检索结果-内蒙古大学图书馆

植物研究 2013年第2期33卷 197-201页

作者：周祥明郝志愚夏时云王姝宋建陈受宜刘仲齐天津市农业生物技术研究中心天津300384 北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083 北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100101

通过对农杆菌菌液浓度、侵染时间、预培养时间和共培养时间等影响转化效率的因素进行优化,建立了合欢农杆菌转化体系。在此基础上,利用农杆菌介导法将TaNHX2基因导入合欢基因组内,获得大量Kan抗性再生植株。常规PCR和实时荧光PCR检测结... 详细信息

通过对农杆菌菌液浓度、侵染时间、预培养时间和共培养时间等影响转化效率的因素进行优化,建立了合欢农杆菌转化体系。在此基础上,利用农杆菌介导法将TaNHX2基因导入合欢基因组内,获得大量Kan抗性再生植株。常规PCR和实时荧光PCR检测结果表明,外源基因已整合到合欢基因组中,并正常转录。

关键词： TaNHX2 合欢遗传转化农杆菌

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正义、反义、干涉调控肉桂酰辅酶A脱氢酶基因对烟草的影响

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广东农业科学 2013年第11期40卷 140-144,156页

作者：韩伯涛盖颖蒋湘宁北京林业大学生物科学与技术学院/国家林业局树木花卉育种生物工程重点实验室/林木育种国家工程实验室北京100083

肉桂酰辅酶A还原酶(Cinnamoyl-CoA reductase,CCR)是在木质素合成途径中起到关键作用的酶,负责催化肉桂酰辅酶A类物质的还原反应生成相应的醛类化合物。分离得到毛白杨CCR基因的cDNA。将CCR基因以正义、反义和干涉的形式,通过农杆菌介... 详细信息

肉桂酰辅酶A还原酶(Cinnamoyl-CoA reductase,CCR)是在木质素合成途径中起到关键作用的酶,负责催化肉桂酰辅酶A类物质的还原反应生成相应的醛类化合物。分离得到毛白杨CCR基因的cDNA。将CCR基因以正义、反义和干涉的形式,通过农杆菌介导的方法转入烟草中,Southern杂交以确定转基因成功。在获得的转基因植株中,所有下调基因的植株都表现出可溶性酚酸含量下降,木质素含量也有明显的下降趋势,纤维素含量则有上升,可能是对木质素含量下降的一种代偿性增长。植物细胞壁组分的含量变化表明CCR基因可能是一个控制木质素代谢途径的一个很好的调控点。

关键词：肉桂酰辅酶A脱氢酶木质素转基因

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山杏苹果酸酶基因的克隆与生物信息学分析

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基因组学与应用生物学 2013年第3期32卷 332-338页

作者：章文乐蔡兼钮俊蒲婧懿朱梦媛胡惠雯张志翔林善枝北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

三羧酸转运体系(柠檬酸,苹果酸和丙酮酸)可为脂肪酸生物合成提供原料乙酰辅酶A与还原力NADPH;而苹果酸酶可催化苹果酸发生氧化脱羧而产生NADPH,是调控脂肪酸代谢的重要酶。山杏种子脂肪酸含量丰富、产油率高,是研究植物油脂代谢的良好... 详细信息

三羧酸转运体系(柠檬酸,苹果酸和丙酮酸)可为脂肪酸生物合成提供原料乙酰辅酶A与还原力NADPH;而苹果酸酶可催化苹果酸发生氧化脱羧而产生NADPH,是调控脂肪酸代谢的重要酶。山杏种子脂肪酸含量丰富、产油率高,是研究植物油脂代谢的良好材料。本研究以山杏为试材,采用RACE克隆和电子拼接相结合的方法,首次从山杏种子中克隆得到苹果酸酶基因(命名为SaME,GenBank上登记号为JX262381),该基因的cDNA编码区全长1923bp、编码640个氨基酸,预测其编码蛋白分子量为70.15kD、等电点为6.38;同时,运用生物信息学方法对SaME基因编码蛋白的理化特性、结构域和亚细胞定位等方面进行预测分析,结果显示,该蛋白定位在细胞的质体膜上,具有苹果酸酶活性,属于NADP-ME超家族。本文对山杏SaME基因的克隆与分析,为进一步探究苹果酸酶对油脂代谢的调控机制奠定了基础。

