检索结果-内蒙古大学图书馆

中华创伤杂志 2009年第9期25卷 774-778页

作者：张翠萍付小兵孙同柱解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

目的研究创伤微环境对表皮细胞的去分化诱导作用，并探讨Wnt通路在这一过程中的作用。方法包皮皮片去除皮下脂肪后，中性蛋白酶消化过夜，分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞。处理后的表皮片经免疫... 详细信息

目的研究创伤微环境对表皮细胞的去分化诱导作用，并探讨Wnt通路在这一过程中的作用。方法包皮皮片去除皮下脂肪后，中性蛋白酶消化过夜，分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞。处理后的表皮片经免疫组化鉴定后移植到BALB／c裸鼠背部全层皮肤缺损创面，5d后用免疫组化法检测皮片内细胞的表型特征，RT—PCR和Western blot检测表皮细胞表型转化过程中Wnts分子及下游分子的表达变化。结果未经处理的表皮片基底部细胞呈CK10染色阴性，CK19和β1整合素染色阳性；Ⅳ型胶原处理后的表皮片内细胞全呈CK10染色阳性。而去基底皮片移植后5d，在皮片的基底侧重新出现CK10染色阴性、CK19和β1整合素染色阳性的细胞。同时在移植皮片内Wnt-10b、Wnt-4和Wnt-7a mR—NA的表达分别增加了3．1倍、2．2倍和1．4倍，而Wnt通路下游β-catenin、cyclin D1和c—myc蛋白表达分别增加了3倍、1．5倍和2倍（P〈0．01）。结论创伤微环境可诱导表皮细胞去分化，Wnt／β-catenin信号通路可能在这一过程中起关键性的调控作用。

关键词：创伤和损伤表皮去分化信号传导 Wnt/β-catenin信号通路

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

分离培养汗腺导管部细胞的新方法

引用

中华外科杂志 2009年第20期47卷 1574-1577页

作者：雷永红付小兵盛志勇蔡飒孙同柱解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100048

目的探讨建立汗腺导管部细胞分离的新技术。方法成人仞厚皮片和薄中厚皮片标本（n=10）剪碎后用Ⅱ型胶原酶消化12h，吸取并转移汗腺导管到培养皿中贴壁培养。应用流式细胞仪、免疫组织化学染色和逆转录．聚合酶链式反应（RT—PCR）以及... 详细信息

目的探讨建立汗腺导管部细胞分离的新技术。方法成人仞厚皮片和薄中厚皮片标本（n=10）剪碎后用Ⅱ型胶原酶消化12h，吸取并转移汗腺导管到培养皿中贴壁培养。应用流式细胞仪、免疫组织化学染色和逆转录．聚合酶链式反应（RT—PCR）以及蛋白印迹（Western Blot）分析检测培养细胞的汗腺特异标志CEA、CK8、CK18、CK19抗原表达，并用膜片钳技术检测培养细胞膜上阿米洛利（amiloride）敏感Na^＋离子通道，用t检验比较分析两组间实验数据。结果汗腺导管贴壁48h后，围绕汗腺导管出现单层扁平的上皮细胞，生长2～4周融合成片。流式细胞学检查示原代培养汗腺导管细胞与原代培养汗腺细胞在癌胚抗原（CEA）阳性率[（90．26±1．12）％帆（89．70±1．43）％]和细胞角蛋白8（CK8）阳性率[（94．41±1．84）％憾（93．65±1．63）％]上，差异无统计学意义（P〉0．05）。形态学染色汗腺导管细胞抗CEA、CK8、CK18、CK19染色均为阳性。RT—PCR表明原代培养汗腺导管细胞表达CEA、CK8、CK18、CK19基因，Western Blot清晰显示CEA条带，CK8、CK18、CK19蛋白条带。膜片钳检测表明原代培养汗腺导管细胞膜上存在amiloride敏感Na^＋离子通道。无血清表皮细胞EpiLife培养基在汗腺导管细胞生长过程中抑制成纤维细胞生长。结论从仞厚皮片和中厚皮片分离培养汗腺导管部细胞的方法较传统的分离方法具有简便快速的优点，EpiLife培养基可抑制培养过程中成纤维细胞的生长，可以在体外建立最佳汗腺导管细胞模型。

关键词：汗腺细胞培养技术细胞分离

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

成体干细胞在组织修复及再生中的治疗现状与展望

引用

中华烧伤杂志 2009年第4期25卷 241-242页

作者：付小兵解放军总医院基础医学研究所第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100853

Ever since the use of adult stem cells in the field of tissue repair and regeneration, their clinical effects, possible mechanisms and side effects have been questioned. In this article, I review the clinical application of adult stem cells, especially mesenchymal stein cells in functional recovery of skin, acute myocardial infarction and vascular diseases, etc. Mean- while, I express my personal opinion on their use in the future.

