检索结果-内蒙古大学图书馆

分子植物育种 2021年第8期19卷 2538-2549页

作者：杨锐霞刘新茹蓝宝良王浩刘晓徐吉臣北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083

扩展蛋白作为一种细胞壁松弛蛋白,参与了植物的生长发育和抗性过程,在植物基因组中具有不可或缺的作用。本研究依据已经测序的红皮柳基因组数据,鉴定了34个扩展蛋白基因,隶属于4个不同的亚家族,分布在14条染色体上。蛋白理化特征分析发... 详细信息

扩展蛋白作为一种细胞壁松弛蛋白,参与了植物的生长发育和抗性过程,在植物基因组中具有不可或缺的作用。本研究依据已经测序的红皮柳基因组数据,鉴定了34个扩展蛋白基因,隶属于4个不同的亚家族,分布在14条染色体上。蛋白理化特征分析发现,多数扩展蛋白表现偏碱性,脂溶指数较高,蛋白结构稳定性较好。亚家族内的成员序列保守性更强,氨基酸一致率介于34.2%~99.4%之间,而不同亚家族间成员的氨基酸一致率介于15.0%~39.8%之间。亚家族内的基因外显子-内含子结构模式相似,亚家族间的基因结构组成存在明显差异。密码子使用分析发现,红皮柳扩展蛋白基因具有5个高频密码子,自然选择对密码子使用偏性影响较大。共线性分析显示,红皮柳扩展蛋白基因的分化与柳树进化过程中的基因组倍性事件有关。研究结果有助于理解扩展蛋白基因在柳树生长发育及进化中的地位,也为深入研究柳树扩展蛋白基因功能提供了参考。

关键词：红皮柳扩展蛋白基因家族密码子偏性基因进化

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理化处理诱导合子染色体加倍选育青杨派杂种四倍体

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北京林业大学学报 2010年第5期32卷 63-66页

作者：王君康向阳石乐鲁敏杨珺北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

利用四倍体与二倍体杂交是培育植物三倍体的最有效途径。为提高四倍体诱导效率,分别施加0.5%秋水仙碱和38～44℃高温对授粉后6～9d的‘哲引3号杨’花序进行处理,对理化处理诱导合子染色体加倍选育杨树四倍体的技术方法进行了初步探索,... 详细信息

利用四倍体与二倍体杂交是培育植物三倍体的最有效途径。为提高四倍体诱导效率,分别施加0.5%秋水仙碱和38～44℃高温对授粉后6～9d的‘哲引3号杨’花序进行处理,对理化处理诱导合子染色体加倍选育杨树四倍体的技术方法进行了初步探索,获得青杨派杂种四倍体8株。其中,施加0.5%秋水仙碱溶液浸泡处理授粉后7d的‘哲引3号杨’花序24h,获得四倍体3株;施加38、41和44℃高温处理授粉后7～8d的‘哲引3号杨’花序4h,获得四倍体5株。推测授粉后7～8d可能是‘哲引3号杨’受精后合子发生第一次有丝分裂较为集中的时期,适时施加理化处理可以获得一定比例的四倍体植株。

关键词：青杨派四倍体合子秋水仙碱高温处理

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GST-pull down技术筛选毛白杨天冬氨酸蛋白酶PtoAED3互作蛋白

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北京林业大学学报 2021年第5期43卷 64-74页

作者：赵杰王兵骆梅莫黎杰李慧刘迪陆海北京林业大学生物科学与技术学院北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083

【目的】天冬氨酸蛋白酶属于蛋白水解酶家族,为了解析毛白杨天冬氨酸蛋白酶PtoAED3在植物生长发育中的分子调节机制,利用GST-pull down联合质谱技术,对PtoAED3的互作蛋白进行鉴定和分析。【方法】通过同源克隆获得了毛白杨PtoAED3的CDS... 详细信息

