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RNA干扰抑制乳腺癌MCF-7细胞鼠双微体-2基因表达及细胞增殖的实验研究

中国医科大学学报 2014年第10期43卷 892-896页

作者：宫琦玉汲坤张丽艳王波楚琪张明璇牙克石市人民医院检验科内蒙古牙克石022150 沈阳医学院病理生理学教研室沈阳110034 内蒙古民族大学第二临床医学院病理科内蒙古民族大学分子病理学研究所内蒙古林业总医院病理科内蒙古牙克石022150 沈阳医学院沈阳110034

目的研究乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达及siRNA mdm2对肿瘤细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学方法检测乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达;将siRNA mdm2质粒转染乳腺癌MCF-... 详细信息

目的研究乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达及siRNA mdm2对肿瘤细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学方法检测乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达;将siRNA mdm2质粒转染乳腺癌MCF-7细胞,应用MTT检测siRNA mdm2对肿瘤细胞增殖的抑制作用。结果 mdm2蛋白在乳腺导管内癌组织和浸润性乳腺癌组织中的阳性表达率均为100%(18/18,20/20),在乳腺增生症组织中表达阳性率为20%(4/20)。与乳腺增生症组织比较,乳腺导管内癌组织和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白阳性表达率明显增高(P<0.01)。MTT结果表明转染pGCsiRNA-mdm2后MCF-7细胞生长受到抑制,与mock组和pGCsiRNA-scramble组比较差异有统计学意义(P<0.01)。转染pGCsiRNA-mdm2 72 h后与48 h比较,MCF-7细胞生长受抑制明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 mdm2在乳腺癌组织中存在广泛表达,其阳性表达可能促进肿瘤细胞的增殖过程。

关键词：乳腺增生症乳腺导管内癌浸润性乳腺癌鼠双微体-2 RNA干扰 mdm2

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***926人脐静脉内皮细胞株与原代细胞生物特性的比较研究

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新疆医科大学学报 2014年第1期37卷 36-39页

作者：李慧李秀娟古力热巴.夏依买旦阿曼古丽.如则吴江聂永梅新疆医科大学基础医学院生理学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第二附属医院心电图室乌鲁木齐830063

目的比较培养***926人脐静脉内皮细胞株与原代脐静脉内皮细胞(HUVECs)的优缺点及生物学特性。方法通过倒置显微镜、透射电镜形态学鉴定、Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学检查及生长曲线测定,比较2种脐静脉内皮细胞的形态、生长曲线等差异。... 详细信息

目的比较培养***926人脐静脉内皮细胞株与原代脐静脉内皮细胞(HUVECs)的优缺点及生物学特性。方法通过倒置显微镜、透射电镜形态学鉴定、Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学检查及生长曲线测定,比较2种脐静脉内皮细胞的形态、生长曲线等差异。结果透射电镜观察到原代HUVECs中发现较多WebelPalade小体,而***926细胞株较少见。免疫组织化学染色Image-Pro Plus 6.0软件进行分析***926人脐静脉内皮细胞株与原代HUVECs平均光密度值分别为(2 234.02±78.78)、(4 138.80±594.01)。原代HUVECs的染色程度明显较***926细胞株高,差异有统计学意义(P<0.01)。***926人脐静脉内皮细胞株生长曲线较原代HUVECs稳定。结论培养原代HUVECs耗时长,生长期较短,易出现杂细胞的污染,细胞的增殖能力有限,花费昂贵。***926细胞株虽生物特性较差,但其操作简便,具有一定程度的原代HUVECs所具有的生物特性,细胞均一以及增长旺盛,可用于较复杂、细胞创伤较大的体外内皮细胞的研究。

关键词： EA HY926细胞株原代人脐静脉内皮细胞细胞培养比较

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低剂量镉诱导大、小鼠肝脏基因高甲基化并伴随细胞凋亡减少及细胞增殖增多

低剂量镉诱导大、小鼠肝脏基因高甲基化并伴随细胞凋亡减少及细胞...

