检索结果-内蒙古大学图书馆

Wnt/β-catenin信号通路活化对表皮细胞表型变化的影响

Wnt/β-catenin信号通路活化对表皮细胞表型变化的影响

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第二十次中日整形外科学术交流会暨中国康复医学会修复重建外科第十七次学术交流会暨第四届全国颅颌面整形美容外科专业组学术会议暨第一次修复重建外科学会皮瓣学组学术会议

作者：张翠萍解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的探讨Wnt/β-catenin信号通路活化对表皮细胞表型变化的影响。方法差速贴壁法分离成熟表皮细胞。将Wnt通路活化剂氯化锂(LiCl)(20mM)和GSK-3β抑制子(15μM)加入到细胞培养上清中,诱导6天后观察细胞的形态

关键词：信号通路细胞表型 Wnt catenin

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快速建立人汗腺细胞培养系的实验方法研究

快速建立人汗腺细胞培养系的实验方法研究

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作者：许永安黄沙张翠萍孙同柱付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的快速体外分离、培养人汗腺细胞培养系。方法在通过采用临床治疗过程中制作微粒皮的方法来缩小皮肤微粒大小、增加胶原酶Ⅱ型的浓度以及改变胶原酶Ⅱ型酶解消化皮肤的反应时的温度条件,进一步加快人皮肤汗腺细胞的获取速度。通过与... 详细信息

目的快速体外分离、培养人汗腺细胞培养系。方法在通过采用临床治疗过程中制作微粒皮的方法来缩小皮肤微粒大小、增加胶原酶Ⅱ型的浓度以及改变胶原酶Ⅱ型酶解消化皮肤的反应时的温度条件,进一步加快人皮肤汗腺细胞的获取速度。通过与现有的汗腺细胞分离方法做对比,进一步证实此方法分离、获取汗腺细胞的高效性。结论本试验建立的汗腺细胞分离、培养方法较现有的方法更加高效、便捷,为汗腺的修复与再生研究提供一种获取细胞的新策略。

关键词：汗腺细胞胶原酶实验方法

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去分化来源表皮干细胞的分离及表型特征观察

去分化来源表皮干细胞的分离及表型特征观察

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作者：张翠萍付小兵孙同柱解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的分离培养去分化来源的表皮干细胞(dedifferentiation-derived epidermal stem cells,DDESCs),并进一步观察其表型特征。方法包皮皮片去除皮下脂肪后,中性蛋白酶消化过夜,分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除... 详细信息

目的分离培养去分化来源的表皮干细胞(dedifferentiation-derived epidermal stem cells,DDESCs),并进一步观察其表型特征。方法包皮皮片去除皮下脂肪后,中性蛋白酶消化过夜,分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞后,移植到BALB/c裸鼠背部全层皮肤缺损创面,移植5天后收集皮片制备单细胞悬液,流式检测CK10、CK19和?1整合素阳性细胞百分数,然后用Ⅳ型胶原粘贴法分离皮片内DDESCs,并采用免疫荧光法和荧光定量PCR法分别检测去分化细胞内CK19、?1整合素、Oct4和Nanog的表达。结果流式检测结果表明,皮片移植5天后,CK10阳性细胞减少(P<0.01),CK19和?1整合素阳性细胞增加(P<0.01)。Ⅳ型胶原粘贴分离DDESCs,结果表明,移植皮片组在10min内约有4.56%的贴壁细胞出现。细胞的表型分析结果表明DDESCs内CK19、?1整合素、Oct4和Nanog的表达量类似于原始表皮干细胞(P>0.05)但明显高于成熟表皮细胞(P<0.01)。结论 DDESCs的表型特征与原始表皮干细胞相类似,预示将来去分化细胞有可能代替原始表皮干细胞应用于创伤部位的修复和再生。

关键词：去分化来源表皮干细胞流式检测整合素

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与人汗腺细胞共培养的人骨髓间充质干细胞表型转化及相关机制

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中华创伤杂志 2010年第12期26卷 1136-1139页

作者：贾赤宇欧阳云淑付小兵解放军第三○九医院整形美容烧伤修复中心北京100091 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院超声科解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的研究人骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）与经热休克处理的人汗腺细胞（sweat gland cells,SGCs）体外间接共培养状态下的细胞表型转化及相关机制.方法体外分别分离扩增人MSCs及SGCs,原代SGCs生长融合后于47℃热休... 详细信息

目的研究人骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）与经热休克处理的人汗腺细胞（sweat gland cells,SGCs）体外间接共培养状态下的细胞表型转化及相关机制.方法体外分别分离扩增人MSCs及SGCs,原代SGCs生长融合后于47℃热休克,收集即刻和24 h后的上清加入第3代MSCs,7 d后分别以二步免疫细胞化学法和流式细胞术检测MSCs表达细胞角蛋白7（CK7）、CK18和癌胚抗原（CEA）的情况并与对照组比较.结果加入SGCs上清后MSCs生长减慢,7 d内无明显形态改变;二步免疫细胞化学法显示部分细胞CK7和CEA染色刚性;流式细胞术显示,诱导组细胞CK7和CEA阳性率分别为5.76%和2.01%,对照组为1.12%和0.51%,两者差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 SGCs热损伤释放后某些信号物质,可诱导MSCs横向分化.

