检索结果-内蒙古大学图书馆

植物生理学报 2014年第4期50卷 477-482页

作者：刘蕾高海波沈应柏北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083 临沂大学生命科学学院山东临沂276005

土壤盐渍化是植物生长的主要逆境之一。茉莉酸类物质与植物抗逆性密切相关。以国家二级保护植物新疆沙冬青为实验材料,利用非损伤微测技术,从动态离子流转运的角度研究了MeJA预处理后NaCl处理对新疆沙冬青根部K^+、H^+、Na^+流的影响。... 详细信息

土壤盐渍化是植物生长的主要逆境之一。茉莉酸类物质与植物抗逆性密切相关。以国家二级保护植物新疆沙冬青为实验材料,利用非损伤微测技术,从动态离子流转运的角度研究了MeJA预处理后NaCl处理对新疆沙冬青根部K^+、H^+、Na^+流的影响。结果表明,MeJA预处理的新疆沙冬青经盐胁迫后根冠区瞬时K^+外流低于未经MeJA预处理的对照植株,H^+外流强度大于对照植株;新疆沙冬青根尖区域(0~3000μm)经MeJA和NaCl(50 mmol·L^(-1),24 h)预处理,解除NaCl胁迫后观察到Na^+外流和H^+内流,流速高于对照植株。表明适当浓度MeJA预处理能有效提高新疆沙冬青苗期抗盐性。

关键词：盐胁迫 H+-ATPase MeJA 非损伤微测技术

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云南松基因组微卫星富集文库的构建

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生物技术通报 2014年第1期30卷 93-99页

作者：许玉兰张瑞丽田斌蔡年辉康向阳段安安北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083 西南林业大学国家林业局西南地区生物多样性保育重点实验室昆明650224

采用磁珠富集法构建云南松微卫星富集文库。云南松基因组DNA经RsaⅠ酶切,与特定接头连接,再用接头特异引物进行PCR扩增。连接扩增产物与用生物素标记的(AG)12、(AT)12、(CG)12、(GT)12、(ACG)12、(ACT)12和(CCA)8探针杂交,通过链霉亲和... 详细信息

采用磁珠富集法构建云南松微卫星富集文库。云南松基因组DNA经RsaⅠ酶切,与特定接头连接,再用接头特异引物进行PCR扩增。连接扩增产物与用生物素标记的(AG)12、(AT)12、(CG)12、(GT)12、(ACG)12、(ACT)12和(CCA)8探针杂交,通过链霉亲和素偶联的磁珠捕捉含接头和微卫星序列的片段并扩增,将获得的片段连接到pMD-19T载体上,转化至大肠杆菌JM109感受态细胞中,成功构建了云南松微卫星富集文库。通过PCR检测从文库中筛选阳性克隆,在383富集阳性菌落中获得阳性克隆257个,经测序分析,在获得的159条序列中,有143条含有SSR,其中完美型占65.73%,非完美型占23.78%,混合型占10.49%。结果表明,磁珠富集法构建云南松基因组微卫星文库高效、可行的,文库的构建为微卫星位点的分离、遗传多样性的分析等奠定基础。

关键词：云南松富集文库微卫星

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蒙古沙冬青对灰斑古毒蛾重复取食响应的代谢组学分析

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植物生理学报 2014年第1期50卷 61-67页

作者：孙敬茹张笑沈应柏杨海军北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 北京林业大学林木、花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 清华大学化学系微量分析测试方法与仪器研制北京市重点实验室北京100084

植物对同种昆虫重复取食做出更有效的响应是植物适应自然界虫害周期性爆发的重要策略。为了研究蒙古沙冬青对其主要害虫灰斑古毒蛾幼虫重复取食响应的代谢基础,本实验采用基于核磁共振(NMR)的代谢组学技术,分析了遭受同一年不同代灰斑... 详细信息

