检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通报 2022年第8期38卷 142-149页

作者：覃雪晶王雨涵曹一博张凌云北京林业大学林学院森林培育与保护教育部重点实验室北京100083

制备青杄(Picea wilsonii)PwHAP5基因的特异性多克隆抗体,为研究PwHAP5基因功能、分子机制奠定基础。经PCR扩增获得青杄花粉PwHAP5基因片段与载体pET-48b相连构建原核表达载体pET-48b-PwHAP5。经诱导产生重组蛋白PwHAP5,通过His-NTA镍... 详细信息

制备青杄(Picea wilsonii)PwHAP5基因的特异性多克隆抗体,为研究PwHAP5基因功能、分子机制奠定基础。经PCR扩增获得青杄花粉PwHAP5基因片段与载体pET-48b相连构建原核表达载体pET-48b-PwHAP5。经诱导产生重组蛋白PwHAP5,通过His-NTA镍柱纯化蛋白产物。蛋白经SDS-PAGE检测后再免疫兔子制备兔抗血清。血清经ProteinA纯化后,通过SDS-PAGE和Western blot检测抗体纯度和特异性。结果表明,成功构建了原核表达载体pET-48b-PwHAP5,制备了分子质量约为45 kD的重组蛋白PwHAP5。获得的青杄PwHAP5兔抗血清经间接ELISA法检测效价达1∶729000以上;制备的PwHAP5蛋白兔多克隆抗体能特异性识别抗原,效价高,满足后续研究PwHAP5蛋白在青杄生长发育中的功能等需求。

关键词： PwHAP5基因原核表达蛋白纯化多克隆抗体

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不同无性系刺槐生长、材性及适用性

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中南林业科技大学学报 2023年第4期43卷 164-173页

作者：陈楠楠彭祚登李云北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室北京100083 北京林业大学生物与技术学院北京100083

【目的】通过对刺槐不同无性系林木之间生长、材性和适应性的研究,为刺槐建筑用材林培育选用优良无性系和刺槐优质木材的加工利用提供科学的依据。【方法】以河南省洛宁县国有吕村林场无性系试验林中的豫刺1号、豫刺2号、豫刺7号、豫刺... 详细信息

【目的】通过对刺槐不同无性系林木之间生长、材性和适应性的研究,为刺槐建筑用材林培育选用优良无性系和刺槐优质木材的加工利用提供科学的依据。【方法】以河南省洛宁县国有吕村林场无性系试验林中的豫刺1号、豫刺2号、豫刺7号、豫刺8号、无性系3-Ⅰ共5个刺槐无性系为研究对象,分析林木生长过程,比较林木生长及材性差异并进行适用性评价。【结果】5个无性系胸径大小排序为无性系3-Ⅰ>豫刺1号>豫刺8号>豫刺7号>豫刺2号;材积大小排序为无性系3-Ⅰ>豫刺1号>豫刺7号>豫刺8号>豫刺2号。其胸径、树高均呈现前期生长迅速后生长逐渐减缓趋势。其木材气干密度、全干密度、基本密度测量范围为0.769~0.812、0.731~0.775、0.644~0.673 g·m^(-3);干缩率中气干差异干缩和全干差异干缩变化幅度分别为1.41~1.82、1.47~1.62;湿胀率中全干至气干湿胀率(径向、弦向、体积)、全干至饱水湿胀率(径向、弦向、体积)分别在2.34%~2.67%、3.23%~3.59%、5.88%~6.73%、5.1%~5.81%、8.05%~8.67%、13.77%~15.23%之间;力学性质中顺纹抗压强度、横纹全部抗压强度(径向、弦向)、抗弯强度、抗弯弹性模量测量值范围分别为53.44~58.89、12.00~15.46、14.23~18.11、107.386~122.299、9737.701~10410.325 MPa。【结论】5个无性系刺槐中最适合作为结构用材原料的是无性系3-Ⅰ;最适合作为装饰用材原料的是豫刺7号。

