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植物保护学报 2013年第1期40卷 1-4页

作者：马康生刘彦飞仵均祥西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室陕西杨凌712100

为研究温、湿度对麦红吸浆虫老熟幼虫脱穗的影响,在室内条件下,以小麦黄熟期麦红吸浆虫老熟幼虫尚未脱穗的被害麦穗为材料,测定不同温、湿度及处理时间对麦红吸浆虫老熟幼虫脱穗的影响,其中湿度通过PE自封袋加水调节。温度为12～16℃时... 详细信息

为研究温、湿度对麦红吸浆虫老熟幼虫脱穗的影响,在室内条件下,以小麦黄熟期麦红吸浆虫老熟幼虫尚未脱穗的被害麦穗为材料,测定不同温、湿度及处理时间对麦红吸浆虫老熟幼虫脱穗的影响,其中湿度通过PE自封袋加水调节。温度为12～16℃时老熟幼虫脱穗率明显高于其它温度处理,14℃达到峰值24.78%。每袋加水2 mL时脱穗率达39.6%,明显高于其它湿度处理。处理12～36h脱穗率明显增加,处理48h时脱穗率与36h差异不显著。表明在14℃、每袋加水2mL、处理时间为36 h时麦红吸浆虫老熟幼虫最易脱穗活动。

关键词：麦红吸浆虫温度湿度老熟幼虫脱穗

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小麦对麦长管蚜的耐害性及评估方法

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植物保护学报 2022年第4期49卷 983-993页

作者：胡想顺李广阔张战凤赵惠燕刘同先西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室农业农村部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室陕西杨陵712100 新疆农业科学院植物保护研究所农业农村部西北荒漠绿洲作物有害生物综合治理重点实验室乌鲁木齐830091

为更有效地将耐害性用于小麦病虫害的绿色防控,该文就小麦对麦长管蚜的耐蚜性及其评估方法进行总结。具有耐蚜性的小麦受到一定数量蚜虫为害时,田间产量损失不明显,或能够通过生理生态途径补偿产量损失。耐蚜性不影响蚜虫的取食及生物... 详细信息

为更有效地将耐害性用于小麦病虫害的绿色防控,该文就小麦对麦长管蚜的耐蚜性及其评估方法进行总结。具有耐蚜性的小麦受到一定数量蚜虫为害时,田间产量损失不明显,或能够通过生理生态途径补偿产量损失。耐蚜性不影响蚜虫的取食及生物学参数,对蚜虫进化压力小,因此田间表现更稳定。耐蚜小麦可以允许田间存在一定数量的蚜虫,这不仅可以减轻防治压力,还可以为天敌提供食物,有利于天敌的保护和利用,更符合有害生物绿色防控理念的核心。然而,目前抗麦长管蚜的小麦抗源鉴选主要是以蚜量为基础的抗生性和不选择性,耐害性被忽视。鉴于麦长管蚜田间蚜量与小麦产量(千粒重)损失率正相关,且峰值蚜量和小麦千粒重受损敏感期在小麦灌浆期重合,因此提出了以耐蚜值(千粒重损失率和灌浆期蚜情指标的比值)为依据计算耐蚜指数来评估小麦耐害性的方法,该方法可弥补抗源鉴选中忽视耐害性的不足,也能克服以田间千粒重损失率为依据评估耐害性时很难实现蚜量统一的不足,同时消除抗生性和不选择性带来的影响。

关键词：小麦麦长管蚜抗性表型耐害(蚜)性评估方法耐蚜值耐蚜指数

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禾谷缢管蚜钠通道辅助亚基对钠通道基因表达水平及杀虫剂敏感性的影响

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昆虫学报 2022年第11期65卷 1459-1468页

作者：张存环刘朗彭雄郄杏桃陈茂华西北农林科技大学植物保护学院农业农村部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室旱区作物逆境生物学国家重点实验室陕西杨凌712100

【目的】通过分析禾谷缢管蚜Rhopalosiphum padi钠通道辅助亚基对钠通道功能的影响,探究辅助亚基在钠离子通道的门控性质中的作用。【方法】分别显微注射dsRpNaH1和dsRpNaH2对钠通道基因RpNaH1和RpNaH2进行RNAi后,采用实时定量PCR(qRT-P... 详细信息

