检索结果-内蒙古大学图书馆

热带医学杂志 2014年第5期14卷 547-550页

作者：李劭源张国良文玉欣毛冬婷曹开源陈心春曾谷城中山大学中山医学院微生物学教研室广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广东广州510080 广东医学院附属深圳市第三人民医院肝病研究所广东深圳518112 暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院胸外科广东深圳518020

目的比较结核分枝杆菌中敏感株、多耐药株、广泛耐药株三者间基因表达的差异,为进一步针对耐药菌株的研究提供方向。方法从深圳市第三人民医院收集敏感株、多耐药株、广泛耐药株各1株,提取菌株RNA,然后构建cDNA文库,使用Genome Analyzer... 详细信息

目的比较结核分枝杆菌中敏感株、多耐药株、广泛耐药株三者间基因表达的差异,为进一步针对耐药菌株的研究提供方向。方法从深圳市第三人民医院收集敏感株、多耐药株、广泛耐药株各1株,提取菌株RNA,然后构建cDNA文库,使用Genome Analyzer IIx高通量测序仪进行全基因组测序,经过筛选比对后得到测序结果 ,再比较3个菌株间的基因表达差异。结果高通量测序后共得到基因3 968个。将耐药株与敏感株的基因进行比较,选取表达差异高于10倍的基因,筛选得到多耐药株差异基因16个、广泛耐药株差异基因10个。这些表达差异基因大部分与毒素-抗毒素系统、PE/PPE家族蛋白、金属转运蛋白相关。还在多耐药株中发现了一系列高表达的前噬菌体基因及噬菌体整合相关的基因。结论通过高通量测序筛选得到一系列耐药株差异表达基因,为未来对耐药菌株的研究提供依据。

关键词：结核分枝杆菌耐药株高通量测序

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胸腺肽a1辅助治疗肝癌Meta分析

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临床研究 2014年第9期22卷 38-38页

作者：彭亮梁延禧赵铁广州医科大学附属第二医院检验科 510260 南华大学医学院医学微生物学教研室 421001

目的:探讨胸腺肽a1对辅助治疗肝癌的效果,为胸腺肽a1用于肝癌的辅助治疗提供临床依据。方法收集国内外相关文献并进行筛选,以对照组和治疗组的六月生存率和十二月生存率作指标,利用Revman 5.0软件进行meta分析。结果治疗组六月生存率和... 详细信息

目的:探讨胸腺肽a1对辅助治疗肝癌的效果,为胸腺肽a1用于肝癌的辅助治疗提供临床依据。方法收集国内外相关文献并进行筛选,以对照组和治疗组的六月生存率和十二月生存率作指标,利用Revman 5.0软件进行meta分析。结果治疗组六月生存率和十二月生存率P值均在P<0.05水平,差别有统计学意义。结论胸腺肽a1作为肝癌治疗的辅助用药对肝癌发展有延缓作用,可延长患者生存时间,提升患者生存质量。

关键词：胸腺肽a1 肝癌 meta分析

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儿童重症肌无力患者胸腺细胞异常增生相关因素分析

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华中科技大学学报（医学版） 2013年第4期42卷 438-441页

作者：胡桂明刘萍萍李倩如高峰张清勇王宪远任景丽杜英郑州大学第二附属医院病理科郑州450014 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001 河南省医药科学研究院郑州450052

目的探讨儿童重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者胸腺细胞异常增生的机制。方法取单纯胸腺增生型MG患者胸腺组织,经病理组织切片、苏木精-伊红(HE)染色和免疫组化染色,观察患者胸腺组织的结构和分子表达特点;通过提取胸腺组织RNA和... 详细信息

目的探讨儿童重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者胸腺细胞异常增生的机制。方法取单纯胸腺增生型MG患者胸腺组织,经病理组织切片、苏木精-伊红(HE)染色和免疫组化染色,观察患者胸腺组织的结构和分子表达特点;通过提取胸腺组织RNA和基因芯片检查,分析与胸腺异常增生相关的细胞因子、膜分子及信号通路表达。结果 MG患者胸腺细胞显著增生,CD3分子呈强阳性表达,HLA-DR分子在髓质表达更明显。多种细胞因子、膜分子和信号分子表达存在异常,其中BCL2、CCL22、CCL25、CCL3、CCR7、CCR9在儿童MG患者胸腺显著增高;而CCL2、CSF3、CSF3R、CX3CL1、CXCL9、IL-1R、IFNGR2则显著降低。结论儿童MG患者胸腺细胞异常增生与IL-1R、IL-6、IFNGR2、CCL25、CCR9等细胞因子及其受体的异常表达及信号分子BCL2的异常表达有关。