关键词：刺槐无性系木材生长物理力学性质综合评价

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青海东部黄土区林地土壤系统分类及参比

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土壤 2025年第1期57卷 214-222页

作者：陈琳耿玉清范秋运韩湘师发苗郭霞北京林业大学林学院森林培育与保护教育部重点实验室北京100083 互助土族自治县林业和草原站青海海东810500

为探讨林地土壤形成特征和在中国系统分类中的归属,以青海东部互助县黄土区9个典型林地土壤为研究对象,基于《中国土壤系统分类检索》(第三版),鉴定其诊断层和诊断特性,并将分类结果与中国土壤发生分类、美国土壤系统分类和世界土壤资... 详细信息

为探讨林地土壤形成特征和在中国系统分类中的归属,以青海东部互助县黄土区9个典型林地土壤为研究对象,基于《中国土壤系统分类检索》(第三版),鉴定其诊断层和诊断特性,并将分类结果与中国土壤发生分类、美国土壤系统分类和世界土壤资源参比基础进行参比。结果表明:研究区林地土壤可归属为石质干润正常新成土、普通简育干润均腐土、斑纹简育湿润均腐土、普通钙积干润均腐土、钙积简育干润雏形土、普通暗沃干润雏形土和普通简育干润雏形土7个亚类。其中,3个灰褐土剖面分别归属于中国土壤系统分类的2个土纲、2个亚纲和2个土类;4个栗钙土剖面分别归属于中国土壤系统分类的2个土纲、2个亚纲和2个土类。与其他分类相比,中国土壤系统分类在设置上充分考虑了腐殖质分布的特征,更适用于天然林土壤类型的划分,也可有效减少发生分类中栗钙土同名异土情况。

关键词：林地土壤系统分类灰褐土栗钙土分类参比

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青杄PwRhomboid基因表达特性及其抗旱作用

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陕西师范大学学报（自然科学版） 2024年第5期52卷 1-11页

作者：杨沛欣刘奎李兴芬汪晴晴曹一博张凌云北京林业大学林学院林木资源高效生产全国重点实验室森林培育与保护教育部重点实验室北京100083

通过对青杄转录组测序分析,筛选出干旱响应基因PwRhomboid,分析该基因在耐旱方面的功能特性,为揭示青杄的耐旱机理提供理论基础。采用生物信息学对PwRhomboid的氨基酸序列和同源基因进行比对;利用RT-qPCR技术分析PwRhomboid对不同非生... 详细信息

通过对青杄转录组测序分析,筛选出干旱响应基因PwRhomboid,分析该基因在耐旱方面的功能特性,为揭示青杄的耐旱机理提供理论基础。采用生物信息学对PwRhomboid的氨基酸序列和同源基因进行比对;利用RT-qPCR技术分析PwRhomboid对不同非生物胁迫和激素的响应情况;通过瞬时转化烟草叶片检测PwRhomboid蛋白的亚细胞定位;获得拟南芥和马铃薯的PwRhomboid转基因株系并进行干旱表型验证。研究结果显示,PwRhomboid的氨基酸序列在N端与其同源物种的氨基酸序列具有较大差异,在C端相似度较高,保守性较好;其蛋白主要定位于细胞膜。PwRhomboid的表达量经干旱、低温和脱落酸诱导后发生有显著变化,在成熟叶中表达量最高,其能够提高转基因拟南芥和马铃薯的耐旱性。经干旱处理后,与对照组拟南芥野生型和pCM1205株系相比,PwRhomboid过表达株系PwRhomboid-L1和PwRhomboid-L2的存活率更高,叶绿素荧光最大光化学效率和实际光化学效率更高;在经聚乙二醇模拟干旱处理后,与野生型相比,过表达株系PwRhomboid-L3、PwRhomboid-L4的马铃薯苗高更高。结果表明PwRhomboid的表达量会受到干旱等逆境和激素的影响,过表达PwRhomboid能够提高拟南芥和马铃薯的耐旱性。

