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中国人兽共患病学报 2009年第5期25卷 477-482页

作者：殷祎隆聂蕾景涛西北民族大学医学院病原生物学教研室兰州730030 甘肃中医学院病原生物与免疫学教研室兰州730000 兰州大学基础医学院病原生物学教研室兰州730000

自从1786、1863年Batsch和Leuckart分别发现细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫以来,一种在寄生虫学和人畜共患寄生虫病史上占有重要地位的疾病“包虫病”开始进入人们的视野,成为全球性的公共卫生问题^[1-3]。与此同时,针对包虫病的治疗也日... 详细信息

自从1786、1863年Batsch和Leuckart分别发现细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫以来,一种在寄生虫学和人畜共患寄生虫病史上占有重要地位的疾病“包虫病”开始进入人们的视野,成为全球性的公共卫生问题^[1-3]。与此同时,针对包虫病的治疗也日趋深入。一般认为,治疗以手术为主,但药物化疗作为重要的辅助手段也已越来越受到重视。[第一段]

关键词：药物研究进展包虫病治疗多房棘球绦虫细粒棘球绦虫公共卫生问题寄生虫学以手术为主

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卡氏棘阿米巴肌动蛋白1的免疫学特性和细胞黏附功能

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吉林大学学报（医学版） 2023年第2期49卷 308-314页

作者：李晶杨舒越赵佳欣孔繁利郭思瑶冯宪敏北华大学基础医学院病理生理教研室吉林吉林132013 吉林医药学院基础医学院病原生物学教研室吉林吉林132013

目的:探讨卡氏棘阿米巴(Ac)肌动蛋白1 (Actin 1)(Ac-Actin 1)的免疫学特性,初步阐明Ac-Actin 1介导Ac虫体黏附宿主细胞并参与Ac虫体入侵的作用。方法:以Ac滋养体cDNA为模板,构建原核表达载体pET 22b (+)-Ac-Actin 1,转化大肠埃希菌感受... 详细信息

目的:探讨卡氏棘阿米巴(Ac)肌动蛋白1 (Actin 1)(Ac-Actin 1)的免疫学特性,初步阐明Ac-Actin 1介导Ac虫体黏附宿主细胞并参与Ac虫体入侵的作用。方法:以Ac滋养体cDNA为模板,构建原核表达载体pET 22b (+)-Ac-Actin 1,转化大肠埃希菌感受态细胞BL21 (DE3);1 mmol·L^(-1)异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)体外诱导表达重组Ac-Actin 1蛋白(rAc-Actin 1),十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对rAc-Actin 1进行可溶性分析,通过亲和层析方法纯化带有His标签的rAc-Actin 1。3只新西兰白兔随机分为对照组(1只)和实验组(2只);实验组兔以rAc-Actin 1为免疫原皮下注射400μg,对照组兔注入等量生理盐水,制备抗rAc-Actin 1多克隆兔血清;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组兔抗rAc-Actin 1多克隆抗体效价并测定IgG亚型,Western blotting法检测抗rAc-Actin 1多克隆兔血清与rAc-Actin 1的免疫反应性,间接免疫荧光实验(IFA)检测Ac-Actin 1在Ac滋养体中的定位。以正常滋养体为对照,抗rAc-Actin 1多克隆兔血清阻断Ac滋养体后与Vero细胞共孵育,显微镜观察Ac-Actin 1对Vero细胞的黏附作用。结果:SDSPAGE和BCA蛋白浓度检测,获得高浓度rAc-Actin 1 (1.7 g·L^(-1))蛋白。ELISA法检测,制备的兔抗rAc-Actin1特异性多克隆抗体效价为1∶6 400, IgG1和IgG2a浓度分别为116.76 g·L^(-1)和1 136.15 mg·L^(-1)。Western blotting法检测,兔抗rAc-Actin 1多克隆抗体可与rAc-Actin 1发生特异性结合,具有良好的免疫反应性。IFA检测,rAc-Actin 1主要定位于Ac滋养体的细胞膜上。显微镜观察,与对照组比较,随着抗体与虫体孵育时间的延长,实验组Ac滋养体对Vero细胞的黏附率明显降低(P<0.01),抗rAc-Actin 1特异性多克隆抗体可有效阻断Ac滋养体与Vero细胞的黏附。结论:rAc-Actin 1具有良好的免疫原性和免疫反应性,参与Ac虫体与宿主细胞的黏附作用。

