检索结果-内蒙古大学图书馆

北京林业大学学报 2012年第2期34卷 103-108页

作者：史军娜刘美芹刘杰陈玉珍卢存福北京林业大学林木育种国家工程实验室教育部林木花卉遗传育种重点实验室

A20/AN1锌指蛋白普遍存在于真核生物中,在胁迫响应引起的信号传导过程中发挥着重要作用。本文利用生物信息学和RT-PCR方法从低温干旱胁迫的沙冬青叶片组织中分离锌指蛋白基因AmSTZF,该基因编码一条含172个氨基酸残基的多肽,含A20和AN1... 详细信息

A20/AN1锌指蛋白普遍存在于真核生物中,在胁迫响应引起的信号传导过程中发挥着重要作用。本文利用生物信息学和RT-PCR方法从低温干旱胁迫的沙冬青叶片组织中分离锌指蛋白基因AmSTZF,该基因编码一条含172个氨基酸残基的多肽,含A20和AN1两个锌指蛋白保守结构域,属A20/AN1锌指蛋白。生物信息学分析显示该蛋白定位于细胞质中,具有磷酸化位点,参与细胞转录调控。RT-PCR分析表明:低温和干旱胁迫处理的沙冬青叶片中,AmSTZF的表达增强,初步推测该基因与沙冬青低温、干旱胁迫响应相关。

关键词：沙冬青 A20/AN1锌指蛋白序列分析表达分析

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沙冬青胚胎晚期发生丰富蛋白基因序列及表达特性分析

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北京林业大学学报 2012年第4期34卷 114-119页

作者：师静刘美芹史军娜赵晓鑫卢存福尹伟伦北京林业大学林木育种国家工程实验室教育部林木花卉遗传育种重点实验室

从沙冬青叶片EST文库中获得了胚胎晚期发生丰富蛋白(LEA)基因cDNA全长序列,命名为AmLEA14。序列分析表明该基因全长579bp,含有一个459bp编码152个氨基酸的开放阅读框,推测编码的蛋白质分子质量为16.6ku。二级结构预测显示此编码蛋白属于... 详细信息

从沙冬青叶片EST文库中获得了胚胎晚期发生丰富蛋白(LEA)基因cDNA全长序列,命名为AmLEA14。序列分析表明该基因全长579bp,含有一个459bp编码152个氨基酸的开放阅读框,推测编码的蛋白质分子质量为16.6ku。二级结构预测显示此编码蛋白属于第4类LEA蛋白。系统发生分析表明,此编码蛋白与大豆LEA14蛋白(P46519.1)的亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,AmLEA14的表达量在低温、干旱、盐胁迫条件下升高,但是主要在低温胁迫后期富集。推测AmLEA14基因可能在沙冬青抵御低温、干旱、盐胁迫中发挥作用,主要是参与沙冬青的低温防御机制。

关键词：沙冬青胚胎晚期发生丰富蛋白序列分析表达分析

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秋水仙素处理杉木种子的诱变效应

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西南林业大学学报（自然科学） 2013年第6期33卷 7-12页

作者：胡瑞阳段红静吴博孙宇涵方禄明郑仁华李云北京林业大学林木遗传育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 福建省将乐国有林场福建将乐353300 福建省林业科学研究院国家林业局南方山地用材林培育重点实验室福建福州350012

以杉木成熟种子为试验材料,经25 mg/L的赤霉素浸种24 h处理后,分别用0.3%、0.6%、0.9%、1.2%的秋水仙素溶液浸泡1、2、3、4 d,蒸馏水浸泡种子作为对照,3周后观察统计出苗率、变异率,9个月后调查诱变苗早期长势。结果表明:秋水仙素对种... 详细信息

