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南京农业大学学报 2023年第3期46卷 522-529页

作者：张秋歌喻燕妮戴伟栾亚宁北京林业大学林学院/森林培育与保护教育部重点实验室北京100083

[目的]本研究旨在明确纳米塑料-脲酶蛋白冠的形成及对纳米塑料和脲酶的影响。[方法]以带正电、带负电、不带电的纳米塑料和质量浓度为0.05、0.20、0.50 mg·mL^(-1)的脲酶为试验材料,制备不同的纳米塑料-脲酶混悬液。根据纳米塑料... 详细信息

[目的]本研究旨在明确纳米塑料-脲酶蛋白冠的形成及对纳米塑料和脲酶的影响。[方法]以带正电、带负电、不带电的纳米塑料和质量浓度为0.05、0.20、0.50 mg·mL^(-1)的脲酶为试验材料,制备不同的纳米塑料-脲酶混悬液。根据纳米塑料对脲酶的吸附量和形貌特征变化,明确蛋白冠的形成。通过粗糙度、水合粒径、Zeta电位和脲酶构象、活性等指标分析,判定不同条件下蛋白冠的形成对纳米塑料表征及脲酶结构和活性的影响。[结果]不同电性纳米塑料对各浓度脲酶均产生吸附,形成蛋白冠;随着脲酶质量浓度增加,蛋白冠的颗粒粒径和表面粗糙度增加;带正电纳米塑料-脲酶蛋白冠与原纳米塑料差异最显著,且显著抑制脲酶活性;当脲酶质量浓度为0.05 mg·mL^(-1)时,蛋白冠的形成会导致脲酶构象发生明显变化,表现为β-折叠结构含量显著下降,无规则结构含量明显上升的特点。[结论]3种电性纳米塑料均可以和脲酶形成蛋白冠,不同程度降低其分散性和稳定性。蛋白冠对纳米塑料和脲酶的影响强度与纳米塑料的带电性和脲酶质量浓度密切相关。

关键词：纳米塑料脲酶蛋白冠活性构象

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青杄PwHAP5基因原核表达及多克隆抗体制备

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生物技术通报 2022年第8期38卷 142-149页

作者：覃雪晶王雨涵曹一博张凌云北京林业大学林学院森林培育与保护教育部重点实验室北京100083

制备青杄(Picea wilsonii)PwHAP5基因的特异性多克隆抗体,为研究PwHAP5基因功能、分子机制奠定基础。经PCR扩增获得青杄花粉PwHAP5基因片段与载体pET-48b相连构建原核表达载体pET-48b-PwHAP5。经诱导产生重组蛋白PwHAP5,通过His-NTA镍... 详细信息

制备青杄(Picea wilsonii)PwHAP5基因的特异性多克隆抗体,为研究PwHAP5基因功能、分子机制奠定基础。经PCR扩增获得青杄花粉PwHAP5基因片段与载体pET-48b相连构建原核表达载体pET-48b-PwHAP5。经诱导产生重组蛋白PwHAP5,通过His-NTA镍柱纯化蛋白产物。蛋白经SDS-PAGE检测后再免疫兔子制备兔抗血清。血清经ProteinA纯化后,通过SDS-PAGE和Western blot检测抗体纯度和特异性。结果表明,成功构建了原核表达载体pET-48b-PwHAP5,制备了分子质量约为45 kD的重组蛋白PwHAP5。获得的青杄PwHAP5兔抗血清经间接ELISA法检测效价达1∶729000以上;制备的PwHAP5蛋白兔多克隆抗体能特异性识别抗原,效价高,满足后续研究PwHAP5蛋白在青杄生长发育中的功能等需求。

关键词： PwHAP5基因原核表达蛋白纯化多克隆抗体

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复合增氧剂对建兰水培苗生长及生理特性的影响

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南京林业大学学报（自然科学版） 2024年第1期48卷 115-123页

