检索结果-内蒙古大学图书馆

北京林业大学学报 2018年第4期40卷 1-9页

作者：李双苏艳艳王厚领李惠广刘超夏新莉尹伟伦北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室北京100083

【目的】miR1444b是木本植物特异miR1444家族中的一员,能够参与植物对金属胁迫的响应,但在干旱胁迫响应中的功能尚不明确。【方法】本实验克隆得到了胡杨MIR1444b基因(peu-MIR1444b)及其启动子(pro-peuMIR1444b),将peu-MIR1444b基因在... 详细信息

【目的】miR1444b是木本植物特异miR1444家族中的一员,能够参与植物对金属胁迫的响应,但在干旱胁迫响应中的功能尚不明确。【方法】本实验克隆得到了胡杨MIR1444b基因(peu-MIR1444b)及其启动子(pro-peuMIR1444b),将peu-MIR1444b基因在模式植株拟南芥中过表达,对转基因植株进行正常浇水、甘露醇模拟干旱和自然干旱条件处理,研究peu-MIR1444b的功能。【结果】克隆得到的pro-peu-MIR1444b和peu-MIR1444b与Phytozome数据库收录的毛果杨基因组序列相似性分别为99.61%和98.82%。利用Plant CARE数据库分析发现,pro-peuMIR1444b序列中包含逆境相关的TC-rich repeats元件和受干旱诱导的MYB结合位点MBS。实时荧光定量PCR分析显示miR1444b在转基因拟南芥中表达量显著高于野生型,预测的靶基因葡聚糖合成酶Ⅳ(AT3G14570.2)表达量明显下调,初步确定葡聚糖合成酶Ⅳ在拟南芥中被peu-miR1444b负调控。在250 mmol/L甘露醇模拟的干旱胁迫条件下,转基因拟南芥株系TG-2和TG-5萌发率分别显著高于野生型20.83%和26.67%,根长分别显著高于野生型56.83%和52.60%(P<0.05)。土壤自然干旱8 d测得转基因拟南芥的光合速率、气孔导度、叶片水分利用效率、PSⅡ最大光化学效率和过氧化物酶(POD)活性均显著高于野生型(P<0.05)。【结论】胡杨miR1444b可以促进根系生长增加植物的吸水能力,负调控葡聚糖合成酶Ⅳ提高植物的渗透调节能力,维持植物在水分亏缺条件下的光合效率,保证植株正常生长,在拟南芥中正调控植物抗旱性。

关键词：胡杨 miR1444b 干旱甘露醇光合速率

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毛白杨木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶PtoXTH35原核可溶性表达方法研究

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江苏农业科学 2019年第8期47卷 33-36页

作者：李钰华李爽盖颖北京林业大学生物科学与技术学院/林木育种国家工程实验室北京100083

从毛白杨中克隆得到木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶PtoXTH35基因,根据SignalIP在线软件预测蛋白信号肽,并分别构建至pET28a、pET32a、pGEX-4t-1、pMAL-c5e、pET 43.1a等5种原核表达载体,经双酶切和测序验证后转化至BL21(DE3)感受态,使用终... 详细信息

从毛白杨中克隆得到木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶PtoXTH35基因,根据SignalIP在线软件预测蛋白信号肽,并分别构建至pET28a、pET32a、pGEX-4t-1、pMAL-c5e、pET 43.1a等5种原核表达载体,经双酶切和测序验证后转化至BL21(DE3)感受态,使用终浓度为0.4 mmol/L的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导其表达目的蛋白。经SDS-PAGE检测,结果表明5种载体均可表达目的蛋白,pET28a、pET32a、pGEX-4t-1等3种载体所表达蛋白均以包涵体的形式存在,而pMAL-c5e和pET 43.1a载体携带蛋白表达量高并且所表达蛋白50%为可溶性蛋白,实现了毛白杨PtoXTH35在原核表达系统中的高效可溶性表达,该试验为后续进一步研究毛白杨PtoXTH35的体外功能奠定了基础。

