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生物技术通报 2013年第3期29卷 102-106页

作者：江锡兵张志毅龚榜初中国林业科学研究院亚热带林业研究所富阳311400 北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

采用AFLP标记技术,利用EcoR I+2/Mse I+3引物组合对美洲黑杨与大青杨12个杂种无性系进行分子鉴定,结果表明,从32对引物组合中筛选出10对扩增条带较多的引物组合,扩增得到总条带数在7-52条之间,多态性条带数在2-28条之间,条带多态性比例... 详细信息

采用AFLP标记技术,利用EcoR I+2/Mse I+3引物组合对美洲黑杨与大青杨12个杂种无性系进行分子鉴定,结果表明,从32对引物组合中筛选出10对扩增条带较多的引物组合,扩增得到总条带数在7-52条之间,多态性条带数在2-28条之间,条带多态性比例分布范围为23.5%-41.6%,多态性条带数和多态性比例均较低,表明各个参试样品之间的亲缘关系较近;UPGMA聚类分析结果与12个无性系的系谱关系一致,表明亲本相同的无性系具有较高的相似系数;利用6个引物组合的9条多态性条带绘制了12个无性系的指纹图谱,为美洲黑杨与大青杨杂种无性系鉴定以及品种保护提供依据。

关键词：杨树杂种 AFLP 分子鉴定指纹图谱

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毛白杨(Populus tomentosa)中2个谷甾醇糖基转移酶基因的克隆与表达分析

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中国细胞生物学学报 2018年第7期40卷 1130-1137页

作者：李思言郭斌安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 山西省林业科学研究院太原030012

谷甾醇糖基转移酶(sitosterol glycosyltransferase,SGT)是能与膜结合催化植物谷甾醇糖基化的一种糖基转移酶。谷甾醇–葡萄糖苷(sitosterol-glucoside,SG)能在纤维素合酶(cellulose synthase,Ces A)的作用下,作为纤维素合成的引物,以UDP-葡萄糖(UDP-Glucose)为底物合成葡聚糖链。为了研究毛白杨(Populus tomentosa)PtSGT基因的功能,根据毛果杨(Populus trichocarpa)的同源基因Ptr SGT1和Ptr SGT3设计了PCR引物,以毛白杨组培苗叶片c DNA为模板克隆了毛白杨PtSGT1和PtSGT3 CDS序列,长度分别为1 851 bp、1 911 bp,分别编码616个氨基酸、636个氨基酸。结构分析表明,毛果杨(***)同源基因Ptr SGT1和Ptr SGT3均含有14个外显子和13个内含子,结构与长度差异明显,分别定位于14号和2号染色体上。氨基酸序列同源性分析和进化分析表明,毛白杨(***)的PtSGT1和PtSGT3均与毛果杨和胡杨(Populus euphratica)相应蛋白具有较高的同源性。Real-time PCR分析显示,PtSGT基因家族的所有基因在根、茎、叶中均有表达,总体上呈组成型表达模式;PtSGT3在各组织中表达量显著高于其他成员,在茎中表达量最高,推测PtSGT3基因在谷甾醇–葡萄糖苷合成中有着重要作用。该实验研究结果为进一步解析毛白杨纤维素合成中这2个基因的功能奠定了基础。

关键词：毛白杨 PtSGT 基因克隆表达模式

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毛华菊CvCRY2基因的克隆、生物信息学及表达分析

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分子植物育种 2019年第17期17卷 5578-5585页

作者：马朝峰邓成燕戴思兰北京林业大学园林学院花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境北京实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

蓝光受体隐花色素(Cryptochromes)在高等植物开花时间调控中发挥重要作用。结合毛华菊转录组数据库,利用RACE技术克隆得到毛华菊CRY2基因,命名为CvCRY2,并对该基因及其蛋白进行了生物信息学和表达模式分析。结果显示,CvCRY2基因编码区... 详细信息

