检索结果-内蒙古大学图书馆

感染．炎症．修复 2015年第3期16卷 182-184页

作者：赵阿龙张翠萍赵洪良赵换军谭志军付小兵天津医科大学天津300070 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

正常表皮细胞包括表皮干细胞、短暂增殖细胞和其他角质细胞,以表皮干细胞为主的基底层不断增生分化并向上迁移[1].表皮干细胞是表皮基底部具有不断增殖和分化能力的干细胞,对于维持表皮的自我更新和完整性具有重要意义[2].角蛋白是表皮... 详细信息

正常表皮细胞包括表皮干细胞、短暂增殖细胞和其他角质细胞,以表皮干细胞为主的基底层不断增生分化并向上迁移[1].表皮干细胞是表皮基底部具有不断增殖和分化能力的干细胞,对于维持表皮的自我更新和完整性具有重要意义[2].角蛋白是表皮细胞的结构蛋白,是一类具有支撑和保护功能的纤维状蛋白质,它们通过直径为10nm的微丝在细胞内形成广泛的网状结构.不同分化程度的表皮细胞表达不同的角蛋白,目前已知的角蛋白有49种,包括34种细胞角蛋白和15种毛发角蛋白.

关键词：表皮干细胞角蛋白15 表皮细胞增殖细胞分化能力毛发角蛋白细胞角蛋白角质细胞

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低氧处理对不同年龄C57小鼠骨髓间充质干细胞增殖能力的影响

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感染．炎症．修复 2015年第1期16卷 23-27,F0002页

作者：张振中刘南波刘煜凡李基伟付小兵吴旭南方医科大学南方医院胸心血管外科广东广州510515 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的：探讨低氧处理对不同年龄C57小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖的影响。方法：全骨髓法从3~6周年轻C57小鼠（年轻组）股骨和胫骨的骨髓中提取、分离BMSCs,传代至第6代,部分于37℃、5%CO2条件下中常规培养,连续5d观察细胞的形态及... 详细信息

目的：探讨低氧处理对不同年龄C57小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖的影响。方法：全骨髓法从3~6周年轻C57小鼠（年轻组）股骨和胫骨的骨髓中提取、分离BMSCs,传代至第6代,部分于37℃、5%CO2条件下中常规培养,连续5d观察细胞的形态及数目,绘制细胞生长曲线;部分细胞进行成骨和成脂诱导。另取第6代BMSCs,随机分为低氧处理组（37℃、5%O2条件下培养30min,再常规培养）和阴性对照组（不行低氧处理,仅常规培养）,常规培养8h后固定细胞,结晶紫染色。观察两组细胞处理前后的数量变化。全骨髓法提取18~24个月老龄C57小鼠（老龄组）的骨髓细胞常规培养,连续12d观察细胞的形态及数目并绘制细胞生长曲线。将老龄组C57小鼠的骨髓贴壁细胞分为低氧处理组和阴性对照组,处理方法同年轻小鼠低氧处理和阴性对照组,于常规培养24h后固定细胞,结晶紫染色,观察两组细胞处理前后的数量变化。结果：年轻C57小鼠BMSCs增殖能力强,可传代至第6代,经过5d的培养细胞数量逐渐增加,并具有成骨、成脂诱导分化能力;但经低氧处理后,BMSCs呈片状脱落。老龄C57小鼠的骨髓贴壁细胞增殖能力差,经过12d的原代培养,细胞数量逐渐减少,并且只有一个集落形成;经低氧处理,贴壁细胞数量锐减,无新的集落形成。结论：低氧处理不能在体外扩增阶段提高C57小鼠BMSCs的增殖能力。

关键词：低氧处理 C57小鼠骨髓间充质干细胞细胞增殖

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汗腺细胞与Matrigel基质在裸鼠皮下培养重建汗腺三维结构过程中CK7、CK14和α-SMA抗原表达的动态变化

汗腺细胞与Matrigel基质在裸鼠皮下培养重建汗腺三维结构过程中CK...

