检索结果-内蒙古大学图书馆

白细胞介素—12和白细胞介素—18质粒对HBcAg DNA疫苗诱导小鼠（H—2^d）体液免疫应答的影响

南京医科大学学报（自然科学版） 2002年第4期22卷 284-287页

作者：吴欣黄祖瑚成军吴兴柳董菁陆北川南京医科大学第一附属医院感染科江苏南京210029 解放军三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

目的:观察编码鼠白细胞介素(IL)-12和IL-18的真核表达载体犤pcDNA3.1/IL-12(以下简称IL-12质粒)和pcDNA3.1/IL-18(以下简称IL-18质粒)犦对HBcAgDNA疫苗(pJW4303/HBc)诱导Balb/c(H-2d)小鼠免疫应答的影响。方法:肌肉注射接种IL-12质粒、IL-18质粒和HBcAgDNA疫苗,ELISA法检测小鼠血清抗HBcIgG亚类(IgG1、IgG2a)水平。结果:免疫6周后,联合注射IL-12、IL-18和IL-12+IL-18组小鼠血清的抗HBc终点滴度均明显高于单纯注射HBcAgDNA疫苗组小鼠(P<0.05),抗HBcIgG亚类以IgG2a占优。结论:IL-12、IL-18以及IL-12+IL-18联合HBcAgDNA疫苗注射能够提高小鼠血清中抗HBc水平。

关键词：乙型肝炎核心抗原 DNA疫苗白细胞介素12 白细胞介素18 小鼠

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丙型肝炎病毒感染与脂类代谢的相关性

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肝脏 2002年第1期7卷 56-58页

作者：成军李莉张玲霞陈菊梅北京解放军第三〇二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室100039

临床上发现慢性丙型肝炎肝脏病理特征十分突出的一点就是脂肪变性。慢性实验性感染丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)的黑猩猩肝脏脂肪变也是常见的一种病理改变。ＨＣＶ核心蛋白编码基因的转基因小鼠 ,其肝脏也有明显的脂肪变性改变 ,所以目前关... 详细信息

临床上发现慢性丙型肝炎肝脏病理特征十分突出的一点就是脂肪变性。慢性实验性感染丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)的黑猩猩肝脏脂肪变也是常见的一种病理改变。ＨＣＶ核心蛋白编码基因的转基因小鼠 ,其肝脏也有明显的脂肪变性改变 ,所以目前关于ＨＣＶ感染与机体脂肪代谢紊乱的问题引起了人们的关注。现有的研究表明 ,ＨＣＶ感染与肝脏的脂类代谢有着十分密切的关系。一、血清ＨＣＶ与血脂成分的结合关于ＨＣＶ与脂类代谢的相互关系 ,首先注意到的是ＨＣＶ病毒颗粒与血清中不同的脂蛋白成分结合的能力。ＨＣＶ病毒颗粒与血清中不同的脂蛋白成分结合 ,可能是干扰脂类代谢 ,形成脂肪肝的重要原因。早在 1992年Ｔｈｏｍｓｓｅｎ等[1] 就发现了含有ＨＣＶＲＮＡ的病毒颗粒密度差别显著 ,且与血清中的脂蛋白有着某种关系。慢性丙型肝炎患者血清中的ＨＣＶＲＮＡ存在于ＨＣＶ的病毒颗粒中。但是 ,含有ＨＣＶＲＮＡ的颗粒 ,其蔗糖密度梯度离心的密度却有很大的差别 ,即 1.0 3～ 1.2 0ｇ/ｃｍ3 之间。在有些血清中ＨＣＶＲＮＡ仅限于低密度颗粒中 ,即 1.0 3～ 1.0 8ｇ/ｃｍ3 的颗粒中 ,而在另一些血清中 ,ＨＣＶＲＮＡ几乎存在于所有的密度颗粒中。...