作者：宋雨蒙李素艳孙向阳北京林业大学林学院森林培育与保护教育部重点实验室北京100083

【目的】研究用聚丙烯酰胺(PAM)和过氧化尿素制备复合增氧剂对建兰(Cymbidium ensifolium)水培苗生长及生理特性的影响。【方法】以直生半年建兰幼苗为试材,设5个处理,分别为CK(不加PAM和过氧化尿素,对照)、T1[不加PAM,10%(质量分数,下... 详细信息

【目的】研究用聚丙烯酰胺(PAM)和过氧化尿素制备复合增氧剂对建兰(Cymbidium ensifolium)水培苗生长及生理特性的影响。【方法】以直生半年建兰幼苗为试材,设5个处理,分别为CK(不加PAM和过氧化尿素,对照)、T1[不加PAM,10%(质量分数,下同)过氧化尿素]、T2(0.05%PAM,10%过氧化尿素)、T3(0.10%PAM,10%过氧化尿素)、T4(0.20%PAM,10%过氧化尿素),分析其不同时期氧气释放特性及对建兰水培苗生长、光合色素、可溶性蛋白含量、根系活力和抗氧化酶活性的影响。【结果】用PAM和过氧化尿素制备复合增氧剂,在一定时间内水体溶氧量显著增高,缓释效应增强;施用复合增氧剂处理的建兰水培苗根系鲜质量、干质量增大,叶长、叶宽和根长增加,根系活力、叶片光合色素、可溶性蛋白含量和过氧化物酶(POD)活性升高,有利于建兰的生长;在PAM含量较高时(≥0.10%),建兰水培苗成活天数显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)活性显著提高;PAM添加量为0.10%时,建兰水培苗叶片净光合速率和根系通气组织数量最大。【结论】施用PAM和过氧化尿素制备的复合增氧剂可以提高水体溶氧量,PAM含量为0.10%时复合增氧剂能显著提高建兰水培苗的光合性能和根系活性,缓解缺氧胁迫对建兰造成的伤害,改善植株的生理特性。

关键词：聚丙烯酰胺过氧化尿素复合增氧剂水培建兰缺氧胁迫

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不同种源和树龄油松年高生长量的比较及主要气候影响因子分析

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植物资源与环境学报 2021年第5期30卷 34-41,49页

作者：荆蓉彭祚登北京林业大学林学院森林培育与保护教育部重点实验室北京100083

以河北省遵化市东陵林场内23个种源油松(Pinus tabuliformis Carr.)试验林为研究对象,对各种源树龄7~15 a油松的年高生长量进行比较和变异分析,并采用冗余分析法研究各种源油松的年高生长量与当年和上一年气候因子的相关性。结果显示:... 详细信息

以河北省遵化市东陵林场内23个种源油松(Pinus tabuliformis Carr.)试验林为研究对象,对各种源树龄7~15 a油松的年高生长量进行比较和变异分析,并采用冗余分析法研究各种源油松的年高生长量与当年和上一年气候因子的相关性。结果显示:不同种源的年高生长量均值以青海省互助县北山(P17)种源最低(15.18 cm)、陕西省洛南县黑山村(P12)种源最高(23.50 cm),而不同树龄的年高生长量均值则以树龄15 a最低(12.48 cm)、树龄12 a最高(26.42 cm)。方差分析结果表明:树龄14 a的年高生长量在种源间存在显著(P<0.05)差异,其余树龄的年高生长量在种源间存在极显著(P<0.01)差异;除P17种源外,其余22个种源的年高生长量在树龄间存在极显著差异。变异分析结果表明:不同种源的年高生长量变异系数均值为31.08%~49.72%,不同树龄的年高生长量变异系数均值为32.39%~45.10%。冗余分析结果表明:共有5个气候因子对油松的年高生长量有显著影响,影响力从大到小依次为当年3月至5月降水量、当年3月至5月地下20 cm温度、上一年6月至8月降水量、上一年9月至11月降水量、上一年3月至5月平均空气相对湿度。其中,上一年9月至11月降水量和上一年3月至5月平均空气相对湿度与供试种源油松的年高生长量呈正相关;上一年6月至8月降水量和当年3月至5月地下20 cm温度与供试种源油松的年高生长量呈负相关;当年3月至5月降水量与供试种源油松的年高生长量呈正相关和负相关2种情况。综上所述,油松的年高生长量在不同种源和树龄间基本存在极显著差异,供试区域油松的高生长主要受水分因子尤其是降水量的影响。