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中国毒理学会第四届中青年学者科技论坛

作者：王波李扬谭毅苗晓蔡露内蒙古民族大学第二临床医学院病理科吉林大学白求恩医学院病理学与病理生理学教研室美国路易斯维尔大学医学院

目的镉是一种人类致癌物质,研究表明镉致癌机理与表观遗传学改变密切有关。DNA甲基化是其中主要的机制之一。因此,本研究拟筛选出与低剂量镉暴露有关的肝脏组织甲基化基因。方法我们前期建立了低剂量镉暴露长期观察的大鼠模型。在镉组... 详细信息

目的镉是一种人类致癌物质,研究表明镉致癌机理与表观遗传学改变密切有关。DNA甲基化是其中主要的机制之一。因此,本研究拟筛选出与低剂量镉暴露有关的肝脏组织甲基化基因。方法我们前期建立了低剂量镉暴露长期观察的大鼠模型。在镉组模型中48周时观察到持续病理改变并进一步应用蛋白组学方法发现肝脏蛋白表达异常,特别是具有抗氧化生物学活性的蛋白,提示低剂量镉暴露后大鼠肝脏组织抗氧化能力下降。在前期研究基础上,我们对该模型应用甲基化DNA免疫沉淀(MeDIP)结合启动子区及CpG岛芯片高通量技术对该模型进行DNA甲基化基因进行筛选。随后对筛选出的基因进行生物信息学Gene Ontology(GO)分析,筛选出与前期结果一致的基因,然后通过小鼠52周模型应用EpiTect Methyl qPCR检测系统验证结果。结果根据基因芯片筛选标准,在符合条件的基因中,筛选出启动子区CpG岛甲基化改变的基因共1,629个,其中高甲基化675个(41.44%),低甲基化899个(55.19%),55个(3.38%)基因部分高甲基化,部分低甲基化。随后对筛选出的基因进行生物信息学GO分析,52周镉组差异甲基化基因中,高甲基化基因有25个GO队列;低甲基化基因有35个队列。结合前期观察到肝细胞凋亡减少的结果,针对与细胞死亡相关基因的GO队列进行分析,筛选出两个相关基因:CASP8基因启动子区域高甲基化;TNF基因启动子区域低甲基化。在大鼠模型中验证了两个筛选基因的表达情况。进一步小鼠镉暴露模型验证显示,在模型85周时,应用EpiTect Methyl qPCR检测系统验证CASP8基因启动子区域甲高基化,蛋白表达降低,与芯片结果一致。在Cd/5-aza组中,镉诱导的CASP8基因高甲基化能够被5-aza阻断。最后应用肝脏肿瘤标记物CK8/18对肝脏组织进行检测观察到镉组肝脏组织发生了癌前病变。结论本研究结果显示镉可以诱导肝脏整体基因高甲基化,如CASP8基因启动子区域高甲基化下调其蛋白表达,导致肝脏细胞凋亡减少,导致癌前病变发生。明确了镉在诱导肿瘤发生过程中DNA甲基化参与肿瘤发生过程,为镉诱导肝脏肿瘤发生提供理论依据;同时也为镉诱导肿瘤发生机制研究提供了新思路。

关键词：高甲基化基因启动子启动子区小鼠肝脏细胞凋亡低剂量肿瘤发生细胞增殖

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Obestatin抑制胰岛β细胞株INS-1细胞L型钙通道电流

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宁夏医科大学学报 2014年第8期36卷 849-852页

作者：陶虹施劲松任安经袁文俊曾晓荣宁夏医科大学基础医学院生理学系银川750004 第二军医大学生理学教研室上海200433 南京军区总院南京210000 第二军医大学病理生理学教研室上海200433 四川泸州医学院心血管研究所泸州646000

目的观察obestatin对胰岛β细胞株INS-1细胞L型钙通道电流的影响。方法应用穿孔全细胞膜片钳技术研究obestatin对培养的胰岛β细胞株INS-1细胞膜L型电压敏感钙通道电流(L-type calcium ion channel current,ICa,L)的影响。结果胰岛β细... 详细信息