【目的】通过分析禾谷缢管蚜Rhopalosiphum padi钠通道辅助亚基对钠通道功能的影响,探究辅助亚基在钠离子通道的门控性质中的作用。【方法】分别显微注射dsRpNaH1和dsRpNaH2对钠通道基因RpNaH1和RpNaH2进行RNAi后,采用实时定量PCR(qRT-PCR)技术测定禾谷缢管蚜成蚜5个钠通道辅助亚基基因(RpTEH1,RpTEH2,RpTEH3,RpTEH4和RpTipE)的表达量;利用qRT-PCR技术和杀虫剂生物测定分别测定RNAi干扰RpTipE对禾谷缢管蚜成蚜钠通道及其辅助亚基基因表达量以及LC浓度高效氯氟氰菊酯敏感性的影响;利用双电压钳技术检测非洲爪蟾Xenopus laevis卵母细胞单独注射果蝇Drosophila钠通道基因DmNa22 cRNA及DmNa22 cRNA分别与果蝇钠通道辅助亚基基因DmTipE及禾谷缢管蚜钠通道辅助亚基基因RpTEH2,RpTEH3,RpTEH4和RpTipE的cRNA共注射时的Na~+电流,分析禾谷缢管蚜钠通道辅助亚基的功能。【结果】RNAi敲降禾谷缢管蚜成虫钠通道基因RpNaH1后,禾谷缢管蚜成蚜4个钠通道辅助亚基基因RpTEH1,RpTEH2,RpTEH3以及RpTipE的表达量显著降低,RpTEH4的表达量没有显著变化;RNAi敲降禾谷缢管蚜钠通道基因RpNaH2后,钠通道辅助亚基基因RpTEH1,RpTEH2,RpTEH3,RpTEH4和RpTipE的表达量都显著降低。RNAi敲降禾谷缢管蚜钠通道辅助亚基基因RpTipE后,钠通道基因RpNaH1和RpNaH2及钠通道辅助亚基基因RpTEH1,RpTEH2,RpTEH3和RpTEH4的表达量都显著降低。RNAi干扰RpTipE后48 h时,禾谷缢管蚜成蚜对LC浓度的高效氯氰菊酯的敏感性降低。双电压钳技术检测结果表明,将果蝇钠通道基因DmNa22 cRNA分别与禾谷缢管蚜钠通道辅助亚基基因RpTEH2,RpTEH3,RpTEH4和RpTipE cRNA共注射到非洲爪蟾卵母细胞中时均提高果蝇钠通道DmNa22的Na~+电流。【结论】禾谷缢管蚜钠通道辅助亚基可能参与调节该虫钠离子通道的门控性质。

关键词：禾谷缢管蚜钠通道钠通道辅助亚基电生理实验 RNAi 基因表达

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小麦蓝矮植原体SWP1效应蛋白的抗血清制备及检测应用

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植物病理学报 2018年第3期48卷 373-377页

作者：羊海珍王楠吴薇张子昂吴云锋西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室西北农林科技大学植物保护学院杨凌712100

小麦蓝矮病是西北冬麦区一种重要的植原体病害,造成严重的产量损失。为进一步探究小麦蓝矮植原体的致病机理,通过原核表达获得其致病因子SWP1的重组蛋白并制备抗血清。将PCR扩增到的SWP1基因片段插入到原核表达载体pET-30a(+)上,导入***... 详细信息

小麦蓝矮病是西北冬麦区一种重要的植原体病害,造成严重的产量损失。为进一步探究小麦蓝矮植原体的致病机理,通过原核表达获得其致病因子SWP1的重组蛋白并制备抗血清。将PCR扩增到的SWP1基因片段插入到原核表达载体pET-30a(+)上,导入*** BL21(DE3)中,表达出约12 kDa含His标签的融合蛋白。用纯化的融合蛋白注射大白兔皮层,获得了特异性较强的SWP1抗血清,其效价为1∶4 000,并成功应用于SWP1在本氏烟中的检测。制备的抗血清在SWP1蛋白结构、功能及其与寄主的互作研究中具有重要意义。

