检索结果-内蒙古大学图书馆

植物学报 2018年第1期53卷 59-71页

作者：吴国栋修宇王华芳北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

将正交因素试验与GUS基因组织化学染色等技术相结合,优化大豆(Glycine max)品种东农50遗传转化体系,导入抗旱关键基因Mt DREB2A。结果表明,大豆种子表面消毒,NaClO溶液法与Cl_2气熏蒸法的去污染率分别达到98.67%和93.33%。子叶节法转GU... 详细信息

将正交因素试验与GUS基因组织化学染色等技术相结合,优化大豆(Glycine max)品种东农50遗传转化体系,导入抗旱关键基因Mt DREB2A。结果表明,大豆种子表面消毒,NaClO溶液法与Cl_2气熏蒸法的去污染率分别达到98.67%和93.33%。子叶节法转GUS基因组织化学染色率(68.33%)显著高于下胚轴法(14.00%)和胚尖法(0.67%)(P<0.05)。种子萌发5天,农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)培养温度25°C,OD600=0.9,共培养5天的转GUS基因子叶节最高达72.00%;恢复培养5天,草丁膦(3 mg·L^(–1))、头孢噻肟钠(200 mg·L^(–1))和羧苄青霉素(300 mg·L^(–1))筛选诱导分化的转GUS基因不定芽最多为3.33%;优化的大豆遗传转化体系转化效率为1.11%。转Mt DREB2A基因大豆东农50植株根系更加密集,主根长度和侧根数量均显著高于对照(P<0.05),证实Mt DREB2A基因具有促进大豆根系生长的作用,为利用该基因进行大豆抗旱育种奠定了坚实的基础并提供了理论依据。

关键词：大豆遗传转化体系优化 GUS基因 MtDREB2A基因根系改良

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香花槐开花不结实—雄性可育性机制

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分子植物育种 2018年第11期16卷 3650-3655页

作者：周爽朱莉飞武寒冲牛伟博王华芳北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

为研究香花槐(Robinia pseudoacacia ***)开花不结实,即败育的主要原因,以可育的刺槐(Robinia pseudoacacia L.)为对照,分别以组织化学染色、荧光显微镜观察和人工杂交等手段,揭示香花槐花粉活力,传粉和结实能力。结果表明,以碘—碘化钾... 详细信息

为研究香花槐(Robinia pseudoacacia ***)开花不结实,即败育的主要原因,以可育的刺槐(Robinia pseudoacacia L.)为对照,分别以组织化学染色、荧光显微镜观察和人工杂交等手段,揭示香花槐花粉活力,传粉和结实能力。结果表明,以碘—碘化钾(I2-KI)、氯化三苯基四氮唑(TTC)染色和离体萌发等三种方法测定的香花槐有活力花粉比例分别为51.20%、61.00%和44.07%。自然授粉的香花槐花粉在柱头上的数量较刺槐稀疏且没有明显地萌发迹象;人工杂交428朵花朵,获4个有结实的杂交荚果,杂交结实率为0.93%,证实香花槐花粉有活力,但在柱头上萌发和花粉管伸长存在障碍。香花槐花絮美丽壮观但不产生种子,本研究对揭示其不育机制乃至刺槐和其他林木的繁殖和遗传改良有参考和启示意义。

关键词：香花槐花粉萌发特性杂交

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北京常见树种滞留大气颗粒物能力研究

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北方园艺 2018年第16期 140-149页

作者：魏俊杰崔彬彬冯馨仪张妍腾忠才孙宇涵保定学院生化系河北保定071000 北京林业大学林木育种国家工程实验室生物科学与技术学院北京100083

为研究北京常见树种滞留颗粒物的能力,以北京20种常见树种及部分2~3年生苗为试材,通过叶片采样、电镜扫描、能谱分析、图像处理、脯氨酸含量测定等方法,对常见树种的滞尘能力进行系统分析。结果表明:2~3年生苗滞尘效果方面存在一定的差... 详细信息

