检索结果-内蒙古大学图书馆

植物生理学报 2012年第1期48卷 67-74页

作者：景寅李煦汪晓峰北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

以甘蓝型油菜‘德油五号’基因组DNA为模板,通过反向PCR扩增得到肌醇半乳糖苷合成酶基因(BnGOLS1)启动子片段,长度为827bp。PLACE和PlantCARE启动子预测工具分析表明:序列中含有TATA-Box、CAAT-Box等基本转录元件,以及ABRE、DRE、HSE、w... 详细信息

以甘蓝型油菜‘德油五号’基因组DNA为模板,通过反向PCR扩增得到肌醇半乳糖苷合成酶基因(BnGOLS1)启动子片段,长度为827bp。PLACE和PlantCARE启动子预测工具分析表明:序列中含有TATA-Box、CAAT-Box等基本转录元件,以及ABRE、DRE、HSE、w-Box等顺式作用元件。将克隆得到的BnGOLS1启动子取代pBI121中的CaMV35S启动子,构建BnGOLS1启动子控制报告基因的GUS表达载体pBI-GS-GUS,通过农杆菌介导的方法在油菜组织中进行瞬时表达。GUS染色结果表明BnGOLS1启动子可以驱动GUS基因在油菜组织中的表达。

关键词：油菜 BnGOLS1基因启动子序列分析瞬时表达

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用于DNA提取的胡杨叶片非低温保存方法研究

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生物技术世界 2013年第2期10卷 3-6页

作者：陈洪伟刘子宏康向阳北京农学院城乡发展学院北京102206 北京世纪立成园林绿化工程有限公司北京100024 北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点开放实验室北京100083

为解决在一定时间内DNA提取野外采样的携带与运输问题,本研究就用于DNA提取的胡杨叶片的非低温保存方法进行了探索。研究结果表明,在选用的5种胡杨叶片非低温保存方法中,70%乙醇,加入50mmol/LEDTA的70%乙醇以及TE缓冲液的保存效果欠佳,... 详细信息

为解决在一定时间内DNA提取野外采样的携带与运输问题,本研究就用于DNA提取的胡杨叶片的非低温保存方法进行了探索。研究结果表明,在选用的5种胡杨叶片非低温保存方法中,70%乙醇,加入50mmol/LEDTA的70%乙醇以及TE缓冲液的保存效果欠佳,保存4d时获得的DNA多降解成弥散片段;采用硅胶干燥保存和SDSDNA提取液保存方法处理的胡杨叶片,在保存20d时仍能获得完整性好、纯度高的DNA大片段。AFLP证明硅胶干燥保存和SDSDNA提取液保存的叶片可取得与新鲜叶片提取DNA相一致的实验效果,该两种方法可作为胡杨野外采样选用的保存方法。

关键词：胡杨 DNA提取硅胶干燥保存 SDS DNA提取液保存

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毛白杨PtPCP-like基因的克隆及其遗传转化初报

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北京林业大学学报 2012年第5期34卷 31-36页

作者：郭斌刘军梅李英陈仲李昊叶梅霞王佳安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室

利用滤纸吸附噬菌体-PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtPCP-like基因cDNA全长序列,测序表明克隆得到的该序列全长595bp,包含一个完整的开放阅读框,编码91个氨基酸;经BLAST分析发现,该基因包含与拟南芥花粉外被蛋白基因相似的序... 详细信息

利用滤纸吸附噬菌体-PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtPCP-like基因cDNA全长序列,测序表明克隆得到的该序列全长595bp,包含一个完整的开放阅读框,编码91个氨基酸;经BLAST分析发现,该基因包含与拟南芥花粉外被蛋白基因相似的序列,命名为PtPCP-like。采用RT-PCR技术检测PtPCP-like基因在各个组织部位的表达模式,结果显示在毛白杨的根和雄花芽中表达丰度最高,而在雌花芽部位表达丰度最低。并且构建35S∶∶PtPCP-like植物表达载体,采用农杆菌介导法将PtPCP-like基因导入烟草中,获得了一批阳性转化植株。采用qRT-PCR技术检测PtPCP-like基因在各个转基因烟草中的表达模式,结果显示在转基因烟草中各个株系均比野生型表达量高,且不同株系间相对表达量差异显著。