关键词：小麦蓝矮病植原体 SWP1 原核表达抗血清

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大麦黄矮病毒BYDV-GAV RT-RPA检测体系的建立及应用

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植物病理学报 2024年

作者：张艺林杨明王岩滨郝兴安旱区作物逆境生物学国家重点实验室植保资源与病虫害治理教育部重点实验室农业农村部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室西北农林科技大学植物保护学院

为实现大麦黄矮病毒-GAV(barley yellow dwarf viruses-GAV, BYDV-GAV)的早期快速检测，以BYDVGAV CP基因序列为模板，设计筛选了RT-RPA扩增引物及LFD探针，建立了RPA检测方法，对恒温扩增条件进行了优化，进一步评估了RT-RPA检测方法... 详细信息

为实现大麦黄矮病毒-GAV(barley yellow dwarf viruses-GAV, BYDV-GAV)的早期快速检测，以BYDVGAV CP基因序列为模板，设计筛选了RT-RPA扩增引物及LFD探针，建立了RPA检测方法，对恒温扩增条件进行了优化，进一步评估了RT-RPA检测方法的灵敏度和特异性，并开展了田间样品的检测分析。结果显示，引物GAV-RPA-F4/R4和GAV-RPA-F6/R6可高效扩增BYDV-GAV，分别配合GR-nfo-pb4和GR-nfo-pb6探针，可实现侧向层析试纸条检测。最佳反应体系为50.0μL:MgAc 2.5μL,RPA Buffer 29.5μL，上、下游引物(10mmol·L-1)各2.4μL,cDNA 2.0μL,RNase-free ddH2O 11.2μL；最优反应条件为37℃扩增25 min，采用PCR仪进行扩增。该检测方法稳定性好，最低检测阈值和RT-PCR方法一致，均为2.3×10-2ng·μL-1(6.03×106copies·μL-1)，可特异性检出BYDV-GAV，对BYDV-PAV、BYDV-GPV、小麦矮缩病毒(wheat dwarfvirus,WDV)、小麦蓝矮植原体(wheat bluedwarf,WBD)等引起黄化矮缩类症状的小麦病原无交叉反应。田间小麦样品检测发现BYDV-GAV带毒率较高，叶片表现黄化症状的疑似黄矮样品中BYDV-GAV检出率为57.8%(11/19)。表明所建立的RT-RPA检测方法可用于田间小麦BYDV-GAV的早期快速检测。

关键词：大麦黄矮病毒重组酶聚合酶扩增快速检测

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八种十字花科寄主植物真叶和子叶的化学成分及其对小菜蛾生长发育及生理代谢的影响

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植物保护学报 2023年第4期50卷 1042-1054页

作者：向中文朱经云刘同先张世泽西北农林科技大学植物保护学院农业农村部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室植保资源与病虫害治理教育部重点实验室旱区作物逆境生物学国家重点实验室陕西杨凌712100 贵州大学昆虫研究所贵阳550025

为明确小菜蛾Plutella xylostella对寄主植物真叶和子叶的适合度,于室内测定8种十字花科植物改良青杂3号、改良露头青、陕油0913、甘杂1号、超级火箕青、四月慢、绿球66和中花尖叶芥蓝真叶和子叶的营养物质和次生代谢物质的含量,并测定... 详细信息

