检索结果-内蒙古大学图书馆

分子植物育种 2009年第6期7卷 1120-1129页

作者：杨彩云尹伟伦夏新莉北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室北京100083

为了研究甘露糖正向筛选体系在拟南芥转化中的有效性,本研究参照GenBank上公布的PMI基因序列,通过PCR从大肠杆菌克隆了6-磷酸甘露糖异构酶(6-phosphomannose isomerase,PMI)基因,替换植物表达载体pCAMBIA1301中的潮霉素磷酸转移酶(hygro... 详细信息

为了研究甘露糖正向筛选体系在拟南芥转化中的有效性,本研究参照GenBank上公布的PMI基因序列,通过PCR从大肠杆菌克隆了6-磷酸甘露糖异构酶(6-phosphomannose isomerase,PMI)基因,替换植物表达载体pCAMBIA1301中的潮霉素磷酸转移酶(hygromycin phosphotransferase,HPT)基因,并将以CaMV35S和AmCBL1P两种启动子调控的沙冬青AmCBL1基因成功地构建到重组载体pPMI上,并导入根癌农杆菌E-HA105中,然后通过农杆菌花序浸染法转入拟南芥。将获得的阳性植株通过GUS组织化学法鉴定、氯酚红(chlorophenol red,CPR)法及PCR检测,证明PMI基因已经转入拟南芥中。在不使用抗生素和除草剂的情况下这种筛选体系为转基因拟南芥筛选提供了更加安全有效的方法,并且为以后AmCBL1基因的功能验证及植物抗逆性的改良奠定了基础。

关键词：磷酸甘露糖异构酶(PMI)基因甘露糖 AmCBL1 遗传转化拟南芥

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Rex-1对Oct4转录活性的调控

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中国生物工程杂志 2009年第9期29卷 17-21页

作者：郭允倩饶艳华赵元裴端卿清华大学医学院生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100084 中国科学院广州生物医药与健康研究院再生生物学国家重点实验室广州510663 北京林业大学林木育种国家工程实验室林木、花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

Rex-1和Oct4是在多能性细胞中特异表达的转录因子,而Rex-1的生物学功能及其调控胚胎干细胞(ES细胞)多能性和分化能力的机制尚不清楚。实验探讨了Rex-1和Oct4的相互关系,利用免疫荧光实验和免疫共沉淀实验证明了Rex-1和Oct4两种蛋白共同... 详细信息

Rex-1和Oct4是在多能性细胞中特异表达的转录因子,而Rex-1的生物学功能及其调控胚胎干细胞(ES细胞)多能性和分化能力的机制尚不清楚。实验探讨了Rex-1和Oct4的相互关系,利用免疫荧光实验和免疫共沉淀实验证明了Rex-1和Oct4两种蛋白共同定位于细胞核中,证明二者之间有直接的相互作用。进一步的活性分析表明Rex-1能够抑制Oct4的转录激活活性。这些数据提供了一种新的调控Oct4活性的机制。

关键词： ES细胞转录因子 Rex-1 Oct4

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p300通过homeobox结构域增强Nanog的转录激活活性

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中国生物工程杂志 2009年第10期29卷 1-5页

作者：郭允倩陈默马天骅裴端卿清华大学医学院生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100084 中国科学院广州生物医药与健康研究院再生生物学国家重点实验室广州510663 北京林业大学林术育种国家工程实验室林木、花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

胚胎干细胞(ES细胞)能够不断地进行自我更新来维持其多能性,很多转录因子共同调控着ES细胞的自我更新和多能性,Nanog就是其中之一,然而Nanog维持ES细胞多能性的机制并不清楚。p300是真核生物中普遍存在的转录辅助因子,与许多转录因子共... 详细信息