【目的】天冬氨酸蛋白酶属于蛋白水解酶家族,为了解析毛白杨天冬氨酸蛋白酶PtoAED3在植物生长发育中的分子调节机制,利用GST-pull down联合质谱技术,对PtoAED3的互作蛋白进行鉴定和分析。【方法】通过同源克隆获得了毛白杨PtoAED3的CDS序列,构建含GST标签的原核表达载体pGEX-4T-PtoAED3。使用IPTG诱导GST-PtoAED3融合蛋白表达后,利用GST标签对PtoAED3蛋白进行纯化,纯化后的PtoAED3蛋白与毛白杨植株总蛋白共孵育,应用GST-pull down技术获得毛白杨总蛋白中与PtoAED3蛋白相互作用的候选蛋白,随后通过质谱技术对筛选到的候选蛋白进行鉴定与分析。【结果】通过质谱技术鉴定这些蛋白的氨基酸序列,共筛选出128个与PtoAED3特异性结合的候选互作蛋白,这些互作蛋白涉及到细胞进程、代谢过程、应激反应、生物调节、发育过程等多个生物学过程。【结论】通过GSTpull down实验联合质谱技术,筛选出毛白杨中与PtoAED3互作的候选蛋白,为研究毛白杨PtoAED3与底物或复合物的互作及其影响毛白杨生长发育的分子调节机制提供了初步方向。

关键词： PtoAED3 GST-pull down 质谱互作蛋白

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凤丹愈伤组织培养体系建立及丹皮酚含量测定

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天然产物研究与开发 2020年第7期32卷 1182-1189页

作者：王若馨纪楠楠王华芳北京林业大学林木育种国家工程实验室北京林业大学生物科学与技术学院北京100083

本文旨在建立凤丹(Paeonia ostii ***)愈伤组织培养及制取丹皮酚的技术体系,为细胞工程制药提供技术基础。凤丹去皮种子以70%乙醇(V/V)浸泡2.0 min和有效氯1.0%的二氯异氰尿酸钠溶液浸泡20 min,去污染率高达97.78%;剥取种胚接种在含6-... 详细信息

本文旨在建立凤丹(Paeonia ostii ***)愈伤组织培养及制取丹皮酚的技术体系,为细胞工程制药提供技术基础。凤丹去皮种子以70%乙醇(V/V)浸泡2.0 min和有效氯1.0%的二氯异氰尿酸钠溶液浸泡20 min,去污染率高达97.78%;剥取种胚接种在含6-苄氨基嘌呤1.5 mg/L、2,4-二氯苯氧乙酸2.0 mg/L的MS培养基上,愈伤组织诱导率达90.00%;愈伤组织在含6-苄氨基嘌呤1.8 mg/L、萘乙酸0.6 mg/L、蔗糖30 g/L、水解酪蛋白0.4 g/L、琼脂5 g/L、pH 7.3的改良WPM培养基上暗培养25天,增殖倍数达3.53,褐化率为11.78%;基于天然产物丹皮酚含量和愈伤组织生长曲线,培养25天时丹皮酚含量达到最高,为最佳收获期。

关键词：凤丹愈伤组织增殖次生代谢物丹皮酚

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毛白杨植物络合素合酶(PtPCS)基因克隆及其表达研究

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分子植物育种 2012年第2期10卷 174-183页

作者：柳玉霞王晓桐苏旭东代亮张志毅徐吉臣北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083

植物络合素(PCs)是植物细胞中一类螯合重金属离子的多肽,对细胞解毒和重金属的富集有重要的作用。植物络合素合酶(PCS)是合成PCs途径中的关键酶。本研究克隆了毛白杨的植物络合素合酶基因PtPCS,该基因cDNA序列全长1512bp,可编码503个氨... 详细信息

植物络合素(PCs)是植物细胞中一类螯合重金属离子的多肽,对细胞解毒和重金属的富集有重要的作用。植物络合素合酶(PCS)是合成PCs途径中的关键酶。本研究克隆了毛白杨的植物络合素合酶基因PtPCS,该基因cDNA序列全长1512bp,可编码503个氨基酸;与其它8种植物同源基因比对显示,它们的氨基酸序列相似性在67%～74.1%之间;构建进化树发现,这9种植物明显的分为两大分支,并且两大分支PCS蛋白的高级结构显示出明显的差异,一种呈月牙状,一种为伞状,重金属超富集植物均为月牙状结构。对毛白杨在不同镉浓度处理下PtPCS基因的表达情况分析发现,毛白杨根、茎、叶中PtPCS基因均表现出先升高后缓慢降低的表达趋势,并且在同一镉浓度处理下,毛白杨不同器官PtPCS基因的表达具有规律性,即根表达量最强,茎次之,叶片最弱。研究结果不仅为植物育种提供了重要的基因资源,也为剖析毛白杨的镉抗性和富集特性的研究奠定了良好的基础。