为明确小菜蛾Plutella xylostella对寄主植物真叶和子叶的适合度,于室内测定8种十字花科植物改良青杂3号、改良露头青、陕油0913、甘杂1号、超级火箕青、四月慢、绿球66和中花尖叶芥蓝真叶和子叶的营养物质和次生代谢物质的含量,并测定取食后小菜蛾幼虫的取食选择性、发育历期、蛹重、保护酶和解毒酶活性。结果显示,8种寄主植物真叶的可溶性糖、总氨基酸、单宁、类黄酮和总酚含量之间差异显著,且大部分均显著高于其子叶,8种寄主植物子叶的可溶性糖、总氨基酸、单宁、类黄酮和总酚含量之间也差异显著。小菜蛾3龄幼虫偏好取食真叶;取食8种寄主植物真叶后成虫前期的发育历期为12.3~16.3 d,取食子叶后成虫前期的发育历期为14.3~18.6 d;取食子叶的蛹重明显低于取食其真叶;取食8种寄主植物真叶的小菜蛾幼虫体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)、羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)和乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)活性之间差异显著,且取食改良青杂3号和四月慢真叶的幼虫体内CAT活性显著高于取食其子叶,取食改良露头青、超级火箕青和中花尖叶芥蓝真叶的幼虫体内CarE活性显著高于取食其子叶;取食8种寄主植物子叶的小菜蛾幼虫体内SOD、POD、CAT、GST、CarE和AchE活性之间也差异显著,且SOD、GST和AchE活性大部分显著高于取食其真叶。表明小菜蛾在取食不同寄主植物真叶和子叶时,通过调节体内保护酶和解毒酶活性适应寄主。

关键词：小菜蛾寄主植物子叶真叶生长发育保护酶解毒酶植物化合物

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苹果锈果类病毒陕西秦冠分离物的鉴定与序列分析

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植物保护学报 2016年第5期43卷 877-878页

作者：吴宽赵磊孙丽英郝兴安康振生吴云锋西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室植保资源与病虫害治理教育部重点实验室陕西杨凌712100

陕西省是我国苹果种植大省,苹果锈果病的发生严重影响其苹果产业,该病是由苹果锈果类病毒（Apple scar skin viroid,ASSVd）引起的,陈炜和田波（1985）首次在国内发现了ASSVd的RNA,Hashimoto＆Koganezawa（1987）首次报道了ASSVd的全基... 详细信息

陕西省是我国苹果种植大省,苹果锈果病的发生严重影响其苹果产业,该病是由苹果锈果类病毒（Apple scar skin viroid,ASSVd）引起的,陈炜和田波（1985）首次在国内发现了ASSVd的RNA,Hashimoto＆Koganezawa（1987）首次报道了ASSVd的全基因组序列。

关键词：分离物秦冠全基因组序列序列分析 Apple 果类测序技术下游引物引物酶 RNA

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烟草品种对烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒的抗性鉴定

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植物病理学报 2013年第1期43卷 50-57页

作者：黄婷吴云锋陈伟成巨龙陕西省烟草研究所西安710061 旱区作物逆境生物学国家重点实验室农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室西北农林科技大学植物保护学院杨凌712100

2010-2011年采用大田人工接种鉴定的方法,对生产中大面积推广使用的24份烟草品种进行了烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的抗性鉴定。结果表明,供试品种对TMV和CMV的抗病性存在较大差异,对TMV表现抗病的有Coker86、吉烟5号、Coker... 详细信息

2010-2011年采用大田人工接种鉴定的方法,对生产中大面积推广使用的24份烟草品种进行了烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的抗性鉴定。结果表明,供试品种对TMV和CMV的抗病性存在较大差异,对TMV表现抗病的有Coker86、吉烟5号、Coker176、CV87、辽烟8号、CV91、中烟90等7份材料;表现中抗的有秦烟98、双抗70、C151等3份材料;表现中感的有秦烟96、G80、金星6007、龙江981、K326、秦烟201、NC89等7份材料;表现感病的有G28、云烟97、净叶黄、红花大金元、RG11、云烟85、云烟87等7份材料。对CM V表现抗病的有Coker86、龙江981、C151、秦烟201、云烟87等5份材料;表现中抗的材料是金星6007;表现中感的有CV91、RG11、Coker176、中烟90、K326、红花大金元、净叶黄、G80、G28等9份材料;表现感病的有秦烟98、云烟85、秦烟96、NC89、双抗70、云烟97、CV87、辽烟8号、吉烟5号等9份材料。其中兼抗TM V和CM V两种病毒病的材料有2份,分别是Coker86和C151。同时研究还发现,抗病性不同的烟草品种在受到病毒危害以后,对烟叶的产量和品质的影响也不同。明确了中国24个烟草品种的抗病性水平,为抗病品种的利用与品种合理布局提供科学依据,同时为烟草抗病毒病育种的亲本选择提供抗源信息。