为研究北京常见树种滞留颗粒物的能力,以北京20种常见树种及部分2~3年生苗为试材,通过叶片采样、电镜扫描、能谱分析、图像处理、脯氨酸含量测定等方法,对常见树种的滞尘能力进行系统分析。结果表明:2~3年生苗滞尘效果方面存在一定的差异,滞尘能力较高的为麦李和毛樱桃,较差的为接骨木、香椿和毛桃;由于实际造林立地条件的不同,不同立地条件下树种滞尘能力不同,该差异与其叶表面微形态结构密切相关,不同树种叶表面形成不同的沟槽、突起、小室,沟槽越密集,越深,越有利于滞留大气颗粒物;单位面积滞尘量较高的树种其脯氨酸含量也较高;能谱分析表明,树种所附着的颗粒物为PM2.5和PM10的尘土,部分元素来自于汽车尾气的排放。

关键词：园林植物颗粒物电镜分析脯氨酸含量

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柿树的EST-SSR标记开发

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分子植物育种 2018年第3期16卷 880-892页

作者：王静颜芹王洁黄月娇闫晓雨李佳慧张丽张萌薄文浩北京林业大学计算生物学中心北京100083 北京林业大学林木育种国家工程实验室北京10083 北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 山东省果树研究所泰安271000

柿树是中国重要经济树种。为了开发柿树SSR标记,从NCBI的EST数据库中共下载14198条柿树EST序列,经过去冗余处理和SSR位点搜索,共筛选到1 320条EST-SSR序列可以用于引物设计。实验中随机选取了314对引物进行合成和筛选,共有127对引物成... 详细信息

柿树是中国重要经济树种。为了开发柿树SSR标记,从NCBI的EST数据库中共下载14198条柿树EST序列,经过去冗余处理和SSR位点搜索,共筛选到1 320条EST-SSR序列可以用于引物设计。实验中随机选取了314对引物进行合成和筛选,共有127对引物成功扩增出多态性扩增条带,加上从已发表的柿子SSR引物中筛选出的14对多态性较高的引物,共利用141对引物,通过SSR分型检测数据分析,获得了可用于模型分析的异源六倍体柿树全同胞家系共141套分子标记的数据。柿树是一种六倍体树种,多态性标记的开发在柿树的遗传学研究和分子育种上将会有众多的应用,能够促进正对六倍体物种的遗传分析模型的开发,也将对一系列重要的六倍体农作物(小麦,甘蔗,棉花等)的研究有推动作用。

关键词：柿树 EST-SSR 引物开发

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农杆菌介导的白杨遗传优化体系研究

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西南林业大学学报（自然科学） 2018年第4期38卷 14-21页

作者：王蓓蓓张炎金博文王泽伟李亦轩赵健张金凤北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点实验室生物科学与技术学院北京100083

以杂种白杨353为研究材料,利用农杆菌介导法转化p AB5启动子诱导外源基因删除系统,采用正交实验设计,以叶盘分化率为评价指标,优化转化过程中主要影响因子。结果表明:优化体系为菌液OD600值0.8,侵染时间8 min,乙酰丁香酮浓度200μmol/L... 详细信息

以杂种白杨353为研究材料,利用农杆菌介导法转化p AB5启动子诱导外源基因删除系统,采用正交实验设计,以叶盘分化率为评价指标,优化转化过程中主要影响因子。结果表明:优化体系为菌液OD600值0.8,侵染时间8 min,乙酰丁香酮浓度200μmol/L,分化培养基中卡那霉素浓度35 mg/L,头孢霉素浓度350 mg/L,抗性芽生根时的筛选卡那霉素选择压25 mg/L。采用上述遗传优化体系,杂种白杨353叶盘分化率达80.00%,抗性植株经PCR检测,初步确认pAB5启动子诱导的外源基因删除系统已转入其基因组中,为检测外源基因删除系统在杨树中的有效性提供了参考依据。

关键词：农杆菌遗传转化外源基因体系优化无性系白杨

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人工诱导多倍体刺槐及其倍性鉴定

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分子植物育种 2018年第21期16卷 7124-7131页

作者：冯玥任云辉李秀宇孙宇涵邓永平朱继红杨鸿李云北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室北京100083 甘肃省天水市清水县林业局天水741400

试验以3个半同胞家系的刺槐(Robinia pseudoacacia L.)种子为材料,以质量百分比浓度为0.3%、0.4%、0.5%三种浓度梯度秋水仙素水溶液浸渍处理诱导得到多倍体刺槐植株并进行倍性鉴定,探究了不同秋水仙素处理浓度对不同刺槐种子的成活及变... 详细信息