植物对同种昆虫重复取食做出更有效的响应是植物适应自然界虫害周期性爆发的重要策略。为了研究蒙古沙冬青对其主要害虫灰斑古毒蛾幼虫重复取食响应的代谢基础,本实验采用基于核磁共振(NMR)的代谢组学技术,分析了遭受同一年不同代灰斑古毒蛾幼虫取食的蒙古沙冬青叶片和对照组幼苗叶片的代谢差异。结果表明,仅遭受第一代幼虫取食叶片在第二代幼虫期与对照之间代谢物存在较小差异,而仅遭受第二代幼虫取食叶片与遭受两代幼虫取食叶片代谢差异显著,仅遭受第一代与仅遭受第二代幼虫取食的植株相邻分枝叶片差异显著。另外,只有仅遭受第二代幼虫取食组幼苗表现出处理叶片与相邻分枝叶片的显著代谢差异,并且这种代谢差异为总体代谢的变化,而并未表现为特定代谢物含量变化。由此可见,蒙古沙冬青能在代谢水平以很小的代谢变化来保存昆虫取食信息,在遭受同种昆虫取食后,代谢差异被放大,而且这种信息保存在遭受取食叶片中表现更明显。

关键词：蒙古沙冬青灰斑古毒蛾同种昆虫代谢组学

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欧美杨锌指蛋白转录因子基因(ZxZF)的遗传转化及抗旱性初步分析

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林业科学 2014年第3期50卷 31-37页

作者：张伟溪刘浡洋丁昌俊张冰玉黄秦军褚延广苏晓华林木遗传育种国家重点实验室国家林业局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所北京100091 北京林业大学北京100083

C2H2型锌指蛋白转录因子在激活胁迫相关基因、增强植物抗逆性方面具有重要的作用。以来自极端抗逆木本植物霸王C2H2型锌指蛋白转录因子基因(ZxZF)为外源基因,利用农杆菌介导法对欧美杨‘渤丰1号’进行遗传转化。经卡那霉素筛选获得80株... 详细信息

C2H2型锌指蛋白转录因子在激活胁迫相关基因、增强植物抗逆性方面具有重要的作用。以来自极端抗逆木本植物霸王C2H2型锌指蛋白转录因子基因(ZxZF)为外源基因,利用农杆菌介导法对欧美杨‘渤丰1号’进行遗传转化。经卡那霉素筛选获得80株抗性植株,通过PCR检测获得17株呈阳性植株,Southern印记杂交检测证实外源基因以单拷贝方式整合到5个转基因株系体内,RT-PCR及qRT-PCR分子检测表明,外源基因在4个转基因株系中成功表达。PEG模拟干旱胁迫试验结果初步表明,转基因株系叶片相对含水量和脯氨酸含量均显著高于非转基因植株10%以上,转基因株系抗旱性得到一定程度提高。研究表明ZxZF转录因子基因对提高转基因杨树抗旱能力具有重要作用,在培育抗旱林木优良品种中具有重要育种价值。

关键词：欧美杨锌指蛋白基因遗传转化抗旱性

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低温胁迫响应的甜杨miR475靶基因的预测及表达

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基因组学与应用生物学 2014年第3期33卷 487-494页

作者：胡惠雯侯欣瑜蔡兼钮俊项争安基永林善枝北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

MicroRNAs(miRNAs)通过使靶mRNA降解或翻译参与生物体的转录后调控,并在植物对生物与非生物胁迫的应答过程中发挥重要作用。本研究基于相关数据库,利用生物信息学方法,通过搜索预测及实验验证得到甜杨(Populus suaveolens)低温响应miR47... 详细信息

MicroRNAs(miRNAs)通过使靶mRNA降解或翻译参与生物体的转录后调控,并在植物对生物与非生物胁迫的应答过程中发挥重要作用。本研究基于相关数据库,利用生物信息学方法,通过搜索预测及实验验证得到甜杨(Populus suaveolens)低温响应miR475的12条潜在靶基因,并对其降解位点进行分析;同时,以低温(0℃)处理不同时间甜杨幼苗为试材,利用荧光定量PCR对miR475及其靶基因的表达谱进行检测分析,结果发现,随着低温诱导时间的延长,miR475表达量呈下调趋势,而其靶mRNA的表达量则呈现相反趋势,表明甜杨miR475可能以降解靶mRNA的方式在抵御低温中发挥作用。本文研究结果可为甜杨抗冻机制的后续深入研究提供科学依据。

关键词：甜杨 microRNA靶基因低温胁迫荧光定量PCR 表达谱

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毛白杨抗病相关转录因子基因PtWRKY1的表达特性分析

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基因组学与应用生物学 2014年第4期33卷 853-859页