关键词：烟草品种烟草花叶病毒烟草黄瓜花叶病毒抗病性鉴定

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侵染猕猴桃的柑橘叶斑驳病毒外壳蛋白多克隆抗体的制备及检测应用

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植物病理学报 2021年第3期51卷 423-428页

作者：刘欢吴薇朱育波杨鑫吴云锋安康学院现代农业与生物科技学院陕西安康725000 旱区作物逆境生物学国家重点实验室农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室西北农林科技大学植物保护学院杨凌712100

柑橘叶斑驳病毒(Citrus leaf blotch virus,CLBV)是β线形病毒科(Betaflexiviridae)柑橘病毒属(Citrivirus)的代表种,前期研究表明CLBV在陕西栽培猕猴桃中广泛发生。为进一步简化CLBV的检测,并探究其致病机制,通过RT-PCR扩增得到CLBV猕... 详细信息

柑橘叶斑驳病毒(Citrus leaf blotch virus,CLBV)是β线形病毒科(Betaflexiviridae)柑橘病毒属(Citrivirus)的代表种,前期研究表明CLBV在陕西栽培猕猴桃中广泛发生。为进一步简化CLBV的检测,并探究其致病机制,通过RT-PCR扩增得到CLBV猕猴桃分离物外壳蛋白(coat protein,cp)基因,将其插入原核表达载体pET-30a(+),导入*** BL21(DE3)感受态细胞,成功表达出约59 kDa的融合蛋白。用纯化后的融合蛋白对大白兔进行皮下多点免疫注射,获得的抗血清经纯化浓缩后,最终得到浓度为3.78 mg·mL-1的多克隆抗体。将抗体1∶1000稀释后可检测500 pg抗原,使用Dot-ELISA可直接检测田间猕猴桃样品。多克隆抗体的制备为CLBV的检测提供了便捷,也是后续研究CLBV致病机理的重要工具。

关键词：猕猴桃柑橘叶斑驳病毒原核表达多克隆抗体

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山西苹果茎痘病毒遗传多样性分析

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干旱区资源与环境 2022年第2期36卷 141-146页

作者：丁磊崔正秀陈伟吴云锋西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室杨凌712100 山西师范大学生命科学学院临汾041000

苹果茎痘病毒是苹果安全生产的巨大威胁,严重影响苹果产量和质量。探讨苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus, ASPV)在山西省的分布、变异和多样性,可为制定可持续的病毒管理策略提供理论依据。从山西省11个地区采集苹果叶片样品进行R... 详细信息

苹果茎痘病毒是苹果安全生产的巨大威胁,严重影响苹果产量和质量。探讨苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus, ASPV)在山西省的分布、变异和多样性,可为制定可持续的病毒管理策略提供理论依据。从山西省11个地区采集苹果叶片样品进行RT-PCR检测。结合在线数据库,利用相关软件对文中研究获得的序列进行系统发育、遗传多样性、重组以及种群遗传分化等分析。RT-PCR检测结果显示从山西省11个地区采集的409份苹果叶片样品中,ASPV的检出率为36.33%(临漪)至55.37%(平遥)。选择15个ASPV检测为阳性的样品,分别克隆其CP基因并与22个不同的ASPV分离物进行核苷酸和氨基酸一致性分析,发现37个ASPV分离物的核酸一致率为70.27~96.31%,氨基酸一致率为37.04~96.64%,其中,Shanxi-2与JX673826.1的核酸一致率最高,为90.86%, Shanxi-2与MN617853.1的核酸一致率最低,为70.40%。基于CP的进化树分析结果显示37个ASPV分离物被划分为2个进化群体。遗传多样性分析结果表明ASPV种群发生了收缩,且在两个群体之间呈现较大的遗传差异。ASPV-CP基因受负选择压力影响。该研究结果将为评估山西省ASPV的流行病学特征提供重要线索。

关键词：苹果茎痘病毒遗传多样性外壳蛋白

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