关键词：成体干细胞组织修复再生治疗医学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

深Ⅱ度烧伤创面汗腺干细胞标志物的变化规律

引用

中华烧伤杂志 2009年第4期25卷 301-304页

作者：姜笃银宗宪磊付小兵王魏单菲山东大学第二医院急诊科济南250033 解放军总医院基础医学所第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的了解深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中汗腺上皮细胞增殖并向表皮细胞转化的规律，探讨其机制。方法选择2004年1月-2007年12月，江苏省泰州市第四人民医院和山东大学第二医院收治的四肢与躯干烧伤患者28例。收集患者深Ⅱ度烧伤创面组织标本3... 详细信息

目的了解深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中汗腺上皮细胞增殖并向表皮细胞转化的规律，探讨其机制。方法选择2004年1月-2007年12月，江苏省泰州市第四人民医院和山东大学第二医院收治的四肢与躯干烧伤患者28例。收集患者深Ⅱ度烧伤创面组织标本37块、浅Ⅱ度烧伤创面组织标本21块、正常皮肤标本10块。采用免疫组织化学双染色法，观察细胞角蛋白10（CK10）、CK14、CKl9、bcl-2和P63在深、浅Ⅱ度烧伤创面及正常皮肤汁腺分泌部上皮细胞中的表达情况。结果正常皮肤汗腺分泌部上皮细胞中等强度表达CK19、CK14和CK10，基底层肌上皮细胞做弱表达P63和CK14，CK10表达阳性的终末分化细胞不表达bcl-2和P63。浅Ⅱ度烧伤创面修复过程中，其汗腺分泌部结构及上述蛋白表达未见异常。深Ⅱ度烧伤后7d创面汗腺分泌部上皮细胞P63和bcl-2表达增强；伤后8～10d创面基底细胞增殖、迁移和鳞状七皮化，形成bcl-2、P63、CK19和CK14表达强阳性的实心岛状上皮结构，并随肉芽组织向创面浅层迁移，经鳞状上皮增殖完成创面再上皮化。深Ⅱ度烧伤创面愈合后13～30d，超常增殖的表皮基底层和基底上层细胞仍强烈表达bcl-2、CK14、CK19和P63。结论干细胞和短暂扩充细胞逆分化过程导致上皮生长滞后和肉芽组织过度增殖，这种失衡现象可能是导致深Ⅱ度烧伤创面修复失控的重要机制之一。

关键词：烧伤汗腺上皮细胞干细胞转分化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

碱性成纤维细胞生长因子基因转染人表皮细胞及其表达

引用

中华实验外科杂志 2009年第3期26卷 286-288,409页

作者：伊海英孙晓艳付小兵任明姬张广田解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037 解放军总医院基础医学研究所内蒙古医学院基础医学院

目的观察碱性成纤维细胞生长因子基因真核表达载体（pEGFP—C3-bFGF）能否转染体外培养的人表皮细胞并表达。方法采用脂质体（LipofectamineTM2000）转染法，将pEGFP—C3-bFGF转染至人表皮细胞系（HEKa细胞）中，在荧光显微镜下观察其... 详细信息

目的观察碱性成纤维细胞生长因子基因真核表达载体（pEGFP—C3-bFGF）能否转染体外培养的人表皮细胞并表达。方法采用脂质体（LipofectamineTM2000）转染法，将pEGFP—C3-bFGF转染至人表皮细胞系（HEKa细胞）中，在荧光显微镜下观察其瞬时表达及细胞形态。以同期培养的表皮细胞作为阴性对照，免疫细胞化学染色和免疫荧光标记法检测实验组及对照组中β1整合素、CK19、CK14及CK10在表皮细胞中表达的差异。结果荧光显微镜下观察基因转染率为31，6％，转染的细胞体积小，呈圆形或圆梭形，核质比大。免疫细胞化学染色结果显示，实验组细胞中CK19、CK14表达增强，CK10表达减弱。免疫荧光染色结果显示，转染阳性细胞β1整合素弱表达分布在胞膜上，CK19、CK14在胞膜和胞质中表达，CK10表达为阴性。结论pEGFP—C3-bFGF能够转染至人表皮细胞并表达，为探讨bFGF调控表皮细胞去分化的分子机制提供实验参考。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子表皮细胞基因转染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