关键词：山杏苹果酸酶基因克隆生物信息学分析

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黄连木PcSAD基因的克隆及分析

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基因组学与应用生物学 2013年第4期32卷 503-509页

作者：章文乐蒲婧懿朱梦媛钮俊冯清茗胡惠雯侯琦郭静袁一鸣张志翔林善枝北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

中国黄连木(Pistacia chinensis Bunge)是种重要的优良木本油料树种,分布广,而且种子具有含油量高、出油率高、油品质好等优点,是生产生物柴油的理想原料。硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶(stearoyl-ACP desat-urase,SAD)在植物中催化不饱... 详细信息

中国黄连木(Pistacia chinensis Bunge)是种重要的优良木本油料树种,分布广,而且种子具有含油量高、出油率高、油品质好等优点,是生产生物柴油的理想原料。硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶(stearoyl-ACP desat-urase,SAD)在植物中催化不饱和脂肪酸生物合成的第一步脱饱和反应,对植物细胞膜和种子油脂中脂肪酸成分的调控起着重要作用。本研究采用RACE及RT-PCR方法,首次从黄连木种子中克隆获得长度为1791bp的SAD基因(命名为PcSAD),该基因含有1299bp完整的开放阅读框、编码432个氨基酸。生物信息学分析发现,黄连木PcSAD基因的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列与已报道的其它相近物种具有较高同源性,而且PcSAD含有典型的酰基载体蛋白脱饱和酶2和类铁蛋白家族的保守结构域;另外,开展了PcSAD的原核表达载体构建及诱导表达体研究。上述研究结果可为黄连木PcSAD基因的功能鉴及应用定奠定重要基础。

关键词：黄连木硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶基因克隆原核表达生物信息学分析

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玉米自交系AS-9化学诱变后代SSR遗传变异分析

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华北农学报 2013年第3期28卷 92-101页

作者：李红英卢存福兰小中杨凤娇金德善乔佩卢骁玉猛陈玉珍北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室北京100083 西藏农牧学院西藏林芝860000

为分析系列化学诱变对玉米自交系AS-9诱变后代的影响,以玉米自交系AS-9及其化学诱变自交第1代M1和第4代M4为材料,进行发芽试验,同时利用分布在10条染色体上的68对SSR引物进行遗传变异分析。结果表明:诱变M1和M4种子的发芽率、芽长和根... 详细信息

为分析系列化学诱变对玉米自交系AS-9诱变后代的影响,以玉米自交系AS-9及其化学诱变自交第1代M1和第4代M4为材料,进行发芽试验,同时利用分布在10条染色体上的68对SSR引物进行遗传变异分析。结果表明:诱变M1和M4种子的发芽率、芽长和根数普遍高于对照;能在2代玉米试材中扩增出多态性条带的引物有54对,占引物总数的79.41%;M1诱变系与基础材料对照的遗传相似系数平均值为0.364 7,遗传相似系数中心化后的数据在-0.12处,可将材料分为2个类群,基础材料(ⅠCK)为一类,诱变系为一类;M4诱变系与基础材料对照的遗传相似系数平均值为0.434 6,遗传相似系数中心化后的数据在-0.09处,可将材料分为基础自交系(ⅣCK)和诱变系2个类群;M1和M4主成分分析与聚类结果基本一致。说明基础材料AS-9与诱变系材料间存在真实的遗传差异,系列化学诱变已使玉米自交系AS-9产生了广泛的遗传变异。

关键词：玉米自交系化学诱变 SSR标记遗传变异

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河北杨CBF类基因的克隆及其进化

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东北林业大学学报 2013年第10期41卷 75-81页