以杉木成熟种子为试验材料,经25 mg/L的赤霉素浸种24 h处理后,分别用0.3%、0.6%、0.9%、1.2%的秋水仙素溶液浸泡1、2、3、4 d,蒸馏水浸泡种子作为对照,3周后观察统计出苗率、变异率,9个月后调查诱变苗早期长势。结果表明:秋水仙素对种子出苗率、变异率均有显著影响,随着处理浓度和时间的不同呈现出一定规律的变化,0.9%的秋水仙素浸泡种子4 d得到的变异率最大;秋水仙素浓度和处理时间对苗高影响差异显著,同一处理时间随着浓度的增加平均苗高呈现先降低后升高的变化趋势,同一浓度处理则随时间延长苗高表现为先升高后降低的变化趋势;地径大小与苗高规律一致,催芽处理抑制其分枝。

关键词：杉木秋水仙素化学诱变变异苗诱变效应

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甘蓝型油菜BnGOLS1基因启动子的克隆、序列分析及瞬时表达

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植物生理学报 2012年第1期48卷 67-74页

作者：景寅李煦汪晓峰北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

以甘蓝型油菜‘德油五号’基因组DNA为模板,通过反向PCR扩增得到肌醇半乳糖苷合成酶基因(BnGOLS1)启动子片段,长度为827bp。PLACE和PlantCARE启动子预测工具分析表明:序列中含有TATA-Box、CAAT-Box等基本转录元件,以及ABRE、DRE、HSE、w... 详细信息

以甘蓝型油菜‘德油五号’基因组DNA为模板,通过反向PCR扩增得到肌醇半乳糖苷合成酶基因(BnGOLS1)启动子片段,长度为827bp。PLACE和PlantCARE启动子预测工具分析表明:序列中含有TATA-Box、CAAT-Box等基本转录元件,以及ABRE、DRE、HSE、w-Box等顺式作用元件。将克隆得到的BnGOLS1启动子取代pBI121中的CaMV35S启动子,构建BnGOLS1启动子控制报告基因的GUS表达载体pBI-GS-GUS,通过农杆菌介导的方法在油菜组织中进行瞬时表达。GUS染色结果表明BnGOLS1启动子可以驱动GUS基因在油菜组织中的表达。

关键词：油菜 BnGOLS1基因启动子序列分析瞬时表达

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毛白杨PtPCP-like基因的克隆及其遗传转化初报

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北京林业大学学报 2012年第5期34卷 31-36页

作者：郭斌刘军梅李英陈仲李昊叶梅霞王佳安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室

利用滤纸吸附噬菌体-PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtPCP-like基因cDNA全长序列,测序表明克隆得到的该序列全长595bp,包含一个完整的开放阅读框,编码91个氨基酸;经BLAST分析发现,该基因包含与拟南芥花粉外被蛋白基因相似的序... 详细信息

利用滤纸吸附噬菌体-PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtPCP-like基因cDNA全长序列,测序表明克隆得到的该序列全长595bp,包含一个完整的开放阅读框,编码91个氨基酸;经BLAST分析发现,该基因包含与拟南芥花粉外被蛋白基因相似的序列,命名为PtPCP-like。采用RT-PCR技术检测PtPCP-like基因在各个组织部位的表达模式,结果显示在毛白杨的根和雄花芽中表达丰度最高,而在雌花芽部位表达丰度最低。并且构建35S∶∶PtPCP-like植物表达载体,采用农杆菌介导法将PtPCP-like基因导入烟草中,获得了一批阳性转化植株。采用qRT-PCR技术检测PtPCP-like基因在各个转基因烟草中的表达模式,结果显示在转基因烟草中各个株系均比野生型表达量高,且不同株系间相对表达量差异显著。

关键词：毛白杨烟草 qRT-PCR PtPCP—like

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家榆种子老化过程中ROS-类caspse-3途径的初步研究

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西北植物学报 2012年第5期32卷 948-955页

作者：王琼汪晓峰北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

以家榆种子为试材,在37℃、100%相对湿度下进行老化处理后,结合DAPI染色和细胞原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)、激光共聚焦技术以及生化分析,检测家榆种子人工诱导老化过程中细胞核、活性氧(ROS)和类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(ca... 详细信息