蓝光受体隐花色素(Cryptochromes)在高等植物开花时间调控中发挥重要作用。结合毛华菊转录组数据库,利用RACE技术克隆得到毛华菊CRY2基因,命名为CvCRY2,并对该基因及其蛋白进行了生物信息学和表达模式分析。结果显示,CvCRY2基因编码区全长为1 839 bp,共编码613个氨基酸,预测蛋白相对分子量为69.954 kD,理论等电点(pI)为5.69,为亲水性蛋白。同源氨基酸序列比对结果表明,CvCRY2与甘菊、青蒿等功能已确认的CRY2同源性较高,氨基酸序列相似性均达80%以上,与拟南芥AtCRY2的相似性为56.82%;系统进化分析表明CvCRY2蛋白与甘菊、青蒿亲缘关系更近;CvCRY2蛋白功能结构域分析表明其具有高度保守DNA photolyase区域和FADbinding7结构域。CvCRY2蛋白二级结构中α-螺旋占38.66%和无规则卷曲占46.49%。利用qRT-PCR技术对毛华菊根、茎、叶、蕾、花和顶芽等组织器官中CvCRY2基因表达进行相对定量分析,发现CvCRY2在叶片中的表达量最高,其次是茎尖、茎、花、花蕾,在根中的表达量最低。CvCRY2响应短日照处理的表达模式分析发现该基因表达丰度受短日照的影响。随着短日照诱导时间的延长,其表达丰度逐渐升高,在短日照诱导16 d时出现一个表达高峰。本研究可为毛华菊CvCRY2基因的功能解析及调控机制研究提供参考。

关键词：毛华菊(Chrysanthemum vestitum) 隐花色素开花时间

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刺槐花粉萌发和花粉管伸长生长过程中柱头与花柱内钙离子的分布特征

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北京林业大学学报 2015年第11期37卷 59-68页

作者：孙鹏戴丽徐兆翮孙非袁存权胡瑞阳孙宇涵李云北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室中国林业科学研究院经济林研究开发中心北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室中国林业科学研究院沙漠林业实验中心

以去雄后人工授粉的刺槐花为试验材料,并以去雄后不授粉的花为对照,利用焦锑酸钙沉淀法分析刺槐柱头和花柱内钙离子分布对花粉萌发和花粉管生长的影响。结果发现:花粉在萌发前,其萌发孔聚集了大量的钙沉淀。授粉作用会很快促使柱头表面... 详细信息

以去雄后人工授粉的刺槐花为试验材料,并以去雄后不授粉的花为对照,利用焦锑酸钙沉淀法分析刺槐柱头和花柱内钙离子分布对花粉萌发和花粉管生长的影响。结果发现:花粉在萌发前,其萌发孔聚集了大量的钙沉淀。授粉作用会很快促使柱头表面泡状分泌物和胞外基质钙含量增加。随着大量花粉萌发完成,柱头泡状分泌物内的钙含量开始下降,但是柱头胞外基质的钙含量下降不明显,这表明柱头泡状分泌物的钙离子对花粉萌发可能有促进作用。刺槐的花柱含有一个中空花柱道,中空花柱道周围有一层通道细胞,不论授粉与否,通道细胞液泡和细胞壁上都有大量钙离子,这些钙离子对花粉管的生长可能有诱导作用。刺槐花柱内的钙离子梯度现象不明显。本研究结果有利于揭示刺槐乃至其他豆科植物柱头和花柱内钙离子分布对花粉萌发和花粉管生长的影响。

关键词：刺槐柱头花柱钙离子分布花粉萌发花粉管生长

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秋水仙碱对银杏和毛新杨雄株生殖细胞的生理影响

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北京林业大学学报 2019年第7期41卷 83-90页

作者：李健康于丹阳崔彬彬陆超张自和刘泽东孙宇涵李云北京林业大学生物科学与技术学院北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 保定学院生物化工与环境工程学院河北保定071000 北京市大兴区果林研究所北京100260 费县国有大青山林场山东费县273402