关键词：卡氏棘阿米巴滋养体细胞黏附免疫原性免疫反应性

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冠心病患者肺炎衣原体感染与C反应蛋白、血脂相互关系的研究

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临床荟萃 2006年第6期21卷 396-398页

作者：杨彤李凡吉林大学基础医学院病原生物学教研室

目的探讨冠心病(CHD)患者肺炎衣原体(Cpn)感染与C反应蛋白(CRP)、血脂的相互关系,探讨其可能的发病机制。方法采用微量免疫荧光法检测急性心肌梗死(AMI)组、心绞痛(AP)组及对照组患者各35例外周血Cpn IgG抗体,同时测定血脂及CRP。结果AM... 详细信息

目的探讨冠心病(CHD)患者肺炎衣原体(Cpn)感染与C反应蛋白(CRP)、血脂的相互关系,探讨其可能的发病机制。方法采用微量免疫荧光法检测急性心肌梗死(AMI)组、心绞痛(AP)组及对照组患者各35例外周血Cpn IgG抗体,同时测定血脂及CRP。结果AMI组、AP组及对照组血清Cpn IgG抗体阳性率分别为82.2%、65.7%及25.7%,AMI组、AP组分别与对照组比较差异有统计学意义(均P<0.01),但AMI组与AP组间比较差异无统计学意义;血清CRP及血脂总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A(apoA)AMI组、AP组显著高于对照组(均P<0.01),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)AMI组、AP组显著低于对照组(P<0.01),AMI组也明显低于AP组(P<0.01);Cpn感染者特异性抗体IgG滴度与血中CRP、TG、LDL-C及apoA有明显相关性(r分别为0.44、0.64、0.36和0.32),而与HDL-C成负相关(r=-0.78)(均P<0.01)。结论CHD患者Cpn感染率明显增高,Cpn可能通过炎症反应及影响脂质代谢在CHD的发生、发展中起作用。

关键词：肺炎衣原体冠状动脉疾病 C反应蛋白高脂血症

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人乳腺癌组织活化型MMP-2的分布及意义

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吉林大学学报（医学版） 2006年第1期32卷 103-105,F0003页

作者：郭玉芳梅红张丽红刘巍郑贤红李一雷吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室吉林大学基础医学院病原生物学教研室吉林长春130021

目的:研究人乳腺癌组织中活化型MMP-2的分布及与乳腺癌侵袭和转移的关系。方法:采用组织酶谱分析和DQ明胶原位酶谱分析方法检测乳腺癌组织中明胶酶活性。结果:组织酶谱分析显示,乳腺癌组织中存在MMP-2和MMP-9,只有MMP-2存在活化型;DQ明... 详细信息

目的:研究人乳腺癌组织中活化型MMP-2的分布及与乳腺癌侵袭和转移的关系。方法:采用组织酶谱分析和DQ明胶原位酶谱分析方法检测乳腺癌组织中明胶酶活性。结果:组织酶谱分析显示,乳腺癌组织中存在MMP-2和MMP-9,只有MMP-2存在活化型;DQ明胶原位酶谱分析显示,活化型MMP-2主要定位于肿瘤细胞中;在癌组织中绿色荧光表达均为强阳性,而在肿瘤边缘癌组织中荧光表达强弱不同,表达强度与肿瘤的分级、淋巴结转移有关。结论:人乳腺癌组织中明胶酶活性主要由MMP-2产生,活化型MMP-2主要定位于肿瘤细胞,其表达强度与肿瘤的分级、淋巴结转移有关,并在乳腺癌的侵袭和转移中发挥重要作用。