关键词：毛白杨木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶原核表达包涵体可溶性蛋白

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杜仲DREB/WRKY/XET多基因抗旱分子辅助育种基础

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分子植物育种 2018年第24期16卷 7990-7997页

作者：唐文思王叶利王华芳北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室北京100083

杜仲为中国特有抗逆多用途树种,基于多个基因协同提升植物抗旱性的研究基础,克隆杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.) 3个抗旱同源关键基因EuDREB2A、EuWRKY19和EuXET的保守区域。与数据库中其他28个物种的同源序列,进行其基因家族结构域、... 详细信息

杜仲为中国特有抗逆多用途树种,基于多个基因协同提升植物抗旱性的研究基础,克隆杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.) 3个抗旱同源关键基因EuDREB2A、EuWRKY19和EuXET的保守区域。与数据库中其他28个物种的同源序列,进行其基因家族结构域、理化性质、编码氨基酸序列结构和系统进化关系分析,结果表明:杜仲的3个同源基因分别含有其基因家族保守结构域cd00018、cd03892和cd02176,且保守结构域和理化性质与其他物种基本一致。EuDREB2A基因编码的蛋白不稳定且有3个氨基酸残基缺失,EuXET等电点最高且有5个位点的氨基酸残基与其他物种不同。系统发育进化分析表明,杜仲EuDREB2A与洋白蜡FpDREB2A、EuWRKY19与小麦TaWRKY19、EuXET与胡杨PeXET具有相似的抗旱机制。本研究为EuDREB/WRKY/XET多基因分子辅助育种提供理论和技术基础。

关键词：杜仲(Eucommia ulmoides) 抗旱基因多基因抗旱机制分子辅助育种

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不同植物生长调节剂添加处理对杉木体胚成熟的影响

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分子植物育种 2019年第6期17卷 2035-2041页

作者：吴夏雷孙宇涵胡瑞阳曹森冯玥徐金良郑会全胡德活李云北京林业大学生物科学与技术学院北京林业大学林木分子设计育种高精尖创新中心林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 中国林业科学研究院华北林业实验中心北京102300 浙江省开化县林场开化324300 广东省林业科学研究院广州510520

为优化杉木体细胞胚胎发生体系及探讨不同植物生长调节剂的添加处理对杉木体胚成熟的影响,本研究以继代中的杉木胚性愈伤组织为材料,使用不同浓度的脱落酸(ABA)与聚乙二醇-4000 (PEG-4000)组合添加剂和不同浓度的外源还原型谷胱甘肽(GSH... 详细信息

为优化杉木体细胞胚胎发生体系及探讨不同植物生长调节剂的添加处理对杉木体胚成熟的影响,本研究以继代中的杉木胚性愈伤组织为材料,使用不同浓度的脱落酸(ABA)与聚乙二醇-4000 (PEG-4000)组合添加剂和不同浓度的外源还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)对成熟培养初期的杉木胚性愈伤组织进行处理,并对初次产生早期体细胞胚时的胚性愈伤组织进行谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性测定。结果显示,成熟培养在以DCR为基本培养基,附加蔗糖30 g/L、倍力凝5 g/L、活性炭1 g/L、硝酸银10 mg/L的条件下,同时添加ABA 50μmol/L和PEG-4000 100 g/L对杉木愈伤组织成熟具有明显的作用,成熟率达30.77%,其胚性愈伤组织大部分为白色透明、表面亮晶有光泽、质地松软粘连,表面具有明显伸长胚柄的早期体细胞胚再生出来,达到156.45个/g。在此基础上添加不同浓度的外源GSH和GSSG主要表现出低浓度促进,高浓度抑制的作用,其中添加GSH比GSSG影响更大,在GSH浓度为0.25 mmol/L时,成熟率最高,达到41.25%,比对照组高出12.50%,差异显著。本试验的研究发现对于优化杉木体胚成熟培养体系具有重要意义。

