检索结果-内蒙古大学图书馆

第十届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议、第三届中欧创面修复学术会议、中国医师协会创伤外科医师分会创面修复医师专业委员会会议

作者：吴旭张振中刘南波付小兵黄沙南方医科大学南方医院惠侨医学中心解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室

目的：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中引入差速贴壁交换法,初步探索骨髓间充质干细胞集落的形成过程.方法：实验一：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中,采用差速贴壁法将骨髓中的细胞按照贴壁的先后顺... 详细信息

目的：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中引入差速贴壁交换法,初步探索骨髓间充质干细胞集落的形成过程.方法：实验一：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中,采用差速贴壁法将骨髓中的细胞按照贴壁的先后顺序进行分离培养,每隔2h 将已接种但仍未贴壁的细胞重新悬浮和接种至新的细胞培养皿中,进而将细胞分为0～2h 组、2h～4h 组、4h～6h 组、6h～8h组、8h～48h 组,并观察和比较其形态特征和生长规律;实验二：选取GFP(+)或GFP(-)的C57 小鼠作为研究对象,分为GFP(+)组和GFP(-)组.全骨髓法提取C57 小鼠骨髓细胞.在细胞混悬液恒温孵育4h 后,悬浮起仍未贴壁的骨髓细胞,在GFP(+)组和GFP(-)组间进行交换,并继续孵育至48h,从而获得了"(0～4h 内贴壁)GFP(+)细胞/(4h～48h内贴壁)GFP(-)细胞"混合组A 及"(0～4h 内贴壁)GFP(-)细胞/(4h～48h 内贴壁)GFP(+)细胞"混合组B.继续原代培养上述两组细胞,并观察其中的集落形成过程.结果：在实验一中：0～2h 组和2h～4h 组的细胞形态和生长规律相似,4h～6h 组、6h～8h 组和8h～48h 组的细胞形态和生长规律相似.重复上述实验,将细胞重新分为0～4h 组和4h～48h组,继续孵育3 天,0～4h 组的细胞悉数凋亡,继续孵育10 天,4h～48h 组的细胞相继凋亡;在实验二中："(0～4h 内贴壁)GFP(+)细胞"和"(4h～48h 内贴壁)GFP(-)细胞"混合培养后分别发现了由"(0～4h 内贴壁)GFP(+)细胞"和"(4h～48h 内贴壁)GFP(-)细胞"形成的细胞集落,两种集落的细胞形态有较大差异.结论：通过全骨髓法获得的C57 小鼠"骨髓间充质干细胞"中至少应该含有两种不同的细胞类型(暂命名为"先贴细胞"和"后贴细胞")."先贴细胞"和"后贴细胞"的贴壁时间不同,但在体外培养时相互依存,并共同参与了"骨髓间充质干细胞"的集落形成、和传代.

关键词：差速贴壁骨髓间充质干细胞集落形成

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高迁移率蛋白族B1通过调控p53表达抑制T细胞增殖

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感染．炎症．修复 2016年第3期17卷 143-148页

作者：贾敏张卉童亚林姚咏明广西师范大学生命科学学院广西桂林541002 解放军第181医院烧伤整形中心广西桂林541002 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的:探讨高迁移率蛋白族B1(HMGB1)对T细胞的增殖抑制作用及其分子机制。方法:将培养的Jurkat细胞分为对照组、HMGB1(100 ng/ml)12、24、48 h组,HMGB1组加入HMGB1培养相应时间;将细胞分为对照组、HMGB1 10、100、1 000 ng/ml组,予不同浓... 详细信息