关键词：毛白杨烟草 qRT-PCR PtPCP—like

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家榆种子老化过程中ROS-类caspse-3途径的初步研究

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西北植物学报 2012年第5期32卷 948-955页

作者：王琼汪晓峰北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

以家榆种子为试材,在37℃、100%相对湿度下进行老化处理后,结合DAPI染色和细胞原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)、激光共聚焦技术以及生化分析,检测家榆种子人工诱导老化过程中细胞核、活性氧(ROS)和类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(ca... 详细信息

以家榆种子为试材,在37℃、100%相对湿度下进行老化处理后,结合DAPI染色和细胞原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)、激光共聚焦技术以及生化分析,检测家榆种子人工诱导老化过程中细胞核、活性氧(ROS)和类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性的变化.结果显示:随着老化程度加深,种子细胞染色质皱缩、凝聚,继而解体并被排出体外;表皮中最先发现TUNEL凋亡核,而后逐渐延伸到子叶和胚轴;老化处理5d时种子活性氧信号最强,且其与程序性死亡相关事件的发生具有时空一致性,同时在胞浆中检测到较强的caspase-3活性.研究表明,家榆种子人工老化可导致细胞程序性死亡,且存在与ROS迸发及类caspase-3相关联的信号通路.

关键词：家榆种子细胞程序性死亡原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法 H2DCFDA 类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

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牛枝子抗旱候选基因LpDREB的克隆与表达及单核苷酸多态性分析

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林业科学 2012年第6期48卷 40-46页

作者：李静袁虎威李伟北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

牛枝子为胡枝子属中最具耐旱特性的灌木树种,是研究基于单核苷酸多态性(SNP)水平的植物个体间耐旱差异机制的重要材料。以5个种源的天然牛枝子为材料,利用染色体步移技术克隆牛枝子抗旱候选基因LpDREB的全长序列,对LpDREB基因的结构和... 详细信息

牛枝子为胡枝子属中最具耐旱特性的灌木树种,是研究基于单核苷酸多态性(SNP)水平的植物个体间耐旱差异机制的重要材料。以5个种源的天然牛枝子为材料,利用染色体步移技术克隆牛枝子抗旱候选基因LpDREB的全长序列,对LpDREB基因的结构和系统进化进行分析,研究LpDREB基因的组织及诱导表达规律,分析LpDREB基因的SNP分布和类型。研究结果表明:克隆的牛枝子LpDREB基因cDNA片段全长为1611bp,具有957bp的开放阅读框,编码318个氨基酸,包含DREB基因所特有的DREBP/AP2保守区域。LpDREB基因同大豆GmDREB3基因的进化关系最近,但2个基因除保守区域外的其他区域相似性不高。牛枝子LpDREB基因受干旱胁迫诱导表达,在组织器官中的根部表达量最大,其次为叶片,茎中的表达量最少。在天然牛枝子群体中共检测到23个SNP位点,其中启动子及5'端非编码区4个,编码区17个,3'端非编码区2个;23个SNP中,12个属于转换,11个属于颠换;编码区内的17个SNPs位点中,9个属于同义突变,8个为非同义突变,同义突变与非同义突变的比值为1.1。研究结果为基于SNP水平的牛枝子抗旱候选基因的关联分析奠定基础。

关键词：牛枝子 LpDREB基因诱导表达序列分析单核苷酸多态性

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甘蓝型油菜水苏糖合成酶基因克隆及表达分析

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西北植物学报 2012年第3期32卷 439-446页

作者：丁可汪晓峰北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

以甘蓝型油菜品种‘德油5号’为试材,采用RT-PCR和RACE方法首次从油菜中获得水苏糖合成酶基因cDNA全长序列,命名为BnSTS,GenBank登录号为HQ285880.1。该cDNA全长3 210bp,包含一个长为2 619bp的开放阅读框,编码873个氨基酸。通过构建原... 详细信息