目的观察obestatin对胰岛β细胞株INS-1细胞L型钙通道电流的影响。方法应用穿孔全细胞膜片钳技术研究obestatin对培养的胰岛β细胞株INS-1细胞膜L型电压敏感钙通道电流(L-type calcium ion channel current,ICa,L)的影响。结果胰岛β细胞株INS-1细胞钳制膜电位为-20 mV时,分别给予胰岛β细胞株INS-1细胞0nM(对照组)和1、10、100nM obestatin灌流5min后,ICa,L峰值呈浓度依赖性降低,各组为给药前的(97±8)%、(91±7)%、(60±9)%和(45±6)%。其中,10nM和100nM obestatin灌流5 min后ICa,L峰值与对照组相比显著减小(P<0.01,n=5)。胰岛β细胞株INS-1细胞钳制膜电位分别为-30、-20、-10和0mV时,给予10nM obestatin之前,其ICa,L峰值分别为(-5.48±0.69)、(-5.70±0.68)、(-5.58±0.61)和(-3.90±0.44)pA/pF,灌流10nM obestatin 5 min后,ICa,L峰值分别下降至(-3.11±0.68)、(-3.60±0.99)、(-3.26±1.03)和(-2.28±0.71)pA/pF,均明显低于obestatin给药前(P<0.01,n=5)。结论 obestatin可抑制胰岛β细胞株INS-1细胞L型钙通道电流。

关键词：肥胖抑制素胰岛β细胞株INS-1细胞电压依赖性L型钙通道膜片钳

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耐药结核分枝杆菌PhoPR双组分系统基因表达的研究

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中国病原生物学杂志 2014年第4期9卷 303-308页

作者：李文娟宝音王霞张峰章乐吴芳吴江东庄睿邬博梁晨樊超张春军张辉张万江石河子大学医学院病理生理学教研室、“新疆地方与民族高发病”教育部重点实验室新疆石河子832002 新疆乌鲁木齐市第一人民医院新疆阿克苏地区第二人民医院新疆医科大学第五附属医院

目的比较结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)原始耐药菌株与经过含不同浓度培养基培养后的菌株中PhoPR双组分系统基因表达水平的差异,研究MTB PhoPR双组分系统与MTB耐药的相关性。方法分别在原始状态下和用低浓度含药培养基... 详细信息

目的比较结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)原始耐药菌株与经过含不同浓度培养基培养后的菌株中PhoPR双组分系统基因表达水平的差异,研究MTB PhoPR双组分系统与MTB耐药的相关性。方法分别在原始状态下和用低浓度含药培养基及高浓度含药培养基培养单纯耐异烟肼MTB临床分离株(INH-MTB)、单纯耐利福平的MTB临床分离株(RFP-MTB)、单纯耐链霉素MTB临床分离株(SM-MTB)、单纯耐乙胺丁醇的MTB临床分离株(EB-MTB)、耐多药MTB临床分离株(MDR)养至对数期,提取各组MTB总RNA,并进行纯度鉴定;运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR,检测各组MTB的PhoP基因和PhoR基因的表达,比较不同耐药的MTB临床分离株PhoP基因和PhoR基因表达水平的差异。结果在低浓度抗结核药物条件下培养的INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB和MDR组MTB与原始状态下MTB相比,PhoP基因表达分别上调2.19、2.04、1.72、2.73倍,PhoR基因分别上调1.57、2.57、1.56和2.83倍,差异有统计学意义(P<0.05);在高浓度抗结核药物条件下培养,INH-MTB、RFP-MTB、SMMTB、EB-MTB和MDR组MTB中的PhoP基因表达分别上调1.79、1.44、2.10、1.27和1.97倍,PhoR基因在INHMTB、RFP-MTB、SM-MTB和MDR组MTB分别上调1.05、1.91、1.76和2.13倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PhoP和PhoR基因的差异表达与MTB的耐药性相关,提示PhoPR双组分系统与MTB耐药具有相关性。