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：李雪雪李海红张冰娜张明君付小兵汕头大学医学院第二附属医院烧伤整形科广东汕头515041 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100048

目的：讨Matrigel基底膜基质对人外泌汗腺细胞的分化作用.方法：取手外科手术患者自愿捐赠的正常手指全层皮肤,经Ⅱ型胶原酶消化分离出汗腺组织,贴壁培养,待原代细胞达80％融合后,收集细胞,部分细胞制成爬片行二维细胞免疫荧光检测CK7、...

目的：讨Matrigel基底膜基质对人外泌汗腺细胞的分化作用.方法：取手外科手术患者自愿捐赠的正常手指全层皮肤,经Ⅱ型胶原酶消化分离出汗腺组织,贴壁培养,待原代细胞达80％融合后,收集细胞,部分细胞制成爬片行二维细胞免疫荧光检测CK7、CK14和α-SMA抗原表达.原代汗腺细胞(2×106)与1ml浓缩型Matrigel基底膜基质混匀后注射至裸鼠腹股沟皮下,共24只裸鼠,每个时间点3只裸鼠,于注射后1d、2d、4d、6d、10d、14d、21d和28d取材,行石蜡切片,HE染色观察细胞形态结构,免疫荧光染色检测CK7、CK14和α-SMA的抗原表达.结果：汗腺二维细胞免疫荧光检测示：CK7和CK14表达呈阳性,α-SMA呈阴性表达.汗腺细胞与Matrigel基质在裸鼠皮下培养的HE染色示：2d时观察到细胞团形成,6d时细胞团块中央开始出现腔的结构,随着培养时间的延长细胞团块不断增大,中央腔的直径也随之增长.免疫荧光染色示：1d、2d、4d、6d、10d和14d的汗腺细胞0K14表达均呈阳性,CK7和α-SMA呈阴性;当培养至21d时,CK7和α-SMA呈弱阳性表达,CK14仍呈强阳性;培养至28d时,CK7和α-SMA表达逐渐增强,α-SMA表达在大部分细胞团的周边并呈环形分布,CK7表达在部分细胞团的中央,部分细胞团中央的细胞CK14表达减弱,甚至消失,表达部位类似于α-SMA.结论：汗腺细胞与Matrigel基质的混合物在裸鼠皮下培养,不仅能产生具有中央腔的类管状的三维结构,而且抗原的表达呈动态变化,类似于人类汗腺发育过程中抗原的表达时序.这为我们体外研究汗腺的发育、创伤修复提供了很好的模型.

关键词：

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血必净注射液对系统性红斑狼疮小鼠脾脏T淋巴细胞的免疫调节作用

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感染．炎症．修复 2015年第1期16卷 28-32页

作者：王彦博赵艳琴丁砚兰王强解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048 武警北京总队医院北京100027 中国疾病预防控制中心北京102206

目的:探讨血必净注射液对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:以清洁级EB病毒膜抗原BLLF1基因转基因小鼠30只为SLE模型小鼠,随机分为模型组(8周龄和10周龄各5只)、8周龄治疗组(10只)和10周龄治疗组(10只)。两治疗组... 详细信息

目的:探讨血必净注射液对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:以清洁级EB病毒膜抗原BLLF1基因转基因小鼠30只为SLE模型小鼠,随机分为模型组(8周龄和10周龄各5只)、8周龄治疗组(10只)和10周龄治疗组(10只)。两治疗组给予血必净注射液6.4ml/kg腹腔内注射,每日1次,连续14d。治疗14d后处死,分离脾脏,提取DC和T淋巴细胞,荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验检测T细胞孵育上清和脾组织匀浆液IL-2和TNF-α基因及细胞因子表达水平。结果:与正常对照组比较,SLE小鼠IL-4、TNF-α含量显著升高,而IL-2、IFN-γ水平明显降低,脾脏组织及T淋巴细胞IL-2的基因表达显著下降,而TNF-α基因表达则明显升高(P<0.05或P<0.01)。给予血必净注射液治疗后,与模型组比较,狼疮鼠IL-4、TNF-α含量显著降低,而IL-2、IFN-γ水平明显升高,IL-2基因表达显著升高,TNF-α基因表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。两个治疗组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:血必净治疗能够将脾脏的Th2细胞转化为Th1细胞,改变Th1/Th2的比例和机体的免疫应答类型,对系统性红斑狼疮的免疫功能产生影响。