以甘蓝型油菜品种‘德油5号’为试材,采用RT-PCR和RACE方法首次从油菜中获得水苏糖合成酶基因cDNA全长序列,命名为BnSTS,GenBank登录号为HQ285880.1。该cDNA全长3 210bp,包含一个长为2 619bp的开放阅读框,编码873个氨基酸。通过构建原核表达载体,成功表达出预期蛋白。同源性比对结果显示,该基因编码蛋白与拟南芥STS相似性最高为82.08%。荧光定量PCR结果显示,基因表达水平与油菜种子发育过程中水苏糖含量变化具有相关性,与种子脱水耐性的获得具有时间一致性。该基因可能在种子脱水耐性形成机制中具有一定的作用。

关键词：甘蓝型油菜水苏糖合成酶基因克隆表达分析

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Induction of unreduced megaspores with high temperature during megasporogenesis in Populus

Induction of unreduced megaspores with high temperature duri...

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中国林学会林木遗传育种分会第七届全国林木遗传育种学术大会

作者：王君李代丽康向阳北京林业大学林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

三倍体育种是杨树遗传改良最有效的途径之一.由于未减数花粉存在受精竞争力低的问题,利用未减数花粉授粉途径诱导三倍体效率较低.为提高杨树三倍体诱导效率,本研究以'哲引3号杨'为材料,探索了利用高温处理诱导大孢子染色体加倍... 详细信息

三倍体育种是杨树遗传改良最有效的途径之一.由于未减数花粉存在受精竞争力低的问题,利用未减数花粉授粉途径诱导三倍体效率较低.为提高杨树三倍体诱导效率,本研究以'哲引3号杨'为材料,探索了利用高温处理诱导大孢子染色体加倍技术.研究发现'哲引3号杨'大孢子发生进程与雌花芽外部形态发育存在密切关系,可用以指导施加高温处理.通过对处理后所获得的子代苗木进行倍性检测,获得了146株三倍体,最高诱导率达到66.7％,充分证明施加高温诱导大孢子染色体加倍是杨树三倍体诱导的理想途径.施加41和44℃均适合于大孢子染色体加倍.细胞学分析表明粗线期至双线期是高温诱导'哲引3号杨'大孢子染色体加倍的最有效始处理时期.此外,处于减数第二次分裂过程的大孢子母细胞亦可受高温处理获得减数第二次分裂核复原型(SDR)2n大孢子.研究所获得的来源于减数第一次分裂核复原型(FDR)和减数第二次分裂核复原型2n大孢子受精的三倍体子代具有不同的杂合性,对于进一步开展杨树遗传学研究和制定育种计划具有重要价值.

关键词：杨树三倍体育种未减数大孢子品种资源

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水氮耦合效应对毛白杨无性系人工林林分蓄积量与经济效益的影响

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北京林业大学学报 2012年第1期34卷 25-31页

作者：任忠秀聂立水张志毅张强宋连君李赟北京林业大学水土保持与荒漠化防治教育部重点实验室北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室河北省威县苗圃场

为研究水氮耦合效应对毛白杨无性系人工林林分蓄积量与经济效益的影响,在河北省威县苗圃场选择4个毛白杨无性系1316、BT17、B331、S86人工林林分,采用裂区设计进行了连续4年田间试验研究。结果表明:水氮对4个毛白杨无性系林分蓄积量与... 详细信息

为研究水氮耦合效应对毛白杨无性系人工林林分蓄积量与经济效益的影响,在河北省威县苗圃场选择4个毛白杨无性系1316、BT17、B331、S86人工林林分,采用裂区设计进行了连续4年田间试验研究。结果表明:水氮对4个毛白杨无性系林分蓄积量与经济效益有显著影响,各因素对林分蓄积量影响的次序为:水>氮>水氮交互,其中水、氮存在正交互作用。经模型寻优得出4个毛白杨无性系1316、BT17、B331、S86的水氮最佳经济效益组合:当施氮量分别为380kg/hm2(300g/株)、457kg/hm2(360g/株)、472kg/hm2(371g/株)、508kg/hm2(400g/株),土壤水分分别控制在田间持水量的76.92%、80.10%、81.46%、84.86%时,林分蓄积量分别达86.33、149.92、163.45、200.28m3/hm2;相应的纯收入分别为32866、69519、77418、98630元/hm2,分别比对照(W1N0)的纯收入增加了69.87%、82.82%、80.15%、81.45%。每公顷无性系S86的林分蓄积量分别是无性系1316的2.3倍、BT17的1.3倍、B331的1.2倍。每公顷无性系S86的纯收入分别是无性系1316的2.9倍、BT17的1.4倍、B331的1.3倍。可见S86在高水氮条件下为该地区最速生、丰产的毛白杨无性系。