关键词：毛白杨植物络合素合酶(PCS) 基因克隆基因结构基因表达

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一种改良的云杉针叶总RNA提取方法

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分子植物育种 2014年第3期12卷 554-561页

作者：刘洁江静怡徐吉臣北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083

云杉(Picea)是一种重要的绿化和用材树种。根据云杉的特点,本研究提出了改良的云杉RNA提取方法即SDS酚-LiCl法,以不同种云杉(青杄,白杄和红皮)的针叶为试验材料,采用TRIzol法、CTAB法、改进的SDS酚法和SDS酚-LiCl法提取RNA,并进行了质... 详细信息

云杉(Picea)是一种重要的绿化和用材树种。根据云杉的特点,本研究提出了改良的云杉RNA提取方法即SDS酚-LiCl法,以不同种云杉(青杄,白杄和红皮)的针叶为试验材料,采用TRIzol法、CTAB法、改进的SDS酚法和SDS酚-LiCl法提取RNA,并进行了质量验证。结果表明:TRIzol法不能提取云杉针叶总RNA;CTAB法和改进的SDS酚法提取的RNA质量少,并存在不同程度的多糖、多酚和DNA污染。SDS酚-LiCl法适当增加了提取液中SDS、PVP以及β-巯基乙醇的浓度,结合酸性条件、高盐溶液(3 mol/L NaAc)和LiCl等减少DNA、多糖污染的步骤,最终提取的RNA质量好、得率高。进一步反转录后,利用特异引物进行扩增验证,发现扩增的片段条带清晰,得率高,片段大小符合预期。研究结果表明,SDS酚-LiCl法可以较好的提取云杉RNA并进行后续的基因表达及转录组研究,为推动云杉在转录水平上的研究奠定了基础。

关键词：云杉 RNA 多糖多酚 DNA SDS酚-LiCl法

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城市环境中毛白杨和油松叶片表面颗粒污染物的观察

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北京林业大学学报 2016年第8期38卷 28-35页

作者：王慧刘庆倩安海龙刘超郭惠红夏新莉尹伟伦北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室

本文旨在观察北京地区不同环境中毛白杨和油松叶片表面颗粒污染物状况。选择毛白杨和油松分别代表阔叶乔木和针叶常绿树种。在2014年6、10月分别采集样品,利用环境扫描电镜和X-射线能谱仪对2个采样点2种树种叶表滞留的颗粒物进行了粒径... 详细信息

本文旨在观察北京地区不同环境中毛白杨和油松叶片表面颗粒污染物状况。选择毛白杨和油松分别代表阔叶乔木和针叶常绿树种。在2014年6、10月分别采集样品,利用环境扫描电镜和X-射线能谱仪对2个采样点2种树种叶表滞留的颗粒物进行了粒径与数量统计及来源解析。结果表明:PM2.5是毛白杨和油松叶表总颗粒物的主要成分,颗粒物主要滞留在毛白杨叶片的上表面和油松针叶的平面;在单位叶面积上,油松叶表面的颗粒物较毛白杨多;西直门样地叶表的PM2.5数量多于奥林匹克森林公园,10月份叶表滞留的颗粒物数量多于6月份。西直门样品除硅铝酸盐颗粒外还包括烟尘集合体和飞灰颗粒,且含有较多的S元素;与奥林匹克森林公园相比,PM2.5污染较重的西直门地区样品气孔较小、密度较大。

关键词： PM2.5 毛白杨油松气孔环境扫描电镜 X-射线能谱分析

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银杏扩展蛋白基因的鉴定与特征分析

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分子植物育种 2021年第6期19卷 1741-1749页

作者：王瑞雪杨锐霞尹鹏刘家福徐吉臣北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083

扩展蛋白是植物细胞壁重要的组成部分,在植物生长发育和逆境抗性等方面发挥着重要的作用。为探讨银杏(Ginkgo biloba)中扩展蛋白基因家族的组成和特征,本研究利用扩展蛋白的保守结构域,从银杏基因组中鉴定了28个扩展蛋白基因,包括20个E... 详细信息