关键词：油松高生长种源树龄气候因子冗余分析

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青杄PwUSP1基因特征及对干旱和盐胁迫的响应

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北京林业大学学报 2020年第10期42卷 62-70页

作者：刘峻玲梁珂豪苗雅慧胡安妮孙永江张凌云北京林业大学林学院森林培育与保护教育部重点实验室北京100083

【目的】USPs蛋白(universal stress proteins)是一类胁迫相关类蛋白,被广泛报道参与了植物应对非生物胁迫的过程。本研究通过对青杄中PwUSP1基因进行功能分析及验证,探索PwUSP1在植物应对盐和干旱胁迫时的作用,从而为未来通过转基因工... 详细信息

【目的】USPs蛋白(universal stress proteins)是一类胁迫相关类蛋白,被广泛报道参与了植物应对非生物胁迫的过程。本研究通过对青杄中PwUSP1基因进行功能分析及验证,探索PwUSP1在植物应对盐和干旱胁迫时的作用,从而为未来通过转基因工程提高青杄对非生物胁迫的耐受性提供候选基因。【方法】通过瞬时转化烟草叶片实验揭示PwUSP1在细胞中的定位;利用酵母双杂实验鉴定PwUSP1自身能否形成同源二聚体;通过农杆菌侵染法转化野生型拟南芥(WT),获得纯合的PwUSP1过表达株系。通过测定干旱和盐胁迫下过表达株系(L1、L7)及野生型(WT)和空载体(VC)株系的存活率、失水率,来分析比较不同株系对于干旱和盐胁迫的耐受能力;通过二氨基联苯胺(DAB)和氯化硝基四氮锉蓝(NBT)染色,测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)以及丙二醛(MDA)的含量,研究PwUSP1发挥作用的生理机制。【结果】烟草亚细胞定位实验表明,PwUSP1定位于细胞核、细胞质和细胞膜中。酵母双杂结果显示PwUSP1蛋白自身能够形成同源二聚体。利用qRT-PCR检测转基因拟南芥,成功获得两个稳定纯合的株系(L1、L7)进行进一步分析。在盐和干旱胁迫下,相对于WT和VC,过表达PwUSP1能够显著提高植物对盐和干旱的耐受能力,表现出更高的存活率和更低的失水率,且显著降低了植株中过氧化氢、超氧阴离子的累积,提高了SOD、POD和CAT活性,抑制了MDA的积累。【结论】青杄PwUSP1定位于细胞核、细胞质和细胞膜中且自身能够形成同源二聚体,在干旱和盐胁迫条件下,PwUSP1通过增强植物的ROS清除能力及抑制膜脂氧化损伤来提高植物对非生物胁迫的耐受性。

关键词：青杄 PwUSP1 干旱胁迫盐胁迫活性氧清除

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施肥对长白落叶松苗木养分库氮磷吸收及利用的影响

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北京林业大学学报 2011年第2期33卷 31-36页

作者：康瑶瑶刘勇马履一李国雷祝燕马跃北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室

为探讨传统施肥量是否使出圃长白落叶松苗木体内养分达到养分奢养阶段,以长白落叶松1年生播种苗为实验材料,设定不同施肥量实验,对2年生移栽苗木的生物量、N和P的养分浓度及含量进行检验,并结合养分吸收利用效率和N、P的矢量情况进行分... 详细信息