关键词：毛白杨无性系田间试验水氮耦合效应蓄积量经济效益

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毛白杨PtLFY基因启动子的克隆及其瞬时表达分析

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中国生物工程杂志 2012年第4期32卷 41-46页

作者：李昊陈仲李英王佳安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083

为了研究毛白杨LEAFY同源基因PtLFY的表达调控规律,利用PCR技术从毛白杨基因组DNA中克隆出PtLFY基因上游一段1575 bp的序列。经PLACE、PlantCARE在线软件分析表明,该序列含有TATA-BOX、CAAT-BOX等启动子基本元件,另外,还包含干旱诱导的... 详细信息

为了研究毛白杨LEAFY同源基因PtLFY的表达调控规律,利用PCR技术从毛白杨基因组DNA中克隆出PtLFY基因上游一段1575 bp的序列。经PLACE、PlantCARE在线软件分析表明,该序列含有TATA-BOX、CAAT-BOX等启动子基本元件,另外,还包含干旱诱导的MYB结合位点、脱落酸(ABA)响应元件、光响应元件等其他一些调控序列。因此,PtLFY的表达可能受干旱、ABA、光照等因子的调控。利用FootPrinter在线软件对毛白杨等6个物种的LFY同源基因启动子进行比对,发现不同物种的启动子相对保守,但也存在差异,说明LFY基因在功能上具有相似性,但存在一定差异。在序列分析的基础上,构建由PtLFY启动子驱动GUS报告基因的植物表达载体,命名为PtLFYp1304。通过农杆菌介导的方法转化烟草,对该启动子进行瞬时表达研究,结果表明PtLFY启动子可以驱动GUS基因在烟草根、茎、叶和花器官中表达,但在根、茎、叶中仅微弱表达,表达强度明显低于CaMV35S启动子,而在花萼和雄蕊中表达强烈。

关键词：毛白杨 LEAFY 启动子瞬时表达

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毛白杨蔗糖合酶基因PtSUS1的克隆及其表达模式分析

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中国细胞生物学学报 2012年第3期34卷 240-249页

作者：李英陈仲李昊郭斌王佳安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083

蔗糖合酶（sucrose synthase）与植物库强调节、次生壁的形成和纤维素合成等有着密切的联系,其中在纤维素合成过程中的作用尤为显著。本研究根据我们已获得的毛白杨PtSUS1基因片段设计引物,采用RACE技术,获得了毛白杨PtSUS1的基因序列,... 详细信息

蔗糖合酶（sucrose synthase）与植物库强调节、次生壁的形成和纤维素合成等有着密切的联系,其中在纤维素合成过程中的作用尤为显著。本研究根据我们已获得的毛白杨PtSUS1基因片段设计引物,采用RACE技术,获得了毛白杨PtSUS1的基因序列,测序结果显示该基因序列全长为2 669 bp,包括一个完整的阅读框,编码805个氨基酸。通过Blast检索分析表明,PtSUS1与拟南芥、巨桉、陆地棉、温州蜜柑、毛果杨SUS1的核酸和氨基酸序列的同源性分别达到76%~97%和82%~97%。运用生物信息软件对PtSUS1编码的蛋白进行了二级结构预测和功能位点分析,结果显示该蛋白氨基酸序列包括两个功能域,存在可能的磷酸化位点38个,无跨膜结构域存在。系统进化分析表明PtSUS1与PtSUS2关系最为接近。RT-PCR分析结果显示,PtSUS1在被检测的毛白杨根、茎、叶及雌雄花芽组织和器官中均有表达,呈现组成型表达模式。该研究为进一步深入探索毛白杨蔗糖合酶基因PtSUS1的功能奠定了基础。

关键词：蔗糖合酶毛白杨克隆表达模式纤维素合成

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