关键词：青杄 Rhomboid蛋白耐旱性基因表达

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成年雄性毛白杨组培幼化技术研究

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中南林业科技大学学报 2024年第8期44卷 9-15,26页

作者：张劲王永格彭玉信李国雷王茂良张恒月常笑超郦金今刘勇北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室北京100083 北京市园林绿化科学研究院北京100102

【目的】毛白杨以无性繁殖为主,而无性繁殖材料往往存在老化现象,严重影响苗木质量,研究繁殖材料的幼化技术对于改善苗木质量,促进无性林业发展有重要意义。【方法】以北京大兴区站上村的200年生雄性毛白杨为对象,取其根萌条为繁殖材料... 详细信息

【目的】毛白杨以无性繁殖为主,而无性繁殖材料往往存在老化现象,严重影响苗木质量,研究繁殖材料的幼化技术对于改善苗木质量,促进无性林业发展有重要意义。【方法】以北京大兴区站上村的200年生雄性毛白杨为对象,取其根萌条为繁殖材料,探索2种灭菌试剂处理条件下,不同灭菌时间对外植体成活与生长的影响,同时在MS培养基中设置不同激素组合研究其增殖的最佳效果,筛选出适合其生长的最佳增殖培养基,通过继代培养研究此200年生成年雄性毛白杨的组培幼化技术。【结果】结果表明,0.1%氯化汞溶液的灭菌效果比10%次氯酸钠溶液效果好,最佳灭菌处理为0.1%氯化汞7 min,成活率为57%;最佳增殖培养基为MS+0.7 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA,最高丛生芽分化系数为2.23,茎高生长量≥1 cm苗的数量比例为53.33%,显著高于其他处理;随着继代次数的增加,生长周期由63 d(1代)降至44 d(4代),继代培养增殖系数由0.93(1代)提升至4.85(4代),茎高生长量≥3 cm苗的数量比也从2.23%(1代)显著增至62.34%(4代)。【结论】此200年生毛白杨繁殖材料存在一定程度的老化现象,母株的年龄可能影响其根萌条的幼化程度,但随着继代次数的增加,生长势有了显著的提高,说明多次继代培养有较明显的幼化作用,且随着继代次数的增加,幼化效果也越好。

关键词：组织培养成熟树木生理衰弱幼化雄性毛白杨

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山田胶锈菌效应蛋白GyHGSRE1的功能初探

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南京林业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：高馨梅邵晨曦梁英梅劳文浩北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室北京林业大学博物馆内蒙古通辽市生态环境局技术服务中心

【目的】明确山田胶锈菌（Gymnosporangium yamadae）吸器中效应蛋白GyHGSRE1的基础生物学功能，为进一步揭示山田胶锈菌效应蛋白作用的分子机制，制定持久的锈病防控策略奠定基础。【方法】基于前期获得的山田胶锈菌吸器转录组数据筛... 详细信息

【目的】明确山田胶锈菌（Gymnosporangium yamadae）吸器中效应蛋白GyHGSRE1的基础生物学功能，为进一步揭示山田胶锈菌效应蛋白作用的分子机制，制定持久的锈病防控策略奠定基础。【方法】基于前期获得的山田胶锈菌吸器转录组数据筛选具有高表达丰度的效应蛋白；通过MEME（http://***/）、AI（https://***）等在线网站预测GyHGSRE1的蛋白质结构；利用荧光定量PCR检测GyHGSRE1在山田胶锈菌侵染过程中的表达水平，以酵母菌分泌系统验证GyHGSRE1信号肽的分泌功能，并通过农杆菌介导的瞬时表达技术分析GyHGSRE1在本氏烟（Nicotiana benthamiana）和苹果（Malus domestica）叶片中的功能。【结果】在山田胶锈菌吸器转录组数据中获得了FPKM（fragments per Kb per million mapped reads）值为117.92、富含甘氨酸和丝氨酸的小分子分泌蛋白GyHGSRE1。其N端具有1个富含丝氨酸motif的信号肽。qRT-PCR显示GyHGSRE1在山田胶锈菌的吸器形成阶段以及性、锈孢子形成及发育阶段均上调表达，并定位于本氏烟叶片细胞的细胞质和细胞核，能够诱导细胞坏死并激发基础免疫防御反应，但含有信号肽的全长效应蛋白GyHGSRE1能够诱导苹果叶片细胞坏死，去除信号肽后诱导细胞坏死的能力减弱。【结论】富含甘氨酸和丝氨酸的非典型效应蛋白GyHGSRE1定位于植物细胞的细胞质和细胞核，能够诱导本氏烟及苹果叶片细胞坏死，因此可能具有广谱性的激发子活性。GyHGSRE1在山田胶锈菌侵染苹果叶片的定殖和孢子发育阶段显著表达从而发挥功能。其信号肽可能决定着对寄主特异性识别的相关功能。

