检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通报 2023年第11期39卷 283-296页

作者：冯策婷江律刘鑫颖罗乐潘会堂张启翔于超北京林业大学园林学院、花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室、国家花卉工程技术研究中心、城乡生态环境北京实验室、园林环境教育部工程研究中心、林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

NAC转录因子在植物胁迫应答中起关键作用,单叶蔷薇(Rosa persica)主要分布于我国新疆,研究其耐旱能力对治理荒漠地区生态问题具有重要意义。对单叶蔷薇NAC基因家族进行全基因组鉴定,分析基因家族特征和表达模式,利用RT-qPCR验证NAC基因... 详细信息

NAC转录因子在植物胁迫应答中起关键作用,单叶蔷薇(Rosa persica)主要分布于我国新疆,研究其耐旱能力对治理荒漠地区生态问题具有重要意义。对单叶蔷薇NAC基因家族进行全基因组鉴定,分析基因家族特征和表达模式,利用RT-qPCR验证NAC基因在干旱胁迫下的表达情况。NAC基因家族的基因特征变化较大,而基因结构和基序相对保守。启动子分析表明RbeNAC在调节激素合成和适应环境胁迫方面具有重要作用。基于转录组数据分析发现RbeNAC基因的表达表现出组织特异性和对干旱胁迫的响应。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果表明,7个基因(RbeATAF、RbeSOG1、RbeNAC17、RbeNAC71、RbeNAC72、RbeNAC90和RbeNAC96)在根和叶中积极响应干旱胁迫。本研究鉴定了单叶蔷薇NAC基因,初步探究了不同基因可能发挥的功能,获得了7个响应干旱胁迫的候选基因,为后续开展单叶蔷薇抗逆性育种提供参考依据。

关键词：单叶蔷薇 NAC转录因子干旱胁迫基因表达

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梅花PmMYB21在花丝伸长过程中的功能与表达调控分析

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园艺学报 2023年第5期50卷 1048-1062页

作者：袁茜张曼马开峰王佳张启翔北京林业大学园林学院花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境北京实验室园林环境教育部工程研究中心林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

MYB21是调控雄蕊花丝伸长的关键转录因子。以梅花(Prunusmume)早花品种‘粉红朱砂’与晚花品种‘早绿萼’的花芽为材料,分别克隆得到两个序列完全一致的PmMYB21。序列分析表明PmMYB21蛋白含有MYB转录因子的R2R3保守结构域,系统进化分析... 详细信息

MYB21是调控雄蕊花丝伸长的关键转录因子。以梅花(Prunusmume)早花品种‘粉红朱砂’与晚花品种‘早绿萼’的花芽为材料,分别克隆得到两个序列完全一致的PmMYB21。序列分析表明PmMYB21蛋白含有MYB转录因子的R2R3保守结构域,系统进化分析表明PmMYB21与其他物种的MYB21有较高的同源性,亚细胞定位结果显示其位于细胞核内。PmMYB21的表达水平在两个梅花品种开花过程中随花丝伸长而升高;相对于晚花品种,早花品种表达上调时间显著提前。在两个梅花品种的PmMYB21启动子–1529~–1243 bp区域中均检测到CG序列型的甲基化水平下调,该区域甲基化水平与PmMYB21的表达量呈负相关;并在此区域检测到脱落酸、赤霉素和光响应元件,推测这些调控过程可能受到甲基化修饰的影响。加权基因共表达网络分析(WGCNA)结果显示,5296个差异表达基因与Pm MYB21具有连通性,显著富集于激素响应等生物过程。结合WGCNA筛选结果和表达趋势分析,预测Pm MYB21介导生长素(IAA)、赤霉素(GA)和茉莉酸(JA)等激素的信号转导,进而参与梅花花丝的伸长。

关键词：梅花花丝伸长 PmMYB21 甲基化修饰 WGCNA 激素响应

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连翘叶片原生质体分离及瞬时转化

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2023年第4期51卷 130-136,146页

作者：赵峥畑张晓璐程堂仁王佳张启翔潘会堂北京林业大学园林学院花卉种质资源创新与分子育种北京市重点实验室国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境北京实验室北京100083