【目的】多倍化是树木遗传改良的重要途径,秋水仙碱诱导生殖细胞是树木多倍体诱变的重要方式,但还存在某些树种多倍体诱导困难、多倍化诱导质量难以判别等问题。因此,探究多倍化诱导机制,找到一种能够对秋水仙碱人工诱导树木生殖细胞多... 详细信息

【目的】多倍化是树木遗传改良的重要途径,秋水仙碱诱导生殖细胞是树木多倍体诱变的重要方式,但还存在某些树种多倍体诱导困难、多倍化诱导质量难以判别等问题。因此,探究多倍化诱导机制,找到一种能够对秋水仙碱人工诱导树木生殖细胞多倍化效果进行初步判别的科学方法很有必要。【方法】本文以银杏和毛新杨雄性生殖细胞为研究对象,采用茚三酮显色法、CBA法、四氮唑蓝法、愈创木酚法、硫代巴比妥酸法,分别测定了受秋水仙碱诱导后其各自细胞内游离脯氨酸(PRO)含量、可溶性蛋白(Protein)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)的活性、丙二醛(MDA)含量等变化趋势,并对比分析了银杏和毛新杨雄性生殖细胞在秋水仙碱加倍诱导状态下各自生理生化指标差异动态变化节点。【结果】秋水仙碱处理后,银杏生殖细胞内脯氨酸含量在12~36 h先增高后降低,可溶性蛋白含量1~36 h内降低,SOD活性有所降低,POD活性在3~36 h内大幅度升高,MDA含量6 h开始升高,12~48 h处在顶峰状态。毛新杨生殖细胞脯氨酸含量0.5~1 h内升高后期变化趋势不明显,可溶性蛋白含量24~48 h内略降低,SOD活性在12~48 h内明显升高,POD活性与空白组变化差异不明显,MDA含量与空白组、对照组相似。【结论】秋水仙碱诱导对银杏与毛新杨生殖细胞基因表达机制影响不同,对银杏生殖细胞的胁迫强于毛新杨。毛新杨受水分与秋水仙碱胁迫伤害较小,生理指标变化差异不大,但保护酶变化银杏相反,12~48 h内SOD活性上升明显,POD活性变化不明显。银杏生殖细胞POD活性上升,SOD活性有所降低,在此之前脯氨酸与MDA含量有明显上升趋势,可溶性蛋白含量下降。所以秋水仙碱胁迫损伤积累后的基因表达调控可能是其生殖细胞多倍化困难的主要原因,对基因表达调控的影响主要在秋水仙碱胁迫后期。研究结果将为探究秋水仙碱诱导过程基因表达调控机制奠定基础,并为初步判别不同树木种质生殖细胞多倍化诱导难易提供了理论和实例参考。

关键词：银杏毛新杨雄性生殖细胞秋水仙碱生理生化

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菊花白锈病田间药剂防治试验

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西北农业学报 2008年第1期17卷 116-119,136页

作者：王顺利刘红霞戴思兰北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家花卉工程技术研究中心北京100083 北京林业大学省部共建森林培育与保护重点实验室北京100083

菊花白锈病是菊花重要的流行性病害,也是世界检疫性病害。针对菊花白锈病选取10种保护性药剂和13种治疗性药剂进行田间试验,筛选出了效果好、成本低的粉锈宁1000倍液和甲壳素+冰醋酸1000倍液作为保护性药剂交替使用,腈菌唑8000倍+代森锰... 详细信息

菊花白锈病是菊花重要的流行性病害,也是世界检疫性病害。针对菊花白锈病选取10种保护性药剂和13种治疗性药剂进行田间试验,筛选出了效果好、成本低的粉锈宁1000倍液和甲壳素+冰醋酸1000倍液作为保护性药剂交替使用,腈菌唑8000倍+代森锰锌1200倍液和黑杀3000倍液作为治疗性药剂交替使用。还针对带菌插穗进行药剂处理,提出先蘸世高4000倍液再蘸生根粉,为从种苗切断传染源提供了依据。这些结果为有效控制菊花白锈病的传播提供了保证。