扩展蛋白是植物细胞壁重要的组成部分,在植物生长发育和逆境抗性等方面发挥着重要的作用。为探讨银杏(Ginkgo biloba)中扩展蛋白基因家族的组成和特征,本研究利用扩展蛋白的保守结构域,从银杏基因组中鉴定了28个扩展蛋白基因,包括20个EXPA基因、1个EXPB基因、4个EXLA基因和3个EXLB基因。银杏扩展蛋白基因的编码区长度在684~837 bp之间,编码227~278个氨基酸的蛋白质,具有保守的功能域、基序和氨基酸。不同亚家族基因在序列一致性、保守基序及内含子-外显子结构组成上有所不同,呈现亚家族特征。密码子分析显示,扩展蛋白基因具有密码子使用偏性,包含8个高频密码子。银杏扩展蛋白基因信息将有助于理解其在银杏基因组中的地位和作用,为深入研究功能提供基础。

关键词：银杏(Ginkgo biloba) 扩展蛋白亚家族密码子

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沙冬青热胁迫相关蛋白基因AmHsa32超表达提高大肠杆菌的抗热性

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北京林业大学学报 2012年第5期34卷 37-43页

作者：王艳萍刘美芹师静刘胜利陈玉珍卢存福北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室

热胁迫相关蛋白32(Heat stress associated protein32,Hsa32)与植物的抗逆性密切相关。本文将从沙冬青低温干旱EST库中获得的热胁迫相关蛋白基因AmHsa32进行了非生物胁迫下的表达分析与转化大肠杆菌研究。生物信息学分析表明,AmHsa32的... 详细信息

热胁迫相关蛋白32(Heat stress associated protein32,Hsa32)与植物的抗逆性密切相关。本文将从沙冬青低温干旱EST库中获得的热胁迫相关蛋白基因AmHsa32进行了非生物胁迫下的表达分析与转化大肠杆菌研究。生物信息学分析表明,AmHsa32的编码区全长858bp,编码286个氨基酸,预测分子量约32kD,与拟南芥HSA32亲缘关系较近。qRT-PCR分析显示,AmHsa32在沙冬青幼苗中受热胁迫诱导后表达量迅速提高,1h后达到对照的25倍;对其他非生物胁迫如低温、干旱及盐均有响应,表达量有不同程度的增加,说明AmHsa32对沙冬青非生物胁迫抗性的提高可能发挥着重要作用。将AmHsa32基因转化大肠杆菌,同野生菌相比,热胁迫(50℃)条件下,转基因大肠杆菌存活率明显提高。本研究结果表明,AmHsa32可用于通过转基因技术提高热敏感植物抗热性的研究。

关键词：沙冬青热胁迫 AmHsa32基因基因表达分析转基因大肠杆菌

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云南松天然群体遗传变异与生态因子的相关性

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生态学杂志 2016年第7期35卷 1767-1775页

作者：许玉兰蔡年辉陈诗王大玮何承忠段安安康向阳西南林业大学云南省高校林木遗传改良与繁育重点实验室昆明650224 北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083

采用SSR分子标记分析了云南松主分布区范围内20个天然群体的遗传多样性、遗传分化以及与生态因子间的相关性。结果表明:云南松天然群体SSR遗传多样性指标与地理、气象和土壤因子间存在一定相关关系,表现为低纬度、低海拔、温暖、降水量... 详细信息

采用SSR分子标记分析了云南松主分布区范围内20个天然群体的遗传多样性、遗传分化以及与生态因子间的相关性。结果表明:云南松天然群体SSR遗传多样性指标与地理、气象和土壤因子间存在一定相关关系,表现为低纬度、低海拔、温暖、降水量多的环境下遗传多样性丰富;Mantel检测群体遗传距离的地理变异方式较弱,遗传变异不存在明显的地理隔离,与环境因子间的关系也未达到显著水平,但生态隔离的作用明显高于地理隔离的作用,表明地理、气候和土壤因子对云南松群体间的遗传分化有一定的影响,其中以气候因子对云南松遗传多样性的影响最大。

关键词：云南松遗传多样性遗传结构遗传分化生态因子分异

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