关键词：骨髓间充质干细胞汗腺热休克反应共同培养细胞分化

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有关我国再生医学研究的一些思考

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感染．炎症．修复 2010年第1期11卷 4-5页

作者：付小兵解放军总医院基础医学研究所解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100048

组织再生及其相关领域的研究近年来在我国发展十分迅速，许多大学、医院、研究机构以及公司等都涉足于这个领域，标志着一个多学科、跨专业和产学研相结合的再生医学研究正在逐步形成。从学术层面来看，我国科学家在再生医学基础研究的... 详细信息

组织再生及其相关领域的研究近年来在我国发展十分迅速，许多大学、医院、研究机构以及公司等都涉足于这个领域，标志着一个多学科、跨专业和产学研相结合的再生医学研究正在逐步形成。从学术层面来看，我国科学家在再生医学基础研究的某些领域已有明显突破，如证明诱导性多能干细胞（iPS）具有发育的全能性，利用维生素C提高iPS产生率以及有关表皮细胞通过去分化途径转变为表皮干细胞现象的发现等都在国际重要杂志发表了相关结果，引起了较大的反响。

关键词：组织再生医学研究医学基础研究多能干细胞表皮干细胞研究机构分化途径表皮细胞

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复合汗腺的组织工程三维皮肤模型的构建

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感染．炎症．修复 2010年第1期11卷 6-9,F0002页

作者：黄沙付小兵解放军总医院基础医学研究所解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100048

目的:运用组织工程化方法在体外建立复合汗腺的三维皮肤模型,阐明汗腺体外再生的可行性,并为初步建立含有汗腺的仿生化功能性组织工程皮肤奠定实验基础。方法:分离培养人表皮细胞、成纤维细胞和汗腺细胞,将表皮细胞与汗腺细胞按1:1的比... 详细信息

目的:运用组织工程化方法在体外建立复合汗腺的三维皮肤模型,阐明汗腺体外再生的可行性,并为初步建立含有汗腺的仿生化功能性组织工程皮肤奠定实验基础。方法:分离培养人表皮细胞、成纤维细胞和汗腺细胞,将表皮细胞与汗腺细胞按1:1的比例共培养,在培养体系中分别加入含表皮细胞生长因子(EGF)的微球,噻唑蓝(MTT)法观察细胞增殖情况,并与培养时直接加入EGF及不加EGF的对照组进行比较。将共培养的细胞接种于复合成纤维细胞的胶原基质并通过三维培养方式构建组织工程皮肤模型,在模型中加入复合EGF的微球释放载体促进汗腺再生和上皮化进程,HE染色和免疫组织化学方法检测所构建组织工程皮肤以及体外再生汗腺的结构,并与模型中直接加入EGF和未加EGF的对照组进行比较。结果:MTT检测结果显示,与两对照组相比较,通过共培养方式获得的表皮与汗腺细胞团在复合EGF微球作用下生长良好,有明显增殖作用;组织学观察结果显示所构建组织工程皮肤模型具有和正常皮肤相似的结构,并在真皮浅层形成了类似汗腺结构的细胞密集区域,存在大量汗腺特异性标志--角蛋白19(CKl9)和癌胚抗原(CEA)阳性的细胞,这种现象在单纯EGF组仅有微弱表现,在空白对照组则无此现象出现。结论:构建具有汗腺结构的体外皮肤模型具有可行性,这为汗腺再生和功能性组织工程皮肤的研究开创了新的途径。

关键词：汗腺再生组织工程皮肤三维皮肤模型

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科技成果转化中应当注意的几个关系

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感染．炎症．修复 2010年第3期11卷 131-132页

作者：付小兵解放军总医院基础医学研究所北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100048

转化医学代表了当今医学发展的一个潮流，成功的转化不仅是检验理论发现的重要标准，而且也是产生新的重大临床治疗新技术的基础。本文结合近年来我们自己将基础研究的成果转化为临床应用的体会，就医学科技成果转化中应当处理好的几个... 详细信息

转化医学代表了当今医学发展的一个潮流，成功的转化不仅是检验理论发现的重要标准，而且也是产生新的重大临床治疗新技术的基础。本文结合近年来我们自己将基础研究的成果转化为临床应用的体会，就医学科技成果转化中应当处理好的几个关系谈谈个人的意见。

关键词：科技成果转化医学发展转化医学临床治疗临床应用

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蝇蛆疗法在创面修复治疗中的应用进展

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感染．炎症．修复 2010年第1期11卷 58-60页

作者：许永安付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100048 南开大学医学院天津300071

