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西北植物学报 2015年第9期35卷 1899-1905页

作者：宋少宇张俊琦王君北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室生物科学与技术学院北京100083 北京林业大学公共分析测试中心北京100083

以三倍体杨树品种‘银中杨’(Populus alba×*** Yinzhong)无菌苗叶片为材料,对其原生质体分离及纯化条件进行研究,为进一步通过细胞融合、基因工程等进行品种改良探索新的途径。结果表明:酶的种类及浓度、渗透压、酶解时间对‘银... 详细信息

以三倍体杨树品种‘银中杨’(Populus alba×*** Yinzhong)无菌苗叶片为材料,对其原生质体分离及纯化条件进行研究,为进一步通过细胞融合、基因工程等进行品种改良探索新的途径。结果表明:酶的种类及浓度、渗透压、酶解时间对‘银中杨’叶肉原生质体分离效果有显著影响,适宜的分离条件为CPW+3%Cellulase RS+0.5%Macerozyme R-10+0.3%Pectinse Y-23+0.6mol/L甘露醇+0.6g/L MES+1g/L BAS,酶解时间为8h,原生质体产量和活力分别为2.13×107个/g和80.18%;‘银中杨’叶肉原生质体纯化最佳方法为上浮法蔗糖等密度离心,且蔗糖浓度为40%时原生质体产量最高(1.06×107个/g),可满足进一步的原生质体培养等技术的要求。

关键词： '银中杨’ 原生质体分离纯化

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欧洲云杉扦插生根进程中内源激素和多酚类物质变化

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林业科学 2015年第3期51卷 155-162页

作者：欧阳芳群付国赞王军辉马建伟安三平王美琴李悦中国林业科学研究院林业研究所林木遗传育种国家重点实验室国家林业局林业培育重点实验室国家林木种质资源平台北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 河南林业职业学院洛阳471002 甘肃省小陇山林业科学研究所天水741002

【目的】研究欧洲云杉嫩枝扦插生根过程中的生根性状、插穗内的内源激素和多酚类物质含量的变化情况,探讨插穗内内源激素和多酚类物质对欧洲云杉扦插生根影响,旨在为欧洲云杉扦插繁殖机理研究提供科学理论依据。【方法】以5年生欧洲云... 详细信息

【目的】研究欧洲云杉嫩枝扦插生根过程中的生根性状、插穗内的内源激素和多酚类物质含量的变化情况,探讨插穗内内源激素和多酚类物质对欧洲云杉扦插生根影响,旨在为欧洲云杉扦插繁殖机理研究提供科学理论依据。【方法】以5年生欧洲云杉嫩枝插穗为试验材料,在扦插后30,40,50,55,60,65,70,75和80天分别取20株插穗调查愈伤组织形成和根系发育情况,以及扦插后0,37,45,67和72天取插穗的针叶和45,67和72天取插穗基部或基部愈伤组织分析插穗内源激素和多酚类物质含量。【结果】欧洲云杉扦插30天后已有55%的穗条形成愈伤组织,50天愈伤组织全部形成,50-75天为愈伤组织分化生根的高峰期,生根率达到90%,平均生根数为10.7。之后生根数量不变,根系仍然在生长,且扦插后根系效果指数持续增高。扦插后至37天,IAA和ZT/GA3分别降低28.79%和52.35%;GA3,ZT/IAA和GA3/IAA分别升高55.02%,32.78%和67.97%。扦插后37-45天愈伤组织形成期,IAA和GA3分别降低25.75%和40.91%;ZT/GA3,ZT/IAA和GA3/IAA分别升高39.32%,23.75%和20.41%。不定根诱导期（45-67天）,IAA由61.7 ng·100 g^-1增加至79.8 ng·100 g^-1,ZT/GA3增加13.84%;而GA3,ZT/IAA,GA3/IAA降低,分别降低16.27%,24.86%,35.26%。扦插后至67天,ZT的含量约为80 ng·100 g^-1,67-72天以29.97%速率降低,降低为55.6 ng·100 g^-1。对羟基苯甲酸在愈伤组织形成前（37天前）呈升高的趋势,由2.23 ng·100 g^-1增加至7.19 ng·100 g^-1。当进入不定根形成期,对羟基苯甲酸含量呈逐渐减小的趋势,减少至4.16 ng·100 g^-1。儿茶酸和总酚酸含量在欧洲云杉枝插生根过程中均呈降低的趋势。扦插基部韧皮部的内源激素和多酚类物质的含量及比值的变化趋势基部同针叶内,只是含量及比值远远高于插穗基部韧皮部。植物的内源激素和多酚类物质多在幼嫩的叶和芽内合成,并向茎基部和其他部位运输。因此欧洲云杉扦插生根进程中,针叶的内源激素和多酚类物质含量远远高于插穗基部韧皮部内,尤其是67天针叶内IAA含量（79.8 ng·100 g^-1）是基部韧皮部内（17.4 ng·100 g^-1）是4.58-7.52倍。【结论】在欧洲云杉扦插生根进程中,内源激素和多酚类物质的此消彼长共同影响促进愈伤组织分化和不定根的形成。不定根诱导期IAA含量升高,而GA3,ZT和多酚类物质降低是促进插穗生根的重要原因。因此IAA是促进不定根形成的主要内源激素,GA3和ZT以及多酚类物质是不定根形成的抑制剂。

