检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通报 2022年第11期38卷 151-161页

作者：党瑗李维苗向修宇林善枝北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木、花卉遗传育种教育部重点实验室树木花卉育种生物工程国家林业和草原局重点实验室北京100083

油体蛋白OLE在植物油脂合成累积中具有重要调控作用。依据山杏(Prunus sibirica)不同发育阶段种子的mRNA转录组测序数据,注释获得5个具有完整开放阅读框和典型保守结构域oleosin的油体蛋白OLE家族基因,通过差异转录谱分析及RT-qPCR检测... 详细信息

油体蛋白OLE在植物油脂合成累积中具有重要调控作用。依据山杏(Prunus sibirica)不同发育阶段种子的mRNA转录组测序数据,注释获得5个具有完整开放阅读框和典型保守结构域oleosin的油体蛋白OLE家族基因,通过差异转录谱分析及RT-qPCR检测,确定与山杏种子发育及油脂累积密切相关的高表达PsOLE4基因为研究对象,克隆该基因并进行生物信息学分析、组织特异表达检测、亚细胞定位分析、遗传转化拟南芥及其种子油脂含量和脂肪酸组分测定等研究。结果显示,PsOLE4基因全长序列为378 bp,可编码含125个氨基酸且分子量为13 kD的蛋白。该蛋白为疏水性无信号肽的非分泌蛋白,含有18个磷酸化位点、2个跨膜结构域和1个高度保守的脯氨酸结(PX_(5)SP_(3)P)结构域,定位于细胞膜上。PsOLE4基因在山杏种子中的表达量显著高于茎、叶及果实,而且PsOLE4基因表达可有效促进转基因拟南芥种子的脂肪酸含量提高与油脂累积,表明山杏PsOLE4基因具有种子表达特异性,对油脂累积具有重要调控作用。研究结果为后续开展山杏种子PsOLE4功能鉴定及应用奠定基础。

关键词：油体蛋白油脂山杏种子 PsOLE4基因克隆组织表达特性亚细胞定位遗传转化功能分析

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质膜蛋白动力学的调控及其研究方法

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植物学报 2023年第4期58卷 590-601页

作者：罗鹏云钱虹萍刘艳徐昌文崔亚宁北京林业大学生物科学与技术学院林木遗传育种全国重点实验室北京100083 北京林业大学生物科学与技术学院林木育种与生态修复国家工程研究中心北京100083 北京林业大学生物科学与技术学院林木、花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 北京林业大学树木花卉育种生物工程国家林业和草原局重点实验室北京100083 微山县自然资源和规划局济宁277600

质膜蛋白是细胞膜的重要组分之一,在细胞的物质转运、离子交换、信号转导以及代谢过程中起着重要作用。质膜蛋白在膜上是运动的,生长发育和环境因素均可改变其运动方式。因此,研究影响质膜蛋白运动的因素及调控机制对于理解植物生长发... 详细信息

质膜蛋白是细胞膜的重要组分之一,在细胞的物质转运、离子交换、信号转导以及代谢过程中起着重要作用。质膜蛋白在膜上是运动的,生长发育和环境因素均可改变其运动方式。因此,研究影响质膜蛋白运动的因素及调控机制对于理解植物生长发育和应对环境改变至关重要。近年来,显微技术发展迅速,使得关于质膜蛋白动力学调控机制的研究逐步深入。该文详细介绍了质膜蛋白动力学及其影响因素,概述了近几年在质膜蛋白动力学研究中常用的显微成像技术,以期为深入研究质膜蛋白的生物学功能提供参考。

关键词：质膜蛋白动力学膜筏单分子成像技术

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石榴品种SSR指纹图谱构建及杂种父本鉴定

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园艺学报 2023年第2期50卷 265-278页

作者：王瑞洪文娟罗华赵丽娜陈颖王君北京林业大学生物科学与技术学院林木育种与生态修复国家工程研究中心林木花卉遗传育种教育部重点实验室树木花卉育种生物工程国家林业和草原局重点实验室北京100083 枣庄市石榴研究中心山东枣庄277300

以枣庄市石榴国家林木种质资源库中收集的168个石榴品种为材料,利用SSR分子标记技术构建了石榴品种资源指纹图谱,并基于指纹图谱信息,应用最大似然值法(LOD)对品种‘秋艳’和‘会理青皮软籽’的自然授粉实生苗进行了杂种筛选及父本初步... 详细信息