试验以3个半同胞家系的刺槐(Robinia pseudoacacia L.)种子为材料,以质量百分比浓度为0.3%、0.4%、0.5%三种浓度梯度秋水仙素水溶液浸渍处理诱导得到多倍体刺槐植株并进行倍性鉴定,探究了不同秋水仙素处理浓度对不同刺槐种子的成活及变异率的影响,并利用流式细胞仪对所得变异苗在多次继代培养过程中进行了持续性的倍性检测以研究变异苗在继代过程中的倍性变化情况。结果表明:以质量百分比浓度为0.4%的秋水仙素浸渍处理刺槐种子2 d,诱导多倍体效率最高,其成活率与成活苗变异率分别为70.4%与49.06%。诱变苗中经直接萌发所得植株占68.3%,其中嵌合体所占比例约为28.1%;经根萌所得植株占31.7%,其中嵌合体所占比例约为5.1%。植株倍性在以30 d为周期继代两次后趋于稳定。四倍体植株相比二倍体具有叶面积增大,叶形指数减小,叶绿体数明显增多等特征。本研究为四倍体刺槐诱导及培育过程中有效排除嵌合体干扰提供了手段,为四倍体刺槐植株批量诱导后的变异苗初选及倍性初步鉴定工作提供了参考。

关键词：刺槐四倍体诱导倍性鉴定流式细胞仪检测

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农杆菌介导酸枣叶片遗传转化SPDS基因体系的建立

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分子植物育种 2018年第20期16卷 6710-6717页

作者：崔艳红王欢豆苏含张亚东庞晓明李颖岳北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 河南龙源花木有限责任公司许昌461000

为研究根癌农杆菌介导的SPDS基因遗传转化酸枣叶片体系建立的条件,本研究以酸枣叶片为受体,采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens, LBA4404)介导法,将SPDS基因导入酸枣基因组,并对其遗传转化体系进行优化,对筛选获得的转基因酸枣... 详细信息

为研究根癌农杆菌介导的SPDS基因遗传转化酸枣叶片体系建立的条件,本研究以酸枣叶片为受体,采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens, LBA4404)介导法,将SPDS基因导入酸枣基因组,并对其遗传转化体系进行优化,对筛选获得的转基因酸枣植株进行检测。结果表明,根癌农杆菌介导的SPDS基因遗传转化的最佳条件为:将预培养3 d的酸枣叶片,用LBA4404菌株菌液(OD600=0.6)浸染15 min,共培养3 d,然后转入含Kan 20 mg/L和Cef 200 mg/L的筛选分化培养基上诱导分化,待抗性芽长到2～3 cm后,转入含Kan 40 mg/L和Cef 100 mg/L的筛选生根培养基上进行筛选,在以上最佳遗传转化条件下,经过3次筛选得到19个抗性植株,经PCR检测,有9株呈阳性,即SPDS基因已被整合到酸枣基因组中,并可以正常转录。本研究成功建立了根癌农杆菌介导的酸枣叶片高效遗传转化体系,为枣树基因工程育种和种质创新提供了帮助。

关键词：亚精胺合成酶基因根癌农杆菌遗传转化酸枣

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黑果枸杞外整流钾离子通道SKOR基因的克隆及表达分析

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浙江农林大学学报 2018年第1期35卷 104-111页

作者：刘丽萍戴逢斌张冲田菊陈金焕北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083 北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 内蒙古自治区和盛生态科技研究院内蒙古呼和浩特011517

黑果枸杞Lycium ruthenicum为多年生野生灌木,由于其珍贵的营养价值和强非生物胁迫抗性受到广泛关注。为研究黑果枸杞钾离子(K+)/钠离子(Na+)选择性运输的分子机制,从转录组数据中筛选出拟外整流K+通道基因,提取黑果枸杞根系总RNA为模板... 详细信息

黑果枸杞Lycium ruthenicum为多年生野生灌木,由于其珍贵的营养价值和强非生物胁迫抗性受到广泛关注。为研究黑果枸杞钾离子(K+)/钠离子(Na+)选择性运输的分子机制,从转录组数据中筛选出拟外整流K+通道基因,提取黑果枸杞根系总RNA为模板,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分离出该拟似SKOR基因。序列分析显示:该基因序列长2 448 bp,编码815个氨基酸。通过比对发现:该基因与拟南芥Arabidopsis thaliana等植物中已报道的SKOR基因编码的氨基酸序列同源性在60%以上,与几种茄科Solanaceae植物的SKOR同源性高达90%以上。进一步对该基因进行表达分析,结果显示:Lr SKOR被盐碱处理强烈诱导而被高盐处理微弱诱导,盐碱处理是高盐处理的6.81倍,是对照的23.79倍,说明Lr SKOR的表达受到盐以及盐碱胁迫调控,并且pH值对其表达水平有显著影响。