关键词：菊花菊花白锈病药剂防治

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盐胁迫下嫁接对梅花光合生理特性和叶绿素荧光参数的影响

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西北林学院学报 2019年第6期34卷 43-48页

作者：赵靓杨佳鑫禹世豪何立飞王静李悦李海燕肖可李庆卫花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室园林学院北京林业大学

研究盐胁迫对梅花光合作用的影响对土地盐渍化地区的梅花种植具有重要意义。选取5个不同水平的盐浓度,以‘丰后’梅的自根苗和嫁接苗为材料,研究对其光合生理特性和叶绿素荧光参数的影响。结果表明,随着盐浓度的增加,自根苗和嫁接苗的... 详细信息

研究盐胁迫对梅花光合作用的影响对土地盐渍化地区的梅花种植具有重要意义。选取5个不同水平的盐浓度,以‘丰后’梅的自根苗和嫁接苗为材料,研究对其光合生理特性和叶绿素荧光参数的影响。结果表明,随着盐浓度的增加,自根苗和嫁接苗的净光合速率(P n)、气孔导度(G s)、蒸腾速率(T r)、可变荧光(F v)、潜在光化学效率(F v/F 0)、PSⅡ最大光化学量子产量(F v/F m)、PSⅡ有效光化学量子产量(F v′/F m′)、PSⅡ实际光化学量子产量(Y(Ⅱ))、表观光合电子传递效率(ETR)和光化学猝灭系数(qP)呈现下降趋势,叶片胞间CO 2浓度(C i)和非光化学淬灭系数(NPQ)呈现上升趋势且自根苗弱于嫁接苗。在0.3%盐处理下自根苗和嫁接苗的光合能力没有受到较大影响,而0.6%~0.9%盐处理下嫁接对提高植物光合能力具有显著作用,在1.2%~1.5%盐处理下不具有显著作用。自根苗在各浓度处理下受到非气孔限制,嫁接苗在0.3%处理下受到的是气孔限制,在0.6%~1.5%处理下受到非气孔限制。

关键词：梅花盐胁迫嫁接光合生理特性叶绿素荧光参数

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高效冬枣花药愈伤组织培养体系的建立

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分子植物育种 2018年第3期16卷 948-953页

作者：贾际平吴丽萍曹明孔德仓李颖岳庞晓明北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 中华人民共和国农业部华北都市农业重点实验室北京102206 河北省沧县国家枣树良种基地沧州061000

以冬枣花药为试验材料,研究影响愈伤组织诱导、增殖和分化的因素,优化各因素建立高效的冬枣花药培养体系。结果表明:在愈伤组织诱导过程中,加入0.4~0.6 mol/L的甘露醇4℃处理1~3 d可提高愈伤组织的诱导率。最适的愈伤组织诱导培养基为:M... 详细信息

以冬枣花药为试验材料,研究影响愈伤组织诱导、增殖和分化的因素,优化各因素建立高效的冬枣花药培养体系。结果表明:在愈伤组织诱导过程中,加入0.4~0.6 mol/L的甘露醇4℃处理1~3 d可提高愈伤组织的诱导率。最适的愈伤组织诱导培养基为:MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ+30 g/L麦芽糖,诱导率可达到69.72%。愈伤组织增殖的最适培养基为MS+0.3 mg/LNAA+1.0 mg/LTDZ+30 g/L麦芽糖;在WPM+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L TDZ+20 g/L麦芽糖时,分化率最高可达89.00%。

关键词：冬枣(Ziziphus jujuba Mill.) 花药愈伤组织诱导分化

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引种栽培条件下大花黄牡丹二次枝及顶芽发育的初步研究

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北京林业大学学报 2022年第6期44卷 106-114页

作者：陈庭巧袁涛解梦雨唐英曾秀丽北京林业大学园林学院国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境北京实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室北京100083 西藏自治区农牧科学院蔬菜研究所西藏拉萨850000