关键词：结核分枝杆菌耐药性 PhoPR双组分系统

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红景天对肺癌多药耐药细胞A549/DDP的促凋亡作用研究

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中国实验诊断学 2014年第9期18卷 1406-1408页

作者：黎萍赵丽晶张捷李君瑶苟伟会王晶吉林大学第二医院儿科吉林长春130041 吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021 吉林大学第二医院呼吸内科吉林长春130041

目的观察红景天对人肺腺癌多药耐药细胞A549/DDP增殖和凋亡的影响,探讨其对化疗耐药的肺癌细胞的可能作用。方法以体外培养的人肺腺癌多药耐药细胞A549/DDP细胞作为研究对象,倒置显微镜观察红景天对肺癌细胞形态的影响;采用MTT法检测红... 详细信息

目的观察红景天对人肺腺癌多药耐药细胞A549/DDP增殖和凋亡的影响,探讨其对化疗耐药的肺癌细胞的可能作用。方法以体外培养的人肺腺癌多药耐药细胞A549/DDP细胞作为研究对象,倒置显微镜观察红景天对肺癌细胞形态的影响;采用MTT法检测红景天对细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、cleaved PARP的表达。结果红景天能显著抑制A549/DDP增殖并促进其凋亡,上调cleaved caspase-3及cleaved PARP的蛋白表达量。结论红景天在体外对人肺腺癌多药耐药细胞A549/DDP细胞具有显著的抑制增殖和促进凋亡作用,其机制可能与其促进凋亡相关基因cleaved caspase-3与cleaved PARP的蛋白表达有关。

关键词：红景天化疗耐药肺癌凋亡

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硫化氢与生物脂代谢

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中国动脉硬化杂志 2014年第4期22卷 421-425页

作者：徐大为范文静郭元宁屈顺林姜志胜南华大学医学院临床医学系湖南省衡阳市421001 南华大学附属第二医院湖南省衡阳市421001 南华大学基础医学博士后流动站病理生理学教研室心血管病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南省衡阳市421001

硫化氢(H2S)作为人类发现的第三种气体信号分子已引起学术界的广泛关注。关于H2S的报道研究很多,大部分集中在H2S与心血管系统的体内平衡的相关研究。然而,有关于H2S与生物脂代谢的关系的研究尚不多见。本文将从H2S的理化性质开始,介绍... 详细信息

硫化氢(H2S)作为人类发现的第三种气体信号分子已引起学术界的广泛关注。关于H2S的报道研究很多,大部分集中在H2S与心血管系统的体内平衡的相关研究。然而,有关于H2S与生物脂代谢的关系的研究尚不多见。本文将从H2S的理化性质开始,介绍H2S在机体中脂代谢的作用及其在机体脂代谢相关疾病中的作用。以H2S为基础的药物将为治疗这些疾病带来新的希望。

关键词：硫化氢脂代谢糖尿病

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Salusins及其心血管效应

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生理科学进展 2013年第3期44卷 164-168页

作者：任安经林丽严晓红袁文俊第二军医大学病理生理学教研室上海200433 第二军医大学生理学教研室上海200433 武汉大学基础医学院生理学系武汉430071 宁夏医科大学基础医学院生理学系银川750004

Salusins是一类新发现的心血管活性肽,包括由28个氨基酸组成的salusin-α和20个氨基酸组成的salusin-β。Salusins广泛分布于人和大鼠的多种组织和器官,具有降低血压、减慢心率、抑制心肌收缩、减轻心脏缺血损伤、促进心肌细胞肥大和血... 详细信息

Salusins是一类新发现的心血管活性肽,包括由28个氨基酸组成的salusin-α和20个氨基酸组成的salusin-β。Salusins广泛分布于人和大鼠的多种组织和器官,具有降低血压、减慢心率、抑制心肌收缩、减轻心脏缺血损伤、促进心肌细胞肥大和血管平滑肌细胞增殖等一系列心血管效应。值得注意的是,作为由同一前体产生的两种多肽,salusin-α和salusin-β在动脉粥样硬化的发生发展中具有相反的作用。