以家榆种子为试材,在37℃、100%相对湿度下进行老化处理后,结合DAPI染色和细胞原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)、激光共聚焦技术以及生化分析,检测家榆种子人工诱导老化过程中细胞核、活性氧(ROS)和类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性的变化.结果显示:随着老化程度加深,种子细胞染色质皱缩、凝聚,继而解体并被排出体外;表皮中最先发现TUNEL凋亡核,而后逐渐延伸到子叶和胚轴;老化处理5d时种子活性氧信号最强,且其与程序性死亡相关事件的发生具有时空一致性,同时在胞浆中检测到较强的caspase-3活性.研究表明,家榆种子人工老化可导致细胞程序性死亡,且存在与ROS迸发及类caspase-3相关联的信号通路.

关键词：家榆种子细胞程序性死亡原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法 H2DCFDA 类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

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牛枝子抗旱候选基因LpDREB的克隆与表达及单核苷酸多态性分析

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林业科学 2012年第6期48卷 40-46页

作者：李静袁虎威李伟北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

牛枝子为胡枝子属中最具耐旱特性的灌木树种,是研究基于单核苷酸多态性(SNP)水平的植物个体间耐旱差异机制的重要材料。以5个种源的天然牛枝子为材料,利用染色体步移技术克隆牛枝子抗旱候选基因LpDREB的全长序列,对LpDREB基因的结构和... 详细信息

牛枝子为胡枝子属中最具耐旱特性的灌木树种,是研究基于单核苷酸多态性(SNP)水平的植物个体间耐旱差异机制的重要材料。以5个种源的天然牛枝子为材料,利用染色体步移技术克隆牛枝子抗旱候选基因LpDREB的全长序列,对LpDREB基因的结构和系统进化进行分析,研究LpDREB基因的组织及诱导表达规律,分析LpDREB基因的SNP分布和类型。研究结果表明:克隆的牛枝子LpDREB基因cDNA片段全长为1611bp,具有957bp的开放阅读框,编码318个氨基酸,包含DREB基因所特有的DREBP/AP2保守区域。LpDREB基因同大豆GmDREB3基因的进化关系最近,但2个基因除保守区域外的其他区域相似性不高。牛枝子LpDREB基因受干旱胁迫诱导表达,在组织器官中的根部表达量最大,其次为叶片,茎中的表达量最少。在天然牛枝子群体中共检测到23个SNP位点,其中启动子及5'端非编码区4个,编码区17个,3'端非编码区2个;23个SNP中,12个属于转换,11个属于颠换;编码区内的17个SNPs位点中,9个属于同义突变,8个为非同义突变,同义突变与非同义突变的比值为1.1。研究结果为基于SNP水平的牛枝子抗旱候选基因的关联分析奠定基础。

关键词：牛枝子 LpDREB基因诱导表达序列分析单核苷酸多态性

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甘蓝型油菜水苏糖合成酶基因克隆及表达分析

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西北植物学报 2012年第3期32卷 439-446页

作者：丁可汪晓峰北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

以甘蓝型油菜品种‘德油5号’为试材,采用RT-PCR和RACE方法首次从油菜中获得水苏糖合成酶基因cDNA全长序列,命名为BnSTS,GenBank登录号为HQ285880.1。该cDNA全长3 210bp,包含一个长为2 619bp的开放阅读框,编码873个氨基酸。通过构建原... 详细信息

以甘蓝型油菜品种‘德油5号’为试材,采用RT-PCR和RACE方法首次从油菜中获得水苏糖合成酶基因cDNA全长序列,命名为BnSTS,GenBank登录号为HQ285880.1。该cDNA全长3 210bp,包含一个长为2 619bp的开放阅读框,编码873个氨基酸。通过构建原核表达载体,成功表达出预期蛋白。同源性比对结果显示,该基因编码蛋白与拟南芥STS相似性最高为82.08%。荧光定量PCR结果显示,基因表达水平与油菜种子发育过程中水苏糖含量变化具有相关性,与种子脱水耐性的获得具有时间一致性。该基因可能在种子脱水耐性形成机制中具有一定的作用。

关键词：甘蓝型油菜水苏糖合成酶基因克隆表达分析

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Induction of unreduced megaspores with high temperature during megasporogenesis in Populus

Induction of unreduced megaspores with high temperature duri...