作者：王泽亮秦鹏飞郭洪英庄国庆宋跃朋安新民张志毅四川省林业科学研究院成都610081 宣汉县林业局林木育种国家工程实验室(北京林业大学)

CBF转录因子属于AP2/EREBP转录因子家族,是植物特有的一类转录因子,在植物应对外界非生物胁迫的过程中起了非常重要的作用。在前期克隆河北杨PhCBF4a、PhCBF4b基因的基础上,通过同源克隆方法,从河北杨中继续分离出其它CBF类基因:PhDREB6... 详细信息

CBF转录因子属于AP2/EREBP转录因子家族,是植物特有的一类转录因子,在植物应对外界非生物胁迫的过程中起了非常重要的作用。在前期克隆河北杨PhCBF4a、PhCBF4b基因的基础上,通过同源克隆方法,从河北杨中继续分离出其它CBF类基因:PhDREB66、PhDREB67-1、PhDREB67-2、PhDREB68、PhDREB69、PhDREB70。与PhCBF4a、PhCBF4b基因相似,这6个基因包含AP2区域、核定位位点(NLS)以及AP2区域侧翼的两个CBF类基因所特有的基序。与相应毛果杨基因比对分析发现,这8个河北杨基因可分为3个Groups(旁系同源基因群),其中2个各包括3个基因,1个包含2个基因,河北杨旁系同源基因及其与毛果杨直系同源物之间在氨基酸水平上表现出了较高的序列一致性。进化分析结果显示,CBF基因可分为真双子叶植物分支与单子叶植物分支。真双子叶植物分支又可以分为3个分支,可分别由3个河北杨CBF旁系同源基因群所代表,显示在从共同的双子叶祖先分离之前或分离过程中,杨树CBF基因经历了复制与趋异的进化过程。PAML分析检测到PhCBF4a基因在进化过程中承受了正向的选择压力,表明其在河北杨响应并适应外界胁迫中的重要作用。表达分析结果显示河北杨CBF类基因能够应答干旱、低温、高温、盐及ABA胁迫,显示了其在调控河北杨胁迫抗性中的作用。

关键词：河北杨 CBF DREB 进化胁迫

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适用于毛白杨芽双向电泳分析的蛋白质提取方法

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北京林业大学学报 2013年第4期35卷 144-148页

作者：谢进田晓明刘淑欣侯佳音盖颖蒋湘宁北京林业大学生物科学与技术学院国家林业局树木花卉育种与生物工程实验室

本实验以毛白杨芽为实验材料,采用Tris-酚法、三氯乙酸-丙酮法和三氯乙酸-丙酮+Tris-酚法对其蛋白质提取方法进行比较,采用双向电泳分离蛋白质,通过PDQuest软件和质谱对这3种提取方法得到的双向电泳胶进行分析。结果显示,三氯乙酸-丙酮... 详细信息

本实验以毛白杨芽为实验材料,采用Tris-酚法、三氯乙酸-丙酮法和三氯乙酸-丙酮+Tris-酚法对其蛋白质提取方法进行比较,采用双向电泳分离蛋白质,通过PDQuest软件和质谱对这3种提取方法得到的双向电泳胶进行分析。结果显示,三氯乙酸-丙酮法得到的蛋白点数量为231±4,得到的鲜样中的总蛋白质含量为(3.57±0.618)mg/g,均高于其他两种提取方法,并且所得到的双向电泳胶更清晰,为毛白杨芽蛋白质提取的最适方法。

关键词：毛白杨芽蛋白质提取双向电泳质谱

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冬枣与临猗梨枣杂交子代果实裂果特性研究

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园艺学报 2013年第4期40卷 749-754页

作者：唐岩荆艳萍许莉斯申连英李颖岳庞晓明北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室计算生物学中心生物科学与技术学院北京100083 河北农业大学中国枣研究中心河北保定061000