作者：项争蔡兼谌殷蕾钮俊刘雪萍胡惠雯侯欣瑜林善枝北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

WRKY转录因子作为植物特有的一类重要转录调控因子,广泛参与植物对生物和非生物胁迫的应答反应及形态发育和组织衰老等,已引起人们的关注。本文以前期克隆得到的毛白杨WRKY转录因子基因(命名为PtWRKY1)为研究对象,开展其基因枪介导洋葱... 详细信息

WRKY转录因子作为植物特有的一类重要转录调控因子,广泛参与植物对生物和非生物胁迫的应答反应及形态发育和组织衰老等,已引起人们的关注。本文以前期克隆得到的毛白杨WRKY转录因子基因(命名为PtWRKY1)为研究对象,开展其基因枪介导洋葱表皮细胞瞬时表达、外源信号分子(水杨酸SA,茉莉酸MeJA,脱落酸ABA)诱导表达、转PtWRKY1基因烟草植株的烟草花叶病毒(TMV)接种实验以及抗病相关基因表达的实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)分析等研究。结果表明,PtWRKY1基因编码蛋白定位于细胞核,SA、ABA及MeJA处理均可诱导PtWRKY1基因表达,但不同诱导因子对PtWRKY1表达量的影响存在一定差异;同时,TMV侵染实验发现外源PtWRKY1表达能增强转基因烟草抗TMV能力,qRT-PCR分析表明PtWRKY1基因及膜保护性酶(POD,SOD,CAT)基因均受TMV诱导而增强表达。本文研究结果可为后续开展毛白杨转录因子PtWRKY1的功能鉴定及应用奠定基础。

关键词：毛白杨 WRKY转录因子 PtWRKY1 表达分析抗病性

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一种优化的胡杨高效多重(12重)SSR体系(英文)

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植物分类与资源学报 2014年第3期36卷 365-374页

作者：徐放赵舒邬荣领杜芳北京林业大学计算生物学中心林木遗传育种国家工程实验室生物科学与技术学院北京100083

微卫星多重PCR方法是一种非常经济并且高通量的基因分型技术。本研究在耐干旱、盐碱的胡杨(Populus euphratica)中开发出一套荧光标记的12重微卫星工作体系。该体系包含12条表达序列标签微卫星(EST-SSR)引物,其中3条设计于NCBI,另外9条... 详细信息

微卫星多重PCR方法是一种非常经济并且高通量的基因分型技术。本研究在耐干旱、盐碱的胡杨(Populus euphratica)中开发出一套荧光标记的12重微卫星工作体系。该体系包含12条表达序列标签微卫星(EST-SSR)引物,其中3条设计于NCBI,另外9条设计于二代的转录组序列。利用该多重微卫星体系可在单一的PCR反应体系中成功扩增出12条表达序列标签的微卫星短序列片段,并在胡杨的3个自然居群96个个体中对该体系进行了验证,结果显示该体系具有很高的稳定性及多样性。同时,在杨属的5个派7个种中对其通用性进行了检验,显示这些引物具有很高的通用性,成功扩增率为79%。本研究中提供的12重多重PCR结合本实验已经公开发表的2个8重体系对揭示胡杨及其他杨树的进化历史具有重要的作用。最后,本研究认为引物的选择,扩增效率,哑等位基因的检测是多重体系开发过程中最为关键的步骤。

关键词：胡杨多重PCR 基因分型

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用SSR标记分析‘赞皇大枣’遗传变异

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中国农学通报 2015年第16期31卷 94-100页

作者：高姣刘君申连英褚新房徐超群杜增峰李登科王哲张振东庞晓明北京林业大学林木育种国家工程实验室/生物科学与技术学院北京100083 河北农业大学中国枣研究中心河北保定071001 河北省赞皇县林业局石家庄051230 河北省沧县国家枣树良种基地河北沧州061000 山西省农业科学院果树研究所山西太谷030815

研究旨在从分子水平揭示‘赞皇大枣’的遗传变异,以期为‘赞皇大枣’新品种选育提供有效的理论基础。利用SSR标记对395份‘赞皇大枣’样品进行PCR扩增,扩增产物经毛细管电泳技术检测,通过分析样品的指纹图谱数据,来评价样品间的遗传关系... 详细信息