为探讨传统施肥量是否使出圃长白落叶松苗木体内养分达到养分奢养阶段,以长白落叶松1年生播种苗为实验材料,设定不同施肥量实验,对2年生移栽苗木的生物量、N和P的养分浓度及含量进行检验,并结合养分吸收利用效率和N、P的矢量情况进行分析。结果表明:2种施肥量处理对其养分库和全株的生物量(P养分库=0.0285;P全株=0.0325)、P的养分浓度(P养分库=0.0022;P全株=0.0418)及P的含量(P养分库=0.0043;P全株=0.0301)影响显著,且存在生物量和N素向养分库转移的现象,养分吸收利用参数值均较低。矢量分析结果显示,整株和养分库中N素均处于养分缺乏状态,而P素处于养分稀释状态。建议生产部门对其传统施肥方式进行转变,对其生长季中指数施N肥和晚季追施P肥,以使苗木达到奢养的阶段,同时利用苗木养分库的大小来预测苗木造林的表现。

关键词：长白落叶松养分承载养分库氮磷

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青杄分子伴侣PwTCP-1基因的克隆及表达分析

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北京林业大学学报 2015年第1期37卷 29-36页

作者：孙帆李长江崔晓燕张凌云北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室

分子伴侣TCP-1在调节植物生长发育过程中具有重要作用,但在林木生长发育及对非生物逆境胁迫响应机制方面的研究较少。从青杄c DNA文库中筛选出1个分子伴侣PwTCP-1(T-complex polypeptide 1)片段,通过RACE-PCR技术获得PwTCP-1的末端序列... 详细信息

分子伴侣TCP-1在调节植物生长发育过程中具有重要作用,但在林木生长发育及对非生物逆境胁迫响应机制方面的研究较少。从青杄c DNA文库中筛选出1个分子伴侣PwTCP-1(T-complex polypeptide 1)片段,通过RACE-PCR技术获得PwTCP-1的末端序列,经过与EST序列拼接,获得PwTCP-1c DNA全长序列。使用clustalx、Mega5.0、DNAMAN和Expasy等工具对PwTCP-1的理化性质、二级结构和三级结构进行生物信息学分析。结果显示,PwTCP-1c DNA全长为2024 bp,开放阅读框1 605 bp,编码534个氨基酸残基的蛋白质,其理论分子质量为59.2k Da,理论等电点为6.12,富含α-螺旋。通过RT-q PCR技术检测了PwTCP-1组织特异性表达、激素响应模式及在种子萌发过程中表达量变化。结果表明:PwTCP-1在青杄各个组织中均有表达,在花粉中表达量最高,在茎中表达量最低;PwTCP-1表达量随着种子萌发先上升,在第4天达到最高,之后缓慢下降。PwTCP-1能响应多种激素处理。油菜素内酯(brassinolide,BR)和赤霉素(gibberellin,GA)分别处理后,PwTCP-1的表达量均显著降低,而茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,Me JA)处理后该基因表达量极显著升高。这些结果显示,PwTCP-1可能参与植物种子萌发过程并响应了多种激素反应过程。

关键词：青杄分子伴侣 PwTCP-1 表达分析植物激素

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长白山2种针阔混交林空间结构多样性研究

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北京林业大学学报 2015年第12期37卷 48-58页

作者：陈亚南杨华马士友任玫玫北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室

为研究云冷杉过伐林的恢复和保护,本文选取落叶松云冷杉林和云冷杉针阔混交林2个林分,应用传统林分直径因子结合空间多样性指数和空间结构参数的二元分布,对长白山落叶松云冷杉林和天然云冷杉林的整体结构进行分析。结果表明:1)云冷杉... 详细信息