关键词：杉木体胚成熟培养谷胱甘肽

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‘凤丹’离体快繁工厂化技术研究

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分子植物育种 2018年第2期16卷 526-534页

作者：王蒙蒙卜祥潘张倩霍瑾茹晁龙军王华芳北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室北京100083

杨山牡丹‘凤丹’(Paeonia ostii *** et *** *** ***)抗逆性强,适应性广,主要用作观赏、药用和新型油料作物。‘凤丹’种子繁殖的个体差异大,组织培养不定芽增殖系数低,生根困难,移栽驯化难以成活,严重制约良种繁育和新品种培育。本研... 详细信息

杨山牡丹‘凤丹’(Paeonia ostii *** et *** *** ***)抗逆性强,适应性广,主要用作观赏、药用和新型油料作物。‘凤丹’种子繁殖的个体差异大,组织培养不定芽增殖系数低,生根困难,移栽驯化难以成活,严重制约良种繁育和新品种培育。本研究以‘凤丹’鳞芽探究鳞芽表面消毒最佳方式;生长调节剂、蔗糖浓度、继代周期、防褐化剂对不定芽扩繁的影响;不定芽珍珠岩基质容器化扦插生根、活性炭(AC)-吲哚丁酸(IBA)集成诱导不定根发生和移栽驯化。初步建立组织培养工厂化育苗技术体系,鳞芽以有效氯1%的二氯异氰尿酸钠水溶液处理20 min,去污染成活率高达66.0%;不定芽在6-苄氨基嘌呤(6-BA)0.5 mg/L、吲哚-3-乙酸(IAA)0.05 mg/L的改良WPM培养基上增殖系数最高达2.73;蔗糖浓度为20 g/L、继代周期为35 d有利于不定芽分化;培养基中添加维生素C(VC)15 mg/L、核黄素(VB2)20 mg/L抗褐化效果最佳。AC-IBA集成诱导不定芽生根,AC 0.5 g/L、AC培养时间为15 d、IBA 15 mg/L诱导生根率53.3%,小植株移栽驯化成活率26.7%;不定芽珍珠岩基质容器化扦插,IBA 20 mg/L诱导生根率40%,驯化成活率97.8%。优化的‘凤丹’组织培养体系为工厂化良种繁育奠定技术基础。

关键词： '凤丹’ 鳞芽组织培养

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年龄效应对白杨硬枝扦插苗生长及其茎皮部解剖结构和叶片生化指标的影响

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西北植物学报 2018年第2期38卷 274-281页

作者：洪汉辉康向阳汪晓峰北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室北京100083

为探究白杨年龄效应导致的扦插繁殖苗退化问题,该试验以杂种三倍体‘北林雄株2号’的不同年龄苗木硬枝插穗为材料,就扦插苗生长形态、光合生理、根发育特征、插穗皮部解剖结构以及苗木生长发育过程中叶片可溶性总糖(TSS)、可溶性总蛋白(... 详细信息

为探究白杨年龄效应导致的扦插繁殖苗退化问题,该试验以杂种三倍体‘北林雄株2号’的不同年龄苗木硬枝插穗为材料,就扦插苗生长形态、光合生理、根发育特征、插穗皮部解剖结构以及苗木生长发育过程中叶片可溶性总糖(TSS)、可溶性总蛋白(TSP)、叶绿素(Chl)、脯氨酸(Pro)、赤霉素(GA)、生长素(IAA)、脱落酸(ABA)及IAA/ABA比值等生理生化指标进行了观测。结果表明:(1)再生苗苗高、地径、叶柄长度、节间宽、叶面积、主根数、主根长、生根率、根系效果指数及净光合速率(P_n)等指标均随插穗年龄的增加而降低,而其侧根数、侧根长、胞间CO_2浓度(C_i)、气孔导度(G_s)和蒸腾速率(T_r)等指标与插穗年龄无明显相关性。(2)插穗茎皮部解剖结构显示,周皮和木质部厚度都随插穗年龄增大而增厚,韧皮部厚度则无明显变化。(3)再生苗叶片可溶性总糖、总蛋白、叶绿素、IAA、GA含量以及IAA/ABA比值等指标均随插穗年龄的增加而逐渐降低,而脯氨酸和ABA含量则随插穗年龄增加而增加。研究发现,白杨扦插苗随插穗年龄的增加累积成熟效应,使新生苗表现出整体性衰老的生长状态。