研究旨在从分子水平揭示‘赞皇大枣’的遗传变异,以期为‘赞皇大枣’新品种选育提供有效的理论基础。利用SSR标记对395份‘赞皇大枣’样品进行PCR扩增,扩增产物经毛细管电泳技术检测,通过分析样品的指纹图谱数据,来评价样品间的遗传关系。16对SSR标记共扩增出51个等位基因,每个位点的等位基因数从2-9不等,平均每位点3.2个。产物片段大小范围为104-304 bp。稀有等位基因为16个,多态位点百分率为75%。395份样品中共得到28种两两相异的‘赞皇大枣’指纹图谱数据,即28种不同的基因型。对28种基因型进行聚类分析的结果表明,它们的遗传相似系数在0.7500-0.9804之间,平均值为0.9047。在遗传相似系数0.90处这些基因型被划分为5个类群。结果表明,‘赞皇大枣’群体内存在较丰富的的遗传变异,还有较大的选育出新品种的潜力。

关键词： '赞皇大枣’ 遗传变异 SSR 基因型新品种选育

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云南松基因组微卫星富集文库的序列特征分析

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生物技术 2014年第4期24卷 62-66页

作者：许玉兰白青松张瑞丽田斌王大玮何承忠蔡年辉康向阳段安安北京林业大学/林木育种国家工程实验室北京100083 西南林业大学/国家林业局西南地区生物多样性保育重点实验室云南昆明650224

目的：分析基因组微卫星富集文库的序列特征，探索云南松基因组微卫星的分布特征或变异规律。方法：采用磁珠富集法，从云南松基因组DNA的RsaI酶切产物中富集微卫星片段，富集片段经洗脱分离、载体连接及转化等环节，对富集文库鉴定和... 详细信息

目的：分析基因组微卫星富集文库的序列特征，探索云南松基因组微卫星的分布特征或变异规律。方法：采用磁珠富集法，从云南松基因组DNA的RsaI酶切产物中富集微卫星片段，富集片段经洗脱分离、载体连接及转化等环节，对富集文库鉴定和测序，分析序列特征。结果：在测序获得的159条序列中，有143条序列含有重复次数不少于3次的微卫星序列，序列长度为135～1138bp，平均520bp，克隆比例为89．94％。在这些序列中，以二核苷酸重复类型最多（56．64％），其次是三核苷酸，有51条（35．66％），此外，出现少量（7．70％）重复类型为4—6bp的微卫星序列；各重复单元的碱基组成以探针及其互补序列为主，并出现少量的非探针类型；重复次数介于3—15，随着重复单元长度的增加而出现的频率降低。结论：分析了云南松基因组微卫星富集文库微卫星重复类型、重复单元碱基组成及其序列长度变异，为进一步分析云南松基因组微卫星的分布特征或变异规律奠定基础，进而为开发SSR引物提供基础信息。

关键词：云南松微卫星 SSR频率

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北京市平原造林常见观叶树种抗寒性的比较

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植物生理学报 2014年第8期50卷 1223-1226页

作者：王岩王玉玲张金全李云李颖岳北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室北京100083 北京市延庆县园林绿化局北京102100

以北京市平原造林常见的8种观叶树种为试验材料,测定不同低温胁迫下叶片相对电导率及伤害率,并通过Logistic方程估算出各树种叶片半致死温度,据此对被测树种的抗寒性进行初步评价。结果表明:不同树种叶片相对电导率及伤害率均随着处理... 详细信息

以北京市平原造林常见的8种观叶树种为试验材料,测定不同低温胁迫下叶片相对电导率及伤害率,并通过Logistic方程估算出各树种叶片半致死温度,据此对被测树种的抗寒性进行初步评价。结果表明:不同树种叶片相对电导率及伤害率均随着处理温度的降低而升高,且二者趋势一致;通过不同树种抗寒性的聚类分析,可将8个检测树种分为4类。综合测定结果显示,各树种抗寒性顺序为:栾树>元宝枫>金焰绣线菊>珍珠梅>黄栌>红宝石海棠>金叶榆>紫叶小檗。

关键词：观叶树种抗寒性相对电导率平原造林

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