以枣庄市石榴国家林木种质资源库中收集的168个石榴品种为材料,利用SSR分子标记技术构建了石榴品种资源指纹图谱,并基于指纹图谱信息,应用最大似然值法(LOD)对品种‘秋艳’和‘会理青皮软籽’的自然授粉实生苗进行了杂种筛选及父本初步鉴定。22对SSR引物从168个石榴品种样品中共扩增到76个等位标记位点,其中多态性位点58个,多态性为76.3%。平均等位位点数(N_(a))、有效等位位点数(N_(e))、观测杂合度(H_(o))、期望杂合度(H_(e))分别为3.455、2.269、0.362、0.538,Shannon’s信息指数(I)平均值为0.897,多态性信息含量(PIC)介于0.330~0.692之间,平均PIC值为0.462。利用22对SSR引物可将166个石榴品种区分开,另有‘大满天红甜’和‘小满天红甜’2个品种未有效区分,有同物异名的可能;在此基础上构建了166个品种的特异指纹代码及指纹图谱二维码。基于指纹图谱信息,利用SSR标记从‘秋艳’的30个自然授粉子代实生苗中筛选到1个真杂种Q-1,疑似父本为‘峄城丰产马牙’,LOD值为5.96;从‘会理青皮软籽’的118个自然授粉子代实生苗中筛选到6个真杂种H-4、H-49、H-51、H-87、H-94和H-103,疑似父本分别为‘四川黄皮酸’‘突尼斯软籽’‘蒙自红花白皮’‘四川黄皮酸’‘突尼斯软籽’及‘蒙自红花白皮’。

关键词：石榴品种资源 SSR指纹图谱遗传多样性父本鉴定

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毛白杨GM107再生体系和遗传转化体系的建立

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分子植物育种 2025年第6期23卷 1888-1896页

作者：黄赛高凯苗得雨安新民北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木、花卉遗传育种教育部重点实验室林木花卉育种生物工程国家林业和草原局重点实验室北京100083 中国林业科学研究院亚热带林业研究所杭州311400

本研究以毛白杨优良无性系GM107为试验材料,通过带芽茎段外植体消毒、接种生根获得无菌组培苗,利用无菌苗叶片建立了高频率的再生体系,筛选出最佳叶片分化生芽培养基为MS+TDZ 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+BA 0.5 mg/L,分化生芽率约为90%,每... 详细信息

本研究以毛白杨优良无性系GM107为试验材料,通过带芽茎段外植体消毒、接种生根获得无菌组培苗,利用无菌苗叶片建立了高频率的再生体系,筛选出最佳叶片分化生芽培养基为MS+TDZ 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+BA 0.5 mg/L,分化生芽率约为90%,每小圆片生芽数可达20个。利用农杆菌介导的叶盘转化法,建立了高效的遗传转化体系,并确定了毛白杨叶片不定芽诱导卡那霉素筛选浓度为100 mg/L,不定芽生根筛选浓度为50 mg/L。Cef 250 mg/L+Tim 250 mg/L+Car 250 mg/L组合可作为筛选培养基的最佳抑菌抗生素组合。在农杆菌侵染前,对GM107小圆片外植体进行7 d预培养为宜。利用已经构建的pCAMBIA2300-VvMYBA1载体,以最佳组合进行遗传转化,获得102个转化株系,通过PCR检测,获得33个阳性株系,阳性植株达到32.35%。本研究为毛白杨基因功能研究提供了高效的遗传转化平台。

关键词：毛白杨再生体系遗传转化根瘤农杆菌

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槲树雌花和种子生长发育动态研究

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北京林业大学学报 2024年第3期46卷 17-26页

作者：祁永梁柯梦吴志勇佀化玙刘克林岳涵孙宇涵李云国家林业和草原局刺槐工程技术研究中心林木育种与生态修复国家工程研究中心林木、花卉遗传育种教育部重点实验室北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 北京市绿地养护管理事务中心北京102200

【目的】阐明槲树雌花发育的生殖周期和发育时序特征。【方法】以人工控制授粉后不同发育时期的槲树雌花为试验材料,通过形态学、生理指标测定和石蜡切片等检测方法,对授粉前后不同发育时期雌花及子房的外部形态、种子发育进程和败育动... 详细信息