目的:探讨高迁移率蛋白族B1(HMGB1)对T细胞的增殖抑制作用及其分子机制。方法:将培养的Jurkat细胞分为对照组、HMGB1(100 ng/ml)12、24、48 h组,HMGB1组加入HMGB1培养相应时间;将细胞分为对照组、HMGB1 10、100、1 000 ng/ml组,予不同浓度HMGB1培养24 h;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖率,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测各组细胞中p53m RNA、磷酸化p53及p53总蛋白的表达水平。将载有p53 sh RNA、p53 m RNA表达序列及空白质料的病毒转染入Jurkat细胞中,并选择100 ng/ml HMGB1刺激24 h,采用同样方法检测细胞增殖率。最后,将细胞分为正常组、HMGB1组、SB203580[p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂]+HMGB1组进行相应处理。收集各组细胞,RT-PCR和Western blot法检测p53 m RNA、磷酸化p53及p53总蛋白的表达水平。结果:HMGB1(100ng/ml)刺激细胞24、48 h后细胞增殖率降低,较正常组差异有显著性(P<0.05);100、1 000 ng/ml HMGB1刺激细胞24 h后,增殖率明显下降,与正常组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。HMGB1(100 ng/ml)刺激细胞后,p53 m RNA、磷酸化及总蛋白表达水平在24、48 h逐步上升,且有明显统计学意义(P<0.05);HMGB1刺激24 h,10、100 ng/ml HMGB1刺激组细胞p53 m RNA、p53磷酸化及总蛋白表达水平较正常组显著上升,但1 000 ng/ml HMGB1没有明显变化;在不同转染组中,予HMGB1刺激细胞,空载组增殖率降低,而p53 sh RNA表达组细胞增殖趋于正常,p53 m RNA过表达组增殖率较空载组下降更为明显。Jurkat细胞在p38 MAPK阻断剂和HMGB1共同作用后,p53 m RNA、磷酸化及总蛋白表达水平比HMGB1刺激组明显下降(P<0.05)。结论:胞外HMGB1可通过诱导p38 MAPK信号通路激活p53蛋白,抑制T细胞增殖。

关键词：高迁移率族蛋白B1 p53 p38丝裂原活化蛋白激酶 T细胞增殖

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3D生物打印技术打印组织和器官的研究进展

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感染．炎症．修复 2016年第1期17卷 46-48页

作者：姚斌刘南波黄沙谢江帆付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048 南开大学医学院天津300071 南方医科大学南方医院心胸外科广东广州501515

3D打印技术由***在1986年第1次提出,称为“立体光固化技术”,即将紫外光照射后的薄层材料打印形成固体3D结构,这种方法后来用于将生物材料塑造成具有三维结构的树脂模型[1].3D生物打印作为一种组织工程技术,其发展需要3D打印技术、细胞... 详细信息

3D打印技术由***在1986年第1次提出,称为“立体光固化技术”,即将紫外光照射后的薄层材料打印形成固体3D结构,这种方法后来用于将生物材料塑造成具有三维结构的树脂模型[1].3D生物打印作为一种组织工程技术,其发展需要3D打印技术、细胞生物学和材料学的发展推动.无溶剂系统的发现促使生物材料可以直接打印形成可用于移植的3D支架[2].目前,在临床医学应用中,3D生物打印已被用来制作导管和夹板[3].

关键词：组织工程技术打印技术生物材料器官光固化技术紫外光照射细胞生物学 3D结构

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人骨髓间充质干细胞与其来源的汗腺样细胞微小RNAs差异表达谱分析

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中华医学杂志 2015年第32期95卷 2626-2629页

作者：谭志军陈艳赵洪良赵换军赵阿龙赵智亮孙梦黎马奎张翠萍付小兵天津医科大学研究生院 300070 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室

目的分析入骨髓间充质干细胞（hBM-MSCs）与其来源的汗腺样细胞微小RNAs（miRNAs）差异表达谱.方法采用成骨、成脂细胞诱导分化液诱导hBM-MSCs分化,油红O和茜素红染色分别进行鉴定.当原代汗腺细胞密度达到70％～ 80％时进行热休克处理... 详细信息