关键词：山田胶锈菌非典型效应蛋白激发子信号肽植物免疫

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木豆NAC家族基因鉴定及其在真菌侵染下的响应分析

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农业生物技术学报 2023年第5期31卷 927-942页

作者：张修齐吴睿董碧莹杜婷婷宋治华李娜曹红燕杨清孟冬北京林业大学林学院/森林培育与保护教育部重点实验室北京林业大学树木发育与基因编辑研究院

NAC (NAM, ATAF1/2和CUC2)转录因子家族是具有保守NAC结构域蛋白的统称，在植物生长、发育和应激反应等生命活动中发挥关键调控作用。本研究利用拟南芥(Arabidopsis thaliana)的NAC家族基因，通过序列比对，从木豆(Cajanus cajan)基因... 详细信息

NAC (NAM, ATAF1/2和CUC2)转录因子家族是具有保守NAC结构域蛋白的统称，在植物生长、发育和应激反应等生命活动中发挥关键调控作用。本研究利用拟南芥(Arabidopsis thaliana)的NAC家族基因，通过序列比对，从木豆(Cajanus cajan)基因组中初步鉴定了90个CcNAC候选基因，系统发育分析显示，90个CcNAC基因可分为13个亚族，根据拟南芥基因功能的研究，筛选到Group 1～4亚族中，共24个CcNAC家族基因为潜在的生物胁迫响应基因。对24个CcNAC家族基因进行理化性质和启动子顺式作用元件分析，结果表明，启动子区域含有包括多种植物激素响应元件，可能与激素信号调控密切相关，具有潜在的响应生物与非生物胁迫的功能。转录组分析结果显示，在茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)处理12 h时，13个NAC基因显著上调表达，5个NAC基因显著下调表达，其中CcNAC55在处理3、6和12 h时均显著上调，且在6、12 h时表达水平最高。进一步利用半定量PCR检测发现，CcNAC55在真菌Cc1-1胁迫时持续显著上调，而在高温胁迫时没有明显差异，说明CcNAC55在木豆抵御生物胁迫的反应中可能发挥重要作用。为了验证CcNAC55应对生物胁迫的功能，本研究利用真空渗透转化法建立了过表达CcNAC55的木豆株系，并在叶片上接种致病真菌Cc1-1，结果显示，CcNAC55过表达可以显著降低木豆叶片的侵染率和侵染面积比率。本研究为木豆NAC基因功能的研究了提供参考，将有助于鉴定和选择与生物胁迫耐受性相关的候选基因。

关键词：木豆生物胁迫 NAC家族基因真菌抗病分析

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山田胶锈菌和亚洲胶锈菌吸器的比较转录组分析

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生物工程学报 2022年第10期38卷 3825-3843页

作者：翁涵刘霞陶思齐梁英梅北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室北京100083 北京林业大学博物馆北京100083

为防止锈病的传播,培育抗病品种以及减少产量损失,基于山田胶锈菌(Gymnosporangium yamadae)和亚洲胶锈菌(Gymnosporangium asiaticum)吸器阶段的转录组差异分析揭示了胶锈菌侵染寄主植物时的专化性选择机制。对山田胶锈菌和亚洲胶锈菌... 详细信息