【目的】阐明槲树雌花发育的生殖周期和发育时序特征。【方法】以人工控制授粉后不同发育时期的槲树雌花为试验材料,通过形态学、生理指标测定和石蜡切片等检测方法,对授粉前后不同发育时期雌花及子房的外部形态、种子发育进程和败育动态进行观察。【结果】(1)在雌花整个生长发育过程,刺苞逐渐变硬,苞片由绿转黄,柱头不断萎缩,花柱不断缩短;子房体积不断膨大,外围壳斗逐渐增厚,于授粉后140 d左右形成棕褐色橡子。(2)授粉后17 d,胚珠发育完成;授粉后30 d,胚囊发育成熟;授粉后38 d,初生胚乳核出现,原胚形成;之后经过了大约13 d休眠后,依次经历球型胚、心型胚、鱼雷胚和子叶胚的分化;而胚乳作为滋养组织,一直处于高度分裂状态,在种子成熟期被子叶全部吸收利用,最终收获无胚乳的成熟种子。(3)初步明确了槲树种胚在整个生长周期内共存在2次败育高峰期,分别在授粉后69 d和99 d。(4)种子败育的表观形态主要表现为败育胚子房壁褐化、胚珠皱缩,显微结构上则主要表现为珠被发育异常、胚胎畸形或空腔胚囊。【结论】本研究建立了槲树雌花分化和种子形成过程外部形态变化与内部解剖特点之间的关系,可为今后栎属胚胎学研究、开花结实机理和胚败育机制研究提供理论依据。

关键词：槲树雌花分化种子形成胚胎发育败育

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不同培养条件及其组合对杉木无性系T-c22组培苗不定根诱导的影响

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北京林业大学学报 2023年第1期45卷 59-69页

作者：郭琪伍越郑会全胡德活胡瑞阳韩娟李云孙宇涵林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室树木花卉育种生物工程国家林业和草原局重点实验室北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 广东省森林培育与保护利用重点实验室广东省林业科学研究院广东广州510520 中国林业科学研究院华北林业实验中心北京102300

【目的】不定根诱导是杉木优良无性系繁殖的重要手段,杉木组织培养中不定根诱导受到多种因素影响,但起主导作用的关键因素尚不清楚。本研究通过比较不同培养条件对杉木不定根诱导的影响,以期研究出最适宜杉木生根的培养因素,为后续试验... 详细信息

【目的】不定根诱导是杉木优良无性系繁殖的重要手段,杉木组织培养中不定根诱导受到多种因素影响,但起主导作用的关键因素尚不清楚。本研究通过比较不同培养条件对杉木不定根诱导的影响,以期研究出最适宜杉木生根的培养因素,为后续试验和研究奠定基础。【方法】以杉木T-c22无性系为试验材料,通过改变营养物质条件、植物生长调节剂种类及浓度、去除针叶情况、有无活性炭、光照条件以及不同光质等不同培养因素,统计杉木生根的各种指标,研究不同培养因素以及不同因素与光照之间的交互作用对杉木生根的影响。【结果】(1)光照比黑暗显著提高杉木组培苗的株高、生根率、平均根数以及平均根长,显著抑制杉木的根鲜质量。(2)白光和红光均能提高杉木的生根率,生根率达100%;白光能够显著提高杉木的生根数量;红光和蓝光均会显著降低杉木的根长,但能够显著提高杉木无菌苗的株高。(3)添加IBA、NAA等单一植物生长调节剂显著提高杉木的株高、平均生根数量、平均根长、根鲜质量以及根干质量;光照和单一生长调节剂的交互作用显著提高平均根数以及平均根长。(4)培养基中含有适量营养成分会显著提高杉木的生根率、生根数量、平均根长、平均根鲜质量以及平均根干质量;光照和有无营养的交互作用显著提高杉木的株高和平均根长。(5)去针叶显著提高杉木无菌苗株高、根的平均长度及平均干质量;光照和有无去针叶的交互作用对杉木不定根的诱导没有显著的影响。(6)活性炭显著降低杉木无菌苗的生根率、生根数量、根鲜质量以及根干质量;活性炭和光照的交互作用显著降低杉木的生根率以及平均根长。【结论】本研究中影响杉木T-c22无性系生根的因素重要性排序为:营养物质>植物生长调节剂的种类和浓度>不同光质>光照时间以及光照与其他因素的交互作用>有无去针叶和活性炭。最适宜杉木T-c22无性系生根的培养基配方为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L;最适宜杉木生根的培养条件为添加适宜的营养物质、适宜浓度的植物生长调节剂(NAA 0.5 mg/L)、去除部分针叶以及红光(16 h/d)处理。

