检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农学通报 2014年第13期30卷 10-14页

作者：任兰芳慕莹荀志丽胡旭东要笑云陆海李凤兰刘頔北京林业大学生物科学与技术学院/林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室/国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083

端粒酶具有修复延伸端粒的功能,对于维持真核生物染色体的完整性至关重要,因此对其活性的测定有着重要意义。通过大量的摸索实验,将常用于动物细胞端粒酶活性检测的端粒末端重复序列扩增法(TRAP法)运用到对植物材料的检测中来,对北方常... 详细信息

端粒酶具有修复延伸端粒的功能,对于维持真核生物染色体的完整性至关重要,因此对其活性的测定有着重要意义。通过大量的摸索实验,将常用于动物细胞端粒酶活性检测的端粒末端重复序列扩增法(TRAP法)运用到对植物材料的检测中来,对北方常见木本植物油松进行了端粒酶活性测定。基于TRAP法的原理,对体外延伸、引物选择、退火温度、电泳检测等实验条件进行优化。结果表明,油松端粒酶活性测定的最佳体外延伸条件为30℃延伸1 h,最适前导链引物和反向引物分别为TS21和ACX,PCR退火温度为61.8℃,电泳检测使用Gene Finder核酸染料染色效果更好,建立了一种有效测定木本植物油松松针叶端粒酶活性的测定方法。

关键词：油松端粒酶 TRAP法优化

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刺槐实时定量PCR分析中内参基因的选择

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林业科学 2014年第9期50卷 167-172页

作者：王金星张利军廖资亿张运根邱乾栋孙鹏孙宇涵胡瑞阳卢楠李云林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 北京风沙源育苗中心北京102115 福建省三明市国有林场管理处三明365000 福建省宁化国有林场宁化365413 中国林业科学研究院经济林研究开发中心郑州450003

实时荧光定量PCR 是由美国Applied Biosystems 公司于1996年在传统的PCR 技术基础上发展起来的一种新的核酸定量技术（ Mackay，2004），具有定量准确、灵敏度高、特异性强、重复性好及高通量等优点（Huggett et al．，2005），已成为... 详细信息

实时荧光定量PCR 是由美国Applied Biosystems 公司于1996年在传统的PCR 技术基础上发展起来的一种新的核酸定量技术（ Mackay，2004），具有定量准确、灵敏度高、特异性强、重复性好及高通量等优点（Huggett et al．，2005），已成为医学、农学、林学、微生物学等众多领域中进行基因表达和转录组分析的常用技术之一（ Postollec et al．，2011；袁亚男等，2008）。

关键词：刺槐内参基因实时荧光定量PCR GeNorm NormFinder

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华北落叶松成熟合子胚不定芽诱导及伸长研究

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中国农学通报 2014年第16期30卷 12-17页

作者：赵健李旦张金凤林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种生物工程重点开放实验室北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 西南林业大学云南生物多样性研究院昆明650224

本研究以华北落叶松成熟合子胚为外植体,进行华北落叶松离体器官发生的初步探究.试验采用不同消毒方法对华北落叶松成熟合子胚进行消毒,设计了以6-BA、NAA及蔗糖为试验因素的L934正交试验进行华北落叶松不定芽的诱导研究,并且在不定芽... 详细信息

本研究以华北落叶松成熟合子胚为外植体,进行华北落叶松离体器官发生的初步探究.试验采用不同消毒方法对华北落叶松成熟合子胚进行消毒,设计了以6-BA、NAA及蔗糖为试验因素的L934正交试验进行华北落叶松不定芽的诱导研究,并且在不定芽伸长试验中添加了少量活性炭.试验结果表明,(1)将种子在用流水冲洗12h,75％酒精消毒3 min,再转入0.1％升汞消毒10min所获得的综合效果较好;(2)光照条件下(约2000lx),DCR培养基+4 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+40 g/L蔗糖为诱导不定芽的最佳组合,其中6-BA影响作用显著,NAA、蔗糖则无显著影响;(3) 1.0 g/L活性炭对不定芽伸长有显著的促进作用,平均伸长达0.43 cm.以上研究为华北落叶松组培器官发生及进一步的遗传转化研究奠定了良好的理论与实践基础.

关键词：华北落叶松成熟合子胚外植体消毒不定芽诱导与伸长

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沙棘微扦插不定根发生的形态解剖学研究

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北京林业大学学报 2013年第2期35卷 130-133页

作者：姚景瀚李伟北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

利用石蜡切片法对沙棘微扦插不定根的发生进行形态解剖学研究。结果表明:沙棘属于诱导型生根,观察到其不定根原基起源于2个区域,一部分根原基起源于维管形成层细胞,另一部分起源于韧皮部薄壁细胞区域。沙棘不定根原基继续发育时,一部分... 详细信息