早在16世纪中叶，人们就发现在感染的战伤创面上孳生的蝇蛆非但不会加重创面感染，反而有利于创面愈合。在此后的几个世纪中，科学家们发现创面治疗中的蝇蛆能够吸收、分解创面上的坏死组织，却对创面周围的正常组织没有任何损伤作用，... 详细信息

早在16世纪中叶，人们就发现在感染的战伤创面上孳生的蝇蛆非但不会加重创面感染，反而有利于创面愈合。在此后的几个世纪中，科学家们发现创面治疗中的蝇蛆能够吸收、分解创面上的坏死组织，却对创面周围的正常组织没有任何损伤作用，并能促进肉芽组织的形成，加快创面愈合。

关键词：创面感染蝇蛆疗法修复治疗应用创面愈合坏死组织损伤作用正常组织

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蜕皮甾酮对体外培养的人骨髓间充质干细胞增殖的影响

蜕皮甾酮对体外培养的人骨髓间充质干细胞增殖的影响

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作者：吴昌昊吴旭付小兵张翠萍孙同柱南方医科大学附属南方医院胸心血管外科解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的分离培养并鉴定人骨髓间充质干细胞,观察不同剂量蜕皮甾酮(Ecdysterone,EDS)对人骨髓间充质干细胞(human marrow mesenchymal stem cells,hMSC)增殖的影响。方法采用密度梯度离心法,分离含有间充质干细胞的人骨髓细胞悬液,获得人骨... 详细信息

目的分离培养并鉴定人骨髓间充质干细胞,观察不同剂量蜕皮甾酮(Ecdysterone,EDS)对人骨髓间充质干细胞(human marrow mesenchymal stem cells,hMSC)增殖的影响。方法采用密度梯度离心法,分离含有间充质干细胞的人骨髓细胞悬液,获得人骨髓间充质干细胞。免疫细胞化学法检测第2代培养的细胞CD44、CD105、CD34及CD29的表达以鉴定其为hMSC。设不同终浓度EDS的细胞培养体系(10μg/ml、25μg/ml、50μg/ml and100μg ml)与对照组(单纯hMSC培养基EDS浓度0ug/ml)作对比,在不同的时间点用MTT比色法测定hMSC细胞的增殖活力,并行流式细胞周期观察增殖期细胞所占比例。结果在培养体系中EDS各浓度组hMSC的MTT吸光度值与对照组均有明显差异(P<0.01);其中EDS浓度为25μg/ml时hMSC培养体细胞MTT吸光度值显著高于其余各组(P<0.01 SPSS软件SNK分析);在EDS浓度为10μg/mL、50μg/mL、100μg/ml时,三组间吸光度值未见明显差异(P>0.05),三组相应吸光度值较25μg/ml组稍减低,但吸光度值显著高于对照组(P<0.01)流式细胞周期显示:EDS浓度为25μg/ml时hMSC培养体细胞S期细胞所占比例,同时EDS浓度为25μg/ml时hMSC培养体细胞的增殖指数也明显高于对照组。结论 EDS在一定浓度范围内对体外培养条件下的hMSC具有生长促进作用,该作用在EDS浓度为25μg/mL时最为显著。但是EDS促进hMSC增殖的作用不随剂量的增加而增加。

关键词：人骨髓间充质干细胞 EDS MTT 吸光度值体外培养

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热损伤与碱性成纤维细胞生长因子联合处理诱导表皮细胞去分化的实验研究

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感染．炎症．修复 2010年第1期11卷 13-16,F0003页

作者：蔡飒潘宇付小兵王军孙同柱雷永红深圳大学医学院组织学与胚胎学教研室广州医学院病原生物学教研室解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100048

目的:体外建立表皮细胞去分化模型,为深入阐明表皮细胞去分化过程奠定基础。方法:离体条件下选择热损伤与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作为联合诱导因素处理成熟表皮细胞。通过Giemsa染色和电镜观察细胞形态的改变;通过细胞培养和滋养... 详细信息

目的:体外建立表皮细胞去分化模型,为深入阐明表皮细胞去分化过程奠定基础。方法:离体条件下选择热损伤与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作为联合诱导因素处理成熟表皮细胞。通过Giemsa染色和电镜观察细胞形态的改变;通过细胞培养和滋养层培养体系观察细胞的增殖能力,包括克隆形成和复层生长情况;采用器官培养体系体外构建三维皮肤,观察细胞再分化形成表皮情况;应用基因芯片技术观察细胞基因表达的改变。结果:经联合诱导后,细胞形态发生改变。表现为体积减小,细胞器数目减少,核浆比增大。增殖和再分化能力的改变体现在诱导后的表皮细胞能形成克隆,在滋养层培养条件下可以形成复层生长,并能够在体外构建出包括基底层和基底上层在内的表皮结构。基因水平的改变表现为与角质化相关基因下调和与有丝分裂相关基因上调。结论:在热损伤与bFGF联合诱导下,已分化的表皮细胞会发生形态、功能和基因表达的改变,表现为干细胞的特性。

关键词：表皮细胞表皮干细胞去分化

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