为研究云冷杉过伐林的恢复和保护,本文选取落叶松云冷杉林和云冷杉针阔混交林2个林分,应用传统林分直径因子结合空间多样性指数和空间结构参数的二元分布,对长白山落叶松云冷杉林和天然云冷杉林的整体结构进行分析。结果表明:1)云冷杉针阔混交林的径阶分布近似为反"J"型曲线,落叶松云冷杉林的径阶分布为多峰的反"J"型曲线,呈现出同代林的特征;2个林分的空间多样性指数分别为5.546 0和4.149 4。2)2个林分空间结构的二元分布特征差异不显著,落叶松云冷杉林中胸径和树高处于中庸且呈随机分布的林木所占比例为14%和13%,云冷杉针阔混交林中为11%和13%;落叶松云冷杉林分中处于强、极强度混交且胸径和树高占据中庸势态的林木分别占总林木的12%和10%,云冷杉针阔混交林中为13%和14%。3)落叶松云冷杉林分中处于不同优劣程度和混交等级的林木株数比例相差较大;云冷杉针阔混交林分中,相同混交状况的林木在不同优劣等级的株数比例相差不大,林分胸径和树高差异不明显。天然云冷杉针阔混交林处于相对稳定状态,落叶松云冷杉林需要采取抚育措施以提高其空间结构多样性。研究结果可应用于落叶松云冷杉林抚育设计,调整其林分结构,实现林分的空间结构化经营。

关键词：针阔混交林空间结构结构参数二元分布

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北京明长城两侧森林景观异质性和复杂性变化

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北京林业大学学报 2015年第5期37卷 81-87页

作者：龚俊杰杨华邓华锋北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室

为了分析北京明长城森林景观结构的空间异质性和斑块形状复杂性,以北京明长城两侧3 000 m范围为研究区域,在选取各类最常用指数的基础上,结合分形理论构建了复杂性评价指标,运用缓冲区分析方法对研究区不同缓冲幅度下的景观异质性与斑... 详细信息

为了分析北京明长城森林景观结构的空间异质性和斑块形状复杂性,以北京明长城两侧3 000 m范围为研究区域,在选取各类最常用指数的基础上,结合分形理论构建了复杂性评价指标,运用缓冲区分析方法对研究区不同缓冲幅度下的景观异质性与斑块形状复杂性状况进行了分析。结果表明:1)有林地和灌木林地分布面积较广,占总面积的83%左右,为研究区的优势景观。其中,有林地为景观基质,聚合性最强,连接性最好,破碎化程度最低;而疏林地和无立木林地斑块间离散程度高,景观连接性差,破碎化程度高。2)随着缓冲距离的扩大,同类型景观斑块邻近度增高,离散程度降低,景观连接性增强,平均斑块面积变大,破碎化程度在降低,景观异质性有所增强,斑块类型趋向于均匀分布。3)随着缓冲距离的扩大,景观斑块形状复杂程度逐渐增加,边缘效应影响也随之增强,景观结构稳定性则逐渐递减。

关键词：明长城森林景观空间异质性复杂性

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应用高分辨率卫星数据估算阔叶红松林乔木多样性

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北京林业大学学报 2015年第3期37卷 20-26页

作者：解潍嘉黄侃李瑞平孙浩扈晶晶黄华国北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室

应用遥感技术估算生物多样性是森林生态学的研究热点和难点。为探索高分辨率卫星数据在估算森林植被多样性上的应用潜力,以吉林蛟河市阔叶红松林大样地数据为支撑,提取了红松树冠的空间分布格局,并估算了乔木物种多样性。首先,基于冬季G... 详细信息

应用遥感技术估算生物多样性是森林生态学的研究热点和难点。为探索高分辨率卫星数据在估算森林植被多样性上的应用潜力,以吉林蛟河市阔叶红松林大样地数据为支撑,提取了红松树冠的空间分布格局,并估算了乔木物种多样性。首先,基于冬季Geo Eye-1影像提取红松树冠分布图,与样地每木调查数据吻合较好。然后,使用景观生态学和地统计学指数,分析红松种群空间分布规律,发现了最大自相关尺度30~40 m。最后,选择拥有红边波段的秋季Rapid Eye卫星图像,建立遥感影像5 m光谱值和30 m窗口大小纹理参数与生物多样性指数的多元线性回归模型。结果表明,红边信息并未显著改善多光谱数据估算植被生物多样性的能力,但所获大区域制图结果与林分龄级吻合较好。

关键词：遥感森林生态系统生物多样性种群分布格局

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