为防止锈病的传播,培育抗病品种以及减少产量损失,基于山田胶锈菌(Gymnosporangium yamadae)和亚洲胶锈菌(Gymnosporangium asiaticum)吸器阶段的转录组差异分析揭示了胶锈菌侵染寄主植物时的专化性选择机制。对山田胶锈菌和亚洲胶锈菌担孢子侵染寄主时形成的吸器进行转录组测序,分别获得了21213条和13015条单基因(unigenes);从山田胶锈菌和亚洲胶锈菌中分别选择5个基因进行实时荧光定量PCR验证,显示其表达情况与转录组分析结果基本一致,表明转录组分析结果可靠;用Nr、GO、KEGG、KOG等7个数据库进行基因功能注释和富集分析,发现两种胶锈菌的基因主要富集在细胞进程、翻译、代谢相关通路;使用SignalP和TMHMM在线网站以及dbCAN、BLAST、HMMER等软件分析显示山田胶锈菌和亚洲胶锈菌吸器中的候选效应蛋白分别有343个(2.51%)和175个(2.79%),其中分别含有14个和5个蛋白酶,10个和3个脂酶;利用OrthoFinder、BLSAT和KaKs Calculator软件分析了两种胶锈菌的进化关系,在一对一同源基因中,比对率大于82%的基因对被认为处于保守选择,有12.37%的基因对处于正向选择,在亚洲胶锈菌中有5个效应子处于进化选择,其中1个为脂酶。山田胶锈菌和亚洲胶锈菌表达基因富集中没有发现显著差异,表明虽然其种间存在典型的寄主选择性,但吸器所涉及的生物学过程相对保守,而两个物种之间存在较低的蛋白相似性,说明它们受到较大的寄主选择压力而产生了明显的进化分歧,这可能与对寄主的特异性选择机制相关。在吸器阶段,胶锈菌可能可以利用植物的脂质作为能量来源,而效应子的主要目的可能是调控植物的生理进程等而不是直接攻击寄主。

关键词：锈菌转录组吸器物种进化效应子

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油茶胚珠败育的组织学特性及相关基因表达分析

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北京林业大学学报 2023年第9期45卷 9-20页

作者：陈雨晴杜兵帅王胜楠曹一博袁德义张凌云森林培育与保护教育部重点实验室北京林业大学林学院北京100083 经济林育种与栽培国家林业局重点实验室经济林培育与保护教育部重点实验室中南林业科技大学湖南长沙410004

【目的】油茶胚珠败育现象严重,只有少数胚珠能发育为成熟种子,但其败育机制尚不清楚。本研究对油茶胚珠败育时期、组织结构变化和败育原因展开探究,旨在明确油茶胚珠的败育过程,为提高油茶产量提供一定的理论基础和实践意义。【方法】... 详细信息