关键词：丙型肝炎脂类代谢相关性

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HCV NS3及其对信号转导途径的影响

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国外医学（流行病学．传染病学分册） 2002年第6期29卷 342-345页

作者：牟劲松刘妍解放军第三〇二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 100039

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3(HCV NS3)在HCV多聚蛋白的成熟和病毒复制过程中发挥了重要作用,同时通过蛋白质之间的相互作用,对肝细胞的生长、代谢,甚至恶性转化产生影响。本文就HCV NS3及其对信号转导途径的影响作了综述。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3 信号转导基因结构

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拉米夫定在几种特殊肝脏疾病状态下的应用

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传染病信息 2002年第3期15卷 111-115页

作者：成军张玲霞解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

本文旨在介绍国外相关适应症应用拉米夫定的结果和经验,以供国内同行参考。 1 拉米夫定在儿童患者中的应用成年患者拉米夫定用药剂量100mg/d,研究证明增加剂量并不能显著增加拉米夫定的抗病毒疗效,因此没有必要盲目增加用药剂量以提高... 详细信息

本文旨在介绍国外相关适应症应用拉米夫定的结果和经验,以供国内同行参考。 1 拉米夫定在儿童患者中的应用成年患者拉米夫定用药剂量100mg/d,研究证明增加剂量并不能显著增加拉米夫定的抗病毒疗效,因此没有必要盲目增加用药剂量以提高疗效。关于儿童患者的拉米夫定用药剂量。

关键词：拉米夫定肝脏疾病应用治疗

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丙型肝炎病毒结构基因转基因小鼠引起肝脏脂肪变

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世界华人消化杂志 2002年第9期10卷 1022-1026页

作者：成军任进余李莉陆志檬李克洪源陆荫英王刚刘妍张玲霞陈菊梅中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 上海第二医科大学瑞金医院临床免疫室上海20004

目的:建立持续表达和诱导表达型丙型肝炎病毒(HCV)结构基因(包括核心蛋白和包膜蛋白E1、E2编码基因)的转基因小鼠动物模型,探讨HCV结构基因表达导致肝脏脂肪变的病理改变.方法:以含有近全长HCVcDNA的质粒为模板,通过多聚酶链反应(PCR)... 详细信息

目的:建立持续表达和诱导表达型丙型肝炎病毒(HCV)结构基因(包括核心蛋白和包膜蛋白E1、E2编码基因)的转基因小鼠动物模型,探讨HCV结构基因表达导致肝脏脂肪变的病理改变.方法:以含有近全长HCVcDNA的质粒为模板,通过多聚酶链反应(PCR)技术扩增HCV结构基因的DNA片段(约2.2kb),克隆到真核表达载体pcDNA4HisMas和pMT/BiP/V5-HisA中,分别构建成持续表达型表达载体pcDNA4HisMas-HCVCore-E2和诱导表达型表达载体pMT/BiP/V5-HisA-HCVCore-E2.以限制性内切酶分析和目的DNA片段的核苷酸序列分析,证实构建HCV结构基因的真核表达载体正确无误.以脂质体体外转染COS-7细胞系,利用抗-HCVE2的多克隆抗体进行Westernblot杂交分析,证实转染细胞中有HCVE2蛋白的表达.利用小鼠受精卵细胞核微注射方法,导入线性化表达载体的DNA,利用假孕小鼠的受精卵植入方法,建立了表达HCV结构基因的转基因小鼠模型.对于持续表达型转基因小鼠的死胎、6月龄以及硫酸铜诱导表达型的转基因小鼠模型的肝脏组织,进行HE染色和病理学特征的分析.结果:构建了持续性表达和可诱导性表达型的HCV结构基因表达载体pcDNA4HisMas-HCVCore-E2和pMT/BiP/V5-HisA-HCVCore-E2,体外转染COS-7细胞证实转染细胞中有HCVE2抗原的表达.对于持续表达型转基因小鼠死胎肝脏病理学特征进行分析,发现肝组织尚未分化发育完成,肝内有大量造血细胞,肝细胞空泡变性,单个核细胞聚集现象.对于持续表达HCV结构基因的6月龄转基因小鼠的肝脏进行病理学分析,发现中央静脉区肝细胞小泡型脂肪变性,中央静脉周围细胞溶解坏死,中央静脉明显扩大,少数组织中亦见大泡型脂肪变性.对于可诱导型转基因小鼠的肝脏进行病理学分析,发现肝小叶内中央静脉周围坏死区累及5-10个小叶,周围无淋巴细胞浸润,交界区可见多数肝细胞核异常,或固化,或呈花环状,或溶解为淡蓝色无定形基质.泡浆内残留大量脂肪小泡,肝脏脂肪变与核异常有一移行过程.结论:建立了表达HCV结构基因的转基因小鼠,发现HCV结构基因的转基因小鼠肝脏有典型的脂肪变病理改变,为进一步研究HCV感染引起的慢性丙型肝炎合并脂肪变的特征和机制研究奠定了基础.