【目的】研究高效分离连翘叶片原生质体的条件,并以PEG介导进行瞬时转化,为连翘基因的同源表达提供技术。【方法】以金叶连翘(Forsythia koreana‘Suwon Gold’)组培苗幼嫩叶片为材料,采用4因素3水平L9(3^(4))正交试验,分析纤维素酶质... 详细信息

【目的】研究高效分离连翘叶片原生质体的条件,并以PEG介导进行瞬时转化,为连翘基因的同源表达提供技术。【方法】以金叶连翘(Forsythia koreana‘Suwon Gold’)组培苗幼嫩叶片为材料,采用4因素3水平L9(3^(4))正交试验,分析纤维素酶质量浓度(15,20,25 g/L)、离析酶质量浓度(3,5,7 g/L)、甘露醇浓度(0.2,0.4,0.6 mol/L)及酶解时间(5,7,9 h)对原生质体分离的影响,探索最优酶解条件,并在此条件下分离原生质体,之后以PEG介导转化pSuper1300::GFP质粒,研究其遗传转化效果。【结果】L_(9)(34)正交试验结果显示,不同处理的金叶连翘叶片原生质体产量为1.17×10^(6)~5.71×10^(6) g^(-1),影响最大的因素为离析酶质量浓度,且4个因素对产量均有极显著影响;原生质体活力为81.19%~90.69%,影响最大的因素为离析酶质量浓度,且其对活力的影响达到显著水平。最佳酶解条件为:在20 g/L纤维素酶、5 g/L离析酶、0.2 mol/L甘露醇的混合液中酶解9 h,在此条件下原生质体产量为5.57×10^(6) g^(-1),活力为86.79%。PEG介导法结果显示,以GFP为报告基因,在转化后的金叶连翘原生质体中可以检测到绿色荧光信号。【结论】获得金叶连翘叶片原生质体分离的最佳条件,且在此条件下原生质体产量、活力较高,能够成功进行瞬时转化。

关键词：原生质体分离连翘叶片瞬时转化 GFP

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绣球‘杜丽’AP 3基因克隆与基因编辑载体构建

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广西植物 2024年第2期44卷 257-266页

作者：李童王月莹赵惠恩花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境北京实验室北京林业大学园林学院北京100083

绣球(Hydrangea macrophylla)是以花序为主要观赏部位的园林植物,多用作切花装饰和景观营造,在亚洲、美洲、欧洲广泛栽培。为探究AP 3基因在绣球花萼形成过程中的功能,加快重瓣绣球新品种培育进程,该研究以绣球‘杜丽’为材料,克隆其MAD... 详细信息

绣球(Hydrangea macrophylla)是以花序为主要观赏部位的园林植物,多用作切花装饰和景观营造,在亚洲、美洲、欧洲广泛栽培。为探究AP 3基因在绣球花萼形成过程中的功能,加快重瓣绣球新品种培育进程,该研究以绣球‘杜丽’为材料,克隆其MADS-box B类基因HmAP 3,并结合生物信息学方法预测基因功能;根据HmAP 3序列信息,筛选出高特异性编辑靶点并构建CRISPR/Cas9基因编辑载体,通过农杆菌转化法将载体整合到绣球基因组中。结果表明:(1)克隆到1段HmAP 3基因的cDNA序列,其序列全长546 bp,共编码181个氨基酸,测序结果表明其氨基酸序列与参考序列一致性为100%,与拟南芥AtAP3相似度为58.8%。(2)不同属植物AP3氨基酸序列差异较大,在同属不同物种中,AP3蛋白主要结构较为保守,仅在少数基序上存在差异。(3)在HmAP 3中共鉴定到2个高特异性靶点,并成功构建2个单靶点CRISPR/Cas9基因编辑载体。(4)该研究共获得5株基因组内含有Cas 9序列的抗性芽,但其靶点均未突变,在抗性芽中没有检测到Cas9表达。该研究探讨了AP 3基因在重瓣绣球育种中的价值,对绣球的CRISPR/Cas9基因编辑技术进行了初探,为绣球优良品种繁育工作奠定了基础。