关键词：白杨扦插繁殖年龄效应生根特性解剖结构激素水平

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红果枸杞EST-SSR分子标记开发及应用

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分子植物育种 2018年第4期16卷 1208-1213页

作者：饶书培张东智陈金焕北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 林木育种国家工程实验室北京100083

为了快速区分市场上不同品系的宁夏枸杞(Lycium barbarum L.),我们针对8种宁夏枸杞中进行了开发新型SSR引物,结果显示这些EST-SSR标记可用来调查分析枸杞的遗传结构。除此之外,运用SSR标记并进行聚类,表明供试的材料遗传多态性较高,8个... 详细信息

为了快速区分市场上不同品系的宁夏枸杞(Lycium barbarum L.),我们针对8种宁夏枸杞中进行了开发新型SSR引物,结果显示这些EST-SSR标记可用来调查分析枸杞的遗传结构。除此之外,运用SSR标记并进行聚类,表明供试的材料遗传多态性较高,8个枸杞品系拥有较高水平的多样性位点,其中宁杞1号和宁杞3号的遗传相似性最高,宁杞8号、宁杞3号和宁杞5号相似性系数为0.222 2,相似性最低,亲缘关系较远,因此这13对SSR引物可被用来快速鉴定宁夏枸杞的8个品系,为枸杞品种鉴定和保护,宁夏枸杞的道地性研究提供科学依据。

关键词：宁夏枸杞 SSR 遗传多样性指纹图谱

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种源地气候对蒙古莸光响应特性的影响

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生态学报 2018年第23期38卷 8425-8433页

作者：白雪卡刘超纪若璇沈超王襄平北京林业大学林学院森林资源与生态系统过程北京市重点实验室北京100083 北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室北京100083

植物对环境的长期适应所形成的遗传特性对其光合、生长等有着重要影响。通过测定8种不同种源地蒙古莸在相同环境条件下的光响应曲线,分析、比较了不同种源地蒙古莸光合响应参数的差异及种源地气候对其影响大小,以期了解蒙古莸光合特性... 详细信息

植物对环境的长期适应所形成的遗传特性对其光合、生长等有着重要影响。通过测定8种不同种源地蒙古莸在相同环境条件下的光响应曲线,分析、比较了不同种源地蒙古莸光合响应参数的差异及种源地气候对其影响大小,以期了解蒙古莸光合特性响应环境变异的机理。结果表明:(1)在相同环境条件下,蒙古莸的光合能力与其种源地有密切关系。随种源地从东到西、从北到南,光合能力逐渐降低,其中内蒙古苏尼特左旗、二连浩特种源的最大净光合速率(P_(nmax))最高,甘肃民勤种源P_(nmax)最小。(2)种源地气候对蒙古莸光响应特性有着显著影响,其中温度和海拔是主要因素,温度、海拔与最大净光合速率(P_(nmax))、暗呼吸速率(Rd)均显著负相关(P<0.01)。(3)种源地气候对各个光合参数的解释程度为:16.65%—73.52%,对表观量子效率(α1)、最大净光合速率(P_(nmax))、光补偿点(Ic)和暗呼吸速率(Rd)有着重要影响,解释力均大于40%。由此可见,种源地气候差异引起的遗传变异是造成不同种源间光响应特性差异的重要因素之一。不同种源蒙古莸光合能力的差异是其适应特有环境的体现。

关键词：蒙古莸种源光响应曲线气候

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不同2n雌配子来源的青杨杂种三倍体与其亲本蛋白质组差异研究

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北京林业大学学报 2018年第5期40卷 1-9页

作者：王溢邱彤韩强康向阳林木分子设计育种高精尖创新中心林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京林业大学生物科学与技术学院北京100083