研究影响枣裂果的因素对选育抗裂果品种和开发防裂措施具有重要意义。对冬枣×临猗梨枣的F1子代分离群体进行裂果率和裂果指数测定,并进行石蜡制片和显微观测,探讨同一分离群体的不同基因型个体间成熟果实表皮结构与裂果的关系。结... 详细信息

研究影响枣裂果的因素对选育抗裂果品种和开发防裂措施具有重要意义。对冬枣×临猗梨枣的F1子代分离群体进行裂果率和裂果指数测定,并进行石蜡制片和显微观测,探讨同一分离群体的不同基因型个体间成熟果实表皮结构与裂果的关系。结果显示,48-LS-33,47-LS-22,II-13-15为极抗裂株系;抗裂株系比易裂株系果实表皮厚,果实表皮厚度和裂果率呈显著负相关,抗裂类型果实表皮细胞排列较紧密,角质层沉积导致的表皮第一层细胞垂周状变化明显,而角质层厚度与裂果无明显相关性。

关键词：枣裂果表皮角质层

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四倍体刺槐黄化嫩枝扦插生根过程生理生化分析

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东北林业大学学报 2013年第11期41卷 5-9页

作者：卢楠孟丙南孙宇涵李云王少明郭志民王青龙徐慧敏林木育种国家工程实验室(北京林业大学) 北京100083 河南省国有洛宁县吕村林场河南省洛宁县林业局

以四倍体刺槐1年生硬枝进行黄化催芽,获得的黄化和未黄化嫩枝为扦插材料,统计和比较了二者的生根情况,用比色法和间接酶联免疫法分别对扦插后不同时间的材料进行了吲哚乙酸氧化酶、多酚氧化酶和过氧化物酶3种氧化酶的活性测定和吲哚乙酸... 详细信息

以四倍体刺槐1年生硬枝进行黄化催芽,获得的黄化和未黄化嫩枝为扦插材料,统计和比较了二者的生根情况,用比色法和间接酶联免疫法分别对扦插后不同时间的材料进行了吲哚乙酸氧化酶、多酚氧化酶和过氧化物酶3种氧化酶的活性测定和吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素和玉米素核苷4种内源激素的质量分数测定,通过对比两种材料在扦插后的不同时期的氧化酶活性和4种内源激素的质量分数的差异及变化规律。结果表明:黄化插穗在生根率、平均生根数和平均根长度方面均明显优于未黄化插穗,并且2种处理方式的3种氧化酶活性和4种内源激素质量分数的变化趋势大致相同,但是黄化嫩枝含有更多的能够促进不定根形成的内源激素,并且氧化酶的活性以及IAA/ABA值都较高,表明黄化处理后的插穗通过氧化酶和内源激素的变化调节,进而促进不定根形成。

关键词：四倍体刺槐黄化嫩枝扦插内源激素氧化酶活性

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油松种子园无性系自由授粉子代测定与种子批稳定性分析

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西北林学院学报 2013年第2期28卷 66-69,113页

作者：钮世辉李伟李悦北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

基于辽宁兴城油松种子园相似立地条件下的多年度自由授粉子代测定材料,分析了油松种子园无性系自由授粉子代的遗传差异及其在年度种子批中表现的稳定性,探索了对稳定性变异的影响因子。结果表明:在油松种子园结实初期,无性系作为母本的... 详细信息

基于辽宁兴城油松种子园相似立地条件下的多年度自由授粉子代测定材料,分析了油松种子园无性系自由授粉子代的遗传差异及其在年度种子批中表现的稳定性,探索了对稳定性变异的影响因子。结果表明:在油松种子园结实初期,无性系作为母本的一般配合力效应在种子批的遗传构成中起重要作用;兴城油松种子园中的绝大多数无性系具有优良的生长表现,现有种子园的去劣疏伐、子代林改建实生苗种子园以及配合选择第二代优树都具有较大的潜力;油松种子园花粉背景和植株生长的综合环境因子对无性系的遗传和表现有一定的影响,根据其稳定性差异可采取不同利用方式。

关键词：油松自由授粉子代种子批稳定性

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