检索结果-内蒙古大学图书馆

世界华人消化杂志 2004年第4期12卷 938-940页

作者：党晓燕成军邓红中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 西安交通大学第二医院传染科陕西省西安市710004

癌基因(oncogene)是一类编码关键性调控蛋白的正常细胞基因，在正常情况下，不表达或只有有限表达，又称原癌基因(proto-oncogene)，当受到理化等因素刺激时，他们可以异常表达，导致细胞的增生、分化或癌变，众所周知，乙型肝炎病毒(H... 详细信息

癌基因(oncogene)是一类编码关键性调控蛋白的正常细胞基因，在正常情况下，不表达或只有有限表达，又称原癌基因(proto-oncogene)，当受到理化等因素刺激时，他们可以异常表达，导致细胞的增生、分化或癌变，众所周知，乙型肝炎病毒(HBV)不仅可引起急慢性病毒性肝炎，而且与肝纤维化和肝细胞癌(HCC)的发生及发展密切相关，许多实验已证实肝细胞癌变过程涉及多种原癌基因的激活和突变，其中HBV对原癌基因c-fos的激活及表达调节也越来越受到关注。通过对HBV与c-fos之间表达调节的阐述，有助于进一步了解HBV导致HCC的分子学机制。

关键词：乙型肝炎病毒 C-fos基因基因表达癌基因肿瘤

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乙型肝炎病毒基因分型的临床意义

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世界华人消化杂志 2004年第7期12卷 1670-1673页

作者：杨艳杰成军陈东风吴煜黄燕萍钟彦伟王春花刘敏中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 中国人民解放军第三军医大学大坪医院消化内科重庆市400038

虽然近年来对乙型肝炎病毒(HBV)基因组变异已边行了较为系统的研究,但仍有许多问题尚未解决.目前研究的热点集中在HBV基因型的特点及临床意义和HBV聚合酶基因变异与核苷类似物耐药性的研究.根据聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-R... 详细信息

虽然近年来对乙型肝炎病毒(HBV)基因组变异已边行了较为系统的研究,但仍有许多问题尚未解决.目前研究的热点集中在HBV基因型的特点及临床意义和HBV聚合酶基因变异与核苷类似物耐药性的研究.根据聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)基因型分型法,目前已将前-S基因分为A,B,C,D,E,F,G,H八种基因型.现就HBV基因型分型方法,基因型与肝炎疾病的关系、预后以及与干扰素、拉米夫定等抗病毒疗效相关性的研究作一综述.

关键词：乙型肝炎病毒基因分型聚合酶链反应 PCR-RFLP

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β_2-微球蛋白对乙型肝炎病毒核心启动子转录活性的调节作用

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世界华人消化杂志 2004年第10期12卷 2491-2494页

作者：高学松成军甄真杨艳杰黄燕萍郭江刘妍戴久增中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 河北医科大学第三医院感染科河北省石家庄市050051

目的:研究β2-m对核心启动子表达的调节作用方法:根据HBV核心启动子及β2-微球蛋白的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和β2-微球蛋白基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白的真核表达载体,... 详细信息

目的:研究β2-m对核心启动子表达的调节作用方法:根据HBV核心启动子及β2-微球蛋白的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和β2-微球蛋白基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白的真核表达载体,脂质体法瞬时转染HepG2细胞.结果:成功构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白(β2-m)的真核表达载体.脂质体法瞬时转染HepG2细胞48h后,核心启动子在β2-微球蛋白(β2-m)的影响下,其启动子活性降底2倍.结论:β2-微球蛋白(β2-m)

关键词： β2-微球蛋乙型肝炎病毒核心启动子转录活性调节作用

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核孔复合体相互作用蛋白(NPIP)对乙型肝炎病毒核心启动子转录活性的调节作用

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世界华人消化杂志 2004年第10期12卷 2488-2491页

作者：高学松成军甄真黄燕萍郭江刘妍戴久增中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 河北医科大学第三医院感染科河北省石家庄市050051

目的:构建HBV核心启动子及NPIP的重组载体,研究NPIP对核心启动子表达的调节作用.方法:根据HBV核心启动子及NPIP的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和NPIP基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真... 详细信息