【目的】研究两种2n雌配子来源的青杨杂种三倍体与亲本的蛋白质组表达差异,从蛋白水平探讨异源三倍体杨树在生长、抗性等方面具有优势的分子基础,为杨树多倍体选育和遗传改良提供科学依据。【方法】采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ... 详细信息

【目的】研究两种2n雌配子来源的青杨杂种三倍体与亲本的蛋白质组表达差异,从蛋白水平探讨异源三倍体杨树在生长、抗性等方面具有优势的分子基础,为杨树多倍体选育和遗传改良提供科学依据。【方法】采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术对青杨三倍体与其亲本进行定量蛋白质组学研究,所提取的杨树蛋白质样品经FASP酶解、iTRAQ试剂标记、高pH-RPLC分离、RPLC-MS分离分析,获取的串联质谱数据通过软件Proteome Discoverer 1.3搜库进行蛋白质鉴定,通过蛋白质相对定量的比较寻找差异表达蛋白,再对差异蛋白质进行GO、KEGG代谢通路分析。【结果】本研究共鉴定出1 472个蛋白质,差异蛋白202个。FDR和SDR青杨杂种三倍体与母本‘哲引3号杨’、父本‘北京杨’的差异蛋白比率在2.0%~10.1%之间。两种不同2n配子来源三倍体中FDR与亲本差异蛋白比率最高,且两种三倍体与父本的差异蛋白比率均比母本高。通路注释分析显示,差异蛋白显著富集于代谢相关、核糖体组装、光合作用和胁迫响应等通路。【结论】杂交和加倍后促进了蛋白质的合成以及光合作用的增强,并提高了多倍体的抗逆性和适应性,这些变化促进了杨树异源多倍体营养生长优势的形成。

关键词： 2n雌配子杨树异源三倍体蛋白质组学 iTRAQ

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高温诱导大孢子染色体加倍选育毛白杨杂种三倍体

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北京林业大学学报 2018年第11期40卷 12-18页

作者：耿喜宁任勇谕韩志强杜康康向阳北京林木分子设计育种高精尖创新中心林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京林业大学生物科学与技术学院北京100083

【目的】鉴于杨树三倍体具有突出的营养生长优势,针对毛白杨良种选育中母本效应难以充分利用问题,选择毛白杨育性好的雌株诱导大孢子染色体加倍选育白杨杂种三倍体,为毛白杨三倍体育种提供技术支撑。【方法】本研究以毛白杨无性系MC1和... 详细信息

【目的】鉴于杨树三倍体具有突出的营养生长优势,针对毛白杨良种选育中母本效应难以充分利用问题,选择毛白杨育性好的雌株诱导大孢子染色体加倍选育白杨杂种三倍体,为毛白杨三倍体育种提供技术支撑。【方法】本研究以毛白杨无性系MC1和MC2为母本,银腺杨YX1为父本。根据白杨大小孢子发生发育存在相关性的原理,以雄株小孢子发育进程为即时判别大孢子发生进程的参照,当小孢子发育至单核早期、单核靠边期和双核期时,分别施加38、40和42℃高温持续处理雌花序4 h。【结果】两个杂交组合的处理组共得到189株毛白杨杂种三倍体,其中MC1×YX1组合中共获得70株杂种三倍体,平均诱导率为56.45%; MC2×YX1组合中共获得119株杂种三倍体,平均诱导率为47.04%,对照组未获得杂种三倍体。当小孢子发育至单核靠边期,对应大孢子母细胞减数分裂至粗线期至中期Ⅰ,此时施加38和40℃高温处理4 h是毛白杨大孢子染色体加倍的最佳处理时期。两个杂交组合的杂种三倍体在平均苗高和地径生长方面均优于二倍体,但组合间存在一定差异,表明三倍体育种同样需要重视亲本选配。【结论】研究进一步证明高温诱导大孢子染色体加倍是一种高效获得毛白杨杂种三倍体的技术途径,相关技术进步对于推进毛白杨良种选育进程具有重要的意义。

关键词：毛白杨大孢子染色体加倍三倍体诱导率

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