关键词：绣球 MADS-box家族 AP3 CRISPR/Cas9 载体构建

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多叶羽扇豆'鲁冰妮'LpluF3'5'H基因的克隆与表达分析

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农业生物技术学报 2023年第6期31卷 1171-1181页

作者：胡钧舒朱云涛赵一燃杨捷孙婷婷何恒斌北京林业大学园林学院花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室/国家花卉工程技术研究中心/城乡生态环境北京实验室/林木、花卉遗传育种教育部重点实验室

类黄酮3',5'羟化酶(flavonoid-3',5'-hydroxylase, F3'5'H)基因是自然界绝大多数蓝色花呈色的关键基因。为探究多叶羽扇豆(Lupinus polyphyllus) F3'5'H的生物学功能，本研究以多叶羽扇豆'鲁冰妮&#... 详细信息

类黄酮3',5'羟化酶(flavonoid-3',5'-hydroxylase, F3'5'H)基因是自然界绝大多数蓝色花呈色的关键基因。为探究多叶羽扇豆(Lupinus polyphyllus) F3'5'H的生物学功能，本研究以多叶羽扇豆'鲁冰妮'('Lupine')的花部组织为实验材料，对其F3'5'H进行克隆、系统进化等生物信息学分析、亚细胞定位和qPCR检测。结果表明，克隆获得多叶羽扇豆LpluF3'5'H(GenBank No. OQ657278) CDS序列长1 620 bp，编码539个氨基酸，生物信息学预测发现其含有细胞色素P450超家族结构域。系统进化分析表明，LpluF3'5'H编码的氨基酸序列与双子叶植物狭叶羽扇豆(L. angustifolius)的相似度最高，单子叶植物则聚为另一支。亚细胞定位表达结果表明，LpluF3'5'H蛋白在荧光下呈点状离散分布，可能定位于叶绿体。qPCR结果显示，LpluF3'5'H在花不同的发育阶段都有不同程度的表达，在'鲁冰妮蓝色'花中的表达水平显著高于'鲁冰妮白色'花。在'鲁冰妮蓝色'花不同发育阶段中，LpluF3'5'H的表达水平在第二发育阶段的花瓣中达到峰值，随后降低。在'鲁冰妮蓝色'花的不同瓣型中，LpluF3'5'H在翼瓣的表达水平最高，其次是旗瓣，在龙骨瓣中表达水平最低。本研究说明LpluF3'5'H可能在多叶羽扇豆蓝色花花色形成过程中起到重要作用，可为后续探究多叶羽扇豆蓝色花的形成机理提供参考。

关键词：多叶羽扇豆'鲁冰妮' 类黄酮3',5'羟化酶(F3'5'H)基因克隆基因表达

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报春苣苔属植物杂交亲和性分析及杂交障碍

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中南林业科技大学学报 2024年第1期44卷 89-96页

作者：白梦李博陈简村夏婷蒋宇璇罗乐张启翔张毓北京林业大学园林学院北京100083 北京林业大学国家花卉工程技术研究中心北京100083 北京林业大学花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室北京100083 北京林业大学城乡生态环境实验室北京100083 国家植物园北京100093

【目的】探究报春苣苔属属内杂交亲和性及杂交障碍的原因。【方法】以4个报春苣苔原生种、2个栽培品种为材料进行常规杂交,通过花粉活力、柱头可授性筛选父母本后开展杂交工作,初步确定杂交组合亲和性关系,并对授粉后的子房发育跟踪观... 详细信息

