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下调MDA-MB-231乳腺癌细胞骨硬化蛋白(SOST)可增加间接共培养的MG-63成骨细胞的成骨作用

细胞与分子免疫学杂志 2016年第11期32卷 1481-1485页

作者：程俊雄郭丹陈茜王婷黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学第二附属医院乳腺外科重庆400016

目的构建靶向抑制骨硬化蛋白(SOST)基因的小干扰RNA(siRNA)腺病毒,感染MDA-MB-231乳腺癌细胞并与MG-63成骨细胞共培养,检测对成骨相关分子表达的影响。方法针对SOST基因RNA序列设计带3个干扰片段的2对引物,以p B2B为模板,扩增"背靠... 详细信息

目的构建靶向抑制骨硬化蛋白(SOST)基因的小干扰RNA(siRNA)腺病毒,感染MDA-MB-231乳腺癌细胞并与MG-63成骨细胞共培养,检测对成骨相关分子表达的影响。方法针对SOST基因RNA序列设计带3个干扰片段的2对引物,以p B2B为模板,扩增"背靠背"排列的H1和U6启动子。两个PCR产物以Gibson DNA Assembly的方式同时连接腺病毒穿梭质粒p Ad Trace-OK,经同源重组、HEK293细胞包装获得SOST-siRNA腺病毒。感染MDA-MB-231乳腺癌细胞,实时定量PCR检测SOST mRNA的表达水平,ELISA检测SOST蛋白水平。将转染该腺病毒的MDA-MB-231细胞与MG-63成骨细胞间接共培养,实时定量PCR检测护骨因子(OPG)、骨钙蛋白(OCN)、整合素结合涎蛋白(IBSP)、核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)的表达情况。结果成功获得带3个干扰片段的腺病毒穿梭质粒,经同源重组和包装后,获得AdR-si SOST腺病毒。用该病毒感染MDA-MB-231细胞后,明显抑制SOST的表达。在乳腺癌骨转移体外模型中感染Ad-si SOST腺病毒,能导致MG-63细胞的OPG、OCN、IBSP mRNA表达上升,RANKL mRNA降低。结论在乳腺癌骨转移体外模型中感染Ad-si SOST腺病毒,能促进MG-63细胞的成骨分化,提高OPG/RANKL的比例。

关键词： SOST siRNA 腺病毒乳腺癌骨转移

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川芎嗪对肾缺血/再灌注家兔心功能的改善作用

川芎嗪对肾缺血/再灌注家兔心功能的改善作用

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中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议

作者：金可可王万铁邱晓晓毛朝鸣潘雪蓉温州医学院病理生理学教研室温州医学院病理生理学教研室温州医学院病理生理学教研室温州医学院附属第二医院内科温州医学院病理生理学教研室

目的:观察川芎嗪注射液对肾脏缺血/再灌注损伤家兔心功能的影响。方法:健康家兔14只,复制肾缺血/再灌注损伤模型。随机分为生理盐水对照组(NS,n=8)和川芎嗪治疗组(LGT,n=6)。通过四道生理记录仪连续观察缺血前、缺血后1h内和再灌注后1h... 详细信息

目的:观察川芎嗪注射液对肾脏缺血/再灌注损伤家兔心功能的影响。方法:健康家兔14只,复制肾缺血/再灌注损伤模型。随机分为生理盐水对照组(NS,n=8)和川芎嗪治疗组(LGT,n=6)。通过四道生理记录仪连续观察缺血前、缺血后1h内和再灌注后1h内不同时间点心功能的动态变化。结果:对照组家兔左心室内压最大

关键词：川芎嗪注射液动态变化川芎嗪心功能左心室内压改善作用

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RNAi沉默STAT3基因对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

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吉林大学学报（医学版） 2010年第4期36卷 640-643,F0002页

作者：赵淑华赵凡郑晶莹高丽芳赵雪俭吉林大学第二医院妇产科吉林长春130041 吉林大学第二医院骨科吉林长春130041 吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的:研究pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,阐明RNA干涉技术在卵巢癌生物治疗领域中的作用。方法:应用人卵巢癌细胞系SKOV3对15例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型,随机分为3组:对... 详细信息

目的:研究pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,阐明RNA干涉技术在卵巢癌生物治疗领域中的作用。方法:应用人卵巢癌细胞系SKOV3对15例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型,随机分为3组:对照组(生理盐水)、空质粒对照组及重组质粒组(pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3)。应用电子穿孔仪将质粒转入裸鼠移植瘤内,观察重组质粒注射后第7、14、21和28天各组裸鼠皮下移植瘤体积变化。利用Westernblotting检测重组质粒对STAT3蛋白表达的影响,采用HE及TUNEL染色方法观察肿瘤组织形态变化及细胞凋亡情况。结果:重组质粒瘤内注射对SKOV3裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制作用,与2个对照组比较,重组质粒组裸鼠移植瘤生长速度明显减慢(P<0.01)。重组质粒组瘤体内STAT3及CyclinD1、VEGF、survivin、c-myc蛋白表达明显低于2个对照组(P<0.01)。HE染色显示,重组质粒组肿瘤细胞出现大片细胞坏死,2个对照组肿瘤细胞以正常形态居多。TUNEL染色显示,重组质粒组癌组织有大量细胞凋亡,2个对照组几乎均为TUNEL阴性反应细胞。结论:pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒能明显抑制人卵巢癌细胞SKOV3裸鼠皮下移植瘤的生长。