关键词：杉木不定根诱导光照植物生长调节剂活性炭组织培养

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Halo-tag标记技术及其在植物细胞成像中的应用

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植物学报 2023年第3期58卷 475-485页

作者：钱虹萍罗鹏云刘帅徐昌文殷金环崔亚宁林金星林木育种与生态修复国家工程研究中心北京100083 林木、花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 树木花卉育种生物工程国家林业和草原局重点实验室北京100083 北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 中国林业科学研究院林木遗传育种全国重点实验室北京100091

细胞是生物体的基本结构和功能单位,其内部复杂的组织结构、相互作用及动力学过程等决定着整个生物体的生命形态和生命过程。开展活体状态下细胞结构和功能研究,对于探索和掌握生命的本质具有重要意义。随着科学技术的不断进步,一系列... 详细信息

细胞是生物体的基本结构和功能单位,其内部复杂的组织结构、相互作用及动力学过程等决定着整个生物体的生命形态和生命过程。开展活体状态下细胞结构和功能研究,对于探索和掌握生命的本质具有重要意义。随着科学技术的不断进步,一系列新的活细胞标记技术被不断革新。近年来,Halo-tag标记技术逐渐发展成为一种广泛应用的新型分子标记技术,在活细胞成像和追踪研究领域取得了极大进展,并逐渐在植物细胞成像中得到应用。该文首先系统介绍了Halo-tag标记技术的定义、分类和发展过程,然后详细介绍了Halo-tag标记技术发生脱卤有机反应的机制及其荧光配基的种类,最后从观察分子的精细定位、追踪分子的实时运动和检测分子间的相互作用3方面着重阐述了该技术在植物活细胞成像中的最新进展,以期为后续Halo-tag标记技术在植物中的潜在应用奠定理论基础并提供技术支持。

关键词：新型标记技术 Halo-tag标签 Halo-tag配基活细胞成像

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刺槐离体叶片高效再生体系的优化

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林业科学 2023年第4期59卷 68-78页

作者：韩娟李亚鹏田彦挺郭琪李云孙宇涵邓永平牛东升苏立琢李秀宇彭祚登国家林业和草原局刺槐工程技术研究中心、北京林业大学林学院北京100083 国家林业和草原局刺槐工程技术研究中心、林木育种国家工程实验室、林木、花卉遗传育种教育部重点实验室、北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 甘肃省清水县自然资源局清水741400 山西省吉县刺槐种子园吉县042200 辽宁省凌海市生态建设发展中心凌海121228

【目的】通过优化再生过程中的重要影响因素,建立刺槐离体叶片高效的再生体系,这将为刺槐苗木繁殖、诱变育种、遗传转化以及进一步开展刺槐分子育种等奠定良好的基础。【方法】以刺槐组培苗离体的叶片为外植体,观察叶片再生不定芽的整... 详细信息

【目的】通过优化再生过程中的重要影响因素,建立刺槐离体叶片高效的再生体系,这将为刺槐苗木繁殖、诱变育种、遗传转化以及进一步开展刺槐分子育种等奠定良好的基础。【方法】以刺槐组培苗离体的叶片为外植体,观察叶片再生不定芽的整个过程,探究基因型、取材时期、黑暗处理时长以及植物生长调节剂对刺槐叶片再生不定芽的影响,同时筛选适合不定芽生根的IBA浓度。【结果】1)二倍体基因型普18-22再生能力最佳;2)组培苗继代45天为最佳外植体取材时期;3)黑暗处理14天为最佳黑暗处理时长;4)最佳的叶片再生不定芽的培养基为:MS+6-BA3.0 mg·L^(-1)+KT 1.0 mg·L^(-1)+2,4-D 0.1 mg·L^(-1)+蔗糖30 g·L^(-1)+琼脂6.5 g·L^(-1);普18-22不定芽诱导率达96.67%,平均每个叶片再生7.4个不定芽;5)不定芽生根最佳培养基为:1/2MS+蔗糖30 g·L^(-1)+琼脂6.5 g·L^(-1)+IBA 0.3 mg·L^(-1);生根率达100%。【结论】以继代培养45天的二倍体刺槐组培苗普18-22叶片为外植体,接种至MS+6-BA 3.0 mg·L^(-1)+KT 1.0 mg·L^(-1)+2,4-D 0.1 mg·L^(-1)+蔗糖30 g·L^(-1)+琼脂6.5 g·L^(-1)的再生培养基中,黑暗处理14天后转移至正常光照培养,45天后将再生的不定芽转移至生根培养基1/2MS+蔗糖30 g·L^(-1)+琼脂6.5 g·L^(-1)+IBA 0.3 mg·L^(-1)中,待不定芽生根后进行炼苗移栽,得到完整的再生植株。

