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作者：陈仲安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083

A novel sequence that functions as a promoter element for moderate constitutive expression of transgenes, designated as the PtMCP promoter, was isolated from the woody perennial Populus *** PtMCP promoter was fused to the GUS reporter gene to characterize its expression pattern in different *** stable Arabidopsis transformants, transcripts of the GUS reporter gene could be detected by RT-PCR in the root, stem, leaf, flower and *** histochemical and fluorometric GUS activity assays demonstrated that the promoter could direct transgene expression in all tissues and organs, including roots, stems, rosette leaves, cauline leaves and flowers of seedlings and maturing *** constitutive expression pattern was similar to that of the CaMV35S promoter,but the level of GUS activity was significantly lower than in CaMV35S promoter∷GUS *** also characterized the promoter through transient expression in transgenic tobacco and observed similar expression *** GUS staining and quantitative analysis detected GUS activity in all tissues and organs of tobacco, including roots, stems, leaves, flower buds and flowers, but GUS activity in PtMCP promoter∷ GUS plants was significantly lower than in CaMV35 S promoter∷ GUS *** results suggested that the PtMCP promoter from poplar is a constitutive promoter with moderate activity and that its function is presumably conserved in different ***, the PtMCP promoter may provide a practical choice to direct moderate level constitutive expression of transgenes and could be a valuable new tool in plant genetic engineering.

关键词： constitutive promoter moderate expression RT-PCR GUS transgenic plants

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A Novel Moderate Constitutive Promoter Derived from Poplar(Populus tomentosa Carrière)

A Novel Moderate Constitutive Promoter Derived from Poplar(P...

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第三届中国林业学术大会

A novel sequence that functions as a promoter element for moderate constitutive expression of transgenes,designated as the PtMCP promoter,was isolated from the woody perennial Populus *** PtMCP promoter was fused to the GUS reporter gene to characterize its expression pattern in different *** stable Arabidopsis transformants,transcripts of the GUS reporter gene could be detected by RT-PCR in the root,stem,leaf,flower and *** histochemical and fluorometric GUS activity assays demonstrated that the promoter could direct transgene expression in all tissues and organs,including roots,stems,rosette leaves,cauline leaves and flowers of seedlings and maturing *** constitutive expression pattern was similar to that of the CaMV35S promoter,but the level of GUS activity was significantly lower than in CaMV35S promoter::GUS *** also characterized the promoter through transient expression in transgenic tobacco and observed similar expression *** GUS staining and quantitative analysis detected GUS activity in all tissues and organs of tobacco,including roots,stems,leaves,flower buds and flowers,but GUS activity in PtMCP promoter::GUS plants was significantly lower than in CaMV35S promoter::GUS *** results suggested that the PtMCP promoter from poplar is a constitutive promoter with moderate activity and that its function is presumably conserved in different ***,the PtMCP promoter may provide a practical choice to direct moderate level constitutive expression of transgenes and could be a valuable new tool in plant genetic engineering.

关键词： constitutive promoter moderate expression RT-PCR GUS transgenic plants

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Identification and Characterization of the Populus AREB/ABF Subfamily

Identification and Characterization of the Populus AREB/ABF ...

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中国林学会林木遗传育种分会第七届全国林木遗传育种学术大会

作者：季乐翔王佳安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083

Abscisic acid (ABA) is a major plant hormone that plays an important role in responses to abiotic *** ABA-responsive element binding protein/ABRE-binding factor (AREB/ABF) gene subfamily contains crucial transcription factors in the ABA-mediated signaling *** this study, a total of 14 putative AREB/ABF members were identified in the Populus trichocarpa genome using five AREB/ABF amino acid sequences from Arabidopsis thaliana as *** 14 putative Populus subfamily members showed high protein similarities, especially in the basic leucine zipper (bZIP) domain region.A neighbor-joining analysis combined with gene structure data revealed homology among the 14 *** expression patterns of the Populus AREB/ABF subfamily suggested that the most abundant transcripts of 11 genes occurred in leaf tissues, while two genes were most transcribed in root ***, eight Populus AREB/ABF gene members were upregulated after treatment with 100 μM exogenous ABA, while the other six members were *** identified the expression profiles of the subfamily members in Populus tissues and elucidated different response patterns of Populus AREB/ABF members to ABA *** study provided insight into the roles of Populus AREB/ABF homologues in plant response to abiotic stresses.