关键词： RNA干涉 SKOV3 STAT3 卵巢肿瘤

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川芎嗪联用维生素C对实验性缺血-再灌注损伤肝脏能量代谢的影响

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中国新药与临床杂志 2007年第6期26卷 443-445页

作者：陈瑞杰王万铁金可可王卫宋张娟陈锡文温州医学院附属第二医院药剂科浙江温州325027 温州医学院病理生理学教研室浙江温州325035 温州医学院实验动物中心浙江温州325035

目的:探讨川芎嗪(LGT)、维生素C(VitC)联合使用对肝缺血-再灌注损伤(HIRI)时肝细胞能量代谢的影响及其机制。方法:实验兔40只,随机分为肝缺血-再灌注组(A组)和肝缺血-再灌注+ LGT治疗组(B组)、肝缺血-再灌注+VitC治疗组(C组)和肝缺血-... 详细信息

目的:探讨川芎嗪(LGT)、维生素C(VitC)联合使用对肝缺血-再灌注损伤(HIRI)时肝细胞能量代谢的影响及其机制。方法:实验兔40只,随机分为肝缺血-再灌注组(A组)和肝缺血-再灌注+ LGT治疗组(B组)、肝缺血-再灌注+VitC治疗组(C组)和肝缺血-再灌注+LGT+VitC治疗组(D组)。在再灌注45min时,分别检测肝组织内三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)含量、总腺苷酸量(TAN)、能荷(EC)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及一氧化氮代谢产物(NO_2^-/NO_3^-)水平。结果:与A组比较,D组肝组织内ATP、TAN、EC、NO_2^-/NO_3^-含量及SOD活性均明显增高(P＜0．05,P＜0．01),MDA含量显著减少(P＜0．01)。结论:LGT联用VitC可通过降低体内氧自由基水平、提高一氯化氮水平,而改善缺血-再灌注损伤肝脏的能量代谢。

关键词：再灌注损伤肝脏能量代谢抗坏血酸川芎嗪

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新的β_2m基因打靶载体构建方法的建立

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中国病理生理杂志 2003年第7期19卷 889-893页

作者：孟瑛李树浓黄绍良中山大学第二附属医院儿科广东广州510120 中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510089

目的 :采用常规方法 (同源片段的插入方向与Neo基因相同 )构建载体的同时 ,将两条同源臂反向插入Neo基因的两侧 ,构建新型小鼠 β2 m基因替换型打靶载体 β2 m -pPNT ,即增加 3’同源臂的长度 ,探讨同源臂插入位置和长度变化对同源重组... 详细信息

目的 :采用常规方法 (同源片段的插入方向与Neo基因相同 )构建载体的同时 ,将两条同源臂反向插入Neo基因的两侧 ,构建新型小鼠 β2 m基因替换型打靶载体 β2 m -pPNT ,即增加 3’同源臂的长度 ,探讨同源臂插入位置和长度变化对同源重组率的影响。方法 :设计和合成引物 ,经PCR从小鼠 β2 m -pSV2△HXgpt基因组克隆分别扩增出长度为 0 8kb和 4 2kb的 β2 m基因片段 ,作为 5’和 3’同源臂 ,分别反向插入载体pPNT的Neo基因上游和下游 ,构建小鼠 β2 m基因替换型打靶载体 β2 m -pPNT。结果 :经过PCR、限制性内切酶及DNA序列测定 ,证实此两条同源臂包含小鼠 β2 m的起始区和表达区 ,表明载体构建成功。结论 :PCR技术是构建基因打靶载体的简单而可靠方法。增加 3’同源臂的长度对研究提高胚胎干细胞基因敲除的同源重组率提供新的途径。

关键词：小鼠主要组织相容性复合物基因,β2m 基因打靶序列分析

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银杏叶提取物防治心脑血管疾病的研究进展

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中国新药杂志 2016年第1期25卷 76-81页

作者：李淑琴朱嘉宝武宇洲河北医科大学基础医学院病理生理学教研室河北医科大学第二医院心血管内科

银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract)是目前国际上使用最为广泛的中药提取物之一,主要活性成分是银杏黄酮和银杏内酯类化合物。心脑血管疾病是全球主要的病死原因,对其防治具有重要的意义。近年来的研究表明,银杏叶提取物对心脑血管疾... 详细信息

银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract)是目前国际上使用最为广泛的中药提取物之一,主要活性成分是银杏黄酮和银杏内酯类化合物。心脑血管疾病是全球主要的病死原因,对其防治具有重要的意义。近年来的研究表明,银杏叶提取物对心脑血管疾病的防治有多环节、多靶点、不良反应小的优势,应用前景良好。因此,本文综述了近年来银杏叶提取物对心脑血管疾病的防治作用和机制。