【目的】油茶胚珠败育现象严重,只有少数胚珠能发育为成熟种子,但其败育机制尚不清楚。本研究对油茶胚珠败育时期、组织结构变化和败育原因展开探究,旨在明确油茶胚珠的败育过程,为提高油茶产量提供一定的理论基础和实践意义。【方法】本研究以‘华硕’品种果实为试验材料,在体视显微镜下观察油茶果实内胚珠的形态,统计败育率,采用荧光素二乙酸酯(FDA)染色观察败育胚珠失去活性的时间;通过石蜡切片和显微镜观察明确可育胚珠和败育胚珠的组织结构变化,通过碘-碘化钾染色和PAS反应标记可育胚珠与败育胚珠中淀粉粒的分布。利用CFDA荧光示踪和激光共聚焦成像技术揭示同化物在可育胚珠与败育胚珠中的运输路径,通过实时荧光定量PCR试验分析与糖和能量代谢、活性氧代谢、细胞凋亡等过程相关的基因在可育胚珠与败育胚珠中的表达情况。【结果】(1)体式显微镜的观察结果显示26 WAA(花后周数)后油茶可育胚珠与败育胚珠的大小产生差异;FDA标记结果说明,败育胚珠在果实发育过程中逐步失去活性。(2)37 WAA时,胚珠败育率达到64.08%。(3)显微观察显示:可育胚珠的胚和胚乳均正常发育,内外珠被结合紧密;败育胚珠无胚乳细胞,内珠被与外珠被之间的空隙较大;可育胚珠的胚柄和胚乳中均有淀粉粒存在,败育胚珠仅在萎缩的内珠被上观察到少量淀粉粒。可育胚珠的内珠被上无胼胝质沉积,败育胚珠的内珠被上可见胼胝质沉积。(4)CFDA荧光示踪结果发现,败育胚珠与可育胚珠的同化物运输方式存在差异。(5)与糖和能量代谢、活性氧代谢、细胞凋亡等过程相关基因在败育胚珠和可育胚珠中存在差异性表达。【结论】败育胚珠的结构异常,胚珠内缺乏淀粉的积累,内珠被上有胼胝质沉积,同化物的运输方式与可育胚珠不同,参与胚珠物质和能量代谢、抗氧化作用和细胞凋亡等过程的基因的差异表达可能与油茶胚珠的败育有关。

关键词：油茶胚珠败育组织学特性

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盐碱胁迫对雄性毛白杨良种苗木生长和生理的影响

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中南林业科技大学学报 2024年第6期44卷 56-68页

作者：王硕刘勇彭玉信郑志伟常笑超王文霄杨帆北京林业大学林学院森林培育与保护教育部重点实验室北京100083 北京市园林绿化科学研究院北京100102

【目的】适地适树是植树造林的基本原则,毛白杨广泛分布于我国华北平原、黄河中上游平原等地区,而这些区域普遍存在不同类型的盐碱土地。因此,研究盐碱胁迫对雄性毛白杨良种苗木的影响,可为今后盐渍土开发利用和良种苗木推广种植提供技... 详细信息

【目的】适地适树是植树造林的基本原则,毛白杨广泛分布于我国华北平原、黄河中上游平原等地区,而这些区域普遍存在不同类型的盐碱土地。因此,研究盐碱胁迫对雄性毛白杨良种苗木的影响,可为今后盐渍土开发利用和良种苗木推广种植提供技术支撑。【方法】选用‘北林雄株1号’作为雄性毛白杨良种苗木试验材料,通过盆栽浇灌盐水的方式模拟盐碱环境,盐碱类型分为中性盐NaCl、中性混合盐Na_(2)SO_(4)+NaCl、碱性盐NaHCO_(3)和碱性混合盐Na_(2)CO_(3)+NaHCO_(3)。不同盐碱种类设置150和300 mmol·L^(-1)两个浓度。【结果】不同类型盐碱胁迫均会使苗木生长受到抑制,且高浓度下的抑制作用更加明显,中性盐胁迫对植株地上部生长影响较大,高浓度NaCl处理下的苗高增长量相较对照下降了56.61%,而碱性盐胁迫对植株根系生长抑制更强;碱性盐胁迫会显著降低植株的净光合速率,而低浓度的NaCl处理可以增强植株的光合作用;植株根、茎、叶中的Na^(+)含量在盐碱胁迫下显著增加,中性盐处理下植株根部控制Na^(+)的能力强于碱性盐胁迫,且植株由根系向上选择性运输营养元素的能力强于碱性盐胁迫;在高浓度下,Na_(2)SO_(4)+ NaCl处理的根向叶选择性运输K^(+)能力相较对照提升了707.20%,但随着浓度增加,植株自身离子调节能力受到抑制。【结论】综合来看,碱性盐胁迫对雄性毛白杨良种苗木生长和生理产生的负面影响更大。

关键词：盐碱胁迫生长光合作用离子平衡雄性毛白杨

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