目的:构建HBV核心启动子及NPIP的重组载体,研究NPIP对核心启动子表达的调节作用.方法:根据HBV核心启动子及NPIP的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和NPIP基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真核表达载体,脂质体法瞬时转染HepG2细胞.结果:成功构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真核表达载体.脂质体法瞬时转染HepG2细胞48h后,用ELISA法检测β-gal的表达,显示核心启动子在NPIP的影响下,其活性有降低3-4倍.通过体内实验证明NPIP可以下调HBV核心启动子的表达.结论:NPIP明显降低HBV核心启动子的表达,为进一步研究HBV复制的分子生物学机制提供了新的线索.

关键词：核孔复合体相互作用蛋白 NPIP 乙型肝炎病毒核心启动子转录活性调节作用

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应用表达谱芯片技术研究NS5ATP13的反式调节基因

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世界华人消化杂志 2004年第11期12卷 2757-2761页

作者：张黎颖邓红成军党晓燕刘妍蔺淑梅黄燕萍纪冬吴顺华纪泛扑邵清西安交通大学第二医院感染科陕西省西安市710004 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039

目的:应用基因表达谱芯片研究HCV非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5ATP13的反式调节基因. 方法:构建NS5ATP13基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)- NS5ATP13,应用基因表达谱芯片技术对pcDNA3.1(-)- NS5ATP13转染的人肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞... 详细信息

目的:应用基因表达谱芯片研究HCV非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5ATP13的反式调节基因. 方法:构建NS5ATP13基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)- NS5ATP13,应用基因表达谱芯片技术对pcDNA3.1(-)- NS5ATP13转染的人肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞和转染空载体的相同细胞的差异表达mRNA进行检测和分析. 结果:HepG2细胞经转染NS5ATP13后,有86条差异基因表达,其中46条基因表达增强,40条基因表达降低.这些差异表达的基因与细胞的增生、分化及细胞的信号转导、代谢、凋亡密切相关. 结论:应用基因表达谱芯片成功筛选了NS5ATP13的反式调节基因,为进一步阐明NS5ATP13的反式激活作用及免疫调节机制提供了新的依据.

关键词：表达谱芯片技术 NS5ATP13 反式调节基因丙型肝炎病毒外膜蛋白

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HCV核心蛋白与HBV X蛋白协同反式激活作用的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2003年第1期17卷 70-72页

作者：刘妍成军邵得志王琳钟彦伟董菁李克李莉解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

目的　探讨HCV核心蛋白与HBVX蛋白的协同反式激活作用。方法　构建表达HCV核心蛋白的重组质粒pcDNA3 .1( )core和表达HBVX蛋白的重组质粒pcDNA3 .1( )X ;转染HepG2 细胞 ,从转录和翻译水平鉴定病毒基因的瞬时表达 ;与报告质粒pSV lacZ... 详细信息

目的　探讨HCV核心蛋白与HBVX蛋白的协同反式激活作用。方法　构建表达HCV核心蛋白的重组质粒pcDNA3 .1( )core和表达HBVX蛋白的重组质粒pcDNA3 .1( )X ;转染HepG2 细胞 ,从转录和翻译水平鉴定病毒基因的瞬时表达 ;与报告质粒pSV lacZ共转染HepG2 细胞 ,检测 β 半乳糖苷酶表达活性 ,酶的活性反映了表达的肝炎病毒蛋白对SV40病毒早期启动子增强子功能的影响。结果　构建成HCV核心蛋白及HBVX蛋白的重组表达载体pcDNA3 .1( )core、pcDNA3 .1( )X ;在HepG2 细胞均能瞬时表达相应的肝炎病毒蛋白 ;单独共转染试验中pcDNA3 .1( )core、pcDNA3 .1( )X组的 β 半乳糖苷酶的表达分别是对照的 4.9、3 .5倍 ,两种质粒共同转染时酶的表达是对照的 9倍 ;表达质粒对 β 半乳糖苷酶表达的激活作用呈剂量依赖性。结论　HepG2 细胞中表达的HCV核心蛋白和HBVX蛋白均具有反式激活SV40早期启动子增强子的功能 ,并且两种蛋白的反式激活功能具有协同特性。本试验有助于解释HCV、HBV感染 ,尤其是共同感染的致病