【目的】探究报春苣苔属属内杂交亲和性及杂交障碍的原因。【方法】以4个报春苣苔原生种、2个栽培品种为材料进行常规杂交,通过花粉活力、柱头可授性筛选父母本后开展杂交工作,初步确定杂交组合亲和性关系,并对授粉后的子房发育跟踪观察。【结果】1)6种报春苣苔属植物的花粉活力和柱头可授性强弱与其杂交亲和性反应没有绝对的因果关系。2)16个杂交组合的子房膨大率均在65.00%以上,结实率有明显差别,以牛耳朵Primulina eburnea、尖萼报春苣苔P. pungentisepala、大根报春苣苔P. macrorhiza、蚂蝗七P. fimbrisepala作为母本时,各杂交组合的平均结实率分别达到了75.55%、78.44%、46.67%、57.78%,表现出了较高的亲和性,而以‘北林之春’报春苣苔P.‘Spring of Beilin’、‘四季’报春苣苔P.‘Four Season’为母本的组合,结实率最高也仅有6.67%,亲和性较弱。3)对5个亲和性较弱的杂交组合进行花粉管行为荧光观察,发现均存在一定程度的受精前障碍,表现为花粉管胼胝质反应、花粉管末端膨大、扭曲断裂,但各组合最终均有花粉管伸入胚珠,从到达胚珠的花粉管数量来看,牛耳朵等3个原生种的花粉数量均可满足胚珠受精需要,但结实率仍较低。【结论】报春苣苔属属内杂交具有一定的亲和性,但部分组合未获得种子,并非由受精前的花粉萌发和花粉管生长所限制,可能是由于受精卵或幼胚的后期发育过程中出现代谢紊乱而导致败育。

关键词：报春苣苔属杂交授粉亲和性花粉管行为

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东方百合LoABI1基因的克隆及表达分析

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西北植物学报 2023年第2期43卷 190-201页

作者：赵一燃胡钧舒朱云涛孙婷婷何恒斌花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境北京实验室教育部林木花卉育种实验室北京林业大学园林学院北京100083

该研究以东方百合‘索邦’为材料,采用RT-PCR扩增方法克隆ABI1基因,对其进行了生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR检测其组织表达特性和低温处理过程及定植后的表达特征,以明确ABI1基因的功能特性,为解析百合ABA信号转导途径及其调... 详细信息

该研究以东方百合‘索邦’为材料,采用RT-PCR扩增方法克隆ABI1基因,对其进行了生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR检测其组织表达特性和低温处理过程及定植后的表达特征,以明确ABI1基因的功能特性,为解析百合ABA信号转导途径及其调控低温解除休眠过程的机理奠定基础。结果表明:(1)成功克隆得到东方百合LoABI1基因,其编码序列长度为1 341 bp,共编码446个氨基酸;LoABI1氨基酸序列中含有1个蛋白磷酸酶2C(PP2C)保守结构域。(2)系统进化分析显示,LoABI1蛋白与水稻PP2C家族成员OsPP2C06的同源进化关系最近,且与拟南芥AtABI1聚为一支,同属于PP2C基因家族中的A亚群。(3)亚细胞定位发现,LoABI1蛋白定位于烟草表皮细胞的细胞核和细胞质。(4)qRT-PCR荧光定量分析显示,LoABI1基因在百合茎生根、嫩茎、叶片及各花部组织中均有表达,且在幼嫩组织中表达量较高;LoAB1I基因在冷藏期间的表达量呈先升高后降低的趋势,并于冷藏期第5周达到峰值,但在定植期间持续下降且保持较低水平。(5)经4℃低温处理60 d的百合鳞茎在定植后14~28 d能发芽、28~48 d可见花蕾,而不进行低温处理的鳞茎既不萌芽也不开花。研究推测,百合LoABI1基因可能在低温解除种球休眠过程中具有重要作用,LoABI1蛋白可能在百合ABA信号转导过程中发挥作用。

关键词：东方百合‘索邦’ ABI1基因克隆基因表达

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不同栽培地芍药品种资源遗传多样性的SSR分析比较

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园艺学报 2023年第4期50卷 875-884页

作者：万映伶金亦佳刘爱青朱梦婷刘燕北京林业大学园林学院花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境北京实验室北京100083 菏泽市城市管理事业发展中心山东菏泽274000

依据33对SSR荧光引物的扩增结果,从遗传变异和遗传距离角度对中国4个主要栽培区的386个观赏芍药品种的遗传多样性进行评价。结果显示:(1)中国观赏芍药品种资源具有较高遗传多样性,所用SSR引物的多态信息含量(PIC)值介于0.62~0.84,平均... 详细信息