利用石蜡切片法对沙棘微扦插不定根的发生进行形态解剖学研究。结果表明:沙棘属于诱导型生根,观察到其不定根原基起源于2个区域,一部分根原基起源于维管形成层细胞,另一部分起源于韧皮部薄壁细胞区域。沙棘不定根原基继续发育时,一部分沿射线向外生长,另一部分向外生长的同时会与茎段的髓连接起来,这种现象在其他树种中尚未发现。沙棘插穗不定根的发生整体上可分为4个阶段:1)维管形成层细胞和韧皮部薄壁细胞分裂出一些排列紧密、细胞质浓、具有分生组织特点的薄壁细胞团;2)新形成的薄壁细胞团不断分裂并且脱分化,形成具有很强分生能力的不定根原基发端细胞;3)根原基发端细胞继续分裂,沿着射线向远离轴心的方向伸展,从而形成根原基;4)根原基穿过韧皮射线和皮层,向外继续朝皮孔方向发展,最终从皮孔伸出形成不定根,不定根伸出皮孔前内部维管系统发育完善并与茎部维管系统相连接。

关键词：沙棘不定根发育解剖学

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枣和酸枣基因组大小测定

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北京林业大学学报 2013年第3期35卷 77-83页

作者：吴丽萍唐岩李颖岳尹丹妮庞晓明北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室计算生物学中心

本研究旨在找出最适合枣和酸枣的流式细胞术流程,进而测定它们的基因组大小。结果显示,在所对比的5种裂解液中,WPB最适合枣属植物细胞裂解。以毛果杨为内标,通过比较待测样品和内参G0/G1期峰,计算得出6种枣属植物基因组大小。各枣品种... 详细信息

本研究旨在找出最适合枣和酸枣的流式细胞术流程,进而测定它们的基因组大小。结果显示,在所对比的5种裂解液中,WPB最适合枣属植物细胞裂解。以毛果杨为内标,通过比较待测样品和内参G0/G1期峰,计算得出6种枣属植物基因组大小。各枣品种的基因组大小有一定差异,平均基因组大小约为418.56Mb,其中:‘冬枣’的基因组大小为(393.60±4.72)Mb,即C-值为(0.40±0.01)pg;‘鲁枣2号’的基因组大小为(428.00±3.61)Mb,即C-值为(0.44±0.00)pg;‘金丝小枣’的基因组大小为(424.00±5.81)Mb,即C-值为(0.44±0.01)pg;‘孔府酥脆枣’的基因组大小为(429.60±5.03)Mb,即C-值为(0.44±0.01)pg;‘无核小枣’的基因组大小为(413.60±7.07)Mb,即C-值为(0.42±0.01)pg;酸枣的基因组大小为(441.60±4.29)Mb,即C-值为(0.45±0.01)pg。优化的枣属植物流式细胞术流程,为枣属植物的倍性鉴定奠定了基础。

关键词：流式细胞术基因组大小细胞裂解液毛果杨枣

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杨树花药激光显微切割体系的建立

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北京林业大学学报 2013年第1期35卷 139-143页

作者：张文超曹媛武佳叶郝瑞芝荆艳萍北京林业大学生物科学与技术学院、林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室 100083

鉴于以往对于杨树雄配子发育的分子调控机制的研究都基于整个花药甚至整个花序的取材,无法提供细胞特异性的表达信息,本研究建立了冷冻切片技术和激光显微切割技术联用分离杨树花药中不同发育时期的小孢子和花粉细胞的技术体系,并对其RN... 详细信息

鉴于以往对于杨树雄配子发育的分子调控机制的研究都基于整个花药甚至整个花序的取材,无法提供细胞特异性的表达信息,本研究建立了冷冻切片技术和激光显微切割技术联用分离杨树花药中不同发育时期的小孢子和花粉细胞的技术体系,并对其RNA进行了提取和检测。结果显示RNA的纯度、完整度均达到线性扩增的要求。这可以为更精确地研究杨树雄性生殖细胞发育的分子调控机制甚至为全面解析杨树雄配子发育的调控机制提供丰富的信息。

关键词：杨树花药冷冻切片激光显微切割

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华北落叶松胚性愈伤组织诱导影响因子的研究

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林业科学研究 2013年第4期26卷 454-458页

作者：韩登媛李旦赵健李慧张金凤林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室/国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室/北京林业大学生物科学与技术学院北京100083

以成熟合子胚为外植体,用完全随机、正交设计等试验方法加之组培技术来研究影响华北落叶松(Larix princi-pis-rupprechtii)胚性愈伤组织诱导的几种主要因子。结果表明:诱导胚性愈伤组织过程中的最佳灭菌方式为2%Na-ClO灭菌30 min,剥皮... 详细信息