胚胎干细胞(ES细胞)能够不断地进行自我更新来维持其多能性,很多转录因子共同调控着ES细胞的自我更新和多能性,Nanog就是其中之一,然而Nanog维持ES细胞多能性的机制并不清楚。p300是真核生物中普遍存在的转录辅助因子,与许多转录因子共同作用调控下游基因的表达。为探索p300是不是能够影响Nanog的转录活性,我们在细胞中共转Nanog(或突变体)及报告基因和p300,结果表明p300能够通过homeobox结构域增强Nanog的转录激活活性。

关键词： ES细胞 Nanog p300 homeobox结构域转录活性

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植物DNA甲基化调控因子研究进展

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遗传 2008年第4期30卷 426-432页

作者：夏晗刘美芹尹伟伦卢存福夏新莉北京林业大学生物科学与技术学院国家教育部林木花卉遗传育种与基因工程重点开放实验室

DNA甲基化是重要的植物基因组表观遗传修饰。植物中DNA甲基化的建立与维持是由多个调控因子协同作用的结果。不同的甲基转移酶类能直接作用于不同位点胞嘧啶甲基化,其中MET1主要负责保持原初CG位点的甲基化,CMT3主要负责保持CNG位点的... 详细信息

DNA甲基化是重要的植物基因组表观遗传修饰。植物中DNA甲基化的建立与维持是由多个调控因子协同作用的结果。不同的甲基转移酶类能直接作用于不同位点胞嘧啶甲基化,其中MET1主要负责保持原初CG位点的甲基化,CMT3主要负责保持CNG位点的甲基化,并由DRM与CMT3的协同从头甲基化作用来补偿其他相关序列的甲基化。这些甲基转移酶与染色质重塑解旋酶和组蛋白修饰因子协同改变染色质的结构,行使表观遗传的功能。DNA转葡糖基酶有去甲基化活性从而减轻基因沉默。文章综述了以上植物DNA甲基化调控因子的生物学功能及其之间的相互作用和近年来的研究进展,以更好的理解DNA甲基化的建立、保持和去除的机制。

关键词： DNA甲基化表观遗传组蛋白染色质

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盐胁迫对胡杨液泡膜H^+ATPase水解活性的影响

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新疆农业大学学报 2003年第2期26卷 43-48页

作者：马挺军向远寅王沙生中国农业大学食品科学与营养工程学院北京100083 新疆农业大学林学院乌鲁木齐830052 北京林业大学生物学院国家林业局林木花卉育种生物工程重点实验室北京100083

胡杨细胞经 50mmol·L- 1 NaCl处理 1 0d后 ,泡膜液H+ ATPase,PPiase水解活性都增加了 ,说明胡杨具有盐生植物的特性。盐胁迫对专一性抑制剂bafilomycinA1 ,DCCD更敏感 ,说明盐处理下胡杨液泡膜H+ ATPase与bafilomycinA1 ,DCCD结合... 详细信息

胡杨细胞经 50mmol·L- 1 NaCl处理 1 0d后 ,泡膜液H+ ATPase,PPiase水解活性都增加了 ,说明胡杨具有盐生植物的特性。盐胁迫对专一性抑制剂bafilomycinA1 ,DCCD更敏感 ,说明盐处理下胡杨液泡膜H+ ATPase与bafilomycinA1 ,DCCD结合位点上的构象可能发生了一定的变化。从Mg2 + ,ATP依赖性 ,NO3- 和bafilomycinA1 抑制特性、Cl- 激活特性证明胡杨液泡膜H+ ATPase是典型的V H+ ATPase。盐胁迫后 ,对底物ATP的亲和力增强。

关键词：胡杨液泡膜 H^+ATPase 盐胁迫 H^+-PPiase

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胡杨悬浮细胞的生长及液泡膜微囊的制备

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新疆农业大学学报 2003年第3期26卷 55-59页

作者：马挺军白根本向远寅王沙生中国农业大学食品科学与营养工程学院北京100083 北京中医药大学中药学北京100029 新疆农业大学林学院乌鲁木齐830052 北京林业大学生物学院国家林业局林木花卉育种生物工程重点实验室北京100083