关键词：欧洲云杉嫩枝扦插内源激素酚类物质生根进程

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刺槐花粉萌发和花粉管伸长生长过程中柱头与花柱内钙离子的分布特征

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北京林业大学学报 2015年第11期37卷 59-68页

作者：孙鹏戴丽徐兆翮孙非袁存权胡瑞阳孙宇涵李云北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室中国林业科学研究院经济林研究开发中心北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室中国林业科学研究院沙漠林业实验中心

以去雄后人工授粉的刺槐花为试验材料,并以去雄后不授粉的花为对照,利用焦锑酸钙沉淀法分析刺槐柱头和花柱内钙离子分布对花粉萌发和花粉管生长的影响。结果发现:花粉在萌发前,其萌发孔聚集了大量的钙沉淀。授粉作用会很快促使柱头表面... 详细信息

以去雄后人工授粉的刺槐花为试验材料,并以去雄后不授粉的花为对照,利用焦锑酸钙沉淀法分析刺槐柱头和花柱内钙离子分布对花粉萌发和花粉管生长的影响。结果发现:花粉在萌发前,其萌发孔聚集了大量的钙沉淀。授粉作用会很快促使柱头表面泡状分泌物和胞外基质钙含量增加。随着大量花粉萌发完成,柱头泡状分泌物内的钙含量开始下降,但是柱头胞外基质的钙含量下降不明显,这表明柱头泡状分泌物的钙离子对花粉萌发可能有促进作用。刺槐的花柱含有一个中空花柱道,中空花柱道周围有一层通道细胞,不论授粉与否,通道细胞液泡和细胞壁上都有大量钙离子,这些钙离子对花粉管的生长可能有诱导作用。刺槐花柱内的钙离子梯度现象不明显。本研究结果有利于揭示刺槐乃至其他豆科植物柱头和花柱内钙离子分布对花粉萌发和花粉管生长的影响。

关键词：刺槐柱头花柱钙离子分布花粉萌发花粉管生长

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玉米自交系(AS-9)耐盐突变体的遗传变异分析

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亚热带植物科学 2015年第1期44卷 1-7页

作者：杨凤娇李红英卢存福陈玉珍北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

以玉米基础自交系(AS-9)及其化学诱变自交系M4为实验材料进行耐盐性鉴定,同时利用44对可能与根系性状有关联的SSR引物进行遗传变异分析。结果表明,诱变M4幼苗经200和250 mmol·L-1 Na Cl盐胁迫处理7 d后,IV400、IV1600根数比AS-9对... 详细信息

以玉米基础自交系(AS-9)及其化学诱变自交系M4为实验材料进行耐盐性鉴定,同时利用44对可能与根系性状有关联的SSR引物进行遗传变异分析。结果表明,诱变M4幼苗经200和250 mmol·L-1 Na Cl盐胁迫处理7 d后,IV400、IV1600根数比AS-9对照分别增加23.1%、19.1%,诱变IV1600初生根1、2、3根长分别为对照的1.33、1.70、2.15倍;同时在M4玉米试材中扩增出多态性条带的引物25对,占引物总数的56.82%;诱变自交系M4与AS-9的遗传相似系数平均值为0.6563,遗传相似系数中心化后,数据在-0.04处可把材料分为三个类群,基础材料AS-9为Ⅰ类,M4代IV1400、IV1600、IV2000聚为Ⅲ类,其余诱变系为Ⅱ类。此外,6对引物的SSR-PCR产物进行序列差异检测,结果产生新的基元和基元重复次数变化,说明系列化学诱变已使玉米自交系AS-9产生了显著的遗传变异。

关键词：玉米自交系化学诱变 SSR标记遗传变异

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杜仲愈伤组织诱导及胚性愈伤组织的判别

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中国农学通报 2015年第34期31卷 20-27页

作者：王燕赵健隋鑫邱小倩张金凤林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室/国家林业局树木花卉育种生物工程重点开放实验室/北京林业大学生物科学与技术学院北京100083

为探索杜仲胚性愈伤组织诱导的条件,建立杜仲体细胞胚胎发生初步体系,以杜仲幼嫩叶片和未成熟合子胚为外植体、MS为基本培养基,探究外源激素配比、未成熟合子胚发育阶段与基因型对愈伤组织诱导的影响,并从形态学和细胞学对愈伤组织进行... 详细信息