以成熟合子胚为外植体,用完全随机、正交设计等试验方法加之组培技术来研究影响华北落叶松(Larix princi-pis-rupprechtii)胚性愈伤组织诱导的几种主要因子。结果表明:诱导胚性愈伤组织过程中的最佳灭菌方式为2%Na-ClO灭菌30 min,剥皮、去胚乳处理。其中污染率和NaClO的灭菌时间呈负相关:NaClO灭菌时间越长,污染率越低。诱导胚性愈伤组织的最佳琼脂浓度为4 g·L-1,且过高和过低的琼脂浓度不仅降低了其诱导率,提高了愈伤组织的褐化水平,也影响了外植体的发育形态。外源激素的正交试验结果表明:2,4-D是主要影响因子,对诱导率的影响显著,其次是KT,最后是6-BA。最佳的植物外源激素配比是2,4-D 1.8 mg·L-1+6-BA 0.3 mg·L-1+KT 0.3 mg·L-1。

关键词：华北落叶松体细胞胚胎发生诱导培养基胚性愈伤组织

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油菜种子发育和萌发过程中脱水耐性相关基因的cDNA-AFLP分析

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西北植物学报 2013年第4期33卷 656-663页

作者：马刚汪晓峰北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

选取甘蓝型油菜种子发育和萌发过程中与脱水耐性相关的不同时间点,采用cDNA-AFLP技术通过128对引物组合分析,共获得394条特异转录衍生片段(TDFs)。经BLAST序列比对,发现其中189条与GenBank数据库中已知功能基因同源,按其功能可分为转录... 详细信息

选取甘蓝型油菜种子发育和萌发过程中与脱水耐性相关的不同时间点,采用cDNA-AFLP技术通过128对引物组合分析,共获得394条特异转录衍生片段(TDFs)。经BLAST序列比对,发现其中189条与GenBank数据库中已知功能基因同源,按其功能可分为转录因子、基础代谢、抗逆胁迫、信号转导等相关蛋白。RT-PCR技术对差异显著性片段验证结果显示,泛素蛋白、油体蛋白、热激蛋白和一些转录因子片段均受到种子脱水诱导表达。研究结果表明,发生在种子发育和萌发过程中的脱水耐性反应非常复杂,涉及植物生命活动的诸多领域。

关键词： cDNA-AFLP 油菜种子脱水耐性 RT-PCR

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转沙冬青锌指蛋白基因AmZFPG烟草非生物胁迫抗性分析

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园艺学报 2013年第4期40卷 713-723页

作者：智冠华史军娜赵晓鑫刘胜利陈玉珍卢存福北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室教育部林木花卉遗传育种重点实验室北京100083

分析了沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)锌指蛋白基因AmZFPG在非生物胁迫下的表达特性,结果显示AmZFPG受低温、干旱、高盐胁迫诱导表达,表明该蛋白参与多种胁迫相关的信号转导和应答反应。为进一步探索AmZFPG的功能,构建了真核表达载... 详细信息

分析了沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)锌指蛋白基因AmZFPG在非生物胁迫下的表达特性,结果显示AmZFPG受低温、干旱、高盐胁迫诱导表达,表明该蛋白参与多种胁迫相关的信号转导和应答反应。为进一步探索AmZFPG的功能,构建了真核表达载体AmZFPG-pCAMBIA2300,将该基因转入烟草(Nicotiana tabacum L.),对转基因烟草T1代进行非生物胁迫分析,结果显示,转基因烟草的耐寒性、耐旱性、耐盐性均获得了提高。

关键词：沙冬青 AmZFPG基因转基因烟草非生物胁迫

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NO对铅胁迫下玉米根尖细胞的影响

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中国细胞生物学学报 2013年第4期35卷 469-475页

作者：武佳叶郝瑞芝曹媛汪晓峰宋涵荆艳萍北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

NO是很多植物对各种生物和非生物胁迫应答过程中一种关键的信号分子。该文以玉米根为材料,研究了铅(Pb)胁迫对玉米根的影响,并通过添加外源NO(SNP)和NO清除剂(cPTIO)探究NO在玉米根尖细胞应答Pb胁迫过程中的作用。结果表明:一定浓度的P... 详细信息

NO是很多植物对各种生物和非生物胁迫应答过程中一种关键的信号分子。该文以玉米根为材料,研究了铅(Pb)胁迫对玉米根的影响,并通过添加外源NO(SNP)和NO清除剂(cPTIO)探究NO在玉米根尖细胞应答Pb胁迫过程中的作用。结果表明:一定浓度的Pb能抑制玉米根生长,引起根尖细胞活力下降,在Pb胁迫的玉米根尖细胞中可以检测到TUNEL阳性信号,表明Pb可以导致玉米根尖细胞程序性死亡(PCD),该过程伴随细胞中NO、ROS含量的升高。SNP能增强Pb引起的玉米根尖细胞中H2O2和O2–.的积累,而cPTIO作用则相反,能降低Pb引起的玉米根尖细胞中ROS的积累并缓解细胞程序性死亡。上述结果说明,在玉米根尖细胞中,Pb诱导产生的NO促进了活性氧积累,在玉米根应答Pb胁迫过程中作为信号分子起重要作用。

关键词： Pb胁迫细胞程序性死亡(PCD) 一氧化氮(NO) 活性氧(ROS)

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