关键词： salusins 心脏血管动脉粥样硬化

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急性白血病患者浆细胞样树突状细胞TLR9的表达及功能分析

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第7期29卷 754-756页

作者：段丽芳张连生张晓芹王宇张红陕西中医学院病理生理学教研室陕西咸阳712046 兰州大学第二医院血液科甘肃兰州730030

目的检测Toll样受体9(TLR9)mRNA在急性白血病(AL)患者外周血浆细胞样树突状细胞(pDCs)内的表达水平及pDCs的功能。方法免疫磁珠分选13例初诊未治急性髓细胞白血病(AML)、11例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者和15例健康对照外周血pDCs,real ... 详细信息

目的检测Toll样受体9(TLR9)mRNA在急性白血病(AL)患者外周血浆细胞样树突状细胞(pDCs)内的表达水平及pDCs的功能。方法免疫磁珠分选13例初诊未治急性髓细胞白血病(AML)、11例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者和15例健康对照外周血pDCs,real time-PCR检测pDCs内TLR9 mRNA表达水平;用CpG ODN2216与pDCs共培养24 h,ELISA检测上清液中IFN-α、IL-6、TNF-α水平。结果 AML-pDC和ALL-pDCs产生的IFN-α、IL-6、TNF-α水平分别为[(378.24±89.96)pg/mL,(57.98±29.68)pg/mL,(60.24±26.75)pg/mL]、[(352.56±67.34)pg/mL,(68.78±31.45)pg/mL,(53.67±25.98)pg/mL]明显低于正常对照组[(685.86±102.16)pg/mL,(91.25±32.12)pg/mL,(86.65±28.69)pg/mL](P<0.05);AML-pDC、ALL-pDC中TLR9 mRNA的表达水平分别为0.34±0.25、0.41±0.23,均明显低于正常对照组(P<0.05)。结论急性白血病患者pDCs内TLR9 mRNA水平明显降低,可能与患者pDCs功能缺陷有关。

关键词：急性白血病浆细胞样树突状细胞 Toll样受体9

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不同起搏部位对人体心电图Tp-Te间期的影响及临床意义

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中国老年学杂志 2013年第1期33卷 52-54页

作者：刘金莎刘振华赵丽晶于波孙欢张军智闫明洲吉林大学附属中日联谊医院心内科吉林长春130021 吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室吉林大学白求恩第二医院门诊部

目的以植入起搏器患者及健康成人为研究对象,比较不同部位起搏时心电图Tp-Te(T峰-末)间期并探讨其临床应用价值。方法选择植入心脏起搏器患者及无心脏病史者,测量心电图V2、V3、V4导联的Tp-Te间期,分别比较植入起搏器组与健康成人组、... 详细信息

目的以植入起搏器患者及健康成人为研究对象,比较不同部位起搏时心电图Tp-Te(T峰-末)间期并探讨其临床应用价值。方法选择植入心脏起搏器患者及无心脏病史者,测量心电图V2、V3、V4导联的Tp-Te间期,分别比较植入起搏器组与健康成人组、右室电极位于室间隔组与心尖组、单腔起搏器组与双腔起搏器组以及双心室起搏组与单腔右室起搏组心电图Tp-Te间期。结果植入起搏器组较健康成人组Tp-Te间期明显延长(P<0.001),右室电极位于室间隔组与心尖组Tp-Te间期无显著差异(P>0.05),单腔右室起搏器组与双腔起搏器组Tp-Te间期无显著差异(P>0.05),双心室起搏组Tp-Te间期较单腔右室起搏组明显延长(P<0.05)。结论植入起搏器可能增加室性心律失常的风险,Tp-Te间期不能作为起搏器右室电极固定位置以及单、双腔起搏器选择的参考因素,双心室起搏可提高恶性心律失常的风险。

关键词：双腔起搏单腔起搏双心室起搏室间隔心尖 Tp-Te间期

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