目的分析入骨髓间充质干细胞（hBM-MSCs）与其来源的汗腺样细胞微小RNAs（miRNAs）差异表达谱.方法采用成骨、成脂细胞诱导分化液诱导hBM-MSCs分化,油红O和茜素红染色分别进行鉴定.当原代汗腺细胞密度达到70％～ 80％时进行热休克处理,然后将其与hBM-MSCs通过Transwell进行共培养诱导;10 d后分别提取hBM-MSCs和其诱导分化的汗腺样细胞的总RNA,纯化标记后,进行miRNAs杂交和数据分析以及靶基因预测.进一步采用实时荧光定量PCR验证芯片结果的可靠性.结果差异表达水平绝对值＞2倍的miRNAs有68个,其中上调的19个,下调的49个;其中13个表达水平发生显著变化,差异表达水平＞5倍（miRNA-132-3p、-4467、-4484、-146a-5p、-6126等5个上调;miRNA-708-5p、-138-5p、-6812-5p、-138-1-3p、-1281、-3157-3p、-4298、-4459等8个下调）.靶向汗腺发育相关通路核因子κB、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶、Wnt/β-连环蛋白和外胚叶发育不全基因/外胚叶发育不全基因受体的miRNAs有18个.其中上调的miRNA-146a-5p和下调的miRNA-6812-5p验证结果与芯片结果具有一致性.结论 hBM-MSCs与其来源的汗腺样细胞之间有明显的miRNAs差异性表达,其中13个差异表达＞5倍的miRNAs和18个与汗腺发育通路有关的miRNAs可能在hBM-MSCs向汗腺样细胞分化过程中有重要的调控作用.

关键词：间质干细胞汗腺微RNAs 基因表达谱

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小汗腺自发荧光现象的观察

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感染．炎症．修复 2016年第1期17卷 12-15页

作者：王彬彬张翠萍赵志力付小兵王丽内蒙古自治区人民医院整形美容科内蒙古呼和浩特010017 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048 北京军区总医院整形美容中心北京100700

目的:观察小汗腺是否具有自发荧光现象及其随汗腺细胞生长、衰老的变化,推测其发光基团,探讨研究小汗腺的新方法。方法:取整形美容患者弃用的皮肤组织,苏木素染色,奥林巴斯倒置相差显微镜观察小汗腺组织的自发荧光现象。从皮肤中提取单... 详细信息

目的:观察小汗腺是否具有自发荧光现象及其随汗腺细胞生长、衰老的变化,推测其发光基团,探讨研究小汗腺的新方法。方法:取整形美容患者弃用的皮肤组织,苏木素染色,奥林巴斯倒置相差显微镜观察小汗腺组织的自发荧光现象。从皮肤中提取单个汗腺细胞进行体外培养,于汗腺细胞贴壁后7、14、21、28 d在奥林巴斯倒置相差显微镜分别以紫外光、绿光、蓝光3种不同激发光照射,观察小汗腺自发荧光的变化情况;利用激光扫描共聚焦显微镜γ扫描测量小汗腺自发荧光的强度。结果:苏木素染色后的小汗腺组织自发荧光表现为似有小孔的网状结构,小汗腺边界清晰,其自发荧光在蓝色激发光下表现为绿色自发荧光,绿色激发光下表现出红色自发荧光;单独的小汗腺细胞在荧光显微镜下表现出更多颜色的自发荧光,紫外光的激发下显示出蓝色的自发荧光,蓝色的激发光下显示出绿色自发荧光,绿色的激发光下显示出红色的自发荧光,随小汗腺的生长,荧光强度没有明显变化;用激光扫描共聚焦显微镜γ分层扫描方法测定小汗腺自发荧光强度,分别在近530 nm和590 nm处发现两个自发荧光峰值,与黄素和脂褐素的自发荧光峰值相近。结论:通过观察苏木素染色后小汗腺组织的自发荧光可以简单、快速地帮助判断小汗腺结构。单个汗腺细胞的自发荧光强度随汗腺生长没有明显减弱。根据小汗腺自发荧光的峰值测定初步判定小汗腺自发荧光的发光基团是黄素和脂褐素。

关键词：小汗腺自发荧光荧光显微镜激光扫描共聚焦显微镜黄素脂褐素

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严重创伤感染及其并发症处理的若干对策

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中华创伤杂志 2015年第3期31卷 194-196页

作者：姚咏明祝筱梅解放军总医院第一附属医院创伤外科研究室暨全军重点实验室北京100048

创伤感染是伤后数天患者死亡的重要原因,系当今创伤、烧伤外科所面临的棘手问题.尽管早期清创、组织修复、抗菌药物和支持治疗取得长足进步,但感染仍然是创伤患者中常见并发症之一,若处理不当,可诱发严重脓毒症、MODS,甚至死亡[1].由于... 详细信息

创伤感染是伤后数天患者死亡的重要原因,系当今创伤、烧伤外科所面临的棘手问题.尽管早期清创、组织修复、抗菌药物和支持治疗取得长足进步,但感染仍然是创伤患者中常见并发症之一,若处理不当,可诱发严重脓毒症、MODS,甚至死亡[1].由于临床上缺乏特异性防治手段,目前创伤感染病死率仍然很高,已成为进一步提高严重创伤救治水平的主要障碍.因此,深入了解创伤感染的发生特点与变化规律,寻求新的防治对策,对于严重创伤感染及其并发症的早期识别和有效干预具有重要临床意义.