关键词：乳腺肿瘤明胶酶A 酶谱分析肿瘤侵润肿瘤转移

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疟疾疫苗的突破性进展

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科学通报 2024年第35期69卷 5088-5093页

作者：刘太平徐文岳陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院病原生物学教研室重庆400038

2021年10月,疟疾亚单位疫苗RTS,S/AS01获得世界卫生组织(World Health Organization,WHO)的批准,可以接种于疟疾传播风险较高地区的儿童,以期降低非洲5岁以下儿童因疟疾感染而导致的死亡率.因此,RTS,S/AS01成为了获批的首款疟疾疫苗.时... 详细信息

2021年10月,疟疾亚单位疫苗RTS,S/AS01获得世界卫生组织(World Health Organization,WHO)的批准,可以接种于疟疾传播风险较高地区的儿童,以期降低非洲5岁以下儿童因疟疾感染而导致的死亡率.因此,RTS,S/AS01成为了获批的首款疟疾疫苗.时隔两年,在RTS,S基础上进行改进的R21/Matrix-M疫苗也获得了WHO的批准,成为了第二款获批的疟疾疫苗.RTS,S/AS01(Mosquirix)和R21/Matrix-M两款疫苗的相继获批,让人们看到了对抗疟疾的新希望,因此被入选“Science 2023年度十大科学突破”之一.

关键词：疟疾疫苗疟疾感染疟疾传播亚单位疫苗 Matrix

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不同分离株弓形虫hsp70基因体外扩增及其酶切分析

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中国人兽共患病杂志 2004年第3期20卷 199-202页

作者：李华文陈观今郑焕钦中山大学基础医学院病原生物学教研室广州510089

目的　不同分离株弓形虫hsp70基因的比较 ;运用限制性内切酶分析 (PRA)建立一种简单的虫株鉴定方法。方法　采用PCR技术扩增hsp70基因 ;采用 3种限制性内切酶Bsp12 86Ⅰ、BstXⅠ、MboⅠ分别对该基因进行酶切比较。结果　从 5种不同分... 详细信息

目的　不同分离株弓形虫hsp70基因的比较 ;运用限制性内切酶分析 (PRA)建立一种简单的虫株鉴定方法。方法　采用PCR技术扩增hsp70基因 ;采用 3种限制性内切酶Bsp12 86Ⅰ、BstXⅠ、MboⅠ分别对该基因进行酶切比较。结果　从 5种不同分离株的弓形虫基因组DNA中扩增出相似的约 2 0 2 2bp的完整HSP70基因阅读框序列 ;Bsp12 86Ⅰ酶切 5株弓形虫有 2组不同酶谱 ,而BstXⅠ、MboⅠ酶切的片段各株间没有差异。结论　 5种不同分离株弓形虫的hsp70基因片段大小基本相同 ;但酶切图谱有差异 ,这可以为虫株鉴定和毒力研究提供参考。

关键词：弓形虫 hsp70基因体外扩增酶切分析毒力

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固有免疫在钩端螺旋体感染中作用的研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2010年第1期30卷 94-97页

作者：邓聪郭晓奎姜叙诚上海交通大学基础医学院病理学教研室上海200025 上海交通大学基础医学院病原生物学教研室上海200025

钩端螺旋体病是一种在世界范围内传播的重要的人兽共患病。钩端螺旋体(钩体)感染机体后,固有免疫在早期控制感染扩散中的作用及意义逐渐受到重视。巨噬细胞对钩体具有吞噬和杀伤作用,同时,致病性钩体可逃避巨噬细胞杀伤。中性粒细胞、... 详细信息