为探索杜仲胚性愈伤组织诱导的条件,建立杜仲体细胞胚胎发生初步体系,以杜仲幼嫩叶片和未成熟合子胚为外植体、MS为基本培养基,探究外源激素配比、未成熟合子胚发育阶段与基因型对愈伤组织诱导的影响,并从形态学和细胞学对愈伤组织进行胚性的判断。试验结果表明:4种不同激素配比的培养基诱导出的叶片愈伤组织在形态上具有差异,MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L和MS+2,4-D2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L有利于叶片胚性愈伤组织诱导;在培养基MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L上,以未成熟合子胚为外植体诱导出4种类型愈伤组织,其中圆球形和颗粒型突起的愈伤组织具有胚性;未成熟合子胚采集时间对愈伤组织诱导率具有显著差异,6月14日采集的外植体愈伤诱导率最高,不同基因型差异不显著。

关键词：杜仲叶片未成熟胚愈伤组织胚性愈伤组织

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油松端粒长度与树龄相关关系研究

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广东农业科学 2015年第12期42卷 61-65页

作者：胡旭东撖静宜要笑云李丽红蒋璐瑶陆海刘頔北京林业大学生物科学与技术学院/林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室/国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083

端粒是位于染色体末端能够保护染色体维持其稳定性的特殊DNA-蛋白复合物,与细胞分裂、细胞衰老及寿命都有着密不可分的联系。结合前人对银杏、狐尾松等木本植物端粒长度与树龄相关关系的研究,选取我国特有常绿木本裸子植物油松作为试验... 详细信息

端粒是位于染色体末端能够保护染色体维持其稳定性的特殊DNA-蛋白复合物,与细胞分裂、细胞衰老及寿命都有着密不可分的联系。结合前人对银杏、狐尾松等木本植物端粒长度与树龄相关关系的研究,选取我国特有常绿木本裸子植物油松作为试验材料,采集树龄跨度从7年到800年9个年龄段的针叶,采用TRF测定法对油松针叶端粒长度进行了测定。结果表明,随着油松树龄的增加,针叶端粒长度也相应变长。在此基础上,建立了油松端粒长度和树龄相关关系的数学模型,以期利用这一数学模型,可以在不损伤树体的前提下,用更为快捷方便的实验手段对古树树龄进行准确测定。

关键词：油松端粒长度树龄数学模型古树保护

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电阻抗图谱法与电导法测定枣树枝条抗寒性的相关性

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中国农学通报 2015年第4期31卷 127-134页

作者：张振东弓瑞娟王哲高姣李颖岳张钢庞晓明北京林业大学林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室/生物科学与技术学院北京100083 河北农业大学园艺学院河北保定071001

选育抗寒性强的品种是避免枣树受到低温气候伤害的最有效方法,因而,探寻测定枣树抗寒性的合适方法非常重要。以7个品种枣树1年生枝条为材料,利用电导率(EL)法和电阻抗图谱(EIS)法测定其抗寒性。研究了低温胁迫下枣树枝条EIS参数(单分布... 详细信息

选育抗寒性强的品种是避免枣树受到低温气候伤害的最有效方法,因而,探寻测定枣树抗寒性的合适方法非常重要。以7个品种枣树1年生枝条为材料,利用电导率(EL)法和电阻抗图谱(EIS)法测定其抗寒性。研究了低温胁迫下枣树枝条EIS参数(单分布电路元素电阻率r、r1;胞外电阻率re;胞内电阻率ri;弛豫时间τ;弛豫时间分布系数ψ)的变化,并对比分析了2种方法测定枣树抗寒性结果的相关性,以期确定快速测定枣树抗寒性的最佳参数。结果表明:在低温胁迫下,随着处理温度的降低,枣树枝条的各EIS参数均减小。通过EIS参数胞外电阻率re和弛豫时间τ拟合估算的抗寒性与EL法测定的抗寒性呈显著正相关,相关系数分别为0.840和0.879。结果表明冷冻处理后EIS参数re和τ可以作为测定枣树抗寒性的参数。采用EIS法测定抗寒性省时、不需要温育、不破坏植株,具有更大的优越性。

关键词：枣电阻抗图谱抗寒性胞外电阻率弛豫时间

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8个种源油松生长和光合生理指标的比较研究

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北京林业大学学报 2014年第2期36卷 87-93页

作者：高琼王维有梁冬李悦北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室

以河北平泉、青海互助、北京松山、山西灵空山、陕西宁陕、内蒙古宁城、内蒙古呼市土默特、河南卢氏等8个种源的油松幼苗为研究对象,通过Li-6400便携式光合仪测定其光合生理指标,并结合生长性状进行综合分析,旨在为油松优良品种的筛选... 详细信息