关键词：林木育种学黑果枸杞 SKOR基因 K^+/Na^+比 pH值耐盐性

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毛白杨(Populus tomentosa)中2个谷甾醇糖基转移酶基因的克隆与表达分析

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中国细胞生物学学报 2018年第7期40卷 1130-1137页

作者：李思言郭斌安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 山西省林业科学研究院太原030012

谷甾醇糖基转移酶(sitosterol glycosyltransferase,SGT)是能与膜结合催化植物谷甾醇糖基化的一种糖基转移酶。谷甾醇–葡萄糖苷(sitosterol-glucoside,SG)能在纤维素合酶(cellulose synthase,Ces A)的作用下,作为纤维素合成的引物,以UDP-葡萄糖(UDP-Glucose)为底物合成葡聚糖链。为了研究毛白杨(Populus tomentosa)PtSGT基因的功能,根据毛果杨(Populus trichocarpa)的同源基因Ptr SGT1和Ptr SGT3设计了PCR引物,以毛白杨组培苗叶片c DNA为模板克隆了毛白杨PtSGT1和PtSGT3 CDS序列,长度分别为1 851 bp、1 911 bp,分别编码616个氨基酸、636个氨基酸。结构分析表明,毛果杨(***)同源基因Ptr SGT1和Ptr SGT3均含有14个外显子和13个内含子,结构与长度差异明显,分别定位于14号和2号染色体上。氨基酸序列同源性分析和进化分析表明,毛白杨(***)的PtSGT1和PtSGT3均与毛果杨和胡杨(Populus euphratica)相应蛋白具有较高的同源性。Real-time PCR分析显示,PtSGT基因家族的所有基因在根、茎、叶中均有表达,总体上呈组成型表达模式;PtSGT3在各组织中表达量显著高于其他成员,在茎中表达量最高,推测PtSGT3基因在谷甾醇–葡萄糖苷合成中有着重要作用。该实验研究结果为进一步解析毛白杨纤维素合成中这2个基因的功能奠定了基础。

关键词：毛白杨 PtSGT 基因克隆表达模式

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刺槐Genomic-SSR与EST-SSR遗传差异性分析

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中国农学通报 2019年第19期35卷 49-57页

作者：董黎张江涛文彦忠牛东升田书勇孙宇涵李云林木育种国家工程实验室/北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 河南省林业科学研究院郑州450008 吉县林木良种繁育场山西吉县042200 国有冠县苗圃山东冠县252500

为在刺槐育种研究中合理选用不同来源的SSR分子标记,选取12个刺槐个体,试剂盒提取DNA后分别利用9对Genomic-SSR引物和9对EST-SSR引物进行扩增,并采取毛细管电泳检测扩增产物。利用所得条带信息及相关软件对2种SSR分子标记进行多态性、... 详细信息

为在刺槐育种研究中合理选用不同来源的SSR分子标记,选取12个刺槐个体,试剂盒提取DNA后分别利用9对Genomic-SSR引物和9对EST-SSR引物进行扩增,并采取毛细管电泳检测扩增产物。利用所得条带信息及相关软件对2种SSR分子标记进行多态性、遗传相似系数相关性以及聚类等方面的比较分析。结果显示,刺槐Genomic-SSR平均检测到的条带数为6、Shannon多样性指数为1.3833、观测杂合度为0.5749、期望杂合度为0.6832;EST-SSR平均检测到的条带数为5.1、Shannon多样性指数为1.2711、观测杂合度为0.5648、期望杂合度为0.6526。由Genomic-SSR计算得到的个体间的遗传相似系数以及聚类结果与2种SSR标记综合计算得到的遗传相似系数和聚类结果更为相似。结果表明,刺槐Genomic-SSR与EST-SSR存在一定的遗传差异性,但差异并不显著;刺槐Genomic-SSR能更加准确地揭示基因型之间的遗传关系;刺槐EST-SSR具有相对较强的保守性。

关键词：刺槐 Genomic-SSR EST-SSR 遗传相似系数遗传差异性

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