关键词： Arabidopsis thaliana Populus AREB/ABF Bioinformatics qRT-PCR

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雪莲愈伤组织蛋白质提取及双向电泳分析

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西北植物学报 2012年第9期32卷 1903-1909页

作者：金德善卢存福兰小中刘雪萍乔佩李红英陈玉珍北京林业大学生物科学与技术学院北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 西藏大学西藏农牧学院西藏林芝860000

以产自西藏绵头雪莲为材料,分别采用TCA/丙酮法、尿素法和酚法,提取雪莲愈伤组织蛋白质并进行双向电泳,对蛋白产量和纯度以及电泳图谱进行比较。结果表明:(1)酚法较TCA/丙酮法和尿素法获得的蛋白质更纯,杂质少,蛋白点多且分辨率较高,在... 详细信息

以产自西藏绵头雪莲为材料,分别采用TCA/丙酮法、尿素法和酚法,提取雪莲愈伤组织蛋白质并进行双向电泳,对蛋白产量和纯度以及电泳图谱进行比较。结果表明:(1)酚法较TCA/丙酮法和尿素法获得的蛋白质更纯,杂质少,蛋白点多且分辨率较高,在二维电泳图谱中背景清晰,横纹和纵纹较少。(2)对酚法提取的蛋白质样品进行上样量的比较结果显示,17cm胶条500μg上样量二维图谱的背景和蛋白点分布较好。(3)用0℃处理雪莲愈伤组织12h,利用建立的双向电泳体系分析结果发现,有33个蛋白点比常温(23℃)上调1.5倍表达,有5个蛋白点的表达下调2倍。(4)质谱鉴定结果表明,低温诱导的蛋白包括NADP-依赖型异柠檬酸脱氢酶、腺苷高半胱氨酸酶、抗性RPP8类蛋白、蛋白点gi|13129470、α-微管蛋白,分别与新陈代谢、植物防御、能量代谢、细胞的结构蛋白相关。

关键词：雪莲双向电泳样品制备蛋白质组

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甘蒙柽柳对NaCl胁迫的生理响应

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广东农业科学 2012年第10期39卷 38-42,55页

作者：刘克东郑彩霞郝建卿北京林业大学林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室/国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室/北京林业大学生物科学与技术学院北京100083

利用盆栽法研究不同浓度NaCl(0%、0.5%、1.0%、2.0%、4.0%)胁迫对甘蒙柽柳生长和生理特性的影响,结果表明,较低浓度(0.5%)的NaCl对植株各项生理指标影响很小;对较高浓度(1.0%、2.0%、4.0%)NaCl处理,植株在气孔调节、保护酶系统、渗透调... 详细信息

利用盆栽法研究不同浓度NaCl(0%、0.5%、1.0%、2.0%、4.0%)胁迫对甘蒙柽柳生长和生理特性的影响,结果表明,较低浓度(0.5%)的NaCl对植株各项生理指标影响很小;对较高浓度(1.0%、2.0%、4.0%)NaCl处理,植株在气孔调节、保护酶系统、渗透调节物质方面均能作出较快响应,并能在胁迫初期(前8 d)维持相对正常生长,但随着胁迫时间的延长、NaCl浓度增加,植物生长受到明显影响,第8 d时,4.0%NaCl处理的植株相对电导率明显上升,接近对照的4倍,MDA的含量与其成正相关关系;脯氨酸含量在甘蒙柽柳受到盐胁迫后逐渐上升,而可溶性蛋白含量则在盐胁迫初期增加,后期逐渐减小;3种保护酶活性在胁迫后均呈先升高后下降的趋势,其中SOD与CAT的活性在第14 d达到最高,POD活性则是在第20 d达到最高;叶片叶绿素含量与Pn逐渐下降并呈相关关系。洗盐后,1.0%和2.0%NaCl处理的植株各项指标均可得到恢复,而4.0%NaCl处理的植株各项指标很难恢复。

关键词：甘蒙柽柳生理响应盐胁迫

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几种梓属植物花粉形态及分类学意义

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林业科学 2012年第7期48卷 182-185,I0001,I0002页

作者：贾继文麻文俊王军辉张金凤张守攻张建国赵鲲中国林业科学研究院林业研究所林木遗传育种国家重点实验室北京100091 北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 洛阳市农林科学院洛阳471002

梓属(Catalpa),紫葳科(Bignoniaceae),乔木,全世界约13种,分布于美洲及亚洲东部。我国包括引入种共5种及1变型(中国植物志编委会,2005),包括楸树(Catalpa bungei)、灰楸(Catalpa fargesii)、滇楸(Catalpa fargesii ***)、藏楸(Catalpa tibetica)、黄金树(Catalpa speciosa)、梓树(Catalpa ovata),其中黄金树是引入种,滇楸是灰楸的变型。从形态构造、亲缘关系和开花结果规律分析,可将5个种分为楸树组和梓树组2个组,楸树、灰楸和滇楸属于楸树组,藏楸。

关键词：梓属花粉形态四合花粉分类学意义

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云南松SSR-PCR反应体系的建立与优化

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生物技术通报 2012年第4期28卷 93-97页

作者：张瑞丽许玉兰王大玮吕学辉何承忠段安安西南林业大学西南山地森林保育与利用省部共建教育部重点实验室昆明650224 北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

为了建立适宜云南松SSR-PCR的反应体系和扩增程序,利用近缘种火炬松的引物,采用正交设计L16(45)对云南松SSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化,筛选出各反应因素的最佳水平,建立了适于云南松的... 详细信息