关键词：创伤感染并发症处理特异性防治创伤患者临床意义常见并发症严重脓毒症早期清创

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激动素在创面修复及皮肤美容中作用的研究进展

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中华创伤杂志 2015年第12期31卷 1135-1138页

作者：周云超赵志力张翠萍付小兵北京军区总医院全军皮肤修复研究所整形美容中心 100700 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室

激动素（kinetin，KT）是60年前发现的第一个细胞分裂素，经过国内外60年的不断研究，人们对它的观念已从最初的定义植物激素逐步发展为对动植物及人体起广泛作用的物质，并已把它应用于皮肤的美容护理和人体疾病的治疗。然而，KT对动... 详细信息

激动素（kinetin，KT）是60年前发现的第一个细胞分裂素，经过国内外60年的不断研究，人们对它的观念已从最初的定义植物激素逐步发展为对动植物及人体起广泛作用的物质，并已把它应用于皮肤的美容护理和人体疾病的治疗。然而，KT对动物和人体的一些作用机制，以及对多系统的作用是否存在共同作用机制还不太清楚。笔者通过KT对动物及人体各系统作用及作用机制进行归纳总结，

关键词：皮肤美容激动素创面修复细胞分裂素植物激素人体疾病美容护理归纳总结

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电针足三里穴对失血性休克大鼠肾组织功能及脂质过氧化的影响

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中国急救医学 2015年第11期35卷 1036-1038页

作者：钟毓贤乔晋琳石现胡森中国人民解放军海军总医院康复医学科北京100048 解放军总医院针灸科北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的研究电针足三里穴对失血性休克大鼠肾组织功能及脂质过氧化损伤的保护作用。方法取40只SD雄性大鼠按全血容量的40％放血制成失血性休克模型。随机分为四组，电针足三里组（EA组）、电针非经非穴组（SEA组）、液体复苏组（FR组）、... 详细信息

目的研究电针足三里穴对失血性休克大鼠肾组织功能及脂质过氧化损伤的保护作用。方法取40只SD雄性大鼠按全血容量的40％放血制成失血性休克模型。随机分为四组，电针足三里组（EA组）、电针非经非穴组（SEA组）、液体复苏组（FR组）、模型对照组（MC组），每组10只。FR组于失血后10min静脉输入3倍失血量的乳酸林格液。EA组于失血后10min电针足三里穴（持续刺激25min，4Hz，4V）；SEA组电针非经非穴部位，其他操作同EA组。MC组制成失血性休克模型后不做任何处理。于失血后3、6h采血测定血浆肌酐（Cr）含量，并检测肾组织血流量（KBF），后处死动物取肾组织测定丙二醛（MDA）含量及组织含水率（WG）。结果失血性休克后3h和6h，EA组Cr含量显著低于SEA组和MC组，KBF显著高于SEA组和MC组（P〈0．05）；失血性休克后6h，EA组肾组织MDA含量及WG显著低于SEA组和MC组，以上三组均显著高于FR组（P〈0．05）。结论电针足三里能够一定程度上改善失血性休克大鼠肾组织缺血，减轻过氧化和组织水肿。

关键词：失血性休克足三里穴电针肾缺血

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严重脓毒症胆碱能抗炎通路障碍机制的研究进展

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中华创伤杂志 2015年第3期31卷 217-219页

作者：任超童亚林姚咏明解放军总医院第一附属医院创伤外科研究室暨全军重点实验室温州医科大学附属第一医院急诊中心北京100048 解放军第一八一医院烧伤整形中心解放军总医院第一附属医院创伤外科研究室暨全军重点实验室北京100048