关键词：系统性红斑狼疮血必净注射液 T 淋巴细胞细胞因子

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糖尿病难愈性创面环境对间充质干细胞修复创面局部代谢功能的影响

糖尿病难愈性创面环境对间充质干细胞修复创面局部代谢功能的影响

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：姚斌高冬蕴黄沙付小兵中国人民解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京海淀区阜成路51号 100085

目的:检测糖尿病难愈性创面渗出液成分对间充质干细胞(Mesenchymal stromal cells,MSC)在修复创面局部代谢功能方面的影响,以期为糖尿病难愈性创面的治疗提供一种新的思路.方法:首先分离培养C57/BL6小鼠骨髓MSCs并传至第三代备用;于普通...

目的:检测糖尿病难愈性创面渗出液成分对间充质干细胞(Mesenchymal stromal cells,MSC)在修复创面局部代谢功能方面的影响,以期为糖尿病难愈性创面的治疗提供一种新的思路.方法:首先分离培养C57/BL6小鼠骨髓MSCs并传至第三代备用;于普通C57/BL6小鼠以及STZ诱导的糖尿病C57/BL6小鼠背部制作全层皮肤缺损创面,3d后提取创面渗出液,灭菌后加入MSC培养基,培养24h后换新鲜培养基继续培养24h,然后收集培养基上清做酶联免疫吸附测定实验(Elisa)检测GLUT-4和IGF-1的表达;并提取MSC细胞总RNA通过RT-PCR在mRNA水平检测GLUT-4和IGF-1的表达;另设一组正常培养的MSC,处理手段相同作为阳性对照.

关键词：

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十年磨一剑：中国创伤医学十年的创新成果与转化应用

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中华创伤杂志 2014年第1期30卷 2-5页

作者：付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

自1999年国家把“严重创伤早期全身性损害及组织修复的基础究”列入国家重点基础研究发展计划项目（973计划）开展系统研究以来，我国的创伤医学无论是基础研究还是临床治疗，无论是学科建设还是对内对外学术交流都取得了突飞猛进的发... 详细信息

自1999年国家把“严重创伤早期全身性损害及组织修复的基础究”列入国家重点基础研究发展计划项目（973计划）开展系统研究以来，我国的创伤医学无论是基础研究还是临床治疗，无论是学科建设还是对内对外学术交流都取得了突飞猛进的发展，某些方面可以说取得了质的转变。2013年在上海召开的“中国工程科技论坛：十年磨一剑——中国创伤医学的创新成果及其转化应用”，对1999年以来主要在以国家“973”创伤项目牵引下获得的多方面成果进行了系统的总结。结果表明，十余年的创新，十余年的发展，不仅解决了创伤医学基础研究和临床治疗中的许多关键科学问题和技术难题，而且这些成果的转化应用，惠及了广大的创伤患者，显著推动了我国创伤医学的快速发展。

关键词：创伤医学应用转化中国早期全身性损害对外学术交流医学基础研究临床治疗

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通过调控表观遗传修饰以提高细胞再程序化效率的研究进展

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感染．炎症．修复 2015年第3期16卷 185-188页

作者：谢欣彤吴漫茵林瑶蔡飒潘宇付小兵深圳大学医学部广东深圳518060 广东省人民医院医学研究中心广东广州510080 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

机体发育过程中,干细胞通过程序性分化过程产生具有特定形态和功能的体细胞.细胞再程序化是通过外源性导入转录因子等方法,使之重新获得分化前的多能性（即去分化）或改变其特性进而转变为另一种组织细胞（即转分化）[1].通过转染4种转... 详细信息

机体发育过程中,干细胞通过程序性分化过程产生具有特定形态和功能的体细胞.细胞再程序化是通过外源性导入转录因子等方法,使之重新获得分化前的多能性（即去分化）或改变其特性进而转变为另一种组织细胞（即转分化）[1].通过转染4种转录因子（Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4,OSKM）,可诱导成纤维细胞再程序化为具有胚胎干细胞特性的诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem cells,iPSCs）[2].