关键词：银杏叶提取物心血管疾病脑血管疾病 EGb 761

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PINK1/Parkin介导的线粒体自噬及其在肝脏疾病发生发展中的作用机制

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临床肝胆病杂志 2020年第7期36卷 1663-1665页

作者：张浩张悦赵文武张敬各河北医科大学第二临床医学院石家庄050017 河北医科大学病理生理学教研室石家庄050017

线粒体自噬是指细胞通过自噬的机制选择性地清除受损线粒体的过程。线粒体自噬的调控机制有几种,但PINK1/Parkin途径被认为是线粒体自噬的主要途径,这一自噬机制在帕金森等多种疾病的发病中有重要作用。介绍了PINK1/Parkin介导的线粒体... 详细信息

线粒体自噬是指细胞通过自噬的机制选择性地清除受损线粒体的过程。线粒体自噬的调控机制有几种,但PINK1/Parkin途径被认为是线粒体自噬的主要途径,这一自噬机制在帕金森等多种疾病的发病中有重要作用。介绍了PINK1/Parkin介导的线粒体自噬机制及其在肝脏相关疾病(如非酒精性脂肪性肝病、肝纤维化、肝细胞癌等)中的作用,以期为疾病的治疗提供新的线索和思路。

关键词：自噬 PINK1/Parkin通路非酒精性脂肪性肝病肝硬化癌,肝细胞

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α干扰素的中枢镇痛作用

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中国神经科学杂志 1999年第2期15卷 131-133页

作者：宋连霞蒋春雷路长林由振东王云霞王成海刘新垣崔瑞耀第二军医大学神经生物学教研室中国科学院上海生物化学研究所青岛医学院病理生理学教研室

采用侧脑室给药，以电刺激引起大鼠甩尾反应为指标，测定动物的痛阈。结果显示α干扰素（ＩＦＮα）具有提高大鼠痛阈的作用，其镇痛作用依赖ＩＦＮα剂量，此作用能被抗ＩＦＮα单克隆抗体所阻断。纳洛酮、μ阿片受体特异性拮抗剂β－... 详细信息

采用侧脑室给药，以电刺激引起大鼠甩尾反应为指标，测定动物的痛阈。结果显示α干扰素（ＩＦＮα）具有提高大鼠痛阈的作用，其镇痛作用依赖ＩＦＮα剂量，此作用能被抗ＩＦＮα单克隆抗体所阻断。纳洛酮、μ阿片受体特异性拮抗剂β－ＦＮＡ能够阻断ＩＦＮα的镇痛作用，而δ和κ阿片受体特异性拮抗剂则没有这一作用，表明ＩＦＮα的中枢镇痛作用由μ阿片受体所介导。

关键词： α干扰素痛阈阿片受体侧脑室镇痛

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催产素受体与肿瘤

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中国病理生理杂志 2003年第4期19卷 554-557页

作者：崔瑞耀王永久由振东青岛大学医学院病理生理学教研室山东青岛266021 第二军医大学神经生物学研究室上海200433

Oxytocinreceptor(OTR)isamemberofG -proteincoupledreceptor ,whichhasbeen foundinmanytumorsandcancercelllines .Manystudiesrevealedoxytocin(OT)mayinhibitthetumorand cancercellgrowthandproliferation ,butthemechanismofthisinhibitionisnotwellknown .Someexperiments indicatedcAMP -PKAsystemparticipatesinthesignaltransductionthatoxytocininhibitsthecancercellpro liferation .However ,otherexperimentsshowedthesignaltransductionforoxytocinintheHs5 78Tcarcinosaco macellisthesameasthatinthenormalcells .Inthisreview ,therelationshipbetweenOTRandtumorsare summarized . [

关键词：催产素受体肿瘤信号转导

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新型缺氧保护因子胞红蛋白的研究进展

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医学研究生学报 2015年第9期28卷 978-983页

作者：李维范文静屈顺林南华大学医学院病理生理学教研室衡阳医学硕士研究生421001 南华大学附属第二医院急诊科衡阳421001

作为珠蛋白家族的第四名成员,胞红蛋白在缺氧条件下的表达明显增强。其在生物体内分布广泛,具有多种重要的生物学功能,如抗氧化应激、抗纤维化、神经保护作用以及在心血管疾病、癌症等和缺氧有关的疾病中起到一定的保护作用。文中综合... 详细信息

作为珠蛋白家族的第四名成员,胞红蛋白在缺氧条件下的表达明显增强。其在生物体内分布广泛,具有多种重要的生物学功能,如抗氧化应激、抗纤维化、神经保护作用以及在心血管疾病、癌症等和缺氧有关的疾病中起到一定的保护作用。文中综合了近年来的研究成果,就胞红蛋白的结构与分布,抗纤维化、抗癌、促进肌肉再生等相关生理功能以及在缺氧下的表达调节和表达机制作一综述。

关键词：胞红蛋白生理功能缺氧表达机制

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