　改进了胡杨细胞悬浮培养体系,细胞得率提高了3倍多。做出了胡杨悬浮细胞的生长曲线,以培养12～15d为宜。摸索了胡杨细胞破壁技术,使用了研磨、超声、捣碎、FrenchPress法。从蛋白产率、V H+ATPase活力、反应潜势三个方面考虑选用捣碎... 详细信息

　改进了胡杨细胞悬浮培养体系,细胞得率提高了3倍多。做出了胡杨悬浮细胞的生长曲线,以培养12～15d为宜。摸索了胡杨细胞破壁技术,使用了研磨、超声、捣碎、FrenchPress法。从蛋白产率、V H+ATPase活力、反应潜势三个方面考虑选用捣碎法,结合差速离心和蔗糖密度梯度分离纯化液泡膜微囊,完善了从胡杨细胞分离纯化液泡膜微囊的试验流程,从而使液泡膜H+ATPase的研究成为可能。

关键词：胡杨悬浮细胞液泡膜 H^+ATPmse

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银杏木质部特异定位表达基因启动子在转基因烟草中的功能研究

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北京林业大学学报 2002年第1期24卷 1-4页

作者：曾庆银陆海傅学奇王沙生蒋湘宁吉林大学生命科学学院北京林业大学森林生物学实验中心国家林业局树木花卉育种生物工程重点实验室

为了研究银杏GRP 1 8启动子在木本植物中的调控制特性 ,用从银杏细胞壁形成及纤维素生物合成密切相关的 ,并定位于形成层木质部维管组织细胞表达的富甘氨酸蛋白质基因 (GRP 1.8)的启动子与GUS报告基因构建的表达载体转化烟草 ,经过South... 详细信息

为了研究银杏GRP 1 8启动子在木本植物中的调控制特性 ,用从银杏细胞壁形成及纤维素生物合成密切相关的 ,并定位于形成层木质部维管组织细胞表达的富甘氨酸蛋白质基因 (GRP 1.8)的启动子与GUS报告基因构建的表达载体转化烟草 ,经过Southernblotting鉴定 ,得到一批转化再生植株 .经GUS组织化学检测 ,发现转基因烟草的茎木质部呈现GUS染色阳性 ,初步证明银杏GRP 1 8基因启动子确有韧皮部表达特性。

关键词：银杏富甘氨酸蛋白质基因启动子 GUS报告基因转基因烟草木质部特异性定位表达

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胡杨液泡膜微囊的纯化及其质子转运活性

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中国生物化学与分子生物学报 2000年第3期16卷 372-376页

作者：刘群录张旭家李义王沙生黄有国蒋湘宁北京林业大学生物学院森林生物学实验中心国家林业局树木花卉育种生物工程重点实验室北京100083 中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室北京100101 康涅狄格大学植物科学系美国062694067

为进一步研究液泡膜及 H+ - ATP酶在胡杨抵御盐胁迫中所起的作用 ,比较了研磨、捣碎和超声破碎三种细胞破碎方法 ,从悬浮培养的胡杨细胞中制备液泡膜微囊的效果 ;并用差速离心和不连续蔗糖密度梯度离心纯化了胡杨液泡膜微囊 .通过测定 H... 详细信息

为进一步研究液泡膜及 H+ - ATP酶在胡杨抵御盐胁迫中所起的作用 ,比较了研磨、捣碎和超声破碎三种细胞破碎方法 ,从悬浮培养的胡杨细胞中制备液泡膜微囊的效果 ;并用差速离心和不连续蔗糖密度梯度离心纯化了胡杨液泡膜微囊 .通过测定 H+ - ATP酶对 NO-3 、VO3-4和 Na N3的敏感性 ,以及焦磷酸酶质子转运活性表明 ,液泡膜微囊主要分布在 0 %～ 2 5%的蔗糖界面上 .捣碎法破碎细胞结合差速离心和蔗糖密度梯度离心可获得正向微囊比例高。

关键词： H+-ATP酶质子泵活性胡杨液泡膜微囊抗盐机理

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