严重脓毒症是指脓毒症伴器官功能障碍、组织灌注不足和低血压的临床综合征,主要原因是感染所致机体局部炎症因子的过度释放并进入全身血液循环,从而引起多器官功能障碍甚至衰竭[1].目前控制炎症因子的过度释放成为防治脓毒症的重要策略... 详细信息

严重脓毒症是指脓毒症伴器官功能障碍、组织灌注不足和低血压的临床综合征,主要原因是感染所致机体局部炎症因子的过度释放并进入全身血液循环,从而引起多器官功能障碍甚至衰竭[1].目前控制炎症因子的过度释放成为防治脓毒症的重要策略之一.＂胆碱能抗炎通路＂的提出使得炎症反应过程中枢神经系统与外周免疫系统的联系更加具体化[2],中枢神经系统中胆碱能神经核团活化后能刺激迷走传出神经,活化的迷走神经在突触末端释放乙酰胆碱（Ach）,Ach能作用于细胞表面α7型烟碱类乙酰胆碱受体（α7nAchR）而发挥抗炎效应.虽然已经明确胆碱能抗炎通路的激活能减少外周炎症因子的释放,进而降低脓毒症动物的病死率[3],但是对于胆碱能抗炎通路作用的具体细胞机制及其与内分泌免疫反应的本质联系仍未充分阐明.生理情况下,迷走传入神经能迅速感受有害刺激并将信号传入中枢,激活胆碱能抗炎通路而发挥抗炎效应.然而,在严重脓毒症时神经系统发生功能障碍,出现胆碱能抗炎通路抗炎作用减弱甚至消失.笔者拟就严重脓毒症状态下胆碱能抗炎通路功能障碍机制进行综述,为寻求积极有效的干预措施提供新的理论依据.

关键词：胆碱能抗炎通路严重脓毒症多器官功能障碍中枢神经系统乙酰胆碱受体炎症因子炎症反应过程迷走传入神经

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人外分泌汗腺细胞分离方法的优化

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中国应用生理学杂志 2015年第3期31卷 235-237,I0004页

作者：赵换军赵洪良谭志军陈艳许永安张茂张翠萍付小兵天津医科大学天津300070 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048 浙江大学医学院附属第二医院急诊科杭州310009

目的:优化人外分泌汗腺细胞的分离方法,以高效地提取外分泌汗腺细胞。方法:新鲜的皮肤样本剪成组织微粒(大小约1 mm3),A组采用胰蛋白酶-乙二胺四乙酸(EDTA)和胶原酶Ⅱ型(2 mg/ml)体积分数1∶1混合的方法;B组采用传统消化方法,即胶原酶Ⅱ... 详细信息

目的:优化人外分泌汗腺细胞的分离方法,以高效地提取外分泌汗腺细胞。方法:新鲜的皮肤样本剪成组织微粒(大小约1 mm3),A组采用胰蛋白酶-乙二胺四乙酸(EDTA)和胶原酶Ⅱ型(2 mg/ml)体积分数1∶1混合的方法;B组采用传统消化方法,即胶原酶Ⅱ型;C组采用胰蛋白酶-EDTA消化的方法,三组同时置于恒温培养箱内,比较三种方法处理后汗腺细胞团的获取情况。将挑取的汗腺细胞团种于培养皿内,观察细胞贴壁和生长情况,并用流式细胞仪测定各组细胞的增殖指数,最后进行免疫细胞化学检测汗腺细胞标志性蛋白的表达。结果:A组和C组在消化30 min后,镜下可见少部分的汗腺细胞团,2 h后A组游离汗腺细胞团明显增多,C组游离汗腺细胞团很少;B组在消化6 h后,才出现部分游离的汗腺细胞团。将汗腺细胞团培养3 d后发现C组汗腺细胞贴壁情况差、成活细胞少;A组和B组的汗腺细胞贴壁情况良好,培养9 d后呈"铺路石样"生长,细胞增殖指数分别为(18±4)%和(17±6)%,无明显差异,免疫细胞化学结果表明:两组细胞癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白7(CK7)表达均为阳性。结论:胰蛋白酶-EDTA和Ⅱ型胶原酶联合消化法能明显缩短汗腺细胞的分离时间,且不影响细胞的活性和增殖特性。

关键词：汗腺胰蛋白酶胶原酶

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