关键词：程序化表观遗传修饰体细胞多能干细胞调控转录因子分化过程 c-Myc

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乌司他丁对失血性休克大鼠心肌组织热休克蛋白70表达的影响

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感染．炎症．修复 2015年第4期16卷 225-227页

作者：王树明刘锐李宗瑜赵增凯高明娟王晓娜胡森盛志勇黑龙江中医药大学附属第一医院急诊科黑龙江哈尔滨150040 哈尔滨市第五医院烧伤科黑龙江哈尔滨150040 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的:研究乌司他丁对失血性休克大鼠心肌热休克蛋白70(HSP70)表达水平的影响及意义。方法 :80只雄性SD大鼠按随机数字表法分为单纯失血性休克组和乌司他丁组(n=40)。无菌手术分离左侧股动脉置管,按全身血容量的45%经股动脉放血制备失血... 详细信息

目的:研究乌司他丁对失血性休克大鼠心肌热休克蛋白70(HSP70)表达水平的影响及意义。方法 :80只雄性SD大鼠按随机数字表法分为单纯失血性休克组和乌司他丁组(n=40)。无菌手术分离左侧股动脉置管,按全身血容量的45%经股动脉放血制备失血性休克模型。失血后即刻分别静脉注射生理盐水(单纯失血性休克组)和乌司他丁40 000 U/kg(乌司他丁组)。两组于失血后4 h各取10大鼠的腹主动脉血,然后处死动物取心肌组织,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆肌钙蛋白I(c Tn I)含量和心肌组织HSP70的表达水平;各组余下大鼠观察12 h生存情况。结果 :与单纯失血性休克组比较,失血后4 h乌司他丁组血浆c Tn I含量显著降低[(3.16±0.31)ng/ml比(4.01±0.23)ng/ml,P<0.05];心肌组织HSP70表达水平显著升高[(189±13)pg/ml比(167±12)pg/ml,P<0.05]。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,乌司他丁能显著延长失血性休克大鼠的存活时间,使休克12 h大鼠存活率由0升高至50%(P<0.05)。结论 :乌司他丁对失血性休克大鼠早期心肌损害有保护作用并能延长其存活时间,其机制可能与乌司他丁能增加心肌保护性蛋白HSP70的表达有关。

关键词：休克失血性乌司他丁热休克蛋白70

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DNA损伤在去分化源性表皮干细胞安全性评价中的作用及相关机制的研究

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感染．炎症．修复 2015年第1期16卷 17-22页

作者：潘宇余细勇吴漫茵付小兵蔡飒广东省人民医院广东省医学科学院医学研究中心广东广州510080 深圳大学医学部广东深圳518060 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的:从分子、细胞及在体水平评估DNA损伤和非DNA损伤因素诱导所得去分化源性表皮干细胞的安全性,探讨DNA损伤及其应答分子对其安全性评估的意义与机制。方法:分别采用紫外线(UV)照射和bFGF处理诱导方案诱导表皮细胞去分化。采用MTT法... 详细信息

目的:从分子、细胞及在体水平评估DNA损伤和非DNA损伤因素诱导所得去分化源性表皮干细胞的安全性,探讨DNA损伤及其应答分子对其安全性评估的意义与机制。方法:分别采用紫外线(UV)照射和bFGF处理诱导方案诱导表皮细胞去分化。采用MTT法比较正常培养和血清培养条件下的两组去分化源性表皮干细胞的增殖能力;流式细胞术检测凋亡情况;Western blotting检测各组去分化过程中DNA损伤应答分子γ-H2AX、激活型caspase、p53、p21表达的变化;在雌性BALB/c裸小鼠右侧腋窝皮下注射人黑色素瘤细胞及两种去分化源性表皮干细胞,同时设生理盐水注射对照,30d后取瘤块称重,评估两种去分化源性干细胞的成瘤性。结果:1两种去分化源性表皮干细胞均表现出较强的增殖能力,UV照射所得干细胞具有较强的血清耐受性;2UV照射可导致表皮细胞DNA损伤和细胞凋亡,影响表皮细胞中p53和p21水平,而bFGF处理组无此作用;3两种去分化源性表皮干细胞均无体内成瘤性。结论:去分化过程中细胞DNA损伤与否是评价去分化源性干细胞安全性的较敏感的关键指标,因此bFGF处理诱导与UV照射所得的表皮干细胞相比更为安全可靠。