关键词：重症肌无力胸腺细胞细胞因子信号转导

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荧光原位杂交技术在尿路上皮癌筛查中价值

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中华实用诊断与治疗杂志 2013年第10期27卷 951-953页

作者：胡桂明任景丽王宪远杜英杨鲲鹏郑州大学第二附属医院病理科郑州450014 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001 郑州大学第二附属医院胸外科郑州450014

目的评估尿脱落细胞学及荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测在筛查尿路上皮癌中的特异性及敏感性,分析各畸变染色体与尿路上皮癌的关系。方法对156例血尿患者(血尿组)和20例体检健康者(对照组)分别行普通... 详细信息

目的评估尿脱落细胞学及荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测在筛查尿路上皮癌中的特异性及敏感性,分析各畸变染色体与尿路上皮癌的关系。方法对156例血尿患者(血尿组)和20例体检健康者(对照组)分别行普通细胞学和FISH检测。以手术或组织活检病理检测结果验证FISH检测技术及细胞学检测结果的准确性,比较2种检测技术在尿路上皮癌筛查中的敏感性和特异性,分析3、7、17号染色体及p16位点在尿路上皮癌中的畸变概率。结果血尿组FISH检测和尿脱落细胞学检测诊断尿路上皮癌的敏感性分别为91.6%和40.2%,二者比较差异有统计学意义(χ2=33.802,P=0.000);特异性分别为95.9%和97.7%,二者比较差异无统计学意义(P>0.05);3、7、17号染色体及p16位点畸变的概率分别为63.0%、64.1%、67.4%、75.0%。结论 FISH检测可明显提高尿路上皮癌术前诊断准确性,可了解尿路上皮癌患者尿脱落细胞染色体畸变情况。

关键词：尿路上皮癌荧光原位杂交技术普通细胞学检测技术

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携带HR-GFP报告基因的DNA损伤同源重组修复检测系统的建立及初步应用

携带HR-GFP报告基因的DNA损伤同源重组修复检测系统的建立及初步...

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第四届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛

作者：李莎王欢任来峰郭连娣刘聪丁娜娜李婉宜李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川大学华西第二医院发育与干细胞研究所

目的:建立DNA损伤同源重组修复检测系统(I-SceI-HR),应用该系统制备DNA双链断裂(DSB)的人骨肉瘤细胞(U2OS)模型,探索细胞DNA损伤后的修复特性奠定基础。方法:通过分子克隆构建携带I-Sce I归位内切酶识别序列的真核表达载体pcDNA3-HR-GFP... 详细信息

目的:建立DNA损伤同源重组修复检测系统(I-SceI-HR),应用该系统制备DNA双链断裂(DSB)的人骨肉瘤细胞(U2OS)模型,探索细胞DNA损伤后的修复特性奠定基础。方法:通过分子克隆构建携带I-Sce I归位内切酶识别序列的真核表达载体pcDNA3-HR-GFP,将该质粒转染入U2OS细胞中,经G418稳定筛选。随后分别瞬时转染入携带归位内切酶I-Sce I的表达质粒pCBASCEI,以及体外经I-Sce I线性化pcDNA3-HRGFP。48h后用免疫荧光方法检测DNA双链损伤效应分子——γ-H2AX,同时观察EGFP荧光信号;72h后用Western blot检测报告蛋白EGFP的表达,评估DNA双链断裂后同源重组修复情况。结果:酶切鉴定和测序证实pcDNA3-HR-GFP真核表达载体构建成功;I-Sce I-HR系统引入U2OS细胞中后,γ-H2AX表达明显上调,荧光显微镜和Western blot均显示EGFP表达。结论:DSB细胞同源重组修复模型构建成功,I-Sce I-HR系统能够成功地诱导U2OS细胞株产生DSB,并出现同源重组修复,为进一步研究DNA同源重组信号传导提供有效的研究工具。

关键词：同源重组 DNA双链断裂 I-SceI-HR

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携带HR-GFP报告基因的DNA损伤同源重组修复检测系统的建立及初步应用

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西部医学 2013年第12期25卷 1770-1774页

作者：邓昭敏李莎李明远王欢任来峰郭连娣刘聪丁娜娜四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041 四川大学华西第二医院发育与干细胞研究所四川成都610041

目的建立DNA损伤同源重组修复检测系统(Ⅰ-Sce I-HR),应用该系统制备DNA双链断裂(DSB)的人骨肉瘤细胞(U2OS)模型,探索细胞DNA损伤后的修复特性奠定基础。方法通过分子克隆构建携带Ⅰ-Sce I归位内切酶识别序列的真核表达载体pcDNA3-HR-G... 详细信息