关键词：动物模型丙型肝炎病毒结构基因转基因肝脏脂肪变

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IL-12和IL-18表达质粒与HBcAg核酸疫苗联合接种小鼠的免疫应答观察

IL-12和IL-18表达质粒与HBcAg核酸疫苗联合接种小鼠的免疫应答观察

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中华医学会第十一次全国病毒性肝炎及肝病学术会议

作者：黄祖瑚吴欣成军邢益平董菁李军卢山南京医科大学第一附属医院感染病科解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心美国马萨诸塞大学医学中心基因免疫研究室

特异性细胞免疫功能低下是慢性乙型肝炎的主要致病机制之一.动物实验结果表明,HbsAg和HbcAg核酸疫苗均能刺激宿主产生一定强度的特异性免疫应答.有报道以细胞因子为佐剂可以提高核酸疫苗的免疫应答效能.本文选用同属Th1型细胞因子的IL-1... 详细信息

特异性细胞免疫功能低下是慢性乙型肝炎的主要致病机制之一.动物实验结果表明,HbsAg和HbcAg核酸疫苗均能刺激宿主产生一定强度的特异性免疫应答.有报道以细胞因子为佐剂可以提高核酸疫苗的免疫应答效能.本文选用同属Th1型细胞因子的IL-12和(或)IL-18表达质粒与HbcAg核酸疫苗联合免疫小鼠,IL-12和IL-18表达质粒对HbcAg核酸疫苗所诱导的特异性免疫应答能产生增强效应,尤以对特异性CTL活性的增强作用为著.

关键词：乙型肝炎病毒免疫学 IL-12 IL-18 HBcAg核酸疫苗

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基因芯片技术的原理及其在肝病研究中的应用

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中华肝脏病杂志 2002年第4期10卷 302-302页

作者：成军解放军第三0二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室

基因芯片(gene chip),即DNA 芯片(DNA chip)代表的微阵列(microar-ray)技术,是集成了成千上万的网络状密集排列的基因探针,能够在同一时间内杂交分析大量的基因,迅速读取生命相关的基因信息的一种高通量分析技术.这种技术在基因诊断、... 详细信息

基因芯片(gene chip),即DNA 芯片(DNA chip)代表的微阵列(microar-ray)技术,是集成了成千上万的网络状密集排列的基因探针,能够在同一时间内杂交分析大量的基因,迅速读取生命相关的基因信息的一种高通量分析技术.这种技术在基因诊断、基因表达、基因组研究、发现新基因及各种病原体的研究中具有广泛的应用前景.在肝脏疾病的研究中也具有十分重要的意义.

关键词：基因芯片技术肝病研究应用 PCR扩增分子生物学

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硕大利什曼原虫激活蛋白激酶C受体的基因克隆与序列分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2001年第6期19卷 373-374页

作者：成军夏小兵王刚刘妍钟彦伟王琳杨继珍解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

激活蛋白激酶C受体(receptor for activated protem ***)基因家族的成员在目前已知的所有生物类型中普遍存在,在利什曼原虫体内也不例外[1].利什曼原虫表达的RACK蛋白具有很强的抗原性,能够诱导感染机体的免疫系统,产生针对RACK蛋白很... 详细信息

激活蛋白激酶C受体(receptor for activated protem ***)基因家族的成员在目前已知的所有生物类型中普遍存在,在利什曼原虫体内也不例外[1].利什曼原虫表达的RACK蛋白具有很强的抗原性,能够诱导感染机体的免疫系统,产生针对RACK蛋白很强的细胞免疫应答反应[2].为了研究硕大利什曼原虫RACK的基因结构特点,及其作为候选疫苗的应用前景,我们从体外培养的硕大利什曼原虫的基因组DNA中,应用多聚酶链反应(PCR)技术扩增获得了该原虫的RACK基因,并对该基因和编码产物的序列进行了分析.

