兆光周玉杰首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所细胞与分子生物学研究室北京100029 北京市心肺血管疾病研究所心外科北京100029 北京市心肺血管疾病研究所心内科北京100029

心肌缺血性疾病导致梗死区心肌细胞不可逆死亡,疤痕组织形成,心室重构,心功能降低最终导致心力衰竭。尽管现行心脏内外科治疗可以很大程度地降低了急性心肌梗死的病死率。然而并不能使梗死区梗死心肌细胞再生,导致心功能不可逆的降低。... 详细信息

心肌缺血性疾病导致梗死区心肌细胞不可逆死亡,疤痕组织形成,心室重构,心功能降低最终导致心力衰竭。尽管现行心脏内外科治疗可以很大程度地降低了急性心肌梗死的病死率。然而并不能使梗死区梗死心肌细胞再生,导致心功能不可逆的降低。间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）是来源于骨髓和脐带,可以在体外被培养扩增,具有分化多种组织细胞能力的小细胞群。

关键词：间充质干细胞,细胞治疗心肌梗死心肌缺血性疾病

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组织蛋白酶抑制剂胱抑素C的表达和炎性反应在腹主动脉瘤发病中的意义

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新乡医学院学报 2013年第1期30卷 1-4,8页

作者：秦彦文曹旭方微刘静张耀中王淼首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所心血管生物研究室北京100029 首都医科大学附属北京安贞医院病理科北京100029 北京市心肺血管疾病研究所流行病研究室北京100029

目的探讨组织蛋白酶抑制剂胱抑素C(Cystatin C)和炎性反应在腹主动脉瘤(AAA)发病中的意义。方法收集31例AAA患者(AAA组)和32例非AAA患者(对照组)的血浆和AAA组的病变样本,免疫组织化学法检测AAA组病变组织中Cystatin C的表达和巨噬细胞... 详细信息

目的探讨组织蛋白酶抑制剂胱抑素C(Cystatin C)和炎性反应在腹主动脉瘤(AAA)发病中的意义。方法收集31例AAA患者(AAA组)和32例非AAA患者(对照组)的血浆和AAA组的病变样本,免疫组织化学法检测AAA组病变组织中Cystatin C的表达和巨噬细胞表面抗原2(Mac-2)的含量;酶联免疫吸附法测定AAA组和对照组血浆的Cystatin C水平,常规生物化学法检测血脂、血糖水平,采用免疫散射比浊法检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果对照组血管动脉壁高表达Cystatin C,而AAA组血管动脉壁的Cystatin C表达显著降低(P<0.01),同时Mac-2表达较对照组显著增加(P<0.01);AAA组患者血浆Cystatin C水平为(32.55±17.31)μg.L-1,显著低于对照组的(78.13±43.13)μg.L-1,2组比较差异有统计学意义(P<0.01),且与AAA直径呈显著负相关(r=-0.560,P<0.01);AAA组患者hs-CRP水平较对照组显著升高,与AAA直径大小呈显著正相关(r=0.762,P<0.01);血浆Cystatin C与hs-CRP水平显著负相关(r=-0.530,P<0.01);多元线性逐步回归分析结果显示,在校正了与AAA直径大小的相关因素后,Cystatin C和hs-CRP水平与AAA直径大小独立相关(P<0.05,0.01)。结论血浆Cystatin C联合hs-CRP水平检测结果可作为判断AAA炎性反应的参考指标。

关键词：腹主动脉瘤组织蛋白酶胱抑素C 炎性反应超敏C反应蛋白巨噬细胞

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汉族散发法洛四联症患儿GATA6、TBX20基因的表达研究

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心肺血管病杂志 2013年第2期32卷 207-210页

作者：赵鹤罗毅李玉琳张聪聪秦广宁屈昕芃首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所小儿心脏外科北京100029 首都儿科研究所北京市心肺血管疾病研究所血管生物研究室北京100029

目的:通过研究中国汉族法洛四联症(tetralogy of Fallot,TOF)患儿心肌中GATA6、TBX20基因的表达变化,初步探讨GATA6、TBX20基因与汉族TOF分子发病机制之间的关系。方法:实验组选取中国汉族TOF患儿15例,年龄6.5个月～8岁,平均1.9岁,术中... 详细信息

目的:通过研究中国汉族法洛四联症(tetralogy of Fallot,TOF)患儿心肌中GATA6、TBX20基因的表达变化,初步探讨GATA6、TBX20基因与汉族TOF分子发病机制之间的关系。方法:实验组选取中国汉族TOF患儿15例,年龄6.5个月～8岁,平均1.9岁,术中常规切除并留取右心室流出道肥厚心肌;对照组选取汉族室间隔缺损患儿15例,年龄4.5个月～5岁,平均2.2岁。术中留取患儿右心房壁少量心肌组织。提取心肌组织RNA,应用实时荧光聚合酶链反应检测两组心肌中的GATA6、TBX20基因mRNA表达;应用免疫组化染色技术,检测两组心肌中的GATA6、TBX20蛋白的表达并进行统计学比较分析。结果:TOF患者心肌中GATA6、TBX20基因mRNA和蛋白表达水平均较对照组显著降低,差异有统计学意义;同时,TOF患儿心肌TBX20mRNA水平与患儿肺动脉指数呈正相关(r=0.6782,P<0.05)。结论:人类心肌中存在GATA6、TBX20mRNA和蛋白的表达;在中国汉族人群中,TOF的发生可能与心肌组织中GATA6、TBX20基因表达下调有关。

关键词： GATA6基因 TBX20基因先天性心脏病法洛四联症

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