目的建立DNA损伤同源重组修复检测系统(Ⅰ-Sce I-HR),应用该系统制备DNA双链断裂(DSB)的人骨肉瘤细胞(U2OS)模型,探索细胞DNA损伤后的修复特性奠定基础。方法通过分子克隆构建携带Ⅰ-Sce I归位内切酶识别序列的真核表达载体pcDNA3-HR-GFP,将该质粒转染入U2OS细胞中,经G418稳定筛选。随后分别瞬时转染入携带归位内切酶Ⅰ-Sce I的表达质粒pCBASCEI,以及体外经Ⅰ-Sce I线性化pcDNA3-HR-GFP。48小时后用免疫荧光方法检测DNA双链损伤效应分子-γ-H2AX,同时观察EGFP荧光信号;72小时后用Western blot检测报告蛋白EGFP的表达,评估DNA双链断裂后同源重组修复情况。结果酶切鉴定和测序证实pcDNA3-HR-GFP真核表达载体构建成功;Ⅰ-Sce I-HR系统引入U2OS细胞中后,γ-H2AX表达明显上调,荧光显微镜和Western blot均显示EGFP表达。结论 DSB细胞同源重组修复模型构建成功,Ⅰ-Sce I-HR系统能够成功地诱导U2OS细胞株产生DSB,并出现同源重组修复,为进一步研究DNA同源重组信号传导提供了有效的研究工具。

关键词：同源重组 DNA双链断裂 Ⅰ-Sce I-HR

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Mre11多克隆抗体的制备及初步鉴定

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西部医学 2013年第3期25卷 325-328页

作者：张付平王蕾郭莲娣王海斌任来峰曾鸣刘鳐马蕾四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学和神经生物学教研室四川成都610041 四川大学华西第二医院发育与干细胞研究所四川成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041

目的原核表达人Mre11蛋白,并制备出Mre11蛋白的多克隆抗体,为研究Mre11蛋白功能奠定基础。方法以人cDNA文库为模板,构建出原核表达质粒PET41a-Mre11,然后转化受体菌*** BL21,再经IPTG诱导表达,通过采用GST亲和纯化获得GST-融合蛋白,将... 详细信息

目的原核表达人Mre11蛋白,并制备出Mre11蛋白的多克隆抗体,为研究Mre11蛋白功能奠定基础。方法以人cDNA文库为模板,构建出原核表达质粒PET41a-Mre11,然后转化受体菌*** BL21,再经IPTG诱导表达,通过采用GST亲和纯化获得GST-融合蛋白,将该融合蛋白免疫兔以制备出Mre11多抗血清,最后采用western-blot及免疫荧光等方法检测其在细胞中的特异性。结果在受体菌*** BL21中成功诱导表达出了GST-Mre11融合蛋白,免疫新西兰大白兔后获得了高效价的Mre11蛋白抗血清,IP、western-blot及免疫荧光等多种方法检测证实该抗血清能够特异性识别293T和U2OS细胞株中Mre11蛋白,并能够正确清楚检测293T和U2OS细胞株中的Mre11表达情况,具有良好的特异性和高效性。结论成功制备出了兔抗人Mre11蛋白的多克隆抗体,为深入研究Mre11蛋白在DNA损伤中的功能奠定了基础。

关键词： Mre11 多克隆抗体原核表达 MRN复合体

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Mrell多克隆抗体的制备及初步鉴定

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西部医学 2013年第3期25卷 325-328页

作者：张付平王蕾郭莲娣王海斌任来峰曾鸣刘鳐马蕾四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学和神经生物学教研室　　四川成都　　（61004l）四川大学华厦第二医院发育与干细胞研究所　　四川成都　　（610041）四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室　　四川成都　　（610041）

目的原核表达人Mrell蛋白，并制备出Mrell蛋白的多克隆抗体，为研究Mrell蛋白功能奠定基础。方法以人cDNA文库为模板，构建出原核表达质粒PET41a—Mrell，然后转化受体茵E-coliBL21，再经IPTG诱导表达，通过采用GST亲和纯化获得GST-融... 详细信息

目的原核表达人Mrell蛋白，并制备出Mrell蛋白的多克隆抗体，为研究Mrell蛋白功能奠定基础。方法以人cDNA文库为模板，构建出原核表达质粒PET41a—Mrell，然后转化受体茵E-coliBL21，再经IPTG诱导表达，通过采用GST亲和纯化获得GST-融合蛋白，将该融合蛋白免疫免以制备出Mrell多抗血清，最后采用western—blot及免疫荧光等方法检测其在细胞中的特异性。结果在受体茵E-coliBI。21中成功诱导表达出了GST—Mrell融合蛋白，免疫新西兰大白兔后获得了高效价的Mrell蛋白抗血清，IP、western—blot及免疫荧光等多种方法检测证实该抗血清能够特异性识别293T和U20S细胞株中Mrell蛋白，并能够正确清楚检测293T和U20S细胞株中的Mrell表达情况，具有良好的特异性和高效性。结论成功制备出了兔抗人Mrell蛋白的多克隆抗体，为深入研究Mrell蛋白在DNA损伤中的功能奠定了基础。