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中国林学会林木遗传育种分会第七届全国林木遗传育种学术大会

作者：王君李代丽康向阳北京林业大学林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

三倍体育种是杨树遗传改良最有效的途径之一.由于未减数花粉存在受精竞争力低的问题,利用未减数花粉授粉途径诱导三倍体效率较低.为提高杨树三倍体诱导效率,本研究以'哲引3号杨'为材料,探索了利用高温处理诱导大孢子染色体加倍... 详细信息

三倍体育种是杨树遗传改良最有效的途径之一.由于未减数花粉存在受精竞争力低的问题,利用未减数花粉授粉途径诱导三倍体效率较低.为提高杨树三倍体诱导效率,本研究以'哲引3号杨'为材料,探索了利用高温处理诱导大孢子染色体加倍技术.研究发现'哲引3号杨'大孢子发生进程与雌花芽外部形态发育存在密切关系,可用以指导施加高温处理.通过对处理后所获得的子代苗木进行倍性检测,获得了146株三倍体,最高诱导率达到66.7％,充分证明施加高温诱导大孢子染色体加倍是杨树三倍体诱导的理想途径.施加41和44℃均适合于大孢子染色体加倍.细胞学分析表明粗线期至双线期是高温诱导'哲引3号杨'大孢子染色体加倍的最有效始处理时期.此外,处于减数第二次分裂过程的大孢子母细胞亦可受高温处理获得减数第二次分裂核复原型(SDR)2n大孢子.研究所获得的来源于减数第一次分裂核复原型(FDR)和减数第二次分裂核复原型2n大孢子受精的三倍体子代具有不同的杂合性,对于进一步开展杨树遗传学研究和制定育种计划具有重要价值.

关键词：杨树三倍体育种未减数大孢子品种资源

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毛白杨花粉败育过程中Ca^(2+)-ATPase的异常变化

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北京林业大学学报 2012年第4期34卷 10-17页

作者：曹媛康向阳张志毅荆艳萍北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

为研究木本植物花粉败育过程中Ca2+-ATPase的影响,本文利用氯化铈沉淀和电镜细胞化学方法,对不同育性毛白杨花药在小孢子发生发育过程中Ca2+-ATPase进行了定位。结果表明:Ca2+-ATPase在可育花药小孢子母细胞时期大量分布于小孢子母细胞... 详细信息

为研究木本植物花粉败育过程中Ca2+-ATPase的影响,本文利用氯化铈沉淀和电镜细胞化学方法,对不同育性毛白杨花药在小孢子发生发育过程中Ca2+-ATPase进行了定位。结果表明:Ca2+-ATPase在可育花药小孢子母细胞时期大量分布于小孢子母细胞质膜、液泡膜及内膜系统,花药内壁细胞内膜系统和绒毡层细胞质膜,随后Ca2+-ATPase在上述细胞中均减少甚至消失,并于小孢子时期和成熟花粉时期分别在小孢子和花药内壁细胞中再次沉积;不育花药小孢子母细胞以及此时期绒毡层细胞质膜上并无明显Ca2+-ATPase,花药表皮、药室内壁以及中层的Ca2+-ATPase都高于同一时期的可育花药,其绒毡层细胞解体不完全。由上述结果推测:毛白杨不育花药内小孢子母细胞和药壁中Ca2+-ATPase分布异常,影响细胞内钙离子的主动转运,可能导致钙离子异常累积,进而通过影响小孢子母细胞和药室内壁细胞的正常代谢、绒毡层细胞的及时降解而导致花粉败育。

关键词：毛白杨 Ca2+-ATPase 花粉败育

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