以河北平泉、青海互助、北京松山、山西灵空山、陕西宁陕、内蒙古宁城、内蒙古呼市土默特、河南卢氏等8个种源的油松幼苗为研究对象,通过Li-6400便携式光合仪测定其光合生理指标,并结合生长性状进行综合分析,旨在为油松优良品种的筛选提供依据。结果表明:1)净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)日变化均呈双峰曲线型,"午休"现象明显,但第一次出现峰值时间不同;2)不同种源的光合生理指标表现出较明显的地带差异性,其变异规律是经度偏东的北京、河北种源一般比偏西的陕西种源Pn高;3)8个种源油松种间苗期的生长及光合生理等指标差异极显著;4)结合对生长性状的分析发现,具有较高Pn的种源有较大的苗冠高和地径;5)光合指标表现出经度、纬度和海拔三维方向的连续变异模式,而生长性状指标仅表现出经、纬两向的连续变异模式。综合比较后发现,北京松山种源油松对立地环境具有较强的适应能力和生长潜力,不仅具有较高的光合速率和生长量,而且能在干旱环境下最经济地利用水分,具有较高的推广应用价值。

关键词：油松光合作用生长性状

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适宜多基因型青杨杂种叶片再生体系建立

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核农学报 2014年第6期28卷 978-984页

作者：李媛黄振王沛琦李赟康向阳北京林业大学林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

以青杨杂种全同胞家系内30个基因型的叶片为外植体,研究培养基、基因型及基因型×培养基互作效应对青杨杂种叶片分化的影响,筛选适合多基因型青杨叶片分化的广谱型培养基,为对青杨从群体水平进行遗传转化和多倍体诱导奠定技术基础... 详细信息

以青杨杂种全同胞家系内30个基因型的叶片为外植体,研究培养基、基因型及基因型×培养基互作效应对青杨杂种叶片分化的影响,筛选适合多基因型青杨叶片分化的广谱型培养基,为对青杨从群体水平进行遗传转化和多倍体诱导奠定技术基础。研究结果表明:(1)基因型、培养基、基因型×培养基互作效应对青杨杂种叶片分化的影响极显著。(2)筛选出适合多基因型叶片分化的广谱型培养基为MS+6-BA0.4 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1,可满足56.7%的青杨杂种基因型叶片分化,分化率可达70%以上。研究认为:在对群体再生生产中,应充分利用基因型×培养基互作效应,通过广谱型培养基实现大多数基因型青杨杂种叶片分化体系建立,并通过特殊培养基解决特殊基因型的青杨杂种叶片分化体系建立问题。

关键词：青杨杂种多基因型叶片分化培养基

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一种高效提取杨树发病树皮总RNA的方法及应用

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植物生理学报 2014年第2期50卷 223-228页

作者：侯佳孙丰硕吴秋明杨玉巧贺伟王延伟北京林业大学森林培育与保护教育部重点实验室北京100083 北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083 北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 北京林业大学国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083 濮阳市林业科学院河南濮阳457000

对杨树发病树皮总RNA的高效提取是开展杨树抗溃疡病基因表达调控的基础,为了探讨杨树发病树皮RNA的高效提取方法,本研究以欧美杨细菌性溃疡病菌侵染后的‘中林46’杨为材料,比较了包括本研究提出的RNA提取新方法(RNA试剂盒改良法)在内的... 详细信息

对杨树发病树皮总RNA的高效提取是开展杨树抗溃疡病基因表达调控的基础,为了探讨杨树发病树皮RNA的高效提取方法,本研究以欧美杨细菌性溃疡病菌侵染后的‘中林46’杨为材料,比较了包括本研究提出的RNA提取新方法(RNA试剂盒改良法)在内的6种方法提取的总RNA的质量和浓度。结果显示,通过RNA试剂盒改良法提取的总RNA 28S rRNA条带亮度约为18S rRNA条带亮度的2倍且浓度高,表明该方法更适合感染欧美杨细菌性溃疡病的‘中林46’杨发病树皮总RNA的提取。为了验证RNA试剂盒改良法对健康杨树树皮及不同胁迫处理、组织RNA提取的适用性,进一步用该方法提取了‘中林46’杨、‘107’杨、‘北京’杨健康树皮,低氮、低磷处理的毛白杨组培苗以及白玉兰花的总RNA。结果表明,用RNA试剂盒改良法均能获取高质量的总RNA。所提取的总RNA已成功用于感染欧美杨细菌性溃疡病的杨树树皮转录组测序,以及低氮处理的毛白杨组培苗RT-PCR和荧光定量PCR实验,表明用RNA试剂盒改良法提取的总RNA可以用于后续分子实验。

关键词： RNA提取杨树侵染树皮

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