钩端螺旋体病是一种在世界范围内传播的重要的人兽共患病。钩端螺旋体(钩体)感染机体后,固有免疫在早期控制感染扩散中的作用及意义逐渐受到重视。巨噬细胞对钩体具有吞噬和杀伤作用,同时,致病性钩体可逃避巨噬细胞杀伤。中性粒细胞、补体系统和细胞因子在抵御钩体感染方面也具有一定的作用。

关键词：钩端螺旋体病固有免疫巨噬细胞

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当归红芪超滤膜提取物诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞的实验研究

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中国中西医结合杂志 2013年第5期33卷 632-637页

作者：聂蕾殷祎隆刘永琦樊秦苏韫甘肃中医学院基础课部病原生物学与免疫学教研室兰州730000 西北民族大学医学院病原生物学与免疫学教研室兰州730030

目的观察并评价当归红芪超滤膜提取物(简称中药合剂)诱导小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived stroma cells,BMSCs)分化为神经样细胞的效果。方法体外培养小鼠BMSCs后加入药物并分为5组:空白组、6g/L中药合剂组(简称低剂量组)、12... 详细信息

目的观察并评价当归红芪超滤膜提取物(简称中药合剂)诱导小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived stroma cells,BMSCs)分化为神经样细胞的效果。方法体外培养小鼠BMSCs后加入药物并分为5组:空白组、6g/L中药合剂组(简称低剂量组)、12g/L中药合剂组(简称高剂量组)及3g/L中药合剂联合0.5mmol/Lβ-巯基乙醇用药组(简称联合组)、β-巯基乙醇阳性对照组(简称对照组)。通过甲苯胺蓝染色观察各组诱导分化为神经样细胞的效果,应用免疫组织化学及免疫荧光技术检测分化后细胞所表达的神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、巢蛋白(nestin)、神经丝蛋白(neurofilament protein,NFP)、微管结合蛋白2(microtubule-associated protein-2,MAP2)及神经胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)5种神经特异性蛋白的差异,并应用流式细胞分析技术(flow cytometry,FCM)检测各组细胞生长周期的变化。结果诱导后细胞形态发生神经样细胞改变,两个中药合剂组的形态特征性均弱于联合组和对照组;除空白组外,上述5种蛋白在各组的表达为阳性,表达程度均为对照组最高(P<0.05),联合组次之(P<0.05);经流式细胞术检测细胞增殖率比较:对照组最低(P<0.05),高、低剂量组较高(P<0.05),联合组次之(P<0.05)。结论中药合剂可较为有效地诱导小鼠BMSCs分化为神经样细胞,诱导能力虽弱于对照组,但对于分化后细胞的增殖作用明显。联合组可有效诱导BMSCs分化为神经样细胞并使细胞有较高的增殖能力,可能是用于临床研究目前较为理想的用药途径。

关键词：当归红芪超滤膜提取物骨髓间充质干细胞分化神经样细胞

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蛋白激酶9在约氏疟原虫生长发育中的作用

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年第3期37卷 248-253页

作者：程祥云刘太平陈穗林徐文岳陆军军医大学基础医学院病原生物学教研室

目的探究蛋白激酶9 (PK9)在约氏疟原虫生长发育中的作用。方法基于疟原虫PlasmoDB数据库,查找约氏疟原虫致死株17XL (Py17XL)的PK9序列信息, BLAST比对Py PK9和恶性疟原虫PK9(Pf PK9)以及人蛋白激酶p78的同源性。提取Py17XL株野生型(WT... 详细信息