关键词：刺槐叶片黑暗处理植物生长调节剂再生体系

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日本落叶松胚性愈伤组织遗传转化方法的优化

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分子植物育种 2022年

作者：张艾婧蒋湘宁盖颖北京林业大学生物科学与技术学院树木花卉育种生物工程国家林业和草原局重点实验室

优化日本落叶松遗传转化方法，提高转化率，降低假阳性率，以获得生长状态良好且经连续筛选继代后保持稳定遗传的转基因胚性愈伤组织。本研究采用农杆菌侵染法，通过生长曲线确定胚性愈伤组织的对数生长期，选择合适的遗传转化受体，探...

优化日本落叶松遗传转化方法，提高转化率，降低假阳性率，以获得生长状态良好且经连续筛选继代后保持稳定遗传的转基因胚性愈伤组织。本研究采用农杆菌侵染法，通过生长曲线确定胚性愈伤组织的对数生长期，选择合适的遗传转化受体，探究不同菌液浓度和不同侵染时间对转化率的影响。观察不同共培养时间下愈伤组织的生长状态，优化脱菌处理方式。进行抗敏性试验，确定最佳的卡那霉素筛选浓度。结果表明：胚性愈伤组织经过增殖培养14 d左右达到对数生长期，分裂旺盛，是遗传转化的最佳受体材料，菌液浓度OD;为0.4时，侵染15 min，共培养2～3 d，采用静置、振荡漂洗法脱菌3次，对愈伤组织伤害度最轻。卡那霉素浓度20 mg/mL，并在恢复培养阶段（5～7 d）和筛选阶段逐步降低抗生素浓度有利于愈伤组织的生长。经过抗性筛选和PCR鉴定，成功获得转基因胚性愈伤组织，转化率65.1%，阳性率66.2%，并进一步诱导愈伤组织形成体细胞胚。本研究优化了日本落叶松遗传转化体系，为后续进行相关分子机理研究奠定了基础。

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黑果枸杞LrJAZ9基因克隆和表达模式分析

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分子植物育种 2022年

作者：徐萌李艾佳杜超秦英之陈金焕北京林业大学生物科学与技术学院林木花卉育种生物工程国家林业和草原局重点实验室国际竹藤中心

JAZ作为JA信号途径中的关键调控因子，通过调控JA信号下游基因的表达，参与植物生长发育过程中的多种生理活动如开花调控、雄蕊发育、侧根生长及生物与非生物胁迫响应等，对增强植物抗逆性有重要作用。长于中国西北地区的黑果枸杞具有...

JAZ作为JA信号途径中的关键调控因子，通过调控JA信号下游基因的表达，参与植物生长发育过程中的多种生理活动如开花调控、雄蕊发育、侧根生长及生物与非生物胁迫响应等，对增强植物抗逆性有重要作用。长于中国西北地区的黑果枸杞具有极强的耐旱耐盐碱能力，是研究植物抗逆响应机制的良好材料。我们从盐胁迫处理后的黑果枸杞转录组中筛选出了一个盐诱导表达的基因LrJAZ9，并对其进行基因克隆。系统进化分析显示LrJAZ9与拟南芥AtJAZ9亲缘关系最近，亚细胞定位显示该基因定位于细胞核中。LrJAZ9的表达模式具有时间和空间异质性，在雄蕊中表达量最高，在茎中表达量最低。盐处理植株实验表明，叶片中LrJAZ9的表达受盐诱导，随着时间的推移表达量逐渐增多，在6 h时表达量达到最高，表明LrJAZ9可能参与黑果枸杞盐胁迫响应。本研究为后续LrJAZ9基因功能研究奠定基础，也同时为林木抗逆性基因工程改良提供候选基因。

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