关键词：丙型肝炎病毒病毒核心蛋白类乙型肝炎病毒反式激活启动区

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抗乙型肝炎病毒联合治疗方案的研究进展

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中华传染病杂志 2003年第2期21卷 157-160页

作者：成军李莉解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

干扰素α(IFNα),以拉米夫定、阿地福韦、恩替卡韦为代表的核苷类似物和以胸腺素α1为代表的具有免疫调节作用的细胞因子是目前临床上进行抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗的主要药物.这些药物单独用药时在25%-40%患者中取得了不同程度的抗病毒... 详细信息

干扰素α(IFNα),以拉米夫定、阿地福韦、恩替卡韦为代表的核苷类似物和以胸腺素α1为代表的具有免疫调节作用的细胞因子是目前临床上进行抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗的主要药物.这些药物单独用药时在25%-40%患者中取得了不同程度的抗病毒治疗效果,但不满意.目前IFNα仍然是慢性乙型肝炎抗病毒治疗的首选药物.鉴于HBV与人免疫缺陷病毒(HIV)在分子生物学特性上有诸多相似之处,不同作用机制的抗HIV药物组成的所谓的"鸡尾酒"疗法在抗HIV治疗中已经发挥了重要作用,而且目前使用的抗HBV的不同药物一起使用的联合治疗和不同药物先后使用的序贯疗法的新型抗病毒治疗方案,将是抗HBV治疗研究的方向.

关键词：抗乙型肝炎病毒联合治疗方案研究进展乙型肝炎干扰素拉米夫定阿地福韦

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乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因克隆化的研究

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中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 5-7页

作者：刘妍成军陆荫英王刚牟劲松李莉张玲霞陈菊梅中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBX反式激活相关基因。方法以HBX表达质粒pcDNA3.1(-)-X转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)转染的HepG2细胞为对照;制备转染后的... 详细信息

目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBX反式激活相关基因。方法以HBX表达质粒pcDNA3.1(-)-X转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)转染的HepG2细胞为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa I酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果成功构建人HBX反式激活基因差异表达的cDNA消减文库。文库扩增后得到85个白色克降,进行菌落PCR分析,均得到200～1000bp插入片段。挑取含有插入片段的65个克隆进行测序,并通过生物信息学分析获得19种已知基因序列,和15个未知基因。结论应用SSH技术成功构建了HBX反式激活基因差异表达的cDNA消减文库。该文库的建立为进一步阐明HBX反式调节的靶基因及致肝细胞癌发生的分子生物学机制提供理论依据。

关键词：乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因克隆化研究

来源：评论

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低密度脂蛋白受体的研究进展

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中华肝脏病杂志 2003年第3期11卷 190-192页

作者：成军李莉中国人民解放军第三0二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)受体的研究,主要集中在CD81分子和低密度脂蛋白受体(low density li-poprotein-receptor,LDL-R)两种穿膜蛋白分子上[1].最近的研究表明,LDL-R可能是H CV感染肝细胞的受体候选分子[2].

关键词：低密度脂蛋白受体研究进展丙型肝炎病毒

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乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因的筛选

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中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 8-10页

作者：陆荫英李克王琳刘妍王业东成军张玲霞中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA... 详细信息

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落,PCR从中扩增出目的片段并测序,进行生物信息学分析。结果成功克隆出HBVPreS2基因并在酵母细胞中表达,配合后选出既能在4缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基又能在铺有X-α-半乳糖(X-α-gal)的4缺培养基上生长并变成蓝色的真阳性菌落26个,其中含金属硫蛋白A2基因的菌落有12个,细胞色素C氧化酶Ⅱ有1个,细胞色素:P450 IVF亚基2个,细胞色素C氧化酶Ⅳ亚基同功酶1有2个,人血白蛋白3个,。Na+-K+ATP酶β1亚基1个,前清蛋白2个,植物血凝素半乳糖苷结合亚基1个,未知基因2个。结论成功克隆出HBV PreS2蛋白的结合蛋白,为进一步研究HBV PreS2的作用提供了新线索。

关键词：乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因筛选

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