【目的】确定引种栽培条件下的大花黄牡丹二次枝及其顶芽生长发育特点、引种地和原产地花芽分化进程,为大花黄牡丹的引种栽培和开发利用提供参考。【方法】以河南栾川引种栽培的成年株大花黄牡丹为对象,观测其二次枝及其顶芽的生长发育... 详细信息

【目的】确定引种栽培条件下的大花黄牡丹二次枝及其顶芽生长发育特点、引种地和原产地花芽分化进程,为大花黄牡丹的引种栽培和开发利用提供参考。【方法】以河南栾川引种栽培的成年株大花黄牡丹为对象,观测其二次枝及其顶芽的生长发育动态,并利用石蜡切片法观察大花黄牡丹在引种地(栾川和拉萨)及原产地(林芝)三地的二次枝顶芽花芽分化进程。【结果】(1)在栾川栽植的大花黄牡丹二次枝的生长期从5月上旬持续到9月中旬,其中5月上旬-6月上旬为生长高峰;但部分花枝的腋芽发育停滞,不形成二次枝。(2)栾川栽植的大花黄牡丹二次枝的生长可分为三类:第1类占比28.57%,于7月中旬形成顶芽并开始花芽分化,次年正常开花结实;第2类主要位于花枝/果枝中下部,形成顶芽但不分化,次年仅营养生长;第3类不形成顶芽,入冬后至次年春受冻干枯。(3)原产地林芝大花黄牡丹二次枝56.25%的顶芽可分化成花芽,次年开花结实,未观察到第3类二次枝。(4)在引种地和原产地,大花黄牡丹的二次枝顶芽分化过程一致,历经6个分化阶段后,最终形成含1个主花蕾、2~3个侧花蕾、腋芽原基和叶原基的复合芽,主花蕾较侧花蕾分化时间早;腋芽原基位于第3~4个叶原基基部,次年在花枝上发育形成新的二次枝。(5)引种地和原产地顶芽花芽分化起始时间和持续时间不同,引种地栾川分化起始晚,历时相对较长(88~97 d),引种地拉萨及原产地林芝花芽分化较早,历时相对较短(近70 d)。【结论】栾川引种栽培的大花黄牡丹花芽分化比例低,分化起始较晚,持续时间较长,但能够形成稳定且正常花芽分化、开花结实的二次枝,其自然环境可作为选择大花黄牡丹的引种栽培地点的参考。

关键词：大花黄牡丹二次枝生长动态花芽分化复合芽

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刺槐树冠上部外植体来源组培苗不定根诱导及优化

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分子植物育种 2022年

作者：刘晓迪李国雷杜建军牛东升苏立琢张杰 Saleem Ud Din 董黎曹森毕伟孙宇涵李云北京林业大学生物科学与技术学院国家林业与草原局刺槐工程技术研究中心林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京林业大学林学院北京市林业工作总站

年龄效应和位置效应常导致成年树上部枝条作为外植体进行组织培养过程中生根难、生根率低。本研究以成年刺槐YQ1、YQ2树冠上部枝条上的嫩芽作为外植体，设计了暗培养、液体培养、活性炭、暗培养+液体培养、暗培养+活性炭和LED光质配比...

年龄效应和位置效应常导致成年树上部枝条作为外植体进行组织培养过程中生根难、生根率低。本研究以成年刺槐YQ1、YQ2树冠上部枝条上的嫩芽作为外植体，设计了暗培养、液体培养、活性炭、暗培养+液体培养、暗培养+活性炭和LED光质配比不同试验组合等组培条件，通过根系指标筛选出最佳的生根技术参数。结果显示：在组培苗生长发育中，在暗培养+液体培养条件下第4天诱导出不定根。该试验组合生根时间最早，生根率最高，为100%，生根数可达7.80条，平均根长为10.40 cm。研究结果为刺槐良种苗无性繁殖提供了技术支撑。

关键词：

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