关键词： Mrell 多克隆抗体原核表达 MRN复合体

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乙型肝炎病毒基因组基本核心启动子变异分析

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南昌大学学报（医学版） 2013年第3期53卷 19-21页

作者：王园园周艳邹淑惠刘金辉南昌大学研究生院医学部南昌大学第二附属医院检验科江西省儿童医院检验科南昌330006 南昌大学基础医学院微生物学教研室

目的研究慢性乙型肝炎患者感染的HBV基因组中基本核心启动子基因变异状况。方法收集16例慢性乙型肝炎患者的血清标本,抽提血清中HBV DNA,PCR法扩增HBV BCP区基因,PCR产物测序并分析核苷酸序列中的变异位点。结果 12例成功提取DNA,其中2... 详细信息

目的研究慢性乙型肝炎患者感染的HBV基因组中基本核心启动子基因变异状况。方法收集16例慢性乙型肝炎患者的血清标本,抽提血清中HBV DNA,PCR法扩增HBV BCP区基因,PCR产物测序并分析核苷酸序列中的变异位点。结果 12例成功提取DNA,其中2例标本因PCR产物太弱,无法满足测序要求,其他10例测序标本均属于B型,与参考序列AF100309同源性最高;发现HBV BCP共有5个变异点,分别为T1753C、A1762T、G1764A、G1752A和A1775C。结论 HBV BCP变异可能影响HBV前C基因组mRNA转录,是HBV持续感染和肝病变进展的原因之一。

关键词：乙型肝炎病毒基本核心启动子突变

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烟台地区EBV相关胃癌临床病理特征及病毒基因分型

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青岛大学医学院学报 2013年第5期49卷 377-380,385页

作者：于传亭荆永正邱清芳罗兵王云青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021 烟台市烟台山医院检验科蓬莱市第二人民医院莱州市人民医院检验科

目的明确烟台地区EB病毒(EBV)相关胃癌(EBVaGC)的临床病理特征和病毒基因分型,探讨病毒基因变异与EBVaGC发生的相关性。方法收集烟台地区653例胃癌组织标本和116例健康人群咽漱液(TW)标本,分别采用原位杂交和PCR技术检测筛选EBV阳性标本... 详细信息

目的明确烟台地区EB病毒(EBV)相关胃癌(EBVaGC)的临床病理特征和病毒基因分型,探讨病毒基因变异与EBVaGC发生的相关性。方法收集烟台地区653例胃癌组织标本和116例健康人群咽漱液(TW)标本,分别采用原位杂交和PCR技术检测筛选EBV阳性标本;PCR结合限制性片段长度多态性及测序检测EBV阳性标本中1/2分型、C/D分型和F/f分型。结果共筛选和鉴定EBVaGC标本40例(6.1%)和EBV阳性TW标本42例(36.2%)。与EBV阴性胃癌比较,EBVaGC在男性中的检出率高于女性(χ2=4.998,P<0.05),在胃底贲门、胃体的检出率高于胃窦(χ2=22.766,q=4.290、5.724,P<0.05),低分化腺癌的检出率高于高分化腺癌、中分化腺癌和黏液腺癌(χ2=17.013,q=3.219～5.041,P<0.05)。40例EBVaGC中1/2型、C/D型和F/f型EBV的比例分别为90.0%/10.0%、42.5%/57.5%和97.5%/2.5%,42例TW标本中3种基因分型的比例分别为81.0%/19.0%、69.0%/31.0%和92.9%/7.1%。EBVaGC和健康人群之间1/2型、F/f型的分布差异均无统计学意义,而EBVaGC中D型EBV的检出率高于健康人群,差异有显著性(χ2=5.863,P<0.05);3种基因型综合分析,1DF型在EBVaGC的检出率高于健康人群(P=0.009)。结论烟台地区EBVaGC占胃癌的6.1%,好发于男性,主要发生在胃底贲门区和胃体(中上2/3),以低分化腺癌多见;EBVaGC中以1型、F型和D型EBV为主,D型变异可能与EBVaGC相关。

关键词：疱疹病毒4型人胃肿瘤病理学临床基因型

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