关键词：表皮干细胞去分化 DNA 损伤安全性评价

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丙酮酸钠羟乙基淀粉对50%总体表面积Ⅲ度烧伤大鼠肾血流量和肾功能的影响

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中华损伤与修复杂志（电子版） 2015年第5期10卷 13-19页

作者：高明娟刘维维王晓娜刘洋白晓东周方强刘锐郑金光赵增凯胡森解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048 武警总医院烧伤整形科北京100039 美国芝加哥费森尤斯透析中心 60008 上海三代医药科技有限公司 201203 哈尔滨市第五医院烧伤科 150040

目的研究丙酮酸钠羟乙基淀粉(HES)胶体液对50%总体表面积(TBSA)Ⅲ度烧伤大鼠肾血流量和肾功能指标的影响。方法选取SD大鼠180只,100℃水浴烫伤制成50%TBSAⅢ度烧伤模型,37℃水浴制备假伤模型。随机数字表法分为5组:单纯烧伤组(n=20)、... 详细信息

目的研究丙酮酸钠羟乙基淀粉(HES)胶体液对50%总体表面积(TBSA)Ⅲ度烧伤大鼠肾血流量和肾功能指标的影响。方法选取SD大鼠180只,100℃水浴烫伤制成50%TBSAⅢ度烧伤模型,37℃水浴制备假伤模型。随机数字表法分为5组:单纯烧伤组(n=20)、假伤组(n=40)、丙酮酸钠HES组(n=40)、醋酸钠HES组(n=40)和氯化钠HES组(n=40),其中前2组大鼠不补液,后3组(统称复苏组)伤后通过颈静脉导管补液,用微量输液泵控制输液速度。静脉补液总量为0.75 m L/kg×1%TBSA,胶晶比例1∶1,伤后12 h内输完,前4 h各复苏组输入总量的1/2均为醋酸钠林格氏液,后8 h输入总量的余1/2为相应不同胶体。单纯烧伤组于伤后4、8 h分别选取鼠10只,余4组于伤后4、8、12、24 h各时刻点选取鼠10只,激光多普勒血流仪测定肾血流量(RBF),全自动生化分析仪测定血浆中肌酐和尿素氮含量。采用SPSS17.0统计软件包分析,组间两两比较采用单因素方差分析。结果伤后4、8 h,单纯烧伤组大鼠RBF(32.10±6.40、11.80±5.43)BPU较假伤组(146.50±23.73、144.80±24.27)BPU降低,差异有统计学意义(P<0.05);伤后4、8、12、24 h,丙酮酸钠HES组、醋酸钠HES组、氯化钠HES组大鼠RBF分别为(46.40±8.14、104.80±22.75、89.40±12.07、77.10±10.78)、(45.50±8.21、77.20±13.19、70.60±10.55、56.90±8.49)、(45.30±8.76、58.10±11.32、51.70±9.65、40.20±8.25)BPU,均较假伤组(146.50±23.73、144.80±24.27、147.60±26.55、143.20±23.94)BPU明显降低,差异均有统计学意义(P均小于0.05);伤后8、12、24 h,丙酮酸钠HES组RBF均高于醋酸钠HES组和氯化钠HES组,醋酸钠HES组又高于氯化钠HES组,差异均有统计学意义(P均小于0.05)。伤后24 h,丙酮酸钠HES组血浆肌酐(66.70±6.67)μmol/L显著低于醋酸钠HES组(80.20±9.97)μmol/L和氯化钠HES组(91.30±9.50)μmol/L,差异均有统计学意义(P均小于0.05),丙酮酸钠HES组尿素氮(29.00±2.48)mmol/L显著低于醋酸钠HES组(34.60±3.11)mmol/L和氯化钠HES组(44.40±4.89)mmol/L,差异均有统计学意义(P均小于0.05)。结论严重烧伤大鼠静脉复苏时,HES 130/0.4的载体溶液对肾功能有明显的影响,丙酮酸钠HES能显著改善50%TBSA烧伤大鼠RBF和肾功能指标,优于常用的氯化钠HES和醋酸钠HES。

关键词：羟乙基淀粉烧伤缺血肾血流量,有效肾功能丙酮酸钠

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