HA1077对骨髓间质干细胞促愈作用的影响

引用

中华创伤杂志 2009年第7期25卷 663-667页

作者：白晓东刘贤华柳晓杰王佳哲付小兵武警总医院烧伤整形科北京100039 武警总医院中心实验室北京100039 解放军总医院第一附属医院全军创面修复重点实验室

目的探讨HA1077对骨髓间质干细胞（bone mesenchymal stemcells，BMSCs）促愈作用的影响及其机制。方法（1）体外实验：体外分离培养大鼠BMSCs，随机分为正常对照组、诱导组和HA1077组。对照组加入DMEM完全培养液；诱导组：70％DMEM完... 详细信息

目的探讨HA1077对骨髓间质干细胞（bone mesenchymal stemcells，BMSCs）促愈作用的影响及其机制。方法（1）体外实验：体外分离培养大鼠BMSCs，随机分为正常对照组、诱导组和HA1077组。对照组加入DMEM完全培养液；诱导组：70％DMEM完全培养液＋30％大鼠成纤维细胞上清液＋含8μg/L表皮细胞生长因子（EGF）的培养液；HA1077组：在诱导组培养液基础上加入终浓度为10μmol／L的HA1077。取培养7d的细胞，流式细胞检测CK19表达，细胞周期和核增殖抗原（PCNA）表达。（2）在体实验：按前述方法制备兔BMSCs。取新西兰大耳白兔8只，在背部制备6个直径为3cm的圆形皮肤缺损（每侧各3个），深至皮下。创面随机分为空白对照组（A组）：创面应用等渗盐水；EGF对照组（B组）：创面外用EGF，50 U／cm^2；BMSCs治疗组（C组）：除用EGF外，创面注射BMSCs细胞悬液1ml，2×10^6／ml；BMSCs＋HA1077治疗组（D组）：除应用c组措施外，创面注射0．5mlHA1077，浓度为20μmol／L。伤后3，7，14d计算愈合指数（WCD。结果（1）体外实验：诱导组CK19的阳性率为（11．13±2．14）％，HA1077组为（40．31±0．82）％，明显高于诱导组（P〈0．01）。HA1077组PCNA阳性率明显高于诱导组，细胞周期分析显示S期细胞数量最多。（2）在体实验：D组伤后14d的创面愈合指数为86．20±1．92，效果明显好于B组、C组和对照组。结论HA1077可以促进BMSCs细胞表达PCNA进入S期，进而分化表达CK19；在体表联合应用HA1077和BMSCs，可以明显促进创面愈合。

关键词：间质干细胞细胞分化创面愈合兔 HA1077

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺组织的神经与血管支配研究

引用

创伤外科杂志 2009年第5期11卷 388-392页

作者：付小兵孙同柱雷永红包晓霞张翠萍盛志勇解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

目的研究诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺组织后的神经与血管分布特征,以确认再生汗腺组织是否受到新生神经的支配和新生血管的血液供应,进而评价再生汗腺组织的质量。方法选择烧伤后行瘢痕切除术患者4例。每例患者均设创面自体骨髓间充... 详细信息

目的研究诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺组织后的神经与血管分布特征,以确认再生汗腺组织是否受到新生神经的支配和新生血管的血液供应,进而评价再生汗腺组织的质量。方法选择烧伤后行瘢痕切除术患者4例。每例患者均设创面自体骨髓间充质干细胞(MSCs)移植和对照两个部位。移植部位在瘢痕切除的创面上接种经过诱导的MSCs,而对照部位除未接种MSCs外,其余方法同治疗创面。术后3个月在移植部位和对照部位分别进行发汗试验。在移植部位发汗试验呈阳性处取材,同时取对照部位的组织和术中切下的瘢痕组织。采用免疫组织化学二步法检测所取组织标本的S-100蛋白(S-100)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、八因子相关抗原(Ⅷ-RAg)和CD34的表达,并与正常皮肤作比较研究。结果4例创面移植部位发汗试验均呈阳性,对照部位发汗试验阴性。免疫组织化学检测显示移植部位的真皮浅层有结构类似于正常汗腺的组织团块,而对照部位未观察到类似结构。S-100、NSE、Ⅷ-RAg和CD34在移植部位、对照部位、瘢痕组织以及正常皮肤均有表达,并且S-100、NSE、Ⅷ-RAg和CD34在移植部位再生汗腺组织中的分布与在正常皮肤汗腺组织中的分布极其相似。结论诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺的组织中均有神经与血管分布,提示形成具有功能的汗腺组织可能受到新生神经的支配和新生血管的血液供应,骨髓间充质干细胞经诱导可以生成形态和功能较好的汗腺组织。