关键词：利什曼原虫蛋白激酶C受体基因克隆多聚酶链反应 RACK基因

来源：评论

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杜氏利什曼原虫蛋白磷酸酶-2C的基因克隆化与序列分析

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中国人兽共患病杂志 2001年第3期17卷 37-39页

作者：成军夏小兵王刚刘妍钟彦伟王琳杨继珍解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心

目的　克隆杜氏利什曼原虫 (Leishmaniadonovani,Ld) 1S株蛋白磷酸酶 2C(PP2C)的编码基因 ,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗研究奠定基础。方法　体外培养杜氏利什曼原虫 1S株无鞭毛体 ,常规方法从虫体提取制备基因组DNA。... 详细信息

目的　克隆杜氏利什曼原虫 (Leishmaniadonovani,Ld) 1S株蛋白磷酸酶 2C(PP2C)的编码基因 ,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗研究奠定基础。方法　体外培养杜氏利什曼原虫 1S株无鞭毛体 ,常规方法从虫体提取制备基因组DNA。以夏科氏利什曼原虫 (Leishmaniachagasi,Lc)的PP2C基因序列为参照 ,设计并合成利什曼原虫PP2C基因序列特异性的引物。结果　以杜氏利什曼原虫的基因组为模板 ,利用多聚酶链反应 (PCR)技术 ,扩增获得了杜氏利什曼原虫PP2C的全长编码基因。基因序列测定结果表明 ,杜氏利什曼原虫 1S株PP2C基因序列长度为 1317bp ,开放读码框架由 12 2 1bp组成 ,编码产物为 40 6个氨基酸残基。获得的杜氏利什曼原虫 1S株的PP2C基因与来源于夏科氏利什曼原虫的PP2C氨基酸残基序列的同源性为 95 % (387/ 40 6 )。结论　本研究克隆了杜氏利什曼原虫的PP2C基因。

关键词：杜氏利什曼原虫蛋白磷酸酶2C 基因疫苗 T细胞抗原基因克隆化序列分析

来源：评论

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亚马逊利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因的克隆化与序列分析

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中国地方病学杂志 2001年第3期20卷 175-177页

作者：成军钟彦伟刘妍杨继珍董菁解放军第三二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

目的　克隆亚马逊利什曼原虫 (***)无鞭毛体蛋白 (am astin)的编码基因 ,并对其同源基因序列进行分析。方法　根据我们首次克隆的硕大利什曼原虫 (L.m ajor)无鞭毛体蛋白的编码基因 ,设计并合成核苷酸序列特异性引物 ,以亚马逊利什曼原... 详细信息

目的　克隆亚马逊利什曼原虫 (***)无鞭毛体蛋白 (am astin)的编码基因 ,并对其同源基因序列进行分析。方法　根据我们首次克隆的硕大利什曼原虫 (L.m ajor)无鞭毛体蛋白的编码基因 ,设计并合成核苷酸序列特异性引物 ,以亚马逊利什曼原虫基因组 DNA为模板 ,以多聚酶链反应 (PCR)技术扩增无鞭毛体蛋白的编码基因 DNA片段 ,并进行核苷酸序列测定以及核苷酸序列的同源性分析。结果　克隆了亚马逊利什曼原虫无鞭毛体蛋白的编码基因 ,含有单一开放读框 ,长度为 5 5 2 bp,编码的无鞭毛体蛋白由 183个氨基酸残基 (aa)组成。亚马逊利什曼原虫与硕大利什曼原虫无鞭毛体蛋白编码基因之间高度同源 ,在核苷酸与氨基酸残基序列水平上的同源性分别为 96 %和 94%。

关键词：利什曼原虫无鞭毛体基因克隆化序列分析

来源：评论

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