为了建立适宜云南松SSR-PCR的反应体系和扩增程序,利用近缘种火炬松的引物,采用正交设计L16(45)对云南松SSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化,筛选出各反应因素的最佳水平,建立了适于云南松的SSR反应体系。在10μL的反应体系中,模板DNA的用量为30.0 ng,TaqDNA聚合酶的用量为1.0 U,Mg2+的浓度为2.0 mmol/L,dNTPs浓度为0.4 mmol/L,引物的浓度为0.2μmol/L。扩增程序为:94℃预变性4 min;94℃变性45 s,48℃退火30 s,72℃延伸30 s,30个循环;72℃延长10 min,4℃保存。最后利用1个居群对该体系进行稳定性验证,结果可用于云南松SSR标记的研究。

关键词：云南松 SSR 优化正交设计

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云南松及其近缘种间遗传关系研究现状

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西北林学院学报 2012年第1期27卷 98-102页

作者：许玉兰蔡年辉康向阳李根前何承忠段安安西南林业大学西南山地森林保育与利用省部共建教育部重点实验室云南昆明650224 北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

种质资源研究是育种工作的基础,云南松与其近缘种间的遗传关系一直深受林木育种工作者的重视,其研究结果可为探讨起源、进化、分类、育种和资源保护与利用提供科学依据。本文从形态学、细胞学、同工酶和分子生物学等方面综述其遗传关系... 详细信息

种质资源研究是育种工作的基础,云南松与其近缘种间的遗传关系一直深受林木育种工作者的重视,其研究结果可为探讨起源、进化、分类、育种和资源保护与利用提供科学依据。本文从形态学、细胞学、同工酶和分子生物学等方面综述其遗传关系研究现状,并对今后进一步开展这方面的研究进行了探讨。

关键词：云南松种质资源遗传关系分类

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油松花粉离体萌发及萌发特征研究

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内蒙古农业大学学报（社会科学版） 2012年第5期28卷 21-27页

作者：田菊尚峰男宋少宇王君康向阳北京林业大学林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

为了加强油松有性杂交,为种子园育种研究奠定基础,对油松花粉离体萌发的适宜条件及萌发特征进行了系统研究.结果表明,油松花粉在无蔗糖培养基中仍具一定萌发能力,蔗糖的添加可显著促进花粉萌发,但高浓度蔗糖可抑制花粉管的生长；油松花... 详细信息

为了加强油松有性杂交,为种子园育种研究奠定基础,对油松花粉离体萌发的适宜条件及萌发特征进行了系统研究.结果表明,油松花粉在无蔗糖培养基中仍具一定萌发能力,蔗糖的添加可显著促进花粉萌发,但高浓度蔗糖可抑制花粉管的生长；油松花粉管易形成分枝,蔗糖浓度与分枝花粉频率呈正相关；硼酸的添加在培养初期可有效加速花粉萌发,但过高浓度的硼酸对花粉萌发具抑制作用；Ca2+对花粉萌发的影响较小,不同浓度Ca2+处理均可获得较高的萌发率；培养温度对花粉萌发的促进作用明显,但温度的持续升高将抑制花粉萌发.综合萌发率、花粉管生长及分枝花粉管频率,油松花粉萌发的最适液体培养基组成为:2.00％蔗糖+0.075％硼酸+0.005％ Ca2+,26℃下光照培养,72 h时萌发率可达(96.10±0.47)％.

关键词：油松花粉离体萌发花粉管生长

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油松花粉离体萌发及萌发特征研究

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中国农学通报 2012年第28期28卷 21-27页

作者：田菊尚峰男宋少宇王君康向阳北京林业大学林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

为了加强油松有性杂交,为种子园育种研究奠定基础,对油松花粉离体萌发的适宜条件及萌发特征进行了系统研究。结果表明,油松花粉在无蔗糖培养基中仍具一定萌发能力,蔗糖的添加可显著促进花粉萌发,但高浓度蔗糖可抑制花粉管的生长;油松花... 详细信息

为了加强油松有性杂交,为种子园育种研究奠定基础,对油松花粉离体萌发的适宜条件及萌发特征进行了系统研究。结果表明,油松花粉在无蔗糖培养基中仍具一定萌发能力,蔗糖的添加可显著促进花粉萌发,但高浓度蔗糖可抑制花粉管的生长;油松花粉管易形成分枝,蔗糖浓度与分枝花粉频率呈正相关;硼酸的添加在培养初期可有效加速花粉萌发,但过高浓度的硼酸对花粉萌发具抑制作用;Ca2+对花粉萌发的影响较小,不同浓度Ca2+处理均可获得较高的萌发率;培养温度对花粉萌发的促进作用明显,但温度的持续升高将抑制花粉萌发。综合萌发率、花粉管生长及分枝花粉管频率,油松花粉萌发的最适液体培养基组成为:2.00%蔗糖+0.075%硼酸+0.005%Ca2+,26℃下光照培养,72h时萌发率可达(96.10±0.47)%。

关键词：油松花粉离体萌发花粉管生长

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