核酸适配体(Aptamer)是通过数富集配体系统进化技术(SELEX)从随机寡核苷酸文酸库中筛选获得的,对靶标具有高亲和力特异性结合的寡核苷酸序列,被誉为"化学抗体"[1]。毛细管电泳(CE)也是在自由溶液中分离靶标-核酸复合物,它是快速、高效筛选核酸适配体的方法之一,通常只需要1~4轮筛选就可获得蛋白质的适配体[1,2,3]。本研究基于CE-SELEX方法,首先表征靶蛋白性质并评价其与核酸库的亲和力,确定筛选策略后将筛选条件优化为孵育缓冲液10mM NaHPO-KHPO(pH7.17),0.05 mM Mg,孵育温度37℃,孵育时间25min,经3轮筛选后进行高通量测序,获得10条适配体候选序列,测得KD在低微摩尔级。进一步将适配体用于固相萃取柱的制备,用于IgGFc片段的分离及纯化。
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