关键词：汗腺干细胞 S-100蛋白神经元烯醇化酶抗原

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表皮细胞表达胚胎性角蛋白与创伤不同修复结局的关系

引用

中华外科杂志 2009年第16期47卷 1245-1248页

作者：魏欣净姜笃银宗宪磊付小兵盛志勇王魏单菲山东大学附属省立医院皮肤科济南250021 山东大学第二医院、山东大学组织工程研究所解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的探讨特征性细胞角蛋白（CKs）在表皮组织的分布特征和变化规律及其与创伤修复不同结局的关系。方法对人假上皮瘤样增生（PEH）、瘢痕疙瘩（Ke）、增生性瘢痕（HS）和正常皮肤（NS）标本，采用组织病理学和免疫组织化学（IHC）双染... 详细信息

目的探讨特征性细胞角蛋白（CKs）在表皮组织的分布特征和变化规律及其与创伤修复不同结局的关系。方法对人假上皮瘤样增生（PEH）、瘢痕疙瘩（Ke）、增生性瘢痕（HS）和正常皮肤（NS）标本，采用组织病理学和免疫组织化学（IHC）双染色标记技术进行对比研究，观察CKs在表皮组织的分布特征和变化规律，并进行统计学分析。结果NS组表皮不表达CK8＆18和CK17。在活动期PEH、Ke和HS表皮组织中存在数量不等的CK8＆18^＋细胞和CK17^＋细胞，含量高低依次为PEH〉Ke〉HS和HS〉Ke〉PEH（P〈0．05），CK19^＋和CK5＆6^＋细胞有相似的变化趋势，而CK10^＋细胞则呈相反的变化趋势，在局部观察到相应的表皮超常增生、细胞形态改变和表皮下炎症反应。结论活动期PEH、Ke和HS表皮细胞存在程度不同的去分化和终末分化失衡，提示表皮细胞异常增殖和分化与创伤修复不同结局有关。

关键词：皮肤创伤和损伤细胞角蛋白干细胞细胞分化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人脐带间充质干细胞的分离培养及生物学特性的研究

人脐带间充质干细胞的分离培养及生物学特性的研究

引用

第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：赵宏宇付小兵孙同柱雷永红张翠萍艾丽解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的探讨并建立可靠的人脐带间充质干细胞体外分离和培养的方法,并对其生物学特性进行研究。方法采用酶消化法分离脐带间充质干细胞,利用其易贴附朔料壁生长的特性进行传代和纯化,观察其形态学特征,绘制生长曲线,免疫组化及流式细胞技... 详细信息

目的探讨并建立可靠的人脐带间充质干细胞体外分离和培养的方法,并对其生物学特性进行研究。方法采用酶消化法分离脐带间充质干细胞,利用其易贴附朔料壁生长的特性进行传代和纯化,观察其形态学特征,绘制生长曲线,免疫组化及流式细胞技术检测细胞表面标志物的表达情况。结果

关键词：人脐带间充质干细胞生物学特性分离培养

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

瘢痕组织成纤维细胞重编成iPS的实验研究

瘢痕组织成纤维细胞重编成iPS的实验研究

引用

第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：李美蓉付小兵张翠萍解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的通过逆转录病毒携带外源性基因Oct3/4、Sox2、Klf4及c-Myc多潜能转录因子转染宿主细胞,多种正常成体细胞能够进行重编程,形成在形态学、表观遗传学、全基因表达谱以及细胞分化潜能方面与胚胎干细胞高度相似的iPS(induced pluripoten... 详细信息

目的通过逆转录病毒携带外源性基因Oct3/4、Sox2、Klf4及c-Myc多潜能转录因子转染宿主细胞,多种正常成体细胞能够进行重编程,形成在形态学、表观遗传学、全基因表达谱以及细胞分化潜能方面与胚胎干细胞高度相似的iPS(induced pluripotent stem)细胞。但目前尚未见机体异常细胞重编程的报道。瘢痕发病机制目前尚待阐明,普遍认为创伤部位成纤维细胞异常是发生瘢痕的关键因素。

关键词：成纤维细胞培养皿瘢痕组织饲养层胚胎干细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：