依据33对SSR荧光引物的扩增结果,从遗传变异和遗传距离角度对中国4个主要栽培区的386个观赏芍药品种的遗传多样性进行评价。结果显示:(1)中国观赏芍药品种资源具有较高遗传多样性,所用SSR引物的多态信息含量(PIC)值介于0.62~0.84,平均观测杂合度(Ho)和期望杂合度(H_(e))为0.73、0.78,香农信息指数(I)介于1.35~2.08。(2)各栽培地芍药品种的遗传多样性从高到低依次为山东菏泽、河南洛阳、江苏扬州和甘肃临洮。(3)方差分析显示变异主要来自栽培地内个体间,不同栽培地品种遗传分化系数(F_(ST))为0.031,基因流(N_(m))为7.795。(4)各栽培地品种间的遗传距离介于0.032~0.123,遗传一致性介于0.884~0.969;主坐标分析和聚类结果显示品种遗传分化情况与栽培地不完全相关。研究表明,中国观赏芍药品种遗传信息丰富,但4个栽培地间遗传分化小,各栽培地间的基因交流强。

关键词：芍药品种群遗传分化栽培来源聚类

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三倍体芍药品种染色体制片优化和核型分析

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河北农业大学学报 2024年第3期47卷 46-55页

作者：孙榕泽宋焕芝蒋珈琦于晓南北京林业大学园林学院城乡生态环境北京实验室/国家花卉工程技术研究中心花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室北京100083 北京市南水北调团城湖管理处北京100089

为优化三倍体芍药品种染色体制片方法,本研究以三倍体芍药品种‘Fairy Princess’新生长的白色根尖为材料,通过常规染色体制片法,获得预处理试剂和预处理时间对芍药染色体制片影响的结果,并进行核型分析。结果表明,三倍体芍药最佳预处... 详细信息

为优化三倍体芍药品种染色体制片方法,本研究以三倍体芍药品种‘Fairy Princess’新生长的白色根尖为材料,通过常规染色体制片法,获得预处理试剂和预处理时间对芍药染色体制片影响的结果,并进行核型分析。结果表明,三倍体芍药最佳预处理试剂为0.002 mol/L 8-羟基喹啉溶液,最佳预处理时间为12~36 h;‘Fairy Princess’核型公式为2n=3x=15=10m+2sm+3st。核型分类为2A型。研究结果为三倍体芍药应用提供染色体信息,为野外取材长时间保存提供依据。

关键词：芍药预处理制片优化核型分析

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6个朱砂梅品种花色苷合成结构基因及转录因子编码基因的表达模式分析

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江苏农业学报 2024年第2期40卷 367-375页

作者：郭梦鸽秦孝天陈瑞丹北京林业大学园林学院北京100083 花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室北京100083 国家花卉工程技术研究中心北京100083 城乡生态环境北京实验室北京100083 园林环境教育部工程研究中心北京100083 林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

为明晰朱砂梅品种群梅花花色表型差异形成的分子调控机制,以花色由浅至深呈梯度变化的6个朱砂梅品种为试验材料,利用色差仪和分光光度计测定不同品种盛花期花瓣的花色表型及花色苷含量,通过荧光定量PCR及相关性分析,对花色苷合成结构基... 详细信息

为明晰朱砂梅品种群梅花花色表型差异形成的分子调控机制,以花色由浅至深呈梯度变化的6个朱砂梅品种为试验材料,利用色差仪和分光光度计测定不同品种盛花期花瓣的花色表型及花色苷含量,通过荧光定量PCR及相关性分析,对花色苷合成结构基因(PmCHS、PmCHI、PmF3H、PmF3′H、PmDFR、PmANS、PmUFGT)及转录因子编码基因(PmMYB1、PmbHLH3)的转录特性进行探究。结果表明,各品种间花瓣花色苷含量与花色红度的变化趋势一致;PmMYB1、PmbHLH3、PmF3′H、PmDFR、PmUFGT的相对表达量与花色苷含量呈极显著正相关;转录因子编码基因PmMYB1与PmbHLH3的相对表达量呈极显著正相关,且均与结构基因PmF3′H、PmDFR、PmUFGT的表达水平呈显著或极显著正相关。推测转录因子编码基因PmMYB1PmbHLH3通过正向调控结构基因PmF3′H、PmDFR和PmUFGT的表达从而调控朱砂梅花瓣的呈色。

关键词：梅花花色苷结构基因转录因子荧光定量PCR

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