目的探究蛋白激酶9 (PK9)在约氏疟原虫生长发育中的作用。方法基于疟原虫PlasmoDB数据库,查找约氏疟原虫致死株17XL (Py17XL)的PK9序列信息, BLAST比对Py PK9和恶性疟原虫PK9(Pf PK9)以及人蛋白激酶p78的同源性。提取Py17XL株野生型(WT)基因组DNA,设计引物, PCR扩增PK9基因。采用CRISPR-Cas9技术,将同源臂与sgRNA序列一起连接到PYC-MCS质粒中,构建PK9基因敲除(PK9KO)重组质粒。重组质粒电转至Py17XL虫株内,经乙胺嘧啶筛选、克隆,进行PCR鉴定和测序。10只雌性BALB/c小鼠随机分为WT感染组和PK9KO感染组,每组5只,重复3次实验。每鼠腹腔注射1×105个红内期疟原虫,每隔24 h取血检测小鼠原虫血症,观察小鼠存活情况。200只3~5日龄的斯氏按蚊随机分为WT感染小鼠吸血组和PK9KO感染小鼠吸血组,每组100只。于吸血8 d后解剖蚊胃,每组随机选取15只斯氏按蚊进行解剖,测定蚊胃中卵囊的数量。10只雌性BALB/c小鼠随机分为WT子孢子感染组和PK9KO子孢子感染组,每组5只,重复2次实验。每鼠尾静脉注射1×103个子孢子,每隔12 h取血,涂片观察其原虫血症出现时间。结果Py PK9与Pf PK9的序列一致性为82.5%, Py PK9和人类蛋白激酶p78的一致性为39.4%。PK9基因PCR扩增产物的长度约为597 bp。经PCR鉴定、测序确定PK9KO重组质粒构建成功, Py17XL虫株成功敲除PK9基因。WT感染组小鼠迅速出现原虫血症,感染后5~6 d全部死亡, PK9KO感染组小鼠全部存活,原虫血症在感染后17 d消失。WT感染小鼠吸血组和PK9KO感染小鼠吸血组的斯氏按蚊感染率分别为60.0%(9/15)和66.7%(10/15),差异无统计学意义(P> 0.05)。WT子孢子感染组和PK9KO子孢子感染组小鼠均于72 h查见原虫血症。结论PK9在红内期Py17XL的毒力中发挥了重要作用。

关键词：约氏疟原虫蛋白激酶9 红内期

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矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对H_2O_2诱导细胞氧化损伤的保护作用

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食品工业科技 2019年第6期40卷 273-278页

作者：刘迪孙宏宇时文艳陈为马爱新冯宪敏吉林医药学院基础医学院病原生物学教研室吉林132013

目的:研究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对人胚肾HEK-293细胞氧化损伤的保护作用。方法:通过检测细胞活力、活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)水平考察C3G对氧化损伤细胞的影响,并采用Western blot法和q RTPCR检测Nrf2和Keap1的蛋白表达量和m ... 详细信息

目的:研究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对人胚肾HEK-293细胞氧化损伤的保护作用。方法:通过检测细胞活力、活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)水平考察C3G对氧化损伤细胞的影响,并采用Western blot法和q RTPCR检测Nrf2和Keap1的蛋白表达量和m RNA表达量变化。结果表明:C3G预处理氧化应激细胞后,细胞活力显著高于H_2O_2损伤组(p <0.05),并呈浓度依赖性提高; H_2O_2损伤组的DCF荧光强于对照组,ROS相对含量增加到近2倍,1.25、5、20μmol/L C3G预处理后细胞荧光强度逐渐减弱,ROS相对量呈浓度依赖性降低; C3G预处理后细胞MDA水平呈浓度依赖性降低; 1.25、5、20μmol/L C3G处理后,Nrf2的m RNA表达和蛋白表达量均呈浓度依赖性上调,Keap1蛋白表达量显著低于H_2O_2损伤组(p <0.05),5和20μmol/L C3G对Keap1的m RNA下调作用明显。结论:矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对HEK-293细胞有保护作用,可降低细胞ROS和MDA水平,其作用机制可能是通过激活Nrf2/Keap1信号通路以抵抗H_2O_2导致的细胞氧化损伤。

关